第十四章 唾液及唾液斑检验
中考生物唾液实验细节

中考生物唾液实验细节
一、实验及其目的
本实验旨在观察、研究唾液分泌机制,通过实验了解唾液分泌的特点和作用,进而对唾液的分泌机制有一定的了解。
二、实验原理和原料
原理:唾液主要由唾液腺分泌而成,唾液中含有蛋白质和糖类,还具有抗菌消毒作用,对抑制口腔病原菌的形成具有重要作用。
原料:抗凝剂、试管、棉花、羊膜素。
三、实验步骤
1.用抗凝剂将棉花紧实塞入试管中,空出至少5毫米的空间; 2.放置羊膜素数分钟,牽引出唾液;
3.观察物质的液体和物质构造;
4.读出液面,记录体积;
5.重复上述步骤,并进行重复测量;
6.分析实验结果,得出结论。
四、实验结果及分析
通过实验,发现唾液液面比为1:1,由于唾液中含有蛋白质和糖类,因此具有明显的糖化作用。
五、结论
1.唾液是由唾液腺分泌的液体,具有抗菌消毒作用,可抑制口腔病原菌;
2.唾液的比例为1:1,具有明显的糖化作用。
法医物证教材唾液斑精班检验

时间ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ素
唾液斑的检验结果会随着时间 的推移而发生变化,因此采集 后应尽快进行检验。
其他因素
如采集者的操作方式、采集环 境等也可能对唾液斑检验造成 影响。
03
唾液斑的检测技术
化学检测法
联苯胺检测法
通过观察唾液中过氧化酶催化联苯胺氧化反应产生的颜色变化,判断是否存在 唾液斑。
酸性磷酸酶检测法
利用唾液中酸性磷酸酶催化对硝基苯磷酸酯生成有色产物,进行唾液斑的检测。
提高检验的准确性与可靠性
标准化操作流程
制定和完善唾液斑检验的标准化操作流 程,确保检验结果的可靠性和可重复性 。
VS
质量控制
加强实验室内部和外部的质量控制,定期 进行比对和校准,确保检验数据的准确性 和一致性。
拓展唾液斑检验的应用领域
疾病预测与预防
利用唾液斑检验的结果,预测个体患某种疾 病的风险,并为其提供针对性的预防措施和 建议。
唾液斑的特性
唾液斑通常呈淡黄色或白色,具有一定的黏稠度,容易干燥形成 薄膜。唾液斑的成分和性质受个体差异、饮食习惯、口腔卫生状 况等因素影响。
唾液斑在法医学中的应用
个体识别
由于唾液斑中含有个体的特异性成分,如DNA、蛋 白质等,可以通过检测这些成分进行个体识别,用 于身份确认和亲缘关系鉴定等。
毒品检测
免疫学检测法
抗人血红蛋白检测
利用抗原-抗体反应原理,通过检测唾液中是否存在人血红蛋 白,判断是否存在唾液斑。
抗精子抗体检测
通过检测唾液中是否存在抗精子抗体,判断是否存在精斑。
DNA检测法
STR分型检测
利用唾液中含有的口腔上皮细胞DNA进行STR分型检测,用于个体识别和亲子鉴 定。
法医物证学(山东联盟)智慧树知到答案章节测试2023年济宁医学院

第一章测试1.以下参数中,表示假设父为孩子的机会比随即男子为孩子生父机会大多少倍的是( )。
A:RCPB:EPPC:PID:CCE答案:C2.法医物证学的研究对象包括A:与人体有关的生物物证B:植物C:动物D:其他E:碎石答案:A3.下列关于法医物证的基本任务,描述正确的是A:直接得出结论B:提供证物C:其他D:个人识别及亲子鉴定E:解决案子的前因后果答案:D4.以下哪些选项是法医物证A:骨骼B:血液C:毛发D:指纹答案:ABC5.法医物证的特点是()A:稳定性受环境影响B:易受主观因素影响C:与案件联系一目了然D:属于“科学证据”答案:AD第二章测试1.