松郁安神方对肝郁证失眠大鼠机体褪黑素水平的影响
松郁安神方对失眠大鼠基底核腺苷受体与多巴胺受体的影响
Traditional Chinese Medicine 中医学, 2021, 10(1), 52-59Published Online January 2021 in Hans. /journal/tcmhttps:///10.12677/tcm.2021.101006松郁安神方对失眠大鼠基底核腺苷受体与多巴胺受体的影响王秀峰，张瑜，曾雪爱，张一帆，陈铭奇，黄俊山*福建省中医药科学院，福建省中医睡眠医学重点实验室，黄俊山福建省名老中医药专家传承工作室，福建福州收稿日期：2020年12月15日；录用日期：2021年1月6日；发布日期：2021年1月15日摘要目的：观察中药复方松郁安神方(SYF)对失眠大鼠基底核腺苷受体和多巴胺受体的调节作用。
方法：利用失眠大鼠模型，造模成功后分别给予SYF高剂量、SYF低剂量和阿普唑仑用药1周。
治疗过程中观察实验大鼠的一般情况变化。
治疗结束后，运用Western Blotting实验检测基底核组织腺苷A2A R受体和多巴胺受体D2DR蛋白表达水平。
结果：对照组大鼠一般生理状况正常，模型组大鼠失眠引起的症状明显，SYF 高剂量组和低剂量组大鼠失眠引起的症状显著改善。
同对照组相比较，模型组基底核组织中A2A R蛋白表达水平被显著下调(P < 0.01)，D2DR蛋白表达水平被显著上调(P < 0.01)。
而阿普唑仑组、SYF高剂量组和低剂量组则使得失眠大鼠基底核组织中A2A R蛋白表达水平被显著上调(P < 0.01)，D2DR蛋白表达水平被显著下调(P < 0.01)。
结论：SYF可以改善实验大鼠因失眠引起的症状，其机制可能与调控失眠大鼠基底核腺苷受体和多巴胺受体的表达相关。
关键词松郁安神方，失眠，腺苷受体，多巴胺受体Effects of Songyu Anshen Prescriptionon Basal Adenosine Receptorand Dopamine Receptorin Insomnia RatsXiufeng Wang, Yu Zhang, Xue’ai Zeng, Yifan Zhang, Mingqi Chen, Junshan Huang**通讯作者。
松郁安神方对失眠大鼠基底核多巴胺和腺苷含量的影响
意义。 ２ 结果 ２１ 用药前后 实 验 大 鼠 的 一 般 情 况 差 异 实 验 期 间对照组的大鼠，饮食没有明显的变化，体质量缓慢 增加，睡眠活动正常，毛色有光泽，其他生理状况正 常。在造模和用药期间，模型组大鼠的饮食增加，白 天和夜间 活 动 比 对 照 组 增 加，睡 眠 减 少，精 神 状 态 差，烦躁，皮毛颜色欠光泽，体质量增长与对照组和 观察组差异有统计学意义。中药复方 ＳＹＦ在改善 失眠引起的症状上优于西药阿普唑仑。 ２２ 不同药物处理对大鼠基底核组织中 ＤＡ含量 的影响 为了检测不同药物对实验大鼠基底核组织 中 ＤＡ含量的影响，采用 ＲａｔＤＡＥＬＩＳＡＫｉｔ检测用药 处理后各组大鼠基底核组织中 ＤＡ含量。结果如图 １所示，与对照组大鼠基底核组织中 ＤＡ含量比较， 模型组大鼠基底核组织中 ＤＡ含量显著升高 （Ｐ＜ ００１），阿普唑仑组大鼠基底核组织中 ＤＡ含量显著 降低（Ｐ＜００１）。与模型组比较，阿普唑仑组、ＳＹＦ 高剂量组和 ＳＹＦ低剂量组大鼠基底核组织中 ＤＡ含 量均显著下降（Ｐ＜００１）。同阿普唑仑组比较，ＳＹＦ 高剂量组（Ｐ＜００５）和 ＳＹＦ低剂量组（Ｐ＜００１）比 较差异均有统计学意义。ＳＹＦ高剂量组和 ＳＹＦ低剂 量组之间比较，差异无统计学意义（Ｐ＞００５）。
图 １ 各组实验大鼠基底核组织中 ＤＡ含量比较
安神汤加减治疗肝郁气滞型失眠的临床效果观察
安神汤加减治疗肝郁气滞型失眠的临床效果观察目的观察安神汤加减治疗肝郁气滞型失眠的临床效果。
方法选取我院2015年1月～2017年1月收治的97例肝郁气滞型失眠者，将其按随机排列表法分为两组，其中对照组48例（采用劳拉西泮片），观察组49例（加用安神汤）。
