动脉内皮细胞中TIE2启动CREG真核表达质粒pTIE2-CREG-EGFP-N1的表达

动脉内皮细胞中TIE2启动CREG真核表达质粒pTIE2-CREG-EGFP-N1的表达李杰;闫承慧;张效林;梁振阳;冯雪瑶;白净;韩雅玲【摘要】背景:血管内皮发生的分子机制是细胞及基因替代治疗的首要前提.目的:构建一种通过血管内皮细胞特异蛋白TIE2 启动子来启动表达的E1A 激活基因阻遏子(cellular repressor of E1A-stimulated genes,CREG) 和增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein,EGFP) 融合的真核表达质粒.方法:根据GenBank 中公布的TIE2 基因的启动子序列,人工合成TIE2 启动子DNA 序列,经AseⅠ和NheⅠ双酶切后,亚克隆入表达质粒pEGFP-N1 中构建pTIE2-EGFP-N1.同时,用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切pcDNA3.1 myc-His/hCREG质粒得到CREG 基因,亚克隆入质粒pTIE2-EGFP-N1 中构建pTIE2-CREG-EGFP-N1,酶切鉴定.应用脂质体法将该质粒转染至体外培养的小鼠动脉内皮细胞,荧光显微镜下观察EGFP 的表达;Western blot 检测CREG 蛋白的表达.结果与结论:经酶切鉴定证实实验构建的pTIE2-CREG-EGFP-N1 质粒正确;体外转染48 h,荧光显微镜下可见EGFP的表达,Western blot 检测到CREG 蛋白的表达.说明实验成功构建了pTIE2-CREG-EGFP-N1 重组质粒,其可携带目的基因在小鼠动脉内皮细胞中有效表达.%BACKGROUND: The molecular mechanism of blood vessel endothelium formation is the primary premise for cellular and gene replacement therapy. OBJECTIVE: To construct an eukaryotic expression plasmid for cellular repressor of E1A-stimulated genes (CREG) driven by an endothelial cell specific promoter TIE2 and reported by enhanced green fluorescence protein (EGFP), and then to observe its expression in mouse artery endothelial cells in vitro. METHODS: TIE2 promoter DNA sequencewas synthesized according to GenBank, and was attached with AseⅠ and NheⅠrestriction enzyme recognition sites at bo th ends, respectively. The TIE2 promoter sequence was released from pUC57-TIE2 plasmid by AseⅠ and NheⅠ digestion enzymes, and then was inserted into pEGFP-N1 plasmid to form pTIE2-EGFP-N1 recombinant plasmid. CREG gene fragment was released from pcDNA3.1 myc-His/hCREG plasmid by BamHⅠ and EcoRⅠdigestion enzymes, and then was subcloned into pTIE2-EGFP-N1 plasmid in order to construct pTIE2-CREG-EGFP-N1 plasmid. The recombinant pTIE2-CREG-EGFP-N1 plasmid was then transfected into mouse artery endothelial cells by liposome. The EGFP expression was observed by fluorescence microscopy and the CREG expression was detected by western blot analysis. RESULTS AND CONCLUSION: Identification of pTIE2-CREG-EGFP-N1 by enzyme digestion and sequencing analysis showed that lengths of the target genes which were inserted into the recombinant plasmid were correct, and that the recombinant plasmid was transfected into mouse artery endothelial cells successfully. The strong expression of EGFP was observed by fluorescence microscopy, and the expression of CREG protein was detected by western blot analyis. The results showed that the pTIE2-CREG-EGFP-N1 eukaryotic expression plasmid was successfully constructed and the recombinant vector provides a practical tool in investigating the function and regulation of CREG in the development of cardiovascular diseases and also in producing transgenic mice with endothelial cell specific over-expression of CREG.【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2011(015)041【总页数】5页(P7706-7710)【关键词】启动子;TIE2;E1A;激活基因阻遏子;转染;小鼠动脉内皮细胞;基因载体构建【作者】李杰;闫承慧;张效林;梁振阳;冯雪瑶;白净;韩雅玲【作者单位】解放军沈阳军区总医院全军心血管病研究所心内科,辽宁省沈阳市110016;解放军第四军医大学西京医院心内科,陕西省西安市710032;解放军沈阳军区总医院全军心血管病研究所心内科,辽宁省沈阳市110016;解放军沈阳军区总医院全军心血管病研究所心内科,辽宁省沈阳市110016;解放军沈阳军区总医院全军心血管病研究所心内科,辽宁省沈阳市110016;解放军沈阳军区总医院全军心血管病研究所心内科,辽宁省沈阳市110016;解放军沈阳军区总医院全军心血管病研究所心内科,辽宁省沈阳市110016;解放军第四军医大学西京医院心内科,陕西省西安市710032;解放军沈阳军区总医院全军心血管病研究所心内科,辽宁省沈阳市110016【正文语种】中文【中图分类】R3180 引言E1A激活基因阻遏子(cellular repressor of E1A-stimulated genes, CREG)是一个转录调控相关因子[1]。