血缘关系鉴定可能用到的遗传标记包括()A:常染色体DNA遗传标记B:mtDNA遗传标记C:y染色体遗传标记D:X染色体遗传标记答案:ABCD2.哪种不属于表达产物遗传性状A:酶型B:DNA序列多态性C:红细胞血型D:.血小板型答案:B3.纯合子的基因型期望值检验Hardy-Weinberg平衡公式为下列A:(基因频率1)(基因频率2)样本含量B:基因频率样本含量C:2(基因频率1)(基因频率2)样本含量D:(基因频率)²*样本含量答案:D4.表型的概念A:是生物体可见性状的实际基因B:是指生物体某特定基因所表现的性状C:指个体多个基因座上等位基因的组合D:指个体一个基因座上等位基因的组合答案:B5.基因型概念正确的是A:是指生物体某特定基因所表现的性状B:是指个体一个基因座上等位基因的组合,是生物体可见性状的实际基因C:是指个体一个或多个基因座上等位基因的组合,是生物体可见性状的实际基因D:是指个体多个基因座上等位基因的组合,是生物体可见性状的实际基因答案:C第三章测试1.关于SE33的描述不正确的是A:多态性程度非常低B:杂合度为0.94C:突变率0.6%D:等位基因范围在3-39.2答案:A2.选用基因座应遵循的原则,不包括A:群体遗传学调查充分B:多态性好C:检测不灵敏D:PCR扩增稳定答案:C3.下列属于DNA分析方法评估内容的是A:种属特异性B:检测灵敏度C:可重复性D:遗传方式答案:ABCD4.稀有等位基因的表述不合适的是A:人群中频率较高的等位基因B:其命名需要计算C:计算时需要注意核苷酸的重复数D:人群中频率较低的等位基因答案:A5.STR的中文描述A:短串联重复序列B:短随机序列C:短可变序列D:短变异序列答案:A第四章测试1.荧光标记STR复合扩增系统,荧光染料标记在(),扩增后,使相应PCR产物上携带标记引物的荧光染料。
唾液实验报告结论

实验名称:唾液成分分析实验实验目的:通过分析唾液的成分,了解唾液在口腔生理功能中的作用,以及唾液成分的变化对口腔健康的影响。
实验时间:2023年X月X日实验地点:实验室实验对象:唾液样本实验方法:1. 收集唾液样本:在实验前,要求实验对象保持口腔清洁,避免进食和饮水,自然分泌唾液至收集器中。
2. 唾液成分分析:采用化学分析法、生物化学分析法、分子生物学技术等方法对唾液样本进行成分分析。
3. 数据记录与处理:将实验数据记录在实验报告中,并运用统计学方法对数据进行分析。
实验结果:1. 唾液成分分析结果显示,唾液中含有多种无机盐、有机酸、酶类、蛋白质、糖类等成分。
2. 无机盐主要包括钠、钾、钙、镁等,其中钠离子含量最高,对维持口腔酸碱平衡、电解质平衡等具有重要作用。
3. 有机酸主要包括乳酸、柠檬酸等,有助于降低口腔pH值,抑制细菌生长。
4. 酶类主要包括唾液淀粉酶、唾液蛋白酶、唾液脂肪酶等,能够参与食物的消化过程。
5. 蛋白质主要包括唾液淀粉酶抑制物、唾液免疫球蛋白等,具有免疫、抗菌、抗炎等作用。
6. 糖类主要包括葡萄糖、果糖等,为口腔微生物提供营养。
结论:1. 唾液是口腔中一种复杂的生理液体,具有多种生理功能,如消化、清洁、抗菌、免疫等。
2. 唾液成分的变化与口腔健康密切相关。
如唾液中的有机酸、酶类、蛋白质等成分的变化,可影响口腔微生物的生长,进而影响口腔健康。
3. 本实验通过分析唾液成分,揭示了唾液在口腔生理功能中的作用。
在今后的口腔保健工作中,应关注唾液成分的变化,为口腔疾病的预防和治疗提供依据。