比较两组患者治疗前后的睡眠质量、中医症候评分，评估治疗效果。
结果观察组的总有效率为95.9%，高于对照组的85.4%（P＜0.05）。
观察组患者治疗后的睡眠质量各项评分明显低于对照组（P＜0.05）。
观察组患者治疗后的中医症候评分明显低于对照组（P＜0.05）。
结论安神汤加减治疗肝郁气滞型失眠的临床效果较好，可明显提高患者的睡眠质量，可在临床推广应用。
[Abstract]Objective To observe the clinical effect of modified Anshen Decoction in the treatment of insomnia of liver depression and qi stagnation type.Methods From January 2015 to January 2017，97 insomnia patients with type liver depression and qi stagnation treated in our hospital were selected.They were divided into the two groups according to the random permutation table method.In the control group （n=48），Lorazepam Tablets was used，while in the observation group，Anshen Decoction was added.The sleeping quality before and after treatment was compared in order to evaluate the therapeutic effect.The quality of sleep and TCM syndrome score of the two groups were compared before and after treatment，and the therapeutic effect was evaluated.Results The total effective rate of the observation group was 95.9%，which was higher than that of the control group （85.4%）（P＜0.05）.The various score of sleep quality of the patients in the observation group after treatment was significantly lower than that of the control group reapectively （P＜0.05）.The score of TCM syndrome in patients of the observation group after treatment was significantly lower than that of the control group （P＜0.05）.Conclusion The clinical effect of modified Anshen Decoction in the treatment of insomnia of liver depression and qi stagnation type is better，and can obviously improve the quality of sleep for patients and can be promoted and applied in clinic.[Key words]Liver depression and qi stagnation；Curative effect；Insomnia；Anshen Decoction失眠早期在中老年群體中发病率较高，其中老年者由于身体老迈、脏器功能降低，易出现失眠症状，但近几年生活、工作压力增加导致失眠者年龄呈年轻化，其不仅影响患者的睡眠质量，还会给患者的日常生活、工作、学习等均造成困扰[1]。