血管内皮生长因子mRNA在上皮性卵巢癌中的表达及意义

# 580#
M ODERN ONCOLOGY, O ct12005, VO I113, NO15
ations between the expression of VEG FmRNA and lymph node m etastasis and the vo lume o f asc ites ( P < 0. 05). N o co rre lations o fVEGFmRNA expression w ere noted w ith h istor ica l types, patho log ical g rade, clin ica l stage and prognosis (P > 0. 05). Conclusion T he expression of VEG FmRNA in epithelia l ovarian carc inom a m ay enhance the pred ic tab ility o f patients at high risk for tum or progress ion w ho a re po ten tia l cand idates for further aggress ive therapy. 【K ey w ords】 ep ithe lia l ovar ian neoplasm; vascular endo the lial g row th factors mRNA; in situ hyb rid ization
血管内皮生长因子 mRNA 在上皮性卵巢癌中的表达及意义
王静 1, 陈亦乐 1, 陈森林 1, 吴晓英 2, 汪春年 2
【摘要】目的探讨血管内皮生长因子 ( vascular endo the lial grow th factor, VEG F) 核酸在上皮性卵巢癌组织中

洛伐他汀对小鼠主动脉血管内皮生长因子表达的影响

洛伐他汀对小鼠主动脉血管内皮生长因子表达的影响作者：谌宇翔谭志坚欧辉跃来源：《商情》2020年第09期【摘要】目的：研究洛伐他汀（Lovastatin，LOV）对小鼠主动脉内皮生长因子（endothelial cell-derived growth factor， VEGF）表达的影响。

方法：成年昆明小鼠24只，随机分为对照组、给药组（LOV低、高浓度）3组，每组8只小鼠。

将1mg/ml的盐酸肾上腺素用0.9%生理盐水稀释1.5倍，于每日的8∶00 am、12∶00am、4∶00 pm对三组都予以皮下注射，盐酸肾上腺素0.05 ml/100 g，连续5天，建立内皮损伤模型。

建模成功后，各組小鼠分别给予洛伐他汀（5、15mg/Kg）进行灌胃，对照组给予0.3ml生理盐水灌胃。

六周后免疫组化检测小鼠主动脉VEGF的表达。

结果：灌胃6周后，免疫组化显示，与对照组相比，给药组小鼠主动脉VEGF表达明显增强，且浓度越高，VEGF表达越强。

结论：LOV通过促进VEGF的表达改善和治疗内皮损伤，LOV对小鼠主动脉内皮损伤后VEGF的表达具有促进作用。

【关键词】洛伐他汀 ;主动脉内皮损伤 ;血管 ;内皮生长因子引言：内皮损伤被认为是血管壁内的动脉粥样硬化（athero-sclerosis， AS）发生发展的早期启动因素。

而洛伐他汀属于调整血脂药，是临床上常用的降血脂、预防心脑血管疾病的药物。

他汀类药物对血管内皮损伤也有明显的改善作用。

但是其机制尚不明确。

本实验通过观察洛伐他汀对小鼠主动脉内皮损伤后VEGF表达的影响，初步探讨洛伐他汀可能的机制。

一、材料与方法（一）药物试剂与仪器成年昆明小鼠24只，雌雄各半，盐酸肾上腺素，戊巴比妥钠，VEGF免疫组化S-P试剂盒，HE染色试剂盒，洛伐他汀，生理盐水等（二）动物分组及模型制备随机选取16只小鼠作为给药组，8只作为对照组。

将1 mg/ml的盐酸肾上腺素用0.9%生理盐水稀释1.5倍，三组小鼠均于每日的8∶00 am、12∶00am、4∶00 pm在皮下注射稀释后的盐酸肾上腺素0.05 ml/100 g，连续5天，自第4天起每二次给药中间时间将小鼠放入0℃的冰水中冰泳5 min，共4次。

