金银花挥发油B-环糊精包合物工艺研究

金银花挥发油B-环糊精包合物工艺研究
作者：杨志文杨木华夏侯国
【摘要】目的探索用β 环糊精对金银花挥发油进行包合的研磨法最佳工艺。

方法以挥发油利用率和包合物含油率为评价指标，采用正交实验对研磨法进行工艺优化。

结果初步确定了最佳工艺条件为：金银花挥发油和β CD的比例为1∶8 ，搅拌时间2 h，包合温度为50℃。

挥发油利用率大于70%。

结论研磨法制备金银花挥发油β-环糊精包合物的工艺简单可行。

【关键词】金银花挥发油β 环糊精包合物工艺
AbstractObjectiveTo s tudy the β-cyclodextrin inclusion technologies for volatile oil in Flos Lonicera.MethodsOrthogonal design was porformed to optimize the best package rate and utilize the rate as the evaluating indicator, packed preparation condition of trituration method. Results The best packed preparation condition was as follows：β CD：volatiles = 8: 1, temperature 50℃, tuiturating 2 hours.ConclusionThis is a very simple and effective method.
Key wordsFlos Lonicera oil；β Cyclodextrin inclusion compound ；Preparation
金银花为常用中药,其挥发油的成分有较强的体外抑菌、抗菌抗病毒、平喘镇咳等作用,以金银花挥发油为主要成分的制剂有金银花注射液、维C银翘片、金银花露和清咽糖浆等［1，2］。

应用新型辅料β 环糊精(β CD)包合技术是中药制剂工艺研究新兴发展的一门技术［3］。

为了提高挥发油在制剂过程中的稳定性，本实验拟用β CD对金银花挥发油进行包合。

1 仪器与材料
硅胶G薄层板(青岛海洋化工厂)；752紫外分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)；金银花（河南封丘）；β 环糊精( 中国医药上海化学试剂公司，纯度98%)；挥发油测定装置(上海玻璃厂制造)；水为纯化水。

2 方法和结果
2.1 挥发油的提取金银花粉碎,参照《中国药典》2005年版Ⅰ部附录挥发油测定法提取挥发油，冷却后呈半固体状，淡黄色，称重。

2.2 金银花挥发油包合物制备采用研磨法进行包合物的制备。

取一定量的β-环糊精，加入2～3倍水研磨，然后加入金银花挥发油，在恒温条件下，搅拌一定时间，所得糊状物真空干燥，研碎过80目筛，即得黄白色粉末状包合物。

2.3 包合工艺条件的优选
2.3.1 正交实验因素水平的选择单因素考察实验表明，β-CD 的用量超过挥发油的10倍以上,包含率不再有明显增加。

本实验设定条件A (β-CD和金银花挥发油的比例) 、条件B(搅拌时间) 、条件C(包合温度) 3个主要因素为考察对象,采用L9 (33 ) 正交表进行实验,以挥发油利用率、包合物含油率为考察指标，对金银花挥发油包合的最佳工艺进行优选［4］。

因素水平见表1 。

表1 因素水平（略）
2.3.2 包合物油利用率的测定将制得的包合物按《中国药典》2005年版附录XD挥发油测定法(一法)测定包合物中挥发油的实际含量。

在测定挥发油含量及空白回收率基础上计算挥发油利用率、包合物含油率，计算公式如下：
挥发油利用率( %) =包合物含油量(ml) /〔挥发油投入量(ml)×空白回收率〕×100 %
包合物含油率( %) =包合物含油量(ml)×挥发油密度(g·ml-1)/ 包合物重量(g) ×100 %
空白回收率( %) =收集挥发油量(ml)/加入发油量(ml)×100%
2.3.3 空白回收率测定精密移取2 ml挥发油置1 000 ml圆底烧瓶中，加300 ml水，提取至挥发油量不再增加，计算挥发油提取回收率，平行实验3次。

