猪脂联素ADP酶联免疫分析

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人脂联素ADP酶联免疫分析ELISA

人脂联素ADP酶联免疫分析ELISA

人脂联素(ADP)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用人血清,血浆及相关液体样本中脂联素(ADP)的含量。

试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。

2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围:请来电咨询保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6个月注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。

一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。

如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人脂联素(ADP)水平。

用纯化的人脂联素(ADP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入脂联素(ADP),再与HRP标记的脂联素(ADP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的脂联素(ADP)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人脂联素(ADP)浓度。

样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

酶联免疫法测定猪肉组织链霉素残留量的探讨

酶联免疫法测定猪肉组织链霉素残留量的探讨

对酶联免疫检测法检测猪 肉中的链霉素残 留 展 开研 究, 主要进行 线性、 检测 限、 准确度灵敏度和特异性等 方面的试验。
猪 肉 酶联免疫法
文章编 号: 1 0 0 3 - - 4 3 3 1 ( 2 0 1 3 ) 0 3 — 0 0 1 8 — 0 3
结果表 明该 方法可 满足 国家农业部与欧盟的要求 , 可用 于链霉素残 留初 筛检测。 关键 词 链霉素
K Hz P O 、 K C 1 、 N a C I 、 T w e e n 8 0均 购 自上海 试 一试 剂 公 司; 链 霉 素 酶联 试 剂 盒 ( 荷兰 E D ) 购 自北 京 陆 桥 公
2 5 u L抗体溶液于除 A 1 和A 2 外 的全部板孔 。2 ~
8℃下在 暗 处温 育 1 h 。用 洗涤 缓冲 液( 2 5 0 u 孔1 注
文献标 识码 : A
链霉素是一种氨 基葡萄糖型抗 生素 ,分子式
C : H 剪 N 7 o 。 : , 用 于革 兰 氏阴性 菌和 结核 杆 菌感 染 的 治 疗。 在家 畜感 染性 疾病 的防治 中发 挥 了重要 作用 , 但 其毒 副作 用较 大 , 链霉 素对 听 觉神 经毒 性较 大 , 长 期 使 用可 对 人 体 肾脏 和 听神 经 造 成 不 可逆 转 的损 害 , 长 期使用 还 会使 细菌 产 生耐药 性 [ 卜 2 ] 。 为 了保障动 物源 性食 品的安全 , 2 3 7 7 / 9 0 / E E C ( 7 0 3 / 2 0 0 7修 订) 规 定动 物 性 食 品肌 肉 、 脂肪 、 肝脏 中 链 霉素 最 大残 留 限量 ( MR L ) 为5 0 0 u g / k g , 肾脏 中 为 1 0 0 0 u g , k g , 乳 中为 2 0 0 u g / k g C 。 目前 链 霉 素残 留

人中分子量脂联素MMWADP酶联免疫分析

人中分子量脂联素MMWADP酶联免疫分析

人中分子量脂联素(MMW-ADP)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围:96T6pg/ml-250pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中中分子量脂联素(MMW-ADP)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人中分子量脂联素(MMW-ADP)水平。

用纯化的人中分子量脂联素(MMW-ADP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入中分子量脂联素(MMW-ADP),再与HRP标记的中分子量脂联素(MMW-ADP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的中分子量脂联素(MMW-ADP)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人中分子量脂联素(MMW-ADP)浓度。

