《生物化学》考研复习重点大题

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生物化学原理考研题目及答案

生物化学原理考研题目及答案

生物化学原理考研题目及答案题目一:酶的催化机制问题:1. 简述酶的催化作用原理。

2. 描述酶活性位点的结构特点。

3. 解释米氏方程及其在酶动力学中的应用。

答案:1. 酶是生物体中催化化学反应的生物大分子,绝大多数酶是蛋白质。

酶的催化作用原理基于降低反应的活化能,通过与底物形成酶-底物复合物来实现。

酶的活性位点与底物结合,使得底物分子间的距离和取向更适合发生化学反应,从而加速反应速率。

2. 酶活性位点的结构特点包括:具有高度的专一性,能够与特定底物结合;含有氨基酸残基,如色氨酸、酪氨酸等,这些残基通过氢键、离子键等非共价键与底物相互作用;活性位点的形状与底物的形状互补,形成“锁-钥匙”模型。

3. 米氏方程是描述酶促反应速率与底物浓度关系的数学模型,表达式为 \( v = \frac{V_{max}[S]}{K_m + [S]} \),其中 \( v \) 是反应速率,\( V_{max} \) 是最大反应速率,\( [S] \) 是底物浓度,\( K_m \) 是米氏常数,表示酶与底物结合的亲和力。

米氏方程在酶动力学中用于确定酶的动力学参数,分析酶促反应的机制。

题目二:DNA复制的机制问题:1. 描述DNA复制的基本过程。

2. 解释DNA聚合酶在DNA复制中的作用。

3. 讨论DNA复制过程中可能出现的错误及其修复机制。

答案:1. DNA复制是一个半保留的过程,包括启动、延伸和终止三个阶段。

首先,DNA双链在复制起点处被解旋酶解开,形成复制叉。

随后,引物酶合成RNA引物,为DNA聚合酶提供起始点。

DNA聚合酶沿着模板链添加互补的核苷酸,形成新的DNA链。

2. DNA聚合酶在DNA复制中的主要作用是催化新链的合成。

它具有5'到3'的聚合活性,能够准确地在模板链上添加互补的脱氧核苷酸,确保复制的准确性。

此外,DNA聚合酶还具有校对功能,能够识别并修正配对错误。

3. DNA复制过程中可能出现的错误包括插入错误、缺失错误和错配。

生物化学考研题库(改)

生物化学考研题库(改)