结果见表2。

表2 空白回收率测定实验（略）
用综合评分寻找最佳工艺，计算方法如下：在金银花挥发油包合物的两个指标中，分别选取最高者作为100分，其余按公式计算；得分y1 j=100－最高值+yj ，考虑到生产成本，将挥发油利用率定为0.7，含油率定为0.3，按此方法计算公式如下：
综合得分=挥发油利用率得分×0.7+含油率得分×0.3［5］
交实验安排及方差分析结果见表3～4。

表3 挥发油包合条件的正交安排（略）表4 方差分析结果（略）
根据直观分析结果知，各因素对实验结果影响的程度依次为A > B > C,最佳包合工艺为A2B2C2，即β-CD与挥发油比例为8∶1 ( g：ml) ,包合温度为50℃,包合时间为2 h。

经方差分析可知,只有β-CD与挥发油配比对挥发油包合有显著性影响,而包合温度和研磨时间对挥发油包合无显著性影响。

2.4 包合工艺的验证实验在最佳工艺条件下，即金银花挥发油∶β-环糊精=1∶8，包合温度50℃，研磨2 h，重复实验，证明此工艺有效可行。

结果见表5。

表5 研磨法工艺验证实验（略）
2.5 包合物的验证
2.5.1 紫外分光光度法将金银花挥发油、金银花挥发油包合物、物理混合物做紫外扫描，扫描范围200～400 nm。

结果表明，金银花挥发油在321 nm波长处吸收峰明显，而金银花挥发油包合物在紫外区无明显吸收峰，说明金银花挥发油已被β-CD包合形成了的包合物。

2.5.2 薄层图谱分析(TLC)将金银花挥发油、金银花挥发油包合物、包合物萃取油(ABEO)分别在硅胶G薄层板上点样，作TLC分析，展开剂为石油醚-丙酮(8∶2)，挥去溶剂后将薄层板置于碘缸中熏，在可见光下观察到金银花挥发油与包合物萃取油均展出6个棕黄色斑点，其Rf值基本一致，而金银花挥发油包合物未见斑点.说明形成新的包合物,而且包合过程对金银花挥发油的化学成分没有影响。

2.5.3 差热分析法(DTA)差热分析法条件:升温范围50～350℃；升温速度：10℃·min-1，测定氮气流速为40 ml·min-1。

结果显示：β-CD 在82.9 ℃和215.1 ℃处有两特征峰,分别为环糊精的脱水峰和熔融分解峰［5］；金银花挥发油物理混合物为3个峰74.9℃；185.3℃，22
3.7℃,由于挥发油中低沸点挥发性成分的存在,使β-CD 的脱水峰由82.9 ℃降低至7
4.9 ℃；在包合物中,β-CD 和混合物各自峰消失,在171.2℃出现了新特征峰,说明新的包合物形成。

3 讨论
通过三因素三水平的正交实验筛选最佳包合工艺,β-CD与挥发油的最佳比例为8∶1 ( g：ml) ,包合温度50℃,包合时间为2 h。

验证实验表明本工艺重现性好,质量稳定。

经紫外分光光度法、薄层图谱分析验证、差热分析法说明包合物确已形成,而且挥发油的主要成分包合前后未发生明显变化。

【参考文献】
［1］张玲，彭广芳，林慧彬，等.山东金银花挥发油化学成分的研究［J］. 中国药学杂志，1995，19（11）：651.
［2］阮鸣，彭国平.金银花挥发油的萜类化学成分研究进展［J］.时珍国医国药，2005,16(1)：59.
［3］谢崇义, 李旺生, 凌艳，等.β-环糊精在中药制剂中的应用及研究进展［J］.中国中医药信息杂志，2001,8(3 )：36.
［4］Yilmaz VT , Karadag A ,lcbudak H，et al. The rmal decomposition of β-cy-clodextrin inclusion complexes of ferrocene and their derivatives ［J］.Thermochimica Acta, 1995 ,261 :1071.
［5］赵开军, 濮存海,关志宇. 小儿感冒舒颗粒中荆芥挥发油β-环糊精包合的工艺研究［J］.中药材，2006，2（29）：181.。