试剂盒组成标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。

加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

脂联素的检测原理

脂联素的检测原理

脂联素的检测原理脂联素是一种由脂细胞分泌的激素,它在调节脂肪代谢和血糖平衡方面起着重要的作用。

脂联素的检测可以帮助我们了解脂肪代谢的状态,预测患者发生代谢性疾病的风险,并评估某些药物治疗的疗效。

目前,常见的脂联素检测方法主要包括酶联免疫吸附法(ELISA)、免疫荧光法(IFA)和放射免疫分析法(RIA)。

下面将以ELISA方法为例,详细介绍脂联素的检测原理。

ELISA法是一种基于抗原-抗体相互作用的免疫测定方法,其基本原理是将检测物(如脂联素)与特异性抗体结合,并通过化学指示剂的发色反应来测定其浓度。

具体步骤如下:1. 涂层:首先,在微孔板的孔中涂层抗脂联素的特异性抗体。

孔的数量通常根据实验需要进行调整,可以并行测试多个样本。

2. 样品加入:将待测样本加入涂有抗体的孔中,使样品中的脂联素与抗体结合。

3. 洗涤:利用洗涤缓冲液去除未结合的样品。

4. 检测:加入与脂联素结合的酶标记抗体,使其与未结合的脂联素结合。

5. 再次洗涤:用洗涤缓冲液清洗未结合的酶标记抗体。

6. 底物反应:加入含底物的显色或荧光溶液,使底物发生颜色或荧光反应。

7. 阻止反应:通过添加停止液停止底物的反应,以阻止进一步的颜色或荧光产生。

8. 读数:使用酶标仪测定对应波长下的光密度或荧光强度。

光密度或荧光强度与样品中脂联素的浓度成正比。

ELISA法的优点是操作简便、灵敏度高,并且可以高通量地同时处理多个样品。

但是,该方法仍然存在一些局限性,如可能受到样本的稀释或污染的影响。

因此,在进行脂联素检测时,需遵循相关操作规范,并同时采用多种方法进行验证。

总之,脂联素是调节脂肪代谢和血糖平衡的重要激素,其检测可帮助评估患者的代谢状态和相关疾病风险。

ELISA法是一种常用的脂联素检测方法,通过特异性抗体与脂联素结合,利用底物反应的光密度或荧光信号测定其浓度。

该方法操作简便、灵敏度高,但仍需遵循相关操作规范,并进行多种方法的验证。

希望该回答能对你有所帮助。

酶联免疫的操作方法

酶联免疫的操作方法

酶联免疫的操作方法酶联免疫是一种常见的免疫测定方法,常用于检测抗原或抗体的存在和浓度。

其操作方法如下:1. 抗原包被:首先,将待检测样品中的抗原加入到含有特异性抗体的孔或固相载体表面,通过吸附或共价键结合的方式,将抗原固定在孔或固相载体上。

这样做是为了使抗原与特异性抗体充分结合,形成抗原-抗体复合物。

2. 洗涤:将包被好的板子或固相载体进行洗涤,去除非特异性结合物,减少误差的发生。

3. 反应:将与抗原-抗体复合物结合的二抗(或识别抗体)加入孔或固相载体中,与复合物发生特异性结合。

该二抗预先被连接上与酶(通常是辣根过氧化物酶HRP)结合的分子,因此称之为辣根过氧化物酶标记的二抗。

4. 洗涤:将孔或固相载体进行洗涤,去除非特异性结合物。

5. 底物添加:将染色底物加入孔或固相载体中,底物在酶的作用下,发生可见的颜色反应。

该底物通常是染色体底物或亚硝酸4-硫酸钠。

6. 反应停止:通过加入酸或碱,停止底物的反应,并阻止底物继续发色。

7. 反应评估:测量底物反应产生的颜色强度或发光强度,使用光度计或发光仪等设备进行测定。

酶联免疫方法优点如下:- 高灵敏度:酶标记可提供较强的信号,使检测到的目标物浓度可达到可靠的程度。

- 特异性:通过使用具有特异性的抗体或抗原,酶联免疫能够准确检测目标物。

- 简单易行:操作相对简单,无需复杂的实验条件和设备。

- 可量化:根据底物反应的强度,可以定量测定目标物的含量。

- 高通量:酶联免疫可同时处理多个样品,提高工作效率。

然而,酶联免疫也有一些局限性,例如:- 检测范围受限:传统的酶联免疫方法通常只能在较低至中等浓度范围内进行可靠的检测,对于高浓度的目标物可能不敏感。

- 受干扰物影响:某些样品中可能含有干扰物质,如脂质、乳糖、硫醇等,它们可能影响酶的活性或干扰底物的测定。

- 特异性限制:一些高度相似的抗原或抗体可能导致交叉反应,从而降低特异性。

总的来说,酶联免疫是一种常用的免疫测定方法,通过将抗原或抗体固定在固相载体上,并利用酶的催化反应使其产生可见的颜色或发光信号,从而实现对目标物的检测和定量。

猪组织型纤溶酶原激活剂t-PA酶联免疫分析ELISA

猪组织型纤溶酶原激活剂t-PA酶联免疫分析ELISA

猪组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测小鼠血清,血浆及相关液体样本中组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)的含量。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)水平。

用纯化的猪组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入组织型纤溶酶原激活剂(t-PA),再与HRP标记的组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中猪组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)浓度。

试剂盒组成:注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。

一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。

如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

操作步骤1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。

人脂联素(ADP)ELISA试剂盒说明书

人脂联素(ADP)ELISA试剂盒说明书

人脂联素ADP)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书厦门慧嘉生物科技有限公司本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中脂联素(ADP)的含量。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人脂联素(ADP)水平。

用纯化的抗-脂联素(ADP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入脂联素(ADP),再与HRP 标记的脂联素(ADP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的脂联素(ADP)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人脂联素(ADP)浓度。

试剂盒组成:样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。

加入一定量的PBS,PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

标本融化后仍然保持2-8℃的温度。

猪胰岛素(Insulin)酶联免疫分析

猪胰岛素(Insulin)酶联免疫分析

猪胰岛素(Insulin)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围:96T3 mIU/L- 80 mIU/L使用目的:本试剂盒用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中胰岛素(Insulin)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪胰岛素(Insulin)水平。

用纯化的猪胰岛素(Insulin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加胰岛素(Insulin),再与HRP标记的胰岛素(Insulin)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的胰岛素(Insulin)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中猪胰岛素(Insulin)浓度。

试剂盒组成标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。

加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.温育:操作同3。

8.洗涤:操作同5。

9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

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猪脂联素(ADP)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。

检测范围:96T
5μg/L -120μg/L
使用目的:
本试剂盒用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中脂联素(ADP)含量。

实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪脂联素(ADP)水平。

用纯化的猪脂联素(ADP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入脂联素(ADP),再与HRP 标记的脂联素(ADP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的脂联素(ADP)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中猪脂联素(ADP)浓度。

试剂盒组成
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,
然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。

加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.温育:操作同3。

8.洗涤:操作同5。

9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。

测定应在加终止
液后15分钟以内进行。

操作程序总结:
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,
即为样品的实际浓度。

注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。

一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。

如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6个月。

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