肝郁脾虚失眠方对失眠模型大鼠GABA的影响
肝郁脾虚失眠方对失眠模型大鼠GABA的影响陈抒鹏;唐娜娜;王思梦;徐媛媛;缪慧慧【期刊名称】《光明中医》【年(卷),期】2023(38)3【摘要】目的观察肝郁脾虚失眠方对失眠大鼠GABA的影响。
方法选用PF级SD大鼠60只,随机分为6组每组10只,分别为A.空白对照组,B.肝郁脾虚失眠方组,C.肝郁脾虚失眠方+GABA受体激动剂Eto组,D.肝郁脾虚失眠方+GABA受体激动剂Aca组,E.肝郁脾虚失眠方+GABA受体抑制剂Bac组,F.肝郁脾虚失眠方+GABA受体抑制剂Phac组,除A组外均采用复合造模法(夹尾刺激和PCPA腹腔注射)制造肝郁失眠模型,分组给药14 d。
并观察大鼠生理状态,通过QRT-PCR技术获取GABAA、GABAB mRNA表达量,通过Western-blot检测脑组织GABAA、GABAB蛋白质的表达。
结果模型组大鼠造模后与正常组相比可见大鼠饮食饮水减少,睡眠时间减少,便溏,皮毛无光泽,爪甲冰凉。
给药干预后,与模型组比较,肝郁脾虚失眠方组大鼠白天活动减少,喜卧,睡眠时间增加,昼夜节律开始恢复,饮食二便接近正常组,皮毛逐渐顺滑有光泽。
干预后,QRT-PCR:GABAA-RNA表达量:肝郁脾虚失眠方组GABAA-RNA表达量显著优于空白对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),Aca 组、Bac组、Eto组、Phac组GABAA-RNA表达量均低于肝郁脾虚失眠方组,差异具有统计学意义(P<0.05);干预后,GABAB-RNA表达量:肝郁脾虚失眠方组GABAB-RNA表达量显著优于空白对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),Aca组、Bac组、Eto组、Phac组GABAB-RNA表达量均低于肝郁脾虚失眠方组,差异具有统计学意义(P<0.05)。
干预后,WB:脑组织GABAA、GABAB的表达:以目的蛋白GABAA、GABAB与内参GAPDH的比值比较各组蛋白的表达量,空白组GABAA、GABAB的表达量明显优于造模组,肝郁脾虚失眠方组GABAA表达量稍低于Aca 组,高于Bac组、Eto组、Phac组,肝郁脾虚失眠方组GABAB表达量优于Aca组、Bac组、Eto组、Phac组。
名医治疗肝郁脾虚失眠的经典案例
名医治疗肝郁脾虚失眠的经典案例一、病症描述某女性患者，芳龄50岁，因失眠问题长期困扰，每晚入睡困难，易醒，早醒，甚至出现夜间多次醒来的现象。
经常感到疲倦、乏力，影响了日常生活及工作。
经过详细的检查，医生发现其肝郁气滞，脾胃功能失调，属于肝郁脾虚型失眠。
二、名医治疗患者在求医问诊后，获得了名医的治疗。
经过综合治疗，包括中药汤剂调理，针灸调理，运动疗法及心理辅导，患者的失眠症状逐渐得到缓解，睡眠质量明显改善，精神状态也有所恢复。
三、中医药疗法1. 中药汤剂调理名医凭借多年临床经验，为患者配制了一剂独特的中药汤剂，根据患者的具体症状及体质特点进行个性化调理。
汤剂中包含了活血化瘀的药物，有助于调理患者的肝郁气滞状况；同时还添加了益气健脾的中药材料，有助于调理脾胃功能，增强体质。
患者每日按时服用中药，坚持服用一段时间后，感觉自己睡眠情况有所好转。
2. 针灸调理名医对患者进行了针灸调理，选取了一些特定的穴位进行针刺，通过调理气血，调和肝郁，患者的失眠症状得到了一定的缓解。
针灸调理不仅可以调理气血，而且还有助于调整患者的神经系统和内分泌系统，对改善失眠症状起到了积极的作用。
3. 运动疗法患者在名医的指导下进行适当的运动锻炼，如散步、太极等，帮助调理和改善身体的功能状态。