4. 针对唾液成分的变化,可以采取以下措施:(1)保持口腔清洁,减少细菌滋生;(2)增加富含维生素的食物摄入,提高唾液免疫球蛋白的含量;(3)适当饮用含有机酸、酶类的饮料,促进口腔健康。
5. 本实验结果为口腔医学研究提供了参考,有助于进一步了解唾液在口腔生理功能中的作用,为口腔疾病的预防和治疗提供理论依据。
唾液测定的工作原理和方法

唾液测定的工作原理和方法唾液测定是一种非侵入性的生物检测方法,通过分析唾液中的成分来评估人体的健康状况。
唾液测定的工作原理是基于唾液中的分子、细胞和蛋白质的特征,这些特征可以反映人体的生理状态和疾病风险。
唾液测定的方法包括唾液采集、处理和分析。
以下将详细介绍唾液测定的工作原理和方法。
1. 唾液采集方法唾液采集通常使用非刺激性的方法来避免刺激唾液分泌,并确保采集到的是中等峰值状态下的唾液样本。
常用的唾液采集方法包括自由采集和刺激采集。
自由采集是指要求被测试者按照指示在容器中收集唾液样本,常见的自由采集方法包括流淌法、吸取法和漱口法。
流淌法是被测试者把唾液逐渐咽下或咬碎后贯注在采集容器中,这种方法比较简单,但收集样本量较少。
吸取法是通过使用吸管或试管,让被测试者将唾液吸入试管中,这种方法可以获得较多的唾液样本。
漱口法是被测试者用生理盐水或蒸馏水含漱数次后将唾液吐入采集容器中,这种方法可以获得较多的唾液样本,并在一定程度上消除口腔内细菌的干扰。
刺激采集是指通过外界刺激来提高唾液分泌,常见的刺激采集方法包括咀嚼口香糖、咀嚼脆果或使用电刺激法等。
2. 唾液处理方法唾液采集后,需要经过一系列处理步骤来净化样本、去除杂质和浓缩样本。
常见的处理方法包括离心、滤膜、洗涤和浓缩。
离心是将唾液样本以高速旋转的方式,使得固体颗粒沉淀,液体部分被分离出来。
滤膜是将唾液样本通过特定孔隙大小的滤膜,可以去除大分子、蛋白质、颗粒等杂质。
洗涤是通过添加洗涤液或缓冲液,去除唾液样本中的化学物质、异物和红细胞。
浓缩是通过蒸发、凝固或冷冻等方法,将唾液中所需的分子、细胞和蛋白质样本浓缩到一个较小的体积中,以便进行后续的分析。
3. 唾液分析方法唾液分析可以通过各种仪器和技术手段进行,常见的分析方法包括免疫学方法、分子生物学方法和化学分析方法等。
免疫学方法是利用免疫学原理,通过与抗原或抗体结合反应来检测和定量特定分子或细胞,常见的免疫学方法包括酶联免疫吸附测定(ELISA)、免疫荧光和免疫印迹等。
唾液分泌实验报告

一、实验目的1. 了解唾液分泌的生理机制。
2. 探究影响唾液分泌的因素。
3. 学习使用实验仪器和观察实验现象。
二、实验原理唾液是由唾液腺分泌的,主要成分包括水、黏蛋白、酶、电解质等。
唾液分泌受到多种因素的影响,如食物的刺激、情绪变化、温度变化等。
本实验通过观察不同条件下唾液分泌量的变化,探究影响唾液分泌的因素。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:唾液收集管、试管、碘液、淀粉糊、清水、生理盐水、酒精、棉签、温度计等。
2. 实验仪器:显微镜、天平、计时器、pH计等。
四、实验方法1. 实验分组:将实验对象分为甲、乙、丙三组,每组10人。
2. 实验操作:(1)甲组:空腹状态下,记录唾液分泌量。
(2)乙组:进餐后,记录唾液分泌量。
(3)丙组:情绪激动状态下,记录唾液分泌量。
(4)观察温度对唾液分泌的影响,将唾液收集管放入不同温度的水中,记录唾液分泌量。
(5)观察pH值对唾液分泌的影响,使用pH计测量唾液pH值,记录唾液分泌量。
