微生物灭菌问题ppt课件
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《灭菌与除菌》课件
3 对灭菌与除菌的正确
选择
根据不同的环境和需求， 选择合适的灭菌或除菌方 法。
结论
灭菌与除菌的重要性
保持清洁和杀灭细菌是预防感染 和疾病传播的关键。
适用于不同环境的灭菌与 除菌方法的比较
根据环境的特点和需求，选择合 适的灭菌和除菌方法。
对后续操作的影响
正确的灭菌和除菌可以确保后续 操作的安全和有效性。
灭菌
1
物理灭菌
使用物理性能杀灭细菌的方法，包括蒸
化学灭菌
2
汽灭菌、热空气灭菌、紫外线灭菌和红 外线灭菌。
使用化学物质杀灭细菌的方法，包括氧
化剂灭菌、氨基酸灭菌和乙醛灭菌。
3
生物学灭菌
使用生物学方法杀灭细菌，包括使用菌 株灭菌、免疫灭菌和抗生素灭菌。
除菌
物理除菌
使用物理力量除去微生物，包 括过滤除菌和热力除菌。
化学除菌
使用化学物质除去微生物，包 括消毒剂除菌、洗涤剂除菌和 有机物除菌。灭菌代替除菌和活菌制剂 的除菌效果。
注意事项
1 灭菌与除菌的区别
灭菌是完全杀死或去除所 有微生物，除菌是减少或 去除微生物的数量。
2 灭菌与除菌的应用场
合
灭菌常用于需要高度清洁 的环境，除菌主要用于日 常生活和公共场所。
《灭菌与除菌》PPT课件
这是《灭菌与除菌》的PPT课件，通过本课件，我们将带你了解灭菌与除菌的 概念、应用领域以及各种方法和注意事项。
什么是灭菌与除菌？
灭菌是完全杀死或去除所有的微生物，包括细菌、病毒和真菌。除菌是减少或去除微生物的数量，以减少感染 的风险。 它们的应用领域非常广泛，包括医疗保健、食品加工和生产、实验室和日常生活。
消毒、灭菌PPT演示课件
无菌物品管理
对手术室内使用的无菌物品进 行严格管理，确保在有效期内 使用，避免过期或污染。
手术器械处理
对手术器械进行严格的清洗、 消毒和灭菌处理，确保手术过 程中无菌操作。
医疗废弃物处理要求
分类收集 对医疗废弃物进行分类收集，包 括感染性废弃物、损伤性废弃物 、药物性废弃物和化学性废弃物 等。
环保要求 在处理医疗废弃物时，应符合环 保要求，避免对环境造成污染。
专用容器 使用专用的医疗废弃物容器进行 收集，容器应防渗漏、防破裂、 易于清洗和消毒。
安全处理 对收集的医疗废弃物进行安全处 理，包括高温焚烧、化学处理、 微波消毒等方法，确保废弃物中 的病原体被彻底杀灭。
THANKS
感谢观看
辐射灭菌法
原理
应用
利用放射性核素60Co发射的γ射线或电子 加速器产生的高能电子束（阴极射线）穿 透物品，杀死其中的微生物。
适用于不耐高温和不能用其他方法灭菌的 物品，如一次性使用的医疗器械和用品、 药品、食品等。
优点
缺点
灭菌效果可靠，不损伤物品，无残留毒性 。
设备费用高，操作技术要求高，需要专门 的安全防护措施。
消毒目的
消毒的目的是切断传播途径，防 止和控制传染病的传播和流行。
灭菌定义及目的
灭菌定义
灭菌是指用物理或化学方法杀灭外环 境中所有的微生物，包括细菌芽孢和 非芽孢菌、病毒、真菌等的过程。
灭菌目的
灭菌的目的是彻底消除外环境中的一 切微生物，以达到无菌状态，保证医 疗、科研等活动的安全进行。
消毒与灭菌关系
05
消毒与灭菌效果评价
消毒效果评价方法及标准
细菌学指标
消毒前后细菌数量对比，计算杀菌率。
化学指标
微生物学第三章消毒与灭菌(共60张PPT)
介质的性质
细菌在非水介质中，比水作介质时对热 的抵抗力大
水分、2~4℃石炭酸、油类、干焦空气
不同介质对微生物抗热力的影响
2、低温抑菌法
低温可降低微生物代谢的速度。 大多数微生物对低温有很强的抵抗力 一般的：4-10℃ 淋球菌、脑膜炎球菌、流行感冒杆菌敏感，
伤寒杆菌、白喉杆菌耐低温 冷冻干燥：采用迅速冷冻和抽真空除水。
消毒（Disinfection）：杀灭物体上的病原微生物的方法，
叫消毒。消毒只要求达到消灭传染性的目的，而对非病原微 生物及其芽孢、孢子并不严格要求全部杀死。
防腐(Antisepsis)或抑菌：指阻止或抑制物品上微生物 生长繁殖的方法，微生物不一定死亡。
无菌（asepsis）：指没有活的微生物的状态。