适当的运动能够促进血液循环，增强体质，有助于改善失眠问题。
4. 心理辅导名医还对患者进行了心理辅导，帮助患者排解情绪，释放压力，对患者的心理健康起到了积极的作用。
通过心理辅导，患者的情绪得到了舒缓，有助于改善失眠问题。
四、治疗效果经过一段时间的综合治疗，患者的失眠症状明显改善，入睡情况和睡眠质量明显提升，白天精神状态也有所恢复。
并且，通过定期复查，肝郁气滞和脾虚的情况也得到了较好的调理和改善。
五、结语以上案例是名医在治疗肝郁脾虚失眠患者的一个典型案例。
通过中医药及综合治疗，可以有效调理失眠问题，改善患者的症状，提高生活质量。
对于肝郁脾虚型失眠患者来说，合理的中医治疗是很有必要和有效的。
安神汤加减治疗肝郁气滞型失眠的临床疗效观察
安神汤加减治疗肝郁气滞型失眠的临床疗效观察摘要】目的：观察安神汤加减治疗肝郁气滞型失眠患者的临床效果。
方法：选择我院在2016年3月~2017年10月诊治的肝郁气滞型失眠患者68例进行治疗分析，随机分为研究组和对照组各34例，研究组给予安神汤加减治疗，对照组给予劳拉西泮片治疗，对比疗效。
结果：研究组患者治疗总有效率为94.11%，显著高于对照组治疗总有效率55.88%，组间数据对比有统计学意义（P<0.05）。
结论：采用安神汤加减治疗肝郁气滞型失眠能够显著改善患者睡眠质量，临床疗效好，值得应用。
关键词：安神汤；肝郁气滞型失眠；疗效分析失眠会严重影响患者的生活质量，近年来临床发病有高发、年轻化的趋势。
西医认为失眠会患者脑皮过度兴奋有关，主要采用劳拉西泮类镇静药物治疗，虽然镇静效果好，但长时间服用易出现头晕、乏力等不良反应，药物依赖性较强。
中医治疗肝郁气滞型失眠主要安神汤加减治疗，能够显著改善患者的睡眠质量，且中药温和，安全性较好[1]。
本文分析了安神汤加减治疗肝郁气滞型失眠的临床疗效，总结如下。
1 资料和方法1.1一般资料本次研究选择我院在2016年3月~2017年10月诊治的肝郁气滞型失眠患者68例进行分析，患者均符合失眠的确诊标准，症状表现如下：患者反复性睡眠不足，入睡时间在5h之内，带有入睡困难、睡眠不稳、时长惊醒、醒后难睡等症状，排除药物导致睡眠、内分泌失常等与本次研究无关的疾病。
中医诊断肝郁气滞型失眠标准如下：胸肋胀满、心烦易凉、失眠多梦、心悸气短等，舌红苔白，脉沉。
患者均自愿参与本次治疗，随机分为研究组和对照组各34例，研究组中男18例，女16例，年龄为（46.8±0.2）岁；对照组中男17例，女17例，年龄为（47.1±0.5）岁，两组患者的年龄、性别等数据可比。
1.2治疗方法研究组采用安神汤加减治疗，基本处方如下：黄芪和炒酸枣仁各30g，合欢皮、党参、夜交藤和茯苓各20g，当归、五味子和远志各15g，柴胡、香附、白芍和石菖蒲各10g；血虚者患者加用阿胶和熟地黄各15，心烦、味苦症状患者加用黄连和山栀子各5g，脉滑加用半夏和陈皮各10g，药材经过文水浸泡后文火煎煮，每日早晚服用一剂，连续服用4周[2]。
23563143_松郁安神方对PCPA致失眠大鼠睡眠时相的影响
世界睡眠医学杂志 ＷｏｒｌｄＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｌｅｅｐＭｅｄｉｃｉｎｅ
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松郁安神方对 ＰＣＰＡ致失眠大鼠睡眠时相的影响
曾雪爱 周春权 吴华嵩 黄俊山
（福建省中医药科学院，福州，３５０００３）