(6)观察不同刺激对唾液分泌的影响,使用棉签蘸取不同刺激物质(如酒精、碘液、淀粉糊等),记录唾液分泌量。
五、实验步骤1. 实验对象空腹状态下,记录唾液分泌量。
2. 实验对象进餐后,记录唾液分泌量。
3. 实验对象情绪激动状态下,记录唾液分泌量。
4. 将唾液收集管放入不同温度的水中,记录唾液分泌量。
5. 使用pH计测量唾液pH值,记录唾液分泌量。
6. 使用棉签蘸取不同刺激物质,记录唾液分泌量。
六、实验结果与分析1. 实验结果:(1)甲组:空腹状态下,唾液分泌量为5ml。
(2)乙组:进餐后,唾液分泌量为10ml。
(3)丙组:情绪激动状态下,唾液分泌量为15ml。
(4)温度对唾液分泌的影响:温度升高,唾液分泌量增加;温度降低,唾液分泌量减少。
(5)pH值对唾液分泌的影响:唾液pH值为6.8时,唾液分泌量最大。
(6)不同刺激对唾液分泌的影响:酒精刺激唾液分泌量增加,碘液刺激唾液分泌量减少,淀粉糊刺激唾液分泌量增加。
法医学物证检验
第十四章法医学物证检验第一节概述一、概念凡能证明案件真实情况的物体或物质痕迹,统称为物证。
法医学物证检验是指运用法医学、生物学、组织学、血清学、免疫学、生物化学及遗传学等知识和技术对生物源性材料所进行的检验和认定。
法医学物证检材包括人体的组织、血痕、分泌物(精液、唾液、阴道液、乳汁、汗液、眼泪等)、排泄物(大便、小便)、呕吐物、羊水、胎垢、脓液、毛发等。
有时,还包括动物的组织、血痕、毛发等以及某些植物性物质如花粉孢子、硅藻等。
二、法医学物证检验的意义可以为侦查破案提供线索,划定范围,可以为审理和判决案件提供科学依据,还可为解决其他问题提供证据。
在许多刑事、民事、行政案件的审理以及医疗纠纷的处理、灾害事故的清查和处理中都起重要的作用。
三、物证的发现、采取、送检四、物证检验及鉴定书物证检验在专门的实验室由专业人员检验。
检验前先明确检验目的、要求,核对检材。
检验时,先进行非破坏性检验,然后进行可能破坏检材原成分的检查。
检验时应尽量使用灵敏的方法,以节省检材,以便能重复核对。
应保留足够的检材作复验之用。
检验中应避免各种污染,以防出现假阳性或假阴性结果。
对检验过程、检验方法、检验结果要详细记录,要对各项数据核实。
检验结束后要编写物证检验鉴定书送交委托单位,并就所剩检材征求委托单位意见,妥善处理之。
物证检验鉴定书是法医学鉴定书的一种,其基本内容与一般法医学鉴定书相似。
第二节血的检验一、概述二、血的检验的程序、方法和意义(一)血痕的肉眼检查(二)血痕的预备试验血痕的预备试验是初步检验,其特点是灵敏度高,操作简便、快速,费用低廉,故作为筛选试验较快排除非血痕的检材。
预备试验的特异性差,易出现假阳性反应,故试验结果阴性证明检材不是血痕,结果阳性只提示检材可能是血痕,需进一步作确证试验。
预备试验的方法很多,有联苯胺试验、酚酞试验、氨基比林试验、鲁米那试验、紫外线浓硫酸试验、孔雀绿试验、纸色谱法等。
(三)血痕的确证试验血痕的确证试验指检验血液的特有成分如血红蛋白及其衍生物或血细胞,以确切证明是血痕的试验。
猪群监测新方法——唾液检测法
猪群监测新方法——唾液检测法农业部种猪质量监督检验测试中心樊福好前言:血清学检测在猪群免疫监测和疾病诊断中发挥着重大作用,但由于血液采集对技术要求较高,必须具备专用的血清分离设备(如离心机等),且操作程序复杂,况且一旦发生溶血或污染,对检测结果影响较大,人们一直期望有新的检测方法诞生。
唾液学方法是其中较有发展前景的方法之一。
唾液学方法的优点:唾液学方法中采集的唾液可以直接冷冻,唾液中的各种酶类(如唾液淀粉酶,碱性蛋白酶)和抗菌物质可以使样品保存更长时间。
采集唾液的方法简单,所以唾液学方法对机体无任何损伤,不会造成猪只应激,值得推广。
另外,唾液中的抗体以分泌型抗体为主,对于免疫功能的解释具有特殊的意义。
唾液采集方法:唾液采集的方法简单,利用猪只的好奇心理以及嗜好咀嚼的特性,采用纱布球采集唾液。
将纱布制作成纱布球固定于金属线前端,猪只会主动咀嚼纱布球,唾液将通过虹吸现象进入纱布球内。
将纱布球内的唾液挤压出,释放至样品袋袋内。
将样品袋内的唾液转移至离心管内。
图1 制作纱布球图2 采集唾液图3 挤压纱布球、收集唾液图4 样品袋内收集的唾液图5 离心管内收集的唾液检测方法:采集的唾液必须进行预处理,方可进行抗体或病原等项目的检测。
10x104转/分钟,离心1分钟,去除杂质,留取上清。
按照常规程序进行ELISA或PCR检测。
结果判定:1、唾液中的病原检测(PCR和RT-PCR)若呈阳性,说明机体正在排毒。
2、由于唾液中的抗体和血液中的抗体不是同一个概念,必须避免使用对血清抗体的理解来解释唾液中抗体的作用。
血清中的抗体大部分为循环抗体,某些循环抗体的抗病活性较低,只能与抗原起机械结合作用,而分泌型抗体的产生速度是血清循环抗体产生速度的两倍,分泌型抗体除具有机械结合作用外,尚具有对抗原的主动捕捉作用,补体的经典和补充途径激活作用,ADCC作用以及凝集作用。
为了便于理解唾液中的抗体作用,可以采用相对抗体(相对量抗体)的概念。
42唾液斑的特点和证明
二、唾液斑的证明-淀粉酶的检测方法
淀粉-碘反应阳性者可进一步证明糖的存在(糖的还原作用)。 方法:取检材淀粉液2滴置于试管中,加碱性铜溶液或1%氯化三
苯基四氮唑液2滴,在火焰上短时加热。 结果:出现红至棕红色沉淀为阳性反应,不出现沉淀为阴性反应。 灵敏度:本试验灵敏度较高,5年以上的唾液斑,或唾液斑经
学习目标
了解:
唾液及唾液斑的特点、功能和提取 唾液斑的证明方法
一、唾ห้องสมุดไป่ตู้及唾液斑-概念
唾液(saliva):人或动物口腔内分泌的无色液体。
唾液斑(salivary stain):唾液在载体上干燥后形成的斑 痕,是法医物证检验中常见的生物检材。现场发现的烟头、 瓜子皮、嚼过的口香糖、喝过水的杯子等都属于唾液斑检材。
二、唾液斑的证明-概述
唾液中含有大量的淀粉酶(amylase),要分析检材是否唾液 (斑)时,可检查淀粉酶。但人体粪便、几乎所有的植物、发 芽种子和真菌中均含淀粉酶,人体其他分泌液如鼻涕、尿、精 液等也含少量淀粉酶,因此仅凭在斑痕中检出淀粉酶,不能确 证唾液(斑)。如果在检材中同时检出口腔黏膜脱落上皮细胞, 则可确证唾液斑。
二、唾液斑的证明-口腔黏膜脱落上皮细胞的检查
唾液中含有口腔黏膜脱落上皮细胞。将检材斑用 生理盐水充分浸泡,用玻棒轻轻搅拌,使细胞脱 离,弃去载体,离心沉淀,取残渣涂片,用HE染 色后显微镜观察,如发现口腔粘膜脱落非角化磷 状扁平上皮细胞,以多角形为主,结合淀粉酶结 果阳性,可判断为唾液斑。
三、唾液斑的证明-其他方法
一、唾液及唾液斑的特点-来源
唾液主要由三大唾液腺(腮腺、 颌下腺、舌下腺)和口腔黏膜 下小唾液腺的分泌物所组成。
分泌量: 540-640ml
颌下腺:60% 腮腺:20%- 25% 舌下腺:7%- 8%
唾液常规生化检验-临床意义
唾液常规生化检验-临床意义唾液常规生化检验是一项常用的临床检查方法,通过分析唾液中的生物化学指标,可以提供有关机体健康状况的重要信息。
以下是该检验的临床意义:1.口腔疾病诊断:唾液中包含丰富的蛋白质、酶、电解质等物质,对于口腔疾病的早期诊断和治疗起着重要作用。
例如,唾液中的酸碱度可以判断口腔健康状况,唾液中的酶活性可以反映牙齿和牙龈疾病的程度。
1.口腔疾病诊断:唾液中包含丰富的蛋白质、酶、电解质等物质,对于口腔疾病的早期诊断和治疗起着重要作用。
例如,唾液中的酸碱度可以判断口腔健康状况,唾液中的酶活性可以反映牙齿和牙龈疾病的程度。
1.口腔疾病诊断:唾液中包含丰富的蛋白质、酶、电解质等物质,对于口腔疾病的早期诊断和治疗起着重要作用。
例如,唾液中的酸碱度可以判断口腔健康状况,唾液中的酶活性可以反映牙齿和牙龈疾病的程度。
1.口腔疾病诊断:唾液中包含丰富的蛋白质、酶、电解质等物质,对于口腔疾病的早期诊断和治疗起着重要作用。
例如,唾液中的酸碱度可以判断口腔健康状况,唾液中的酶活性可以反映牙齿和牙龈疾病的程度。
1.口腔疾病诊断:唾液中包含丰富的蛋白质、酶、电解质等物质,对于口腔疾病的早期诊断和治疗起着重要作用。
例如,唾液中的酸碱度可以判断口腔健康状况,唾液中的酶活性可以反映牙齿和牙龈疾病的程度。
1.口腔疾病诊断:唾液中包含丰富的蛋白质、酶、电解质等物质,对于口腔疾病的早期诊断和治疗起着重要作用。
例如,唾液中的酸碱度可以判断口腔健康状况,唾液中的酶活性可以反映牙齿和牙龈疾病的程度。
1.口腔疾病诊断:唾液中包含丰富的蛋白质、酶、电解质等物质,对于口腔疾病的早期诊断和治疗起着重要作用。
例如,唾液中的酸碱度可以判断口腔健康状况,唾液中的酶活性可以反映牙齿和牙龈疾病的程度。
1.口腔疾病诊断:唾液中包含丰富的蛋白质、酶、电解质等物质,对于口腔疾病的早期诊断和治疗起着重要作用。
例如,唾液中的酸碱度可以判断口腔健康状况,唾液中的酶活性可以反映牙齿和牙龈疾病的程度。
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唾液斑的检验目的与要求
主要目的是个人识别 可疑斑痕是否为唾液斑? 若为唾液斑,确定唾液斑的个人来源 检验步骤 肉眼观察
预试验
确证试验
测定遗传标记 进行个人识别
种属鉴定
唾液及唾液斑的提取
被鉴定人漱口,将纱布或棉拭子放入口 中,浸湿后取出,置通风干燥处晾干, 分别包装做好记录。 自然流出的唾液,置干净容器内,立即 放水浴中煮沸十分,置冰箱保存。 烟蒂、瓜子皮、果核、口罩、手帕等用 镊子夹取。 茶杯、易拉罐、酒瓶等应戴手套提取 可疑痰迹、尸体皮肤及其他物体上咬痕 部位的可疑唾液斑,应用少量生理盐水 浸湿的纱布擦取,晾干后备检。
方法
首先证明斑痕中是否含有淀粉酶 淀粉-碘反应阳性者进一步证明糖的存在
特点
灵敏度较高 检测烟头时注意烟草浸出液出现的假阳性 陈旧检材酶的活性减弱甚至消失出现假阴性 其它分泌物精液含淀粉酶可出现阳性结果
第二节
唾液斑的证明
口腔粘膜脱落上皮细胞的检查(确证实验) 原理 唾液中含有口腔粘膜脱落上皮细胞 方法 将检材用生理盐水充分浸泡,弃去载体, 离心,取沉淀物涂片,干燥后染色,显微 镜下检查。 结果 发现口腔粘膜脱落上皮细胞,结合淀粉 酶试验阳性结果,可判断为唾液斑,同时 查见食物残渣,支持此结论。
PCR技术鉴定性别可检验性染色体特异性片段,如 DY1序列、DY3序列、DXS454基因座的序列或扩增 X-Y同源Amelogenin基因、ZFY/ZFX基因。 扩增Y-STR或X-STR基因座也能鉴定性别.
聚丙烯酰胺凝胶电泳Pr 表型模式图
唾液(斑)的DNA分析
唾液中含有口腔粘膜脱落上皮细胞,可从中提取 DNA,进行基因组DNA与线粒体DNA多态性分析。 检材可以是新鲜唾液,用无菌生理盐水漱口的漱 口水、唾液拭子、及烟头等。 提取唾液斑DNA,因检材加入量不易量化,故应结 合检材具体情况调整。 分析血痕、精斑DNA多态性的方法均能用于唾液。 唾液斑检材能提出大分子DNA,可进行DNA指纹图 分析;陈旧唾液斑DNA部分降解,可用PCR法分析。
唾液多态性蛋白和酶测定
唾液含具有遗传多态性的酶与蛋白质
多态性蛋白主要有腮腺酸性蛋白(Pa)、腮腺 碱性蛋白(Pb)、腮腺中性蛋白(Pn)、腮腺中带 蛋白(Pm)、腮腺重蛋白(Ph)、唾液富含脯氨酸 蛋白(Pr)、唾液双带蛋白(Db) 以及唾液糖蛋白 (GL)等。 多态性酶有唾液淀粉酶(Amy1)、唾液酯酶 (Set)、唾液葡糖6-磷酸盐脱氢酶(Sgd)、 唾液酸性磷酸酶(Sap)及唾液过氧化物酶等。
分析DNA多态性 是目前进行唾液(斑)个人识别的有效手段。
唾液(斑)的性别鉴定
唾液斑的性别鉴定可检查口腔粘膜脱落上皮细胞 中的X、Y染色质,也可通过DNA分析进行。 DNA分析方法包括Y特异性分子杂交技术及PCR技术 PCR技术特异性好、灵敏度高,避免了分子杂交技 术的缺陷,成为目前检测血痕性别的主要技术。
第 十四 章 唾液及唾液斑检验
主讲:苏丽娟
笫一节
概
述
唾液斑是唾液干燥后形成的斑痕
法医物证检验常见的生物检材 可能出现唾液斑的地方: 烟蒂、手帕、口罩、纸巾、瓜子皮、 果核、茶杯、尸体皮肤及其他物品上 的咬痕等。
唾液及唾液斑的特点
唾液腺(腮腺、颌下腺、舌下腺)的分泌物 水分约占99.4% 含大量的有机物质与无机物质、血型物质以 及口腔粘膜脱落上皮细胞。 无色,无味,接近中性,pH6.6~7.1,低渗 成年人每日分泌唾液约1.0~1.5升,分泌量 及性质受精神因素、刺激的强度和性质影响, 与食物种类亦有一定关系。 在白色背景上常呈淡黄色,在紫外线下发淡 青色荧光。
笫三节
唾液斑的个人识别
唾液(斑)的血型测定
唾液含有水溶性A、B、H血型物质
中和试验测定ABO血型
中和试验ห้องสมุดไป่ตู้测 原理及方法同精斑ABO血型测定
唾液(斑)的血型测定
酶标抗体免疫测定法检测ABO血型 特点 灵敏度极高,适用于非分泌型 测定分泌型唾液,将唾液样本适当稀释 未知检材先用中和试验分型,结果阴性 再用该测定法。 方法 直接斑点ELISA法、间接斑点ELISA法及 斑点ELISA双抗夹心法等,也可采用ELISAABC法。
第二节
唾液斑的证明
淀粉酶的检测(预实验) 原理 淀粉遇碘呈蓝色 唾液中的淀粉酶能将淀粉分解为糖,糖 与碘不呈蓝色反应。将已知淀粉溶液与唾 液斑作用后,再加碘,若不显蓝色,说明 反应体系中淀粉已被唾液淀粉酶分解。之 后再利用糖的还原作用验证淀粉分解产物 糖的存在,即可判断检材中含有淀粉酶。
淀粉酶的检测
唾液多态性蛋白和酶测定
酸性尿素淀粉凝胶电泳、碱性聚丙烯酰胺凝胶电泳 以及等电聚焦等方法。 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦技术,以氨基乙醇和醋酸 液作电极液,用乙炔炭黑显色,可将唾液淀粉酶分 为1、2-1、2、3-1、3-2、3等6种表型。 用各种聚丙烯酰胺凝胶电泳或淀粉凝胶电泳可检出 唾液酯酶F、S、FS等3种表型;唾液过氧化物酶 SAPX1、SAPX2和SAPX3表型;腮腺酸性蛋白、唾液双 带蛋白、腮腺中带蛋白、腮腺重蛋白、腮腺中性蛋 白各可分为(+)、(-)2型;腮腺碱性蛋白、唾液富 含脯氨酸蛋白各可分为1、2、2-1三型;唾液糖蛋白 则可分为1、2、3、4、0、2-1、3-1、4-1、4-2、43、3-2等11种表型。