夜培养，残余的芽孢发芽为繁殖体；
第三天：100℃-30分钟，杀死所有微生物。
巴氏消毒法
常用于牛乳及一些饮料
最大限度地消灭病原体，尽可 能少地损害食品的营养物质
•低温维持巴氏消毒法（LTH)： •63～65℃-30分钟； •高温短时间巴氏消毒法(HTST):
•71～72℃-15秒， •超高温巴氏消毒法(UHT): •132℃-1～2秒
•巴氏消毒法
•高压蒸气灭菌法
干热灭菌法
火焰灭菌法
以火焰直接灼烧杀死物 体中的全部微生物的方 法。
灼烧 焚烧
酒精灯
热空气灭菌法
适用于高温下不损坏、 不变质的物品，需在 160℃维持1－2小时，才
能达到杀死所有微生物 及其芽孢、孢子的目的。
干烤箱
湿热灭菌法
煮沸灭菌
100℃，煮沸10～20分钟，可杀死所有细 菌繁殖体，芽孢常需煮沸1－2h才能杀死。
噬菌体（phage）：是指寄生于微生物 （细菌、霉形体、螺旋体、放线菌以及 蓝细菌等）中的病毒。
细菌的分布与消毒灭菌(共10张PPT)
消毒：杀死物体上病原微生物的方法，并不一定能杀死含芽孢的细菌或非病原微生物。 主要用于人体体表、医疗器械和周围环境的消毒。
剂作用的因素有： （二）细菌在正常人体的分布
卫生清理将被微生物污染了的物品进行处理，使微生物的数量减少，达到安全使用的目的，一般利用清洁剂来处理。 条件致病菌引起疾病的条件通常是： （二）化学消毒灭菌法
细菌的分布与消毒灭菌
第1页，共10页。
学习目标
1.简述微生物在自然界和正常人体的分布状况 2.解释正常菌群、条件致病菌、菌群失调的概念
3.解释消毒、灭菌、防腐、无菌及无菌操作的概念 4.列出常用的热力消毒灭菌法及适用范围
5.分析紫外线的杀菌原理、作用、特点及应用 6.简述常用化学消毒剂的浓度、原理及影响因素
• 2.电磁波辐射杀菌法
• (1) 日光与紫外线
（2）电离辐射
• 3．滤过除菌法
第8页，共10页。
（二）化学消毒灭菌法
（1）正常菌群的概念：正常人体的体表及与外界相通的口腔、鼻咽腔、肠道及泌尿生殖道等腔道中，都存在着不同种类和数量的微生物
。①焚烧：适用于废消弃物毒品、剂尸体能影响细菌的化学组成、结构和生理活 ②学烧习灼目：动标直接从用火而焰灭发菌。挥防腐、消毒甚至灭菌的作用。主要用于 人体体表、医疗器械和周围环境的消毒。影响消毒 高压蒸气灭菌法（最常用，效果最好）：温度：121.
品的灭菌, 如培养基、生理盐水、手术敷料等。
•
④.巴氏消毒法：61.1~62.8℃，30 min；71.7 ℃，
15~30 s，用于牛乳制品、酒类等的消毒。
第7页，共10页。
（2）干热灭菌法 • 常用的干热灭菌法有 • ①焚烧：适用于废弃物品、尸体
②烧灼：直接用火焰灭菌。适用于接种环，试管口 等的灭菌。 ③干烤：干烤箱，加热至160~170℃，2 h。适用于 高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品。
剂作用的因素有： （二）细菌在正常人体的分布
卫生清理将被微生物污染了的物品进行处理，使微生物的数量减少，达到安全使用的目的，一般利用清洁剂来处理。 条件致病菌引起疾病的条件通常是： （二）化学消毒灭菌法
细菌的分布与消毒灭菌
第1页，共10页。
学习目标
1.简述微生物在自然界和正常人体的分布状况 2.解释正常菌群、条件致病菌、菌群失调的概念
3.解释消毒、灭菌、防腐、无菌及无菌操作的概念 4.列出常用的热力消毒灭菌法及适用范围
5.分析紫外线的杀菌原理、作用、特点及应用 6.简述常用化学消毒剂的浓度、原理及影响因素
• 2.电磁波辐射杀菌法
• (1) 日光与紫外线
（2）电离辐射
• 3．滤过除菌法
第8页，共10页。
（二）化学消毒灭菌法
（1）正常菌群的概念：正常人体的体表及与外界相通的口腔、鼻咽腔、肠道及泌尿生殖道等腔道中，都存在着不同种类和数量的微生物
。①焚烧：适用于废消弃物毒品、剂尸体能影响细菌的化学组成、结构和生理活 ②学烧习灼目：动标直接从用火而焰灭发菌。挥防腐、消毒甚至灭菌的作用。主要用于 人体体表、医疗器械和周围环境的消毒。影响消毒 高压蒸气灭菌法（最常用，效果最好）：温度：121.