摘要 目的：观察松郁安神方对失眠大鼠睡眠时相的影响。方法：采用腹腔注射对氯苯丙氨酸（Ｐａｒａｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅ， ＰＣＰＡ）建立失眠大鼠模型，用松郁安神方进行干预，通过动物睡眠生物解析系统，记录脑电（Ｅｌｅｃｔｒｏｅｎｃｅｐｈａｌｏｇｒａｍ，ＥＥＧ）和 肌电（Ｅｌｅｃｔｒｏｍｙｏｇｒａｍ，ＥＭＧ），分析睡眠觉醒时间、非快速眼动睡眠（ＮｏｎｒａｐｉｄＥｙｅｍｏｖｅｍｅｎｔＳｌｅｅｐ，ＮＲＥＭ）时间和快速眼动 睡眠（ＲａｐｉｄＥｙｅｍｏｖｅｍｅｎｔＳｌｅｅｐ，ＲＥＭ）时间，观察大鼠睡眠时相变化。结果：ＰＣＰＡ可明显减少大鼠白天 ＮＲＥＭ、ＲＥＭ睡眠 时间，增加觉醒时间，给予松郁安神方后，失眠大鼠白天时段 ＮＲＥＭ、ＲＥＭ睡眠时间增加，觉醒时间减少，与 ＰＣＰＡ模型组 比较，差异有统计学意义（Ｐ＜００５或 Ｐ＜００１）。结论：松郁安神方能改善 ＰＣＰＡ致失眠大鼠的睡眠，其主要通过增加白 天的 ＮＲＥＭ和 ＲＥＭ睡眠时间改善睡眠。 关键词 失眠；松郁安神方；睡眠时相
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世界睡眠医学杂志 ＷｏｒｌｄＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｌｅｅｐＭｅｄｉｃｉｎｅ
２０２１年 １月第 ８卷第 １期 Ｊａｎｕａｒｙ．２０２１，Ｖｏｌ．８，Ｎｏ．１
Ａ０２１２６０１２）、中药 饮 片 （福 建 鹭 燕 药 业 股 份 有 限 公 司）、动物 睡 眠 生 物 解 析 系 统 （ＫｉｓｓｅｉＣｏｍｔｅｃ，日 本 ）、 ６８００３脑立体定 位 仪 （深 圳 市 瑞 沃 德 生 命 科 技 有 限 公司）。 ２ 方法 ２１ 中药制备 松郁安神方组成：甘松 １０ｇ、郁金 １５ｇ、玫瑰花 １０ｇ、酸枣仁 １５ｇ、柴胡 １５ｇ、珍珠母 ３０ｇ、生龙骨 ３０ｇ、合欢皮 １５ｇ、丹参 １５ｇ。药物经煎 煮及过滤浓缩至 ３４ｇ／ｍＬ备用。 ２２ ＰＣＰＡ失 眠 模 型 建 立 按 照 参 考 文 献［５］的 方 法，于临用前按照 ３００ｍｇ／ｋｇ用量，将 ＰＣＰＡ溶于弱 碱性生理盐水，配制成混悬液，按 １０ｍＬ／ｋｇ体质量 腹腔注射，连续 ２ｄ，１次 ／ｄ。 ２３ 动物分组与给药 将大鼠随机分为 ３组：空白 对照组、ＰＣＰＡ失眠模型组、松郁安神方 组，每 组 ４ 只。松郁安神方组按 １７ｇ／ｋｇ体质量灌胃给药，空白 对照组和失眠模型组均给予同等体积蒸馏水灌胃，１ 次 ／ｄ，共 ７ｄ。 ２４ 大鼠头部 电 极 埋 植 手 术 大 鼠 腹 腔 注 射 戊 巴 比妥钠（５０ｍｇ／ｋｇ）麻醉，将头部手术区剃毛，脑立体 定位仪固定。剪开皮肤，分离皮下组织，使颅骨完全 暴露。分别于前囟前 １０ｍｍ，旁开 １５ｍｍ和后囟 前 １０ｍｍ，旁开 １５ｍｍ钻孔（钻通颅骨，但未穿破 硬脑膜），将 ２个与采集 ＥＥＧ电极相连的不锈钢螺 丝固定于颅骨的钻孔中，在后囟另一侧钻孔（未钻通 颅骨），将一个与参比电极相连的不锈钢螺丝固定于 颅骨的钻孔中，用牙托粉将 ３个电极封固于颅骨上。 另外两根采集 ＥＭＧ的电极分别插入两侧颈部斜方 肌中。所有的电极都连接到一个微型连接器上，并 用牙科水泥固定在头骨上。缝合创口，术后腹腔注 射青霉素钠，恢复 ７ｄ后进行实验。 ２５ 大鼠睡眠时 相 的 记 录 和 分 析 末 次 灌 胃 给 药 后，将大鼠置于记录笼中，连接记录系统，进行记录。 记录时 ＥＥＧ和 ＥＭＧ信号通过大鼠头部电极，途经 多通道万向轮，经初步放大后将信号接入到放大器。 信号经滤波后，进一步放大，输入到电脑，经模数转 换最终获得数字信号。记录从第 １天的 １９：００点开 始，到次日 １９：００点结束，连续 ２４ｈ记录自由活动大 鼠的 ＥＥＧ和 ＥＭＧ。记录结束后，用 ＳｌｅｅｐＳｉｇｎ分析 软件，根据统一设定的标准扫描记录的 ＥＥＧ／ＥＭＧ 信号，自动判别出觉醒（Ｗ）期、ＮＲＥＭ期和 ＲＥＭ期。 扫描完成后，进行人工检查，必要时改正。 ２６ 统计学方法 采用 ＳＰＳＳ２２０统计软件进行统 计分析。计量资料采用（ｘ珋±ｓ）描述，组间比较采用单
解郁安神方加减治疗肝郁化火型失眠的临床观察
解郁安神方加减治疗肝郁化火型失眠的临床观察
王晖;史守彤
【期刊名称】《光明中医》
【年(卷),期】2018(033)008