猪瘟病毒石门株E2基因在永生化猪血管内皮细胞的表达

（．ｏｌｇｆｔｒａｙＭｅｉｉｅＮｒｗｅｔｒｕｔｒｎｏｅｔｉｅｓｙＹａｇｉｇ７２０，ｈｎ；１Ｃｌｅｏｅｉｒｄｃｎ，ｏｔｓＡｇｉｌｅａｄＦｒｓｙＵｎｖｒｉ，ｎｌ１１０ＣｉａｅＶｅｎｈｃｕｒｔｎ２ＴｅＧｎｒｌｔｉｎｏｏｔｅｔｎｇｍｅｔＳａｅＦｒｓｙＡｄｎｓｒｔｎＳｅｙｎ０３，ｈｎ）．ｈｅｅａＳａｏｆｉｓＰｓＭａａｅｎ，ｔｔｏｅｔｍｉｉａｉ，ｈｎａｇ１０４ＣｉａｔＦｒｔｏ１
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血管内皮细胞生长因子与糖尿病肾病

血管内皮细胞生长因子与糖尿病肾病郭宝强;王季猛【期刊名称】《实用医药杂志》【年(卷),期】2006(23)12【摘要】血管内皮细胞生长因子（VEGF），义称血管通透因子（VPF），是一种二聚体糖蛋白。

内源性的VEGF是由血管内皮细胞、白细胞、血小板、各种组织细胞分泌的。

编码VEGF的基因位于6p染色体（6p21．3）。

其蛋白产物有4种变异体，VEGF121、VEGF165、VEGF189、VEGF206。

人体内多种细胞均有VEGF受体，包括内皮细胞、单核细胞、成纤维细胞、造血细胞、成骨细胞等。

受体类型主要包括VEGFR—1（flt—1）和VEGFR-2（KDR／flk—1），其次还有新近发现的neuropilin-1和neuropilin-2两种具体作用不明确的受体。

【总页数】2页(P1522-1523)【作者】郭宝强;王季猛【作者单位】南华大学内分泌科,湖南衡阳,421001;南华大学内分泌科,湖南衡阳,421001【正文语种】中文【中图分类】R587.2【相关文献】1.血管内皮细胞生长因子基因多态性与糖尿病肾病的相关性 [J], 郭宝强;曹运长;张秋菊;郑薇;王季猛2.芪蛭降糖胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织血管内皮细胞生长因子及细胞外基质的影响 [J], 孟凡辰;郭兆安;于春江;孙春晓;武帅;袁婷;李悦;贾佑铎3.利格列汀结合舒洛地特治疗对糖尿病肾病患者血管内皮细胞生长因子影响的研究[J], 段宇芬4.糖尿病肾病大鼠血管内皮细胞生长因子及其受体表达与厄贝沙坦的干预效应 [J], 王艳;马瑞霞;栾健;翟丽慧5.血清血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)是晚期宫颈癌的特异性生物标记物:VEGF-C与胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)、IGF结合蛋白3(IGF-BP3)及血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)的关系 [J], Mathur S.P.;Mathur R.S.;Gray E.A.;朱国栋因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

黄芩素通过调节HIF-1α

黄芩素通过调节HIF -1α/VEGF 信号通路抑制类风湿关节炎大鼠的炎症反应和病理性血管生成*杜红丽1，张晨宇1，赵清2△［1河南中医药大学第五临床医学院（郑州人民医院）风湿免疫科，河南郑州450053；2河南大学淮河医院风湿免疫科，河南开封475099］［摘要］目的：探讨黄芩素（BA ）调节缺氧诱导因子1α（HIF -1α）/血管内皮生长因子（VEGF ）信号通路对类风湿关节炎（RA ）大鼠炎症反应和病理性血管生成的影响。

方法：按照随机数字表法将SD 大鼠分为对照（control ）组、模型（model ）组、低剂量（10mg/kg ）BA （BA -L ）组、高剂量（30mg/kg ）BA （BA -H ）组、雷公藤多苷片（TWP ；6.25mg/kg ）组和BA -H+HIF -1α激动剂二甲基草酰甘氨酸（DMOG ；40mg/kg ）组，每组12只。

除control 组外，其它组大鼠均采用II 型胶原蛋白-完全弗氏佐剂法诱导RA 大鼠模型。

第2次免疫24h 后开始给药处理，每天给药一次，持续4周。

检测大鼠在给药第0、7、14和28天时的足趾肿胀度，计算关节炎指数；计算大鼠胸腺和脾脏指数；HE 染色检测大鼠踝关节滑膜组织病理损伤；ELISA 法检测大鼠踝关节滑膜组织中肿瘤坏死因子α（TNF -α）和白细胞介素6（IL -6）水平；免疫组化检测大鼠踝关节滑膜组织中VEGF 和VEGF 受体2（又称激酶插入域受体，KDR ）表达；Western blot 检测各组大鼠踝关节滑膜组织中HIF -1α和VEGF 蛋白表达。