品的灭菌, 如培养基、生理盐水、手术敷料等。
•
④.巴氏消毒法：61.1~62.8℃，30 min；71.7 ℃，
15~30 s，用于牛乳制品、酒类等的消毒。
第7页，共10页。
（2）干热灭菌法 • 常用的干热灭菌法有 • ①焚烧：适用于废弃物品、尸体
②烧灼：直接用火焰灭菌。适用于接种环，试管口 等的灭菌。 ③干烤：干烤箱，加热至160~170℃，2 h。适用于 高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品。
消毒与灭菌(共17张PPT)
用于滤过除菌的各式滤器
重金属盐类 升汞、红汞、硫柳汞
酸碱类
醋酸、生石灰
高压蒸汽法
四、防腐〔antisepsis〕
化学消毒剂的类型与杀菌原理
氧化作用， 蛋白质变性与沉淀，灭活酶类
氧化作用， 蛋白质变性与沉淀，灭活酶类 破坏细胞壁、细胞膜，蛋白质变性与凝固
用于滤过除菌的各式滤器
化学消毒灭菌法
一、化学消毒剂的类型与杀菌原理
厕所：生石灰
空气：甲醛熏蒸法、过氧乙酸熏蒸法
手：0.2%—0.4%过氧乙酸浸泡、70%乙醇擦洗
影响消毒剂效果的因素
消毒剂的性质、浓度与作用时间 微生物的种类与数量
温度与酸碱度 有机物
根本概念
一、消毒〔disinfection〕 杀死致病微生物繁殖体
二、灭菌〔sterilization〕
杀死所有微生物 三、抑菌〔bacteriostasis〕
抑制体内、体外细菌的繁殖
四、防腐〔antisepsis〕
抑制体外细菌的繁殖 五、无菌〔asepsis〕
无活细菌存在的状态
物理消毒灭菌法
一、热力灭菌法
二、化学消毒剂的正确使用
三、影响消毒剂效果的因素
化学消毒剂的类型与杀菌原理
类别
常用消毒剂
杀菌原理
酚类
石炭酸、洗必泰
膜、灭活酶类
蛋白质变性、损伤细胞
醇类 谢
乙醇
蛋白质变性与凝固，干扰代
重金属盐类 升汞、红汞、硫柳汞 沉淀，灭活酶类
氧化作用ห้องสมุดไป่ตู้ 蛋白质变性与
硝酸银、蛋白银
氧化剂
高锰酸钾、过氧化氢
氧化作用， 蛋白质沉淀
二、辐射灭菌法
三、滤过除菌法
消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全(ppt)
杀细菌繁殖体，真菌和大部分病毒
含碘消毒剂： 碘伏、碘酊 氧化作用，但有刺激性
醇类消毒剂 乙醇、异丙醇 脱细胞膜的脂类，并使菌体蛋白变性 70-75%乙醇作用最强
（三）低效消毒剂：
杀多数细菌繁殖体，不能杀芽孢和结核杆菌以及 一些真菌和病毒
新洁尔灭
皮肤、粘膜、地面、物品表面（不与阴离子表面活性剂合用）
洗必泰
皮肤、粘膜、地面、物品表面（不与阴离子表面活性剂合用）
高锰酸钾
氧化作用 皮肤、粘膜、蔬菜、水果的消毒
第二节 消毒灭菌的运用
（一）、医疗器械物品的消毒灭菌
1、高危器械物品 用时需进入无菌组织的物品。所有这些物品 都应该灭菌。
2、中危器械物品 用时不进入无菌组织但接触黏膜的器械。采 用消毒即可。
煮沸法
煮沸温度为100℃，一般细菌繁殖体5分钟就 杀死了，芽胞需要1-2小时才可被杀灭。
流动蒸气消毒法
利用一个大气压下100℃的水蒸气进行消毒， 细菌繁殖体15-30分钟杀灭。蒸笼具有类似的原 理。
间歇蒸气灭菌法
利用反复多次的流动蒸气间歇加热以达到灭菌 消毒的目的。
高压蒸气灭菌法
一种最有效的灭菌方法。灭菌的温度取决于 蒸气的压力。在103.4kPa蒸气下，温度达到 121.3℃，维持15-20分钟，可杀灭包括细菌芽 胞在内的所有微生物。
紫外线灯管
2. 电离辐射 常用γ射线(钴-60)和β射线。
原理：
干扰代谢和DNA合成，破坏细胞膜、酶，产生 H2O2、游离羟基杀菌。
特点： 具有较高的能量与穿透力，可在常温下对
不耐热的物品灭菌，故又称“冷灭菌”。
运用： 可用于消毒不耐热的塑料注射器和导管等，
亦能用于食品、药品、生物制品等的消毒灭 菌。
含碘消毒剂： 碘伏、碘酊 氧化作用，但有刺激性
醇类消毒剂 乙醇、异丙醇 脱细胞膜的脂类，并使菌体蛋白变性 70-75%乙醇作用最强
（三）低效消毒剂：
杀多数细菌繁殖体，不能杀芽孢和结核杆菌以及 一些真菌和病毒
新洁尔灭
皮肤、粘膜、地面、物品表面（不与阴离子表面活性剂合用）
洗必泰
皮肤、粘膜、地面、物品表面（不与阴离子表面活性剂合用）
高锰酸钾
氧化作用 皮肤、粘膜、蔬菜、水果的消毒
第二节 消毒灭菌的运用