【摘要】目的探讨肝郁化火型失眠行解郁安神方加减治疗.方法选择2016年2月—2017年7月80例肝郁化火型失眠患者分组.对照组给予西药治疗,观察组解郁安神方加减联合西药治疗.比较2组肝郁化火型失眠临床疗效;药物不良反应情况;干预前后患者中医证候积分、白细胞介素水平、匹兹堡睡眠质量指数.结果观察组肝郁化火型失眠临床疗效高于对照组,P<0.05;观察组药物不良反应情况和对照组之间无明显差异,P>0.05;干预前2组中医证候积分、白细胞介素水平、匹兹堡睡眠质量指数相近,P>0.05;干预后观察组中医证候积分、白细胞介素水平、匹兹堡睡眠质量指数优于对照组,P<0.05.结论解郁安神方加减联合西药治疗肝郁化火型失眠的临床疗效确切,可有效改善症状和睡眠质量,无明显不良作用,值得推广.
【总页数】3页(P1124-1126)
【作者】王晖;史守彤
【作者单位】阳泉市第一人民医院药剂科山西阳泉 045000;阳泉市第一人民医院药剂科山西阳泉 045000
【正文语种】中文
【相关文献】
1.浮针联合柴胡加龙骨牡蛎汤加减治疗肝郁化火型原发性失眠疗效观察 [J], 朱正萍; 范刚启
2.解郁安神颗粒联合交泰丸方足浴治疗围绝经期失眠的临床观察 [J], 李会英
3.普通针刺联合乔氏解郁安神汤治疗肝郁化火型失眠的临床效果 [J], 刘季元;乔树真;宋芬芬;韩治华
4.丹栀逍遥散加减联合左金丸外敷涌泉穴治疗肝郁化火型失眠的临床观察 [J], 陈懿
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松郁安神方对肝郁证失眠大鼠机体褪黑素水平的影响作者：张一帆李星张瑜来源：《世界睡眠医学杂志》2020年第03期摘要目的：观察松郁安神方对肝郁证失眠大鼠机体褪黑素水平的影响。
方法：将40只大鼠随机分成正常对照组、模型组及松郁安神方低、中、高剂量组，采用慢性夹尾刺激和腹腔注射对氯苯丙氨酸（PCPA）复合因子造模法建立肝郁证失眠大鼠模型，给药后测定肝郁证失眠大鼠机体的脑脊液、血清、脑组织（下丘脑、海马）褪黑素（MT）水平的变化。
结果：肝郁证失眠大鼠机体脑脊液、血清、脑组织（下丘脑、海马）的MT水平均显著低于正常组（P<0.05），松郁安神方低剂量组脑脊液、血清、海马的MT水平及松郁安神方中剂量组血清的MT水平显著高于模型组（P<0.05），而松郁安神方低剂量组血清的MT水平与松郁安神方中剂量组比较无显著差异（P>0.05）。
结论：松郁安神方对肝郁证失眠大鼠具有促睡眠作用，其作用机制可能是通过提高机体褪黑素水平而实现。
关键词松郁安神方;失眠;肝郁证;褪黑素Abstract Objective：To observe the effect of Song Yu An Shen Fang on levels of melatonin in rats with insomnia with syndrome of stagnation of liver qi.Methods：A total of 40 rats were randomly divided into normal control group，model group，low，medium and high dose group of Song Yu An Shen Fang group.The insomnia rat model of liver depression syndrome was established by chronic tail clamping stimulation and intraperitoneal injection of PCPA compound factor.The changes of melatonin（MT）in cerebrospinal fluid，serum and brain tissue（hypothalamus and hippocampus）of insomnia rats with stagnation of liver qi syndrome were measured after administration.Results：The