动物生物化学蛋白质翻译

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(2)多肽链的水解切除 水解切除其中多余的肽段,使之折叠成为有 活性的酶或蛋白质。如酶原激活
(3)氨基酸侧链的修饰 氨基酸侧链的修饰包括羟化、羧化、甲基 化及二硫链的形成等。
(4)糖基化修饰 糖蛋白是细胞蛋白质组成的重要成分。它是在翻 译后的肽链上以共 价键与单糖或寡聚糖连接而成。糖基化是在酶催 化下进行的。
氨基酸的羧基与tRNA 的3’端CCA-OH 以酯键相连,因此其氨基是自 由的。
tRNAfmet fMet-tRNA合成酶
酯键
Met 甲酰FH4
翻译起始时, 第一个氨基酸 一般是蛋氨酸, 其氨基要甲酰 化,予以保护。
氨基酸与tRNA的 连接方式
甲酰基
fMet-tRNA
2.2、起始复合物的形成
首先IF3、IF1帮助30S小亚基 与mRNA结合,IF2和GTP帮助 甲酰甲硫氨酸-tRNA与AUG配 对,接着IF3脱离,形成30S 起始复合物。50S大亚基进入, IF1和IF2脱离,形成50S起始 复合物,需要GTP。甲酰甲硫 氨酸-tRNA处于P位。
配机(操作台)
蛋白质翻译系统示意图
1.1、mRNA,信使RNA
mRNA是遗传信息的载体(载有遗传密码,genetic code), 是合成蛋白质的蓝图(模板),它以一系列三联体密码子 (codon)的形式从DNA转录了遗传信息。每个密码子代表一 个氨基酸。
mRNA占细胞总RNA的5-10%,不稳定,寿命短。
4. 肽酰基转移酶中心,是形成肽键的 位点等。
2、蛋白质的生物合成过程
2.1、氨基酸的活化
所有参与合成多肽链的氨基酸都要激活,并由数十种高度专一的氨基 酰-tRNA合成酶催化。该酶由两个识别位点,它们能识别特定的氨基 酸和选择其所对应的tRNA,使两者连接起来(利用ATP)。 反应如下:
A A t R N A A T P 氨 酰 基 - t R N A 合 成 酶 A A - t R N A A M P P P i
一个嘌呤丰富区 起始密码
起始密码AUG上游的S.D序列与16S rRNA3’端互 补结合有利于30S起始复合物的形成
2.3、肽键的形成和延伸
(注意新的AA-tRNA如何定位,第一个肽键如何形成,核糖体如何移动…)
氨酰基tRNA进入A位
新的氨基酸-tRNA的进位依赖EF-Tu和Ts因子的协助
肽键的形成
核糖体
原核70S核糖体和真核80S核糖体的结构和组成
核糖体有4个基本功能
1. 容纳mRNA,并能沿着mRNA由 5’——3’ 移动,由tRNA解读其 密码;
2. 氨基酰位点(A位点),可结合氨 基酰-tRNA(AA-tRNA);
3. 肽酰基位点(P位点),可结合肽酰 基-tRNA(肽-tRNA);
原核的mRNA 是多顺反子;真核的mRNA 是单顺反子。
1.2、tRNA,转运RNA
原核tRNA有30-40种,真核有50-60种,含70-90个核苷酸, 并有多种稀有碱基。
tRNA是最小的RNA, 占细胞总RNA 的15%左右,其功能是搬 运氨基酸和解读密码子。
tRNA 具有“四环一臂”和“三叶草” 形的典型结构。
第15章 蛋白质翻译
Protein Biosynthesis (Translation)
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本章主要内容:
翻译系统 蛋白质生物合成的过程 多肽链翻译后的修饰 蛋白质的到位
基因在原核和真核细胞中最终得到表达
1、蛋白质的翻译系统
原料氨基酸,20种 mRNA是合成蛋白质的“蓝图(或模板)” tRNA是原料氨基酸的“搬运工” rRNA与多种蛋白质结合成核糖体作为合成多肽链的装
核糖体大、小亚基解聚,并进入下一轮合成。
蛋白质合成的终止
多个核糖体结合在同一条mRNA上,由 5’——3’进行翻译,形成多核糖体
(polyribosome),翻译速率得以提高
3.多肽链的修饰和加工
(1)N—端修饰 原核生物修饰时是由肽甲酰基酶除去甲酰基,多数 情况甲 硫氨酸也被氨肽酶除去,真核生物中甲硫氨酸则全部被切除。
真核的核糖体(80S)= 40S小亚基 + 60S大亚基 其中 40S 小亚基含18S rRNA 和33种蛋白质 60S 大亚基含28S,5.8S,5SrRNA和45种蛋白质
rRNA 只有4-5种占细胞 RNA 的大部分 。
图为原核生物的两种 16S rRNA和5S rRNA 的结 构
大亚基
小亚基 tRNA
密码子与反密码子的配对方式
变偶性——反密码子5’端的碱基与密码子的第三位配对不严格
1.3、rRNA与核糖体(ribosome)
核糖体是rRNA 与几十种蛋白质的复合体,有大、小两个亚基构成。 含有合成蛋白质多肽链所必需的酶、起始因子(IF)、延伸因子 (EF)、释放因子(RF)等。
原核的核糖体(70S)= 30S小亚基 + 50S大亚基 其中 30S小亚基含16S rRNA 和21种蛋白质 50S大亚基含23S,5SrRNA和34种蛋白质
注意:3’端CCA氨基酸受位和反密码子环
tRNA的结构—“四环一臂”
倒L形的三级结构
tRNA的功能是解读mRNA上的密码子和搬运氨基酸 tRNA上至少有4 个位点与多肽链合成有关:即3’CCA氨基酸接受位点、 氨基酰-tRNA合成酶识别位点、核糖体识别位点和反密码子位点。 每一个氨基酸有其自身的tRNA。氨基酸的羧基与tRNA的 3’ CCA-OH 以酯键结合。 氨基酸与mRNA相应的密码子正确“对号”须依赖于tRNA的反密码子。
肽键的形成由肽酰基转移酶催化
(此酶具有核酶的活性)
原核生物肽链的延长
核糖体沿着mRNA 5’——3’方向移位 EF-G因子和GTP参与 空载的tRNA从E位点离开
2.4、肽链的终止
氨基酸进位,肽链形成和延伸,核糖体沿着mRNA 的5’——3’ 方向移位,循环往复,新合成的肽链由氨 基端向着羧基端不断延长,直至mRNA上出现终止密 码,相应的肽链释放因子RF1(对应UAA、UAG), RF2(对应UAA、UGA)占据A位。肽链的合成终止, 并从核糖体上释放。
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