（一）、医疗器械物品的消毒灭菌
1、高危器械物品 用时需进入无菌组织的物品。所有这些物品 都应该灭菌。
2、中危器械物品 用时不进入无菌组织但接触黏膜的器械。采 用消毒即可。
煮沸法
煮沸温度为100℃，一般细菌繁殖体5分钟就 杀死了，芽胞需要1-2小时才可被杀灭。
流动蒸气消毒法
利用一个大气压下100℃的水蒸气进行消毒， 细菌繁殖体15-30分钟杀灭。蒸笼具有类似的原 理。
间歇蒸气灭菌法
利用反复多次的流动蒸气间歇加热以达到灭菌 消毒的目的。
高压蒸气灭菌法
一种最有效的灭菌方法。灭菌的温度取决于 蒸气的压力。在103.4kPa蒸气下，温度达到 121.3℃，维持15-20分钟，可杀灭包括细菌芽 胞在内的所有微生物。
紫外线灯管
2. 电离辐射 常用γ射线(钴-60)和β射线。
原理：
干扰代谢和DNA合成，破坏细胞膜、酶，产生 H2O2、游离羟基杀菌。
特点： 具有较高的能量与穿透力，可在常温下对
不耐热的物品灭菌，故又称“冷灭菌”。
运用： 可用于消毒不耐热的塑料注射器和导管等，
亦能用于食品、药品、生物制品等的消毒灭 菌。
微生物消毒灭菌课件
作用机制 蛋白变性，细胞膜损伤 蛋白变性 氧化、蛋白沉淀 氧化、蛋白酶变性 氧化、蛋白沉淀 蛋白变性，细胞膜损伤 作用蛋白质、脱水
常用种类 石炭酸（苯酚） 乙醇 高锰酸钾 红汞、升汞、硫柳汞 碘酒、过氧化氢 新洁而灭 龙胆紫
二、各种化学消毒剂的应用
种类 石炭酸 乙醇 高锰酸钾 红汞 升汞 硫柳汞 双氧水 过氧乙酸 碘酒 新洁而灭 龙胆紫
干烤—干燥箱
焚烧
1. 热力灭菌法
高压蒸汽灭菌法：最有效的灭菌方法 121 ℃ 20-30分钟 煮沸消毒法：水煮100 ℃ 5分钟(繁殖体)-2小时(芽胞) 间歇蒸汽灭菌法：反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌 巴氏消毒法:低温消毒法
低温维持法：较低的温度（61 ℃ 30分钟） 高温瞬时法：72杀℃15-30秒，杀死某些致病菌，
消毒剂：可杀死微生物，通常用于非生物材料的灭菌
或消毒。
防腐剂：能杀死微生物或抑制其生长，但对人及动物的
体表组织无毒性或毒性低，可作为外用抗微生物药物。
第一节 物理消毒灭菌法
1. 热力灭菌法
高温杀灭細菌 干热
湿热
焚烧----最彻底的灭菌方法 烧灼----直接用火焰灭菌方法 干烤----加热160-180℃ 2小时，杀死芽孢 红外线：0.77-1000微米电磁波，热效应。
杀死啤酒中的乳酸菌，牛奶中的结核杆菌
湿热灭菌与干热灭菌的比较
同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好
1、湿热中细菌菌体蛋白较易凝固 2、湿热的穿透力比干热大 3、湿热的蒸汽有潜热
(气凝水放热)
第一节 物理消毒灭菌法 2. 辐射杀菌法 紫紫外外线线:波长200-300m,具有杀菌作用,非电离辐射。
杀菌机理：干扰DNA的复制与转录
消毒剂的分类(176) 根据杀灭微生物的强弱分：高效（细菌芽孢）中效（芽孢以 外）低效（细菌繁殖体、亲脂性病毒、真菌） 根据杀菌机制分：蛋白质变性、干扰酶系统和代谢、损伤细 胞膜 根据化学结构与性质不同分：P176-177
《灭菌技术》课件
臭氧产生
紫外线照射空气中的氧气产生臭 氧，臭氧具有强氧化性，可杀死 多种微生物。
微波灭菌技术
穿透灭菌
微波能够穿透物品内部，均匀加热并 杀死微生物。
表面灭菌
微波加热物品表面水分，形成高温蒸 汽，杀死表面微生物。
过滤灭菌技术
空气过滤
通过高效过滤材料过滤空气中的微生物，常用于洁净室的空 气净化。
液体过滤
包括酶法灭菌、超声波灭 菌等。
灭菌技术的应用领域
医疗领域
手术器械、注射器、医 用敷料等的灭菌处理。
食品工业
食品加工设备、包装材 料等的灭菌处理，保证
食品安全。
制药工业
药品生产过程中的灭菌 处理，确保药品质量和
安全。
其他领域
实验室器材、化妆品生 产设备等的灭菌处理， 保证产品质量和安全。
02 物理灭菌技术
是指可以在宿主体内或体表存活和 繁殖的微小生物，包括细菌、病毒 、霉菌、支原体、衣原体等。
无菌状态
是指在一定空间、一定时间内，不 存在任何活的微生物的状态。
灭菌技术的分类
01
02
03
物理灭菌技术
包括热力灭菌、紫外线灭 菌、电离辐射灭菌、微波 灭菌等。
化学灭菌技术
包括气体灭菌、药液灭菌 等。
生物灭菌技术
《灭菌技术》PPT课 件
目录
CONTENTS
• 灭菌技术概述 • 物理灭菌技术 • 化学灭菌技术 • 灭菌效果的检测与评估 • 灭菌技术的未来发展
01 灭菌技术概述
灭菌技术的定义
灭菌技术
是指通过物理或化学手段，彻底 消除物料中存在的微生物，包括 细菌、病毒、霉菌等，以实现无
菌状态的过程。
微生物
节能技术的应用
紫外线照射空气中的氧气产生臭 氧，臭氧具有强氧化性，可杀死 多种微生物。
微波灭菌技术
穿透灭菌
微波能够穿透物品内部，均匀加热并 杀死微生物。
表面灭菌
微波加热物品表面水分，形成高温蒸 汽，杀死表面微生物。
过滤灭菌技术
空气过滤
通过高效过滤材料过滤空气中的微生物，常用于洁净室的空 气净化。
液体过滤
包括酶法灭菌、超声波灭 菌等。
灭菌技术的应用领域
医疗领域
手术器械、注射器、医 用敷料等的灭菌处理。
食品工业
食品加工设备、包装材 料等的灭菌处理，保证
食品安全。
制药工业
药品生产过程中的灭菌 处理，确保药品质量和
安全。
其他领域
实验室器材、化妆品生 产设备等的灭菌处理， 保证产品质量和安全。
02 物理灭菌技术
是指可以在宿主体内或体表存活和 繁殖的微小生物，包括细菌、病毒 、霉菌、支原体、衣原体等。
无菌状态
是指在一定空间、一定时间内，不 存在任何活的微生物的状态。
灭菌技术的分类
01
02
03
物理灭菌技术
包括热力灭菌、紫外线灭 菌、电离辐射灭菌、微波 灭菌等。
化学灭菌技术
包括气体灭菌、药液灭菌 等。
生物灭菌技术
《灭菌技术》PPT课 件
目录
CONTENTS
• 灭菌技术概述 • 物理灭菌技术 • 化学灭菌技术 • 灭菌效果的检测与评估 • 灭菌技术的未来发展
01 灭菌技术概述
灭菌技术的定义
灭菌技术
是指通过物理或化学手段，彻底 消除物料中存在的微生物，包括 细菌、病毒、霉菌等，以实现无
菌状态的过程。
微生物
节能技术的应用
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培养基的配置 培养基的灭菌
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（一）培养基的配置
一、碳源 1、作用 提供微生物菌种的生长繁殖所需的能源和合成菌体所 必需的碳成分 。提供合成目的产物所必须的碳成分
2、来源 糖类、油脂、有机酸、正烷烃
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二、氮源
氮源主要用于构成菌体细胞物质（氨基酸，蛋白质、核 酸等）和含氮代谢物。常用的氮源可分为两大类：有机氮 源和无机氮源。
所以选择合适的无机氮源有两层意义：
满足菌体生长
稳定和调节发酵过程中的pH
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2、有机氮源
来源：工业上常用有机氮源都是一些廉价的原料，花生饼粉、 黄豆饼粉、棉子饼粉、玉米浆、玉米蛋白粉、蛋白胨、 酵母粉、鱼粉、蚕蛹粉、尿素、酒糟等。
成分复杂：除提供氮源外，有些有机氮源还提供大量的无机 盐及生长因子。
例 玉米浆： ①可溶性蛋白、生长因子（生物素）、苯乙酸
②较多的乳酸
③硫、磷、微量元素等
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氮源使用的一些相关问题：
有机氮源和无机氮源应当混合使用
早期：容易利用易同化的氮源—无机氮源 中期：菌体的代谢酶系已形成、则利用蛋白质
有些产物会受氮源的诱导和阻遏 例： 蛋白酶的生产
有机氮源选取时也要考虑微生物的同化能力
低温维持法
高温瞬时灭菌
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紫外线
杀菌机制： 诱导核酸形成胸腺嘧啶二聚体，从而干扰了核酸的复制
各种微生物对紫外线抗性不同 干细胞强于湿细胞； 芽孢，孢子强于营养细胞； 多倍体＞二倍体＞单倍体
常用于实验室环境的灭菌，以物品表面的灭菌
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有机化合物
甲醛：纯甲醛为气体，37－40％水液为福尔马林。
控制微生物的化学因素
表面消毒剂 化学治疗剂