生物化学考研题库(改)生物化学考研题库(改)一、简介生物化学是研究生物体内化学成分、化学过程以及与生命活动相关的化学变化的学科。

考研生物化学题库是考生备战考研的重要工具之一,通过解题可以提高对生物化学知识的理解和掌握。

二、基础知识题1. DNA是由哪些碱基组成的?2. 请解释核苷酸和核苷的区别。

3. 简述蛋白质的结构层次。

4. 什么是酶?酶的功能是什么?5. 简述ATP的结构和功能。

三、代谢与能量题1. 请解释有氧呼吸和无氧呼吸的区别。

2. 简述脂肪酸的β氧化过程。

3. 什么是糖原?糖原在哪些组织中储存?4. 简述ATP的产生途径。

5. 请解释光合作用的过程。

四、酶学题1. 请解释酶的底物特异性。

2. 什么是酶的活性中心?3. 简述酶的抑制方式。

4. 请解释酶的催化机制。

5. 什么是酶的酶学常数?五、遗传学题1. 请解释DNA复制的半保留复制方式。

2. 简述DNA转录的过程。

3. 什么是基因突变?请列举几种常见的基因突变类型。

4. 请解释RNA剪接的过程。

5. 简述遗传密码的特点。

六、生物大分子题1. 请解释蛋白质的折叠过程。

2. 简述核酸的结构和功能。

3. 什么是多肽?请列举几个常见的多肽激素。

4. 请解释糖蛋白的结构和功能。

5. 简述脂质的分类和功能。

七、细胞生物化学题1. 请解释细胞膜的结构和功能。

2. 简述细胞呼吸的过程。

3. 什么是细胞信号转导?请列举几个常见的信号转导通路。

4. 请解释细胞凋亡的机制。

5. 简述细胞分裂的过程。

八、生物化学技术题1. 请解释PCR技术的原理和应用。

2. 简述蛋白质电泳的原理和方法。

3. 什么是基因克隆?请解释基因克隆的步骤。

4. 请解释DNA测序的原理和方法。

5. 简述酶联免疫吸附试验(ELISA)的原理和应用。

九、应用题1. 请设计一个实验,验证DNA复制的半保留复制方式。

2. 简述蛋白质的结构与功能之间的关系。

3. 请解释肿瘤细胞与正常细胞的代谢差异。

复旦大学生命科学院生物化学 考研复习部分题目

复旦大学生命科学院生物化学 考研复习部分题目

生化复习糖类代谢、光合作用(一)是非题1.NaF 能抑制糖分解代谢中的烯醇化酶。

(1997-12 )2.杀鼠剂氟乙酸抑制TCA 循环是因抑制了柠檬酸合成酶的活性。

(1999-16 )3.酵解反应中有5 步反应是在高负值ΔG ’下进行的。

(1999-19 )4.所有涉及动物细胞内CO 2 固定的羧化反应都需要辅酶TPP 。

(1999-20 )5.人体内所有糖分解代谢的中间产物都可以成为糖原异生的前体物质。

(2000-26 )6.HMP 途径能产生ATP , 所以可以代替TCA 循环, 作为生物体供能的主要途径。

(200 1-16 )7.糖尿病的发生都是由于胰岛素合成障碍所引起的。

(2001-24 )8.糖分解代谢的所有中间产物都可以作为糖异生前体物质。

(2002-6 )9.TCA 所有的中间产物中, 只有草酰乙酸可被循环中的酶彻底降解。

(2003-28 )10.人体不仅能利用D- 葡萄糖, 还可以利用L- 葡萄糖。

(2004-16 )11.糖链的合成没有模板, 生物体加糖顺序和方式由基因编码的转移酶所决定。

(2004-17 )12.葡萄糖激酶对葡萄糖专一性强, 亲和力高, 主要在肝脏中用于糖原异生。

(2004-18 )13.丙酮酸脱氢酶复合物中的电子传递方向为硫辛酸→FAD →NAD + 。

(2004-20 )14.糖原磷酸化酶在生物体内参与糖原生物合成。

(2005-20 )15.人体内半乳糖不能像葡萄糖一样被直接酵解。

(2005-21 )16.通过喝酒的办法可以缓解甲醇中毒者的甲醇毒性。

(2006-19 )17.糖的有氧氧化可以抑制糖酵解的进行。

(2006-20 )18.1 分子葡萄糖在酵解过程中生成2 分子ATP 。

(2006-21 )19.糖无论是有氧分解还是无氧分解, 都必须经历糖酵解阶段。

(2007-19 )20.糖原磷酸化酶和糖原合成酶都受到ATP 的激活。

(期末)21.乙酸衍生物可以在TCA 循环中被氧化代谢。

考研动物生物化学复习题

考研动物生物化学复习题

动物生物化学第一章绪论一、名词解释1、生物化学2、生物大分子二、填空题1、生物化学的研究内容主要包括___________________ 、 ______________ 和 ____________ o2、生物化学发展的三个阶段是________________ 、_________ 和_____________ o3、新陈代谢包括________________ 、_________ 和_____________ 三个阶段。

4、**Biochemistry ” 一词首先由德国的____________ 于1877年提ill。

5、在前人工作的基础上,英国科学家Krebs曾提出两大著名学说 __________ 和______________ o6 水的主要作用有以下四个方面________________ 、________________ 、_________ 和_____________ 。