MT level of cerebrospinal fluid，serum and brain tissue（hypothalamus and hippocampus）in the insomnia rats with stagnation of liver qi syndrome was significantly lower than that in the normal group（P<0.05）.The MT levels of CSF，serum and hippocampus in the low dose group and the middle dose group were significantly higher than those in the model group（P<0.05）.There was no significant difference in MT level between the low dose group and the middle dose group（P>0.05），Conclusion：The effect of Song Yu An Shen Fang on promoting sleep of insomnia with syndrome of stagnation of liver qi may be achieved by increasing the level of melatonin.Keywords Song Yu An Shen Fang; Insomnia; Syndrome of stagnation of liver qi; Melatonin中圖分类号：R256.23文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.2095-7130.2020.03.074中医在治疗失眠上有独有的优势，其病因病机虽复杂，但其发病与个体的体质和性格特征密切相关，临床上多数失眠的反复发作与异常情绪常相互伴随，并且一些针对失眠的证型和方药研究[1，2]显示从肝郁论治失眠具有较好疗效。
黄俊山教授结合多年失眠的临床经验，创制了松郁安神方（药用：甘松、郁金、玫瑰花、生龙骨、珍珠母、夜交藤、丹参、酸枣仁）主要针对肝郁证而设，功在疏肝解郁、安神定志，经临床证实疗效确切，但作用机制需要进一步明确。
本文通过观察松郁安神方对肝郁证失眠大鼠在脑脊液、血清、脑组织（下丘脑、海马）中褪黑素（MT）水平的变化，探讨松郁安神方影响睡眠的药效作用机制。
1 材料与方法1.1 动物与分组健康雄性SD大鼠，8周龄，体质量180～200 g，购于上海斯莱克实验动物有限责任公司[动物合格证编号：20170005009597，许可证号码：SCXK（沪）2017-0005]。
将40只大鼠适应性喂养后随机分为正常对照组、模型组、松郁安神方低剂量组、松郁安神方中剂量组、松郁安神方高剂量组，每组8只。
1.2 实验药物的制备松郁安神方的组成及用量：成人（按60 kg体质量计算）用量：甘松10 g，郁金15 g，玫瑰花10 g，生龙骨（先煎）30 g，珍珠母（先煎）30 g，合欢皮15 g，丹参15 g，酸枣仁15 g，所有中药均购于福州鹭燕医药有限公司;大鼠用量为成人的6倍（按体质量计算），按传统煎药方法煎煮，浓缩，分装灭菌后4 ℃冰箱冷藏备用;临用前置于室温环境下预热（其中最终含生药浓度低剂量为0.7 g/mL、中剂量为1.4 g/mL、高剂量为2.8g/mL）。
对氯苯丙氨酸（PCPA）的配制：将PCPA充分研磨，用弱碱性生理盐水助溶，临用时配成40 mg/mL的混悬液。