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高温灭菌
多数细菌，酵母菌和霉菌的营养细胞和病毒在50-65 ºＣ10 min可以致死。一般噬菌体65－80 ºＣ致死；放线菌、霉菌 的孢子比营养细胞抗热性强，76－80 ºＣ10min可以杀死； 细菌芽孢，在100 ºＣ下５－20min才能致死；同种微生物老 龄菌比幼菌耐热。
开发效果好、有针对性的有机氮源仍然是令人感兴趣
的课题
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三、无机盐的微量元素
1、作用：各种不一样 2、来源：C、N源，以盐的形式补充 3、用量：根据具体的产品，以实验决定
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使用注意点
A. 对于其它渠道有可能带入的过多的某种无机离子和 微量元素在发酵过程中必须加以考虑
例：铁离子 青霉素发酵中，铁离子的浓度要小于20μg/ml 发酵罐必须进行表面处理
醇是脱水剂蛋白质变性剂,70％乙醇杀菌效果最好。
酚：3－5％的石碳酸溶液几分钟即可致死细菌甲 酚杀菌力最强，煤酚皂液（来苏尔）为甲酚和肥 皂的混合液 。
K2MnO4使菌体蛋白质氧化，使酶失活。 0·1－3％浓度 可用于皮肤，果品、餐具、消毒。H2O2清洗伤口。
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第二节 培养基的制备与灭菌
B、使用时注意盐的形式（pH的变化） 例：黑曲酶NRRL-330,生产α-淀粉酶，PH对酶活的影响
pH
酶活
不加
4.25
120分钟
加 K2HPO4
5.45
30分钟
加 KH2PO4
4.62精选ppt
75分钟
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四、生长因子、前体和产物促进剂
1、生长因子 从广义上讲，凡是微生物生长不可缺少的微量的有机物
主要内容
1灭菌原理与技术简介 2培养基制备与灭菌 3空气灭菌流程与设备 4反应器相关灭菌技术
精选ppt
1
第一节 灭菌原理与技术简介
基本概念
生化反应过程多为纯培养过程，必需对生产的过程进行灭菌处 理，其实质是对有害微生物的控制和消除。
灭菌（sterilition）：杀死物体上全部微生物的方法
1、无机氮源
种类：氨盐、硝酸盐和氨水
特点：微生物对它们的吸收快，所以也称之谓迅速利 用的氮源。但无机氮源的迅速利用常会引起pH的变化 如：
(NH4)2SO4 → 2NH3 + 2H2SO4
NaNO3 + 4H2 → NH 精选pp3t + 2H2O + NaOH
13
无机氮源被菌体作为氮源利用后，培养液中就留下了酸性 或碱性物质，这种经微生物生理作用（代谢）后能形成酸性 物质的无机氮源叫生理酸性物质，如硫酸胺，若菌体代谢后 能产生碱性物质的则此种无机氮源称为生理碱性物质，如硝 酸钠。正确使用生理酸碱性物质，对稳定和调节发酵过程的 pH有积极作用。
实验室中是培养基灭菌的最常用方 法。工业中利用饱和蒸汽进行培养 基和设备、管道等的灭菌。
精选ppt
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巴氏消毒法(pasteurization)
是食品（牛奶）酿造（啤酒）工业中常用的方法。 具体做法是61.7－62.8ºＣ处理30min或71.6ºＣ度 处理15min，这样即可杀死病原微生物。又不致 损坏营养，可保留食品饮料原有用味。根据结核杆 菌在62ºＣ下15min被致死。
质，如氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生素等均称生长因子。
如以糖质原料为碳源的谷氨酸生产菌均为生物素缺陷型， 以生物素为生长因子,生长因子对发酵的调控起到重要的作 用。
煮沸灭菌法（煮沸消毒法） 高压蒸汽灭菌法 巴斯德消毒法：（巴氏消毒法）
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高压蒸汽灭菌
就是直接用高温蒸汽灭菌。蒸汽在冷凝时释放出大量潜能， 蒸汽具有强大穿透力，蒸汽的湿热破坏菌体蛋白质和核酸 的化学键，使酶失活，微生物因代谢障而死亡。