结果：与control 组比较，model 组大鼠踝关节滑膜组织病理损伤严重，足趾肿胀度、关节炎指数、胸腺和脾脏指数，以及滑膜组织TNF -α、IL -6、VEGF 、KDR 、HIF -1α和VEGF 水平均显著升高（P <0.05）；与model 组比较，BA -L 组、BA -H 组和TWP 组对应指标变化趋势与上述相反（P <0.05）；BA -H 组与TWP 组比较，上述指标变化差异无统计学意义（P >0.05）；DMOG 减弱了BA -H 对RA 大鼠炎症反应和病理性血管生成的抑制作用。

炎症刺激因子上调Tie2基因在动脉内皮细胞中表达的研究

ｉｃｅｓｄ４ｏｒａｔｒｔｍｕａｉｎｆＴＮＦ— ｎＨＡＥｎｎｒａｅ２ｈｕｓｆｅｓｉｌｔｏｏａｉＣＳａｄＨＰＡＥＣＳａｄＬ１ｎＨＰＡＥＣＳｉｎＩ一８ｉ．ｎ
ＨＰＡＥＣＳ，ｔｆｅｔｏｔａｒｖｄｔｅｋａｔ３ｏｕｒｔｒｓｉｕｌｔｏｎ．ＣｏｎｌｓｏＴｈｅｅｒｓｉｎｏｆｈｅｅｆｃｆｂｏｈｒｉｅｈｅｐａ６ｈｓａｆｅｔｍａｉｃｕｉｎｘｐｅｓｏ
能增加原代血管内皮细胞Ｔｅ２基因的表达。ＴＮ — 用于ＨＡＥｓＨＰＥｓ１一ｐ作用于ＨＰＣｉＦａ作Ｃ，ＡＣ及Ｌ１ＡＥｓ
２后，ｅ２的表达明显增加；ＨＰＣ，者的作用均在３４ｈＴｉ在ＡＥｓ两６ｈ达高峰。论炎症刺激因子Ｔ — 结ＮＦａ和１一ｐ人血管内皮细胞可诱导Ｔｅ２基因的表达，可能与炎症状态下的血管形成有关。Ｌ１在ｉ它【键词】肿瘤坏死因子一；白细胞介素一１Ｔｅ２内皮细胞关ａ１；ｉ；３
ＩｆａｎｌｍｍａｉｎｃｔｋｎｓＴ — ｎＬＩｎｒａｅｔｅｅｐｅｓｎｏｉ２ｉａｃｌｒｅｄｔｅｉｌｅ．ｔｙｏｉｅＮＦａａｄＩ－￣ｉｃｅｓｈｘｒｓｉｆＴｅｖｕａｎｏｈｌｌｏｏｎｓａｃ１
ａｔｒｎｏｈｌｌｃｌ（ＡＥＣＳ）ｎｕｅｙｉｆｍｍａｏｙｃｔｋｎｓＲｅｕｔＴＮＦａａｄＩ１ｏｌｒｅｙｅｄｔｅｉｅｌＨＰａｓｉｄｃｄｂｎｌａｔｒｙｏｉｅ、ｓｌｓ — ｎＬ一８ｃｕｄ

神经生长因子与血管内皮生长因子165双基因共表达载体的构建及鉴定

基础研究．
神经生长因子与血管内皮生长因子１６５双基因共表达载体的构建及鉴定
范波胜，娄季宇，白宏英
摘要：目的利用内部核糖体进入位点（ＩＲＥＳ）序列，构建神经生长因子（ＮＧＦ）与血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）１６５双基因共表达载体ｐＩＲＥＳ－ＮＧＦ — ＶＥＧＦ１６５。方法用分子克隆技术，分别从人血细胞和胎心组织中获得ＮＧＦ和ＶＥＧＦ１６５基因，通过酶切将两者插入质粒ｐｌＲＥＳ中，构建重组载体ｐｌＲＥＳ — ＮＧＦ－ＶＥＧＦ１６５，并鉴定。结果测序
中华老年心脑血管病杂志２Ｏ１３年４月第１５卷第４期
ＣｈｉｎＪＧｅｒｉａｔｒＨｅａｒｔＢｒａｉｎＶｅｓｓｅｌＤｉｓ，Ａｐｒ２０１３，Ｖｏｌ１５，Ｎｏ．４
・４２７・
ｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｈｕｍａｎｂｌｏｏｄｃｅｌｌｓａｎｄｆｅｔａｌｈｅａｒｔｔｉｓｓｕｅ．ＤｏｕｂｌｅｅｎｚｙｍｅｄｉｇｅｓｔｉｏｎｏｆＮｈｅＩ／ＸｈｏＩ，ＢａｍＨ工／ＮｏｔＩｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｖｅｃｔｏｒｐＩＲＥＳ — ＮＧＦ — ＶＥＧＦ１６５ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