1.3 造模及干预方法采用朱洁等[3]肝郁证失眠大鼠模型的建造方法，给予大鼠慢性夹尾刺激和PCPA腹腔注射复合因子造模法，将每组大鼠置于同一笼内，用尖端包扎纱布的止血钳分别夹大鼠尾部，令其与其他大鼠厮打，每天刺激40 min，控制刺激强度，以不破皮流血为度，连续20 d，于造模第16天起，模型组和松郁安神方低剂量组、中剂量组、高剂量组的大鼠按40 mg/100 g腹腔注射PCPA，1次/d，连续2 d;于造模第7天起，正常对照组、模型组给予生理盐水及松郁安神方各组大鼠给药以1 mL/（100 g·d）灌胃，连续14 d;造模第21 d，用10%水合氯醛以0.35 mL/100 g体质量麻醉大鼠，以备实验取材。
1.4 标本取材实验大鼠麻醉后，头部剪毛与消毒后，剪开头部皮肤，成十字口，从蛛网膜下腔进针，取脑脊液，离心，取上清液，置于-70 ℃保存备用;取完脑脊液后，腹主动脉取血，静置两小时，离心，取上清液，分装离心管，置于-70 ℃保存备用;取血后大鼠断头，剪开头皮，用血管钳揭去颅骨和硬脑膜，剪断双侧视神经后用眼科鑷子迅速取出大鼠的整个脑组织，用0.9%氯化钠溶液冲洗干净，冰上分离出下丘脑和海马组织，置于-70 ℃保存备用。
1.5 指标检测应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠血清、脑脊液、脑组织（海马、下丘脑）的褪黑素（MT）的含量，具体操作严格按照试剂盒说明书。
1.6 统计学方法采用IBM SPSS statistics V21.0统计软件进行数据处理，计量数据用均数±标准差（±s）表示，多组之间的比较采用单因素方差分析，若方差齐采用LSD检验，若方差不齐采用Tamhane′s T2检验，以P<0.05表示差异有统计学意义。
2 结果2.1 各组大鼠一般状态比较正常对照组，精神状态好、反应灵敏、毛发有光泽;模型组和松郁安神方各组，在第1w内，大鼠表现为易激惹、防御、抵抗和互相撕咬、尖叫明显、反应灵活、毛发欠光泽、饮食减少;在后2w内，模型组大鼠神情倦怠、易激惹、各种防御、抵抗和互相撕咬不及之前积极、尖叫声细、反应欠灵活、毛发干枯、有脱毛现象，符合肝郁证失眠模型的体征表现[3]，松郁安神方各组较模型组一般状态均有改善。
2.2 各组大鼠脑脊液、血清、脑组织MT含量比较及均值图结果显示，肝郁证失眠大鼠机体脑脊液、血清、脑组织（下丘脑、海马）的MT水平均显著低于正常组，差异有统计学意义（P<0.05）;松郁安神方低剂量组脑脊液、血清、海马的MT水平及松郁安神方中剂量组血清的MT水平显著高于模型组，差异有统计学意义（P<0.05），而松郁安神方低剂量组血清的MT 水平与松郁安神方中剂量组比较差异无统计学意义（P>0.05）。
从表1、2的比较和图1均值图可知，剂量越大对肝郁证失眠机体褪黑素水平的影响越小。
见表1、表2与图1。
3 讨论随着现代社会的压力越来越大，情志不舒导致失眠占的比重日益居多，肝性喜调达恶抑郁，从肝郁论治不寐自古有之，如《辨证录·不寐门》说：“气郁既久，则肝气不舒，肝气不舒，则肝血必耗，肝血既耗，则木中之血上不能润于心”则不寐。
施明等[4]认为五脏虽皆有不寐之象，但其根源不离于肝，精神情志因素是重要环节，故指出临床辨证用药当从肝论治，以治肝为中心，兼顾调理其他四脏。
肝郁影响肝藏血的生理功能，李世金[5]认为睡眠的昼夜节律与肝的关系密切，睡眠有明显的生物节律性，睡眠生物节律性的调控，是通过肝藏血来完成的。
褪黑素（Melatonin，MT）：是在哺乳动物及人体松果体中分泌的主要激素，MT调节人体免疫功能、衰老等过程，褪黑素在预防皮层功能紊乱，如运动、感觉、记忆和心理损伤方面是非常有用的[6]。
在褪黑素多方面调节作用中，对睡眠的调节作用显得尤为突出，其分泌呈夜高昼低的规律，夜间褪黑素水平的高低直接影响睡眠的质量;据报道[7]褪黑素对中枢神经兴奋性的抑制机制可能通过抑制一氧化氮合酶，使谷氨酸受体激活产生NO水平下降而起作用。
说明MT抑制NO及MDA的升高作用，即抗自由基和抗过氧化损伤作用，可能是其发挥改善睡眠剥夺大鼠行为障碍的重要作用机制之一。
脑内促睡眠系统主要包括下丘脑腹外侧视前区、大脑皮质等结构的GABA能神经元及相关递质，下丘脑视交叉上核可能是控制昼夜节律的关键部位;海马在睡眠的调节中同样起重要作用，可促进慢波睡眠，因此海马是研究睡眠一个很有意义的观察点[8]。