是湿热灭中最好方法，通常在 1.05kg/cm2,的压力下面（此时 温度121ºＣ）处理15－30min。
灭菌方法： 湿热灭菌 （mosist heat sterilization） 干热灭菌（ dry heat sterilization）
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湿热灭菌(mosist heat sterilization)
该法比干热灭菌效果好，因为蛋白质在有水的情况下容易 凝固，如含水50％，蛋白质凝固温度为56ºＣ；含水６％ 蛋白质凝固温度为160-170ºＣ
消毒(disinfection)：杀死或消除物体上的病原微生物的方法 防腐(antisepsis)：用理化方法防止抑制微生物生长的方法
化疗(chemotherapy)：利用对病源菌具有高度毒力而对宿主 基本无毒的化学物质来抑制宿主体内病源微生高温灭菌 辐射作用 高渗作用 干燥 超声波
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（一）培养基的配置
一、碳源 1、作用 提供微生物菌种的生长繁殖所需的能源和合成菌体所 必需的碳成分 。提供合成目的产物所必须的碳成分
2、来源 糖类、油脂、有机酸、正烷烃
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二、氮源
氮源主要用于构成菌体细胞物质（氨基酸，蛋白质、核 酸等）和含氮代谢物。常用的氮源可分为两大类：有机氮 源和无机氮源。
所以选择合适的无机氮源有两层意义：
满足菌体生长
稳定和调节发酵过程中的pH
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2、有机氮源
来源：工业上常用有机氮源都是一些廉价的原料，花生饼粉、 黄豆饼粉、棉子饼粉、玉米浆、玉米蛋白粉、蛋白胨、 酵母粉、鱼粉、蚕蛹粉、尿素、酒糟等。
成分复杂：除提供氮源外，有些有机氮源还提供大量的无机 盐及生长因子。
例 玉米浆： ①可溶性蛋白、生长因子（生物素）、苯乙酸
②较多的乳酸
③硫、磷、微量元素等
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氮源使用的一些相关问题：
有机氮源和无机氮源应当混合使用
早期：容易利用易同化的氮源—无机氮源 中期：菌体的代谢酶系已形成、则利用蛋白质
有些产物会受氮源的诱导和阻遏 例： 蛋白酶的生产
有机氮源选取时也要考虑微生物的同化能力
低温维持法
高温瞬时灭菌
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紫外线
杀菌机制： 诱导核酸形成胸腺嘧啶二聚体，从而干扰了核酸的复制
各种微生物对紫外线抗性不同 干细胞强于湿细胞； 芽孢，孢子强于营养细胞； 多倍体＞二倍体＞单倍体
常用于实验室环境的灭菌，以物品表面的灭菌
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有机化合物
甲醛：纯甲醛为气体，37－40％水液为福尔马林。
控制微生物的化学因素
表面消毒剂 化学治疗剂
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高温灭菌
多数细菌，酵母菌和霉菌的营养细胞和病毒在50-65 ºＣ10 min可以致死。一般噬菌体65－80 ºＣ致死；放线菌、霉菌 的孢子比营养细胞抗热性强，76－80 ºＣ10min可以杀死； 细菌芽孢，在100 ºＣ下５－20min才能致死；同种微生物老 龄菌比幼菌耐热。
开发效果好、有针对性的有机氮源仍然是令人感兴趣
的课题
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三、无机盐的微量元素
1、作用：各种不一样 2、来源：C、N源，以盐的形式补充 3、用量：根据具体的产品，以实验决定
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使用注意点
A. 对于其它渠道有可能带入的过多的某种无机离子和 微量元素在发酵过程中必须加以考虑
例：铁离子 青霉素发酵中，铁离子的浓度要小于20μg/ml 发酵罐必须进行表面处理
醇是脱水剂蛋白质变性剂,70％乙醇杀菌效果最好。