三、单项选择题1.现代生物化学从20世纪50年代开始,以下列哪一学说的提出为标志:A.DNA的右手双螺旋结构模型B.三竣酸循环C.断裂基因D.基因表达调控2.我国生物化学的奠基人是:A.李比希B.吴宪C.谢利D.拉瓦锡3.1965年我国首先合成的其有生物活性的蛋白质是:A.牛胰岛素B.RNA聚合酶C. DNA聚合酶D. DNA连接酶4.生物化学的一项重要任务是:A.研究生物进化B.研究激素生成C.研究小分子化合物D.研究新陈代谢规律及其与生命活动的关系5.1981年我国完成了哪种核酸的人工合成:A.清蛋白mRNAB.珠蛋白RXAC.血红蛋白DNAD.酵母丙氨酸tRNA参考答案一、名词解释1、生物化学又称生命的化学,是研究生物机体(微生物、植物、动物)的化学组成和生命现象中化学变化规律的一门科学。

2、分子量比较大的有机物,主要包扌舌蛋白质、核酸、多糖和脂肪。

二、填空题1、生物体的物质组成、新陈代谢、生物分子的结构与功能2、静态生物化学阶段、动态生物化学阶段、现代生物化学阶段3、消化吸收、中间代谢、排泄4、 霍佩赛勒5、 舟氨酸循坏、三竣酸循环6、参与物质代谢反应、定体内诸藝物质的良好溶剂、维持体温相对恒定、物质分解产生的水是体 内水的一个來源三. 单项选择题1. A2. B3. A4. D5. D第二章核酸的化学二. 填空题1、 硏究核酸的鼻祖是 ________ ,但严格地说,他分离得到的只是 _______ o2、 _____ 等人通过著名的肺炎双球菌转化试验,证明了导致肺炎球菌遗传性状改变的转化因子 是 ______ ,而不是 ________ 。

825生物化学考研题库

825生物化学考研题库

825生物化学考研题库生物化学是研究生物体中化学过程和物质的科学,它涉及到生物分子的结构、功能以及它们在生物体内的作用机制。

考研生物化学题库通常包括基础概念、代谢途径、酶学、遗传信息的传递与表达等多个方面。

以下是一些可能包含在考研生物化学题库中的问题和答案示例:一、选择题1. 酶的催化作用主要依赖于:A. 酶的浓度B. 酶的活性中心C. 底物的浓度D. 反应温度答案:B2. 下列哪项不是蛋白质的四级结构?A. α-螺旋B. β-折叠C. 双螺旋D. 多肽链的聚集答案:C二、填空题1. 细胞呼吸过程中,______是最终的电子受体。

答案:氧气2. DNA复制过程中,______酶负责解开双链DNA。

答案:解旋酶三、简答题1. 简述糖酵解过程的主要步骤及其生物学意义。

答案:糖酵解是将葡萄糖分解为两个丙酮酸的过程,不需要氧气,是细胞在缺氧条件下进行能量代谢的主要途径。

它包括糖的磷酸化、异构化、裂解和还原等步骤。

生物学意义在于为细胞提供能量,即使在缺氧条件下也能进行。

2. 解释什么是转录和翻译,并简述它们在蛋白质合成中的作用。

答案:转录是DNA上的遗传信息被复制成mRNA的过程,而翻译是mRNA上的遗传信息被翻译成蛋白质的过程。

转录和翻译是蛋白质合成的两个关键步骤,转录将遗传信息从DNA转移到mRNA,翻译则根据mRNA上的密码子序列合成特定的蛋白质。

四、计算题1. 如果一个细胞在30分钟内消耗了1摩尔的葡萄糖,并且每摩尔葡萄糖产生的能量是2870千焦耳,那么这个细胞在这段时间内产生了多少能量?答案:1摩尔葡萄糖产生的能量为2870千焦耳,因此30分钟内产生的能量为2870千焦耳。

