和胃安神方对失眠大鼠脑组织谷氨酸与γ—氨基丁酸含量的影响

和胃安神方对失眠大鼠脑组织谷氨酸与γ—氨基丁酸含量的影响

目的观察和胃安神方对失眠大鼠脑组织谷氨酸（GLU）、γ-氨基丁酸（GABA）含量的影响，探讨其治疗失眠的作用机制。方法将40只雄性Wistar 大鼠随机分为正常组、模型组、和胃安神方组及地西泮组，每组10只。除正常组外，其余各组大鼠均用对氯苯丙氨酸建立大鼠失眠模型。和胃安神方组和地西泮组分别给予和胃安神方和地西泮水溶液灌胃，其余2组给予生理盐水灌胃。6 d 后，断头处死并冰台上分离大鼠海马及下丘脑，低温离心后分离上清液，高效液相色谱法测定GLU、GABA含量。结果与正常组比较，模型组大鼠海马及下丘脑GLU含量显著升高（P＜0.01），GABA含量显著下降（P＜0.01）；与模型组比较，和胃安神方组大鼠海马及下丘脑GLU含量显著下降（P＜0.01），GABA 含量显著升高（P＜0.01）。结论和胃安神方可以调节失眠大鼠脑内的氨基酸类神经递质GLU及GABA含量，从而发挥治疗失眠的作用。

标签：和胃安神方；失眠；谷氨酸；γ-氨基丁酸；海马；下丘脑；大鼠

随着生活、工作节奏加快以及各种社会压力增大，失眠症发生率逐渐上升，严重影响人们的生活和工作，受到社会广泛关注。与西药相比，中医药治疗失眠症具有无成瘾性、无依赖性、无不良反应及反跳的优点。我们前期的临床研究表明，和胃安神方治疗失眠效果良好[1]，但其调节睡眠-觉醒周期的机

理目前还不清楚。脑内氨基酸类神经递质是一类调节机体生理活动的重要物质，这些物质在组织中的含量是反映神经递质生物合成、释放、摄取、失活等过程的生化指标[2]。本实验拟以失眠大鼠为研究对象，观察和胃安神方对失眠大鼠脑内氨基酸类神经递质谷氨酸（GLU）、γ-氨基丁酸（GABA）含量的影响，探讨其治疗失眠的作用机制。

1 实验材料

1.1 动物

清洁级雄性Wistar大鼠40只，体质量（200±20）g，北京维

通利华实验动物技术有限公司提供，动物合格证号：SCXK（京）2012-0001。提前1周将大鼠饲养在12 h光照（7：00-19：00）、12 h黑暗（19：00-7：00）的安静环境下，自由摄食饮水，室温（24±2）℃，相对湿度40%～50%。

1.2 药物

和胃安神方由清半夏、薏苡仁、陈皮、茯苓、石菖蒲、合欢皮、炒酸枣仁、夜交藤等组成，所有饮片均经中国人民解放军总医院中药房提供并鉴定。将上述诸药按传统煎药法获取汤剂，以恒温水浴锅浓缩成含原药材1.75 g/mL的药液，玻璃瓶密闭盛装，4 ℃冰箱保存备用。地西泮片为天津力生制药股份有限公司生

产，批号H12020119。

1.3 试剂与主要仪器

对氯苯丙氨酸（PCPA）购自美国Sigma公司。GLU、GABA均购自美国Sigma 公司。DIONEX Summit高效液相色谱仪（美国DIONEX公司），Chromeleon色谱工作站（美国DIONEX公司）。

2 实验方法

2.1 造模

2.2 分组与给药

2.3 指标检测

2.3.1 取材连续给药6 d后在同一时限内将大鼠断头处死，取脑组织，冰台上剥离海马及下丘脑，称重，用甲醇制备海马、下丘脑部位脑组织匀浆，离心，沉淀，取上清液备测GlU和GABA含量。

2.3.2 氨基酸标准品储备液的配制精密称取GlU、GABA标准品各50 mg，置于50 mL容量瓶中，用甲醇/水（50∶50）溶解并稀释至刻度，使配成浓度为1 mg/mL的储备液。

5 讨论

中医学认为，失眠由情志所伤、饮食不节、病后年迈及禀赋不足、心胆气虚等引起阴阳失调、气血失和，以致心神失养或心神不安。和胃安神方是援引《内经》中“胃不和则卧不安”学说，并针对现代生活方式和饮食结构习惯变化易引起脾胃、肠道功能紊乱的特点拟制的，前期的临床研究表明其对失眠症的治疗效果明显[1]。

失眠与中枢神经系统兴奋性氨基酸与抑制性氨基酸神经递质的平衡失调密切相关。GLU是主要的兴奋性递质，对中枢神经系统所有神经元均起兴奋作用，其释放的增加导致兴奋性神经毒性，在失眠中起重要作用。GABA由GLU经谷氨酸脱羧酶脱羧而成，是中枢神经系统中最主要的抑制性递质，具有神经保护作用[5]。研究表明，不同脑区GLU和GABA含量及其受体功能的改变参与睡眠-觉醒过程及不同睡眠时相的转换，在睡眠的调节中发挥着重要的作用[6-7]。

本实验采用比较公认的PCPA化大鼠失眠模型，应用高效液相色谱法检测海马、下丘脑部位GLU及GABA含量的变化。实验结果表明，失眠大鼠海马及下丘脑区GLU含量明显增高，GABA含量明显减少；而运用和胃安神方治疗，可以显著降低脑内GLU含量，并增加GABA含量，使失眠得以纠正。由此推测，调节中枢神经递质GLU和GABA的含量可能是和胃安神方治疗失眠的内在机制

之一。

参考文献：

[1] 李绍旦，杨明会.和胃安神法治疗亚健康失眠的临床研究[J].中国全科医学，2010，13（8）：2519-2523.

[2] Steiger A. Neurochemical regulation of sleep[J]. J Psychiatr Res，2007，41（7）：537-552.