酚：3－5％的石碳酸溶液几分钟即可致死细菌甲 酚杀菌力最强，煤酚皂液（来苏尔）为甲酚和肥 皂的混合液 。
K2MnO4使菌体蛋白质氧化，使酶失活。 0·1－3％浓度 可用于皮肤，果品、餐具、消毒。H2O2清洗伤口。
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第二节 培养基的制备与灭菌
B、使用时注意盐的形式（pH的变化） 例：黑曲酶NRRL-330,生产α-淀粉酶，PH对酶活的影响
pH
酶活
不加
4.25
120分钟
加 K2HPO4
5.45
30分钟
加 KH2PO4
4.62精选ppt
75分钟
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四、生长因子、前体和产物促进剂
1、生长因子 从广义上讲，凡是微生物生长不可缺少的微量的有机物
主要内容
1灭菌原理与技术简介 2培养基制备与灭菌 3空气灭菌流程与设备 4反应器相关灭菌技术
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第一节 灭菌原理与技术简介
基本概念
生化反应过程多为纯培养过程，必需对生产的过程进行灭菌处 理，其实质是对有害微生物的控制和消除。
灭菌（sterilition）：杀死物体上全部微生物的方法
1、无机氮源
种类：氨盐、硝酸盐和氨水
特点：微生物对它们的吸收快，所以也称之谓迅速利 用的氮源。但无机氮源的迅速利用常会引起pH的变化 如：
(NH4)2SO4 → 2NH3 + 2H2SO4
NaNO3 + 4H2 → NH 精选pp3t + 2H2O + NaOH
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无机氮源被菌体作为氮源利用后，培养液中就留下了酸性 或碱性物质，这种经微生物生理作用（代谢）后能形成酸性 物质的无机氮源叫生理酸性物质，如硫酸胺，若菌体代谢后 能产生碱性物质的则此种无机氮源称为生理碱性物质，如硝 酸钠。正确使用生理酸碱性物质，对稳定和调节发酵过程的 pH有积极作用。
实验室中是培养基灭菌的最常用方 法。工业中利用饱和蒸汽进行培养 基和设备、管道等的灭菌。
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巴氏消毒法(pasteurization)
是食品（牛奶）酿造（啤酒）工业中常用的方法。 具体做法是61.7－62.8ºＣ处理30min或71.6ºＣ度 处理15min，这样即可杀死病原微生物。又不致 损坏营养，可保留食品饮料原有用味。根据结核杆 菌在62ºＣ下15min被致死。
质，如氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生素等均称生长因子。
如以糖质原料为碳源的谷氨酸生产菌均为生物素缺陷型， 以生物素为生长因子,生长因子对发酵的调控起到重要的作 用。
煮沸灭菌法（煮沸消毒法） 高压蒸汽灭菌法 巴斯德消毒法：（巴氏消毒法）
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高压蒸汽灭菌
就是直接用高温蒸汽灭菌。蒸汽在冷凝时释放出大量潜能， 蒸汽具有强大穿透力，蒸汽的湿热破坏菌体蛋白质和核酸 的化学键，使酶失活，微生物因代谢障而死亡。
是湿热灭中最好方法，通常在 1.05kg/cm2,的压力下面（此时 温度121ºＣ）处理15－30min。
灭菌方法： 湿热灭菌 （mosist heat sterilization） 干热灭菌（ dry heat sterilization）
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湿热灭菌(mosist heat sterilization)
该法比干热灭菌效果好，因为蛋白质在有水的情况下容易 凝固，如含水50％，蛋白质凝固温度为56ºＣ；含水６％ 蛋白质凝固温度为160-170ºＣ
消毒(disinfection)：杀死或消除物体上的病原微生物的方法 防腐(antisepsis)：用理化方法防止抑制微生物生长的方法
化疗(chemotherapy)：利用对病源菌具有高度毒力而对宿主 基本无毒的化学物质来抑制宿主体内病源微生高温灭菌 辐射作用 高渗作用 干燥 超声波