五、论述题1. 论述细胞周期的各个阶段及其在细胞生长和分裂中的作用。

答案:细胞周期包括G1期、S期、G2期和M期。

G1期是细胞生长和准备DNA复制的阶段;S期是DNA复制的阶段;G2期是细胞进一步生长和准备分裂的阶段;M期是细胞分裂的阶段。

生物化学考研试题汇总及答案

生物化学考研试题汇总及答案

生物化学考研试题汇总及答案### 生物化学考研试题汇总及答案#### 一、选择题1. 蛋白质的四级结构是由以下哪个因素维持的?A. 氢键B. 离子键C. 疏水作用D. 范德华力答案:C2. 酶的催化作用主要依赖于:A. 底物浓度B. 酶的浓度C. 酶的活性部位D. 温度和pH值答案:C3. 下列哪种物质不是核酸的组成成分?A. 核苷酸B. 磷酸基团C. 脱氧核糖D. 氨基酸答案:D#### 二、填空题1. 糖酵解过程中,_________ 是第一个产物。

答案:磷酸丙酮酸2. 细胞呼吸的主要场所是_________。

答案:线粒体3. 蛋白质合成的场所是_________。

答案:核糖体#### 三、简答题1. 简述DNA复制的半保留性。

答案:DNA复制的半保留性是指在DNA复制过程中,每个新合成的DNA分子都包含一个原始链和一个新合成的互补链。

这种复制方式确保了遗传信息的准确传递。

2. 描述细胞周期的四个阶段。

答案:细胞周期包括G1期、S期、G2期和M期。

G1期是细胞生长和准备DNA复制的阶段;S期是DNA复制的阶段;G2期是细胞继续生长并准备分裂的阶段;M期是细胞分裂的阶段。

#### 四、计算题1. 如果一个蛋白质分子由100个氨基酸组成,每个氨基酸的平均分子量为120,求该蛋白质的分子量。

答案:蛋白质分子量 = 100 * 120 - (100 - 1) * 18 = 11400 - 1620 = 9780#### 五、论述题1. 论述细胞内信号转导的一般过程及其生物学意义。

答案:细胞内信号转导是细胞对外界信号作出反应的过程。

一般过程包括信号的接收、信号的转导和信号的响应。

信号分子与受体结合后,激活一系列下游信号分子,最终导致细胞内特定基因的表达或酶活性的改变,从而引起细胞行为的改变。

这一过程对于细胞的生长、分化、代谢和免疫应答等生物学过程至关重要。

#### 六、实验题1. 设计一个实验来验证酶的专一性。

2023年各重点大学考研生物化学经典真题题集及答案

2023年各重点大学考研生物化学经典真题题集及答案

硕士硕士入学考试生物化学经典习题及答案第二章蛋白质旳构造与功能自测题一、单项选择题1. 构成蛋白质旳氨基酸属于下列哪种氨基酸?( A )。

A. L-α氨基酸B. L-β氨基酸C. D-α氨基酸D. D-β氨基酸A 构成人体蛋白质旳编码氨基酸共有20种,均属L-α氨基酸(甘氨酸除外)2. 280nm波长处有吸取峰旳氨基酸为( B )。

A.精氨酸B.色氨酸C.丝氨酸D.谷氨酸B 根据氨基酸旳吸取光谱,色氨酸、酪氨酸旳最大吸取峰在280nm处。

3. 有关蛋白质三级构造描述,错误旳是( A )。

A.具有三级构造旳多肽链均有生物学活性B.三级构造是单体蛋白质或亚基旳空间构造C.三级构造旳稳定性由次级键维持D.亲水基团多位于三级构造旳表面具有三级构造旳单体蛋白质有生物学活性,而构成四级构造旳亚基同样具有三级构造,当其单独存在时不具有生物学活性。

4. 有关蛋白质四级构造旳对旳论述是( D )。

A.蛋白质四级构造旳稳定性由二硫键维系B.四级构造是蛋白质保持生物学活性旳必要条件C.蛋白质均有四级构造D.蛋白质亚基间由非共价键聚合蛋白质旳四级构造指蛋白质分子中各亚基旳空间排布及亚基旳聚合和互相作用;维持蛋白质空间构造旳化学键重要是某些次级键,如氢键、疏水键、盐键等。

二、多选题1. 蛋白质构造域( A B C )。

A.均有特定旳功能B.折叠得较为紧密旳区域C.属于三级构造D.存在每一种蛋白质中构造域指有些肽链旳某一部分折叠得很紧密,明显区别其他部位,并有一定旳功能。

2. 空间构象包括( A B C D )。

A. β-折叠B.构造域C.亚基D.模序蛋白质分子构造分为一级、二级、三级、四级构造4个层次,后三者统称为高级构造或空间构造。

β-折叠、模序属于二级构造;.构造域属于三级构造;亚基属于四级构造。

三、名词解释1. 蛋白质等电点2. 蛋白质三级构造3. 蛋白质变性4. 模序蛋白质等电点:蛋白质净电荷等于零时溶液旳pH值称为该蛋白质旳等电点。

考研复习-生物化学必背大题

考研复习-生物化学必背大题

DNA合成必背大题1.简述中心法则。

答:在细胞分裂过程中通过DNA的复制把遗传信息由亲代传递给子代,在子代的个体发育过程中遗传信息由DNA传递到RNA(转录),最后翻译成特异的蛋白质;在RNA病毒中RNA具有自我复制的能力,并同时作为mRNA,指导病毒蛋白质的生物合成;在致癌RNA病毒中,RNA还以逆转录的方式将遗传信息传递给DNA分子(逆转录)。

2.DNA复制的基本规律?(半保留,半不连续,特定位置,方向性,合成引物)(1)复制过程是半保留的。

(2)细菌或病毒DNA的复制通常是由特定的复制起始位点开始,真核细胞染色体DNA复制则可以在多个不同部位起始。

(3)复制可以是单向的或是双向的,以双向复制较为常见,两个方向复制的速度不一定相同。

(4)两条DNA链合成的方向均是从5’向3’方向进行的。

(5)复制的大部分都是半不连续的,即其中一条领头链是相对连续的,其他随后链则是不连续的。

(6)各短片段在开始复制时,先形成短片段RNA作为DNA合成的引物,这一RNA片段以后被切除,并用DNA填补余下的空隙。

3.简述DNA复制的过程?答:DNA复制从特定位点开始,可以单向或双向进行,但是以双向复制为主。

由于DNA双链的合成延伸均为5′→3′的方向,因此复制是以半不连续的方式进行,可以概括为:双链的解开;RNA引物的合成;DNA链的延长;切除RNA引物,连接相邻的DNA片段。

(1)双链的解开在DNA的复制原点,双股螺旋解开,成单链状态,形成复制叉,分别作为模板,各自合成其互补链。

(2)RNA引物的合成引发体在复制叉上移动,识别合成的起始点,引发RNA引物的合成。

移动和引发均需要由ATP提供能量。

以DNA为模板按5′→3′的方向,合成一段引物RNA 链。

在引物的5′端含3个磷酸残基,3′端为游离的羟基。

(3)DNA链的延长当RNA引物合成之后,在DNA聚合酶Ⅲ的催化下,以四种脱氧核糖核苷5′-三磷酸为底物,在RNA引物的3′端以磷酸二酯键连接上脱氧核糖核苷酸并释放出PPi。

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中国农业大学研究生入学考试复习资料《生物化学》重点大题1.简述Chargaff 定律的主要内容。

答案:(1)不同物种生物的DNA 碱基组成不同,而同一生物不同组织、器官的DNA 碱基组成相同。

(2)在一个生物个体中,DNA 的碱基组成并不随年龄、营养状况和环境变化而改变。

(3)几乎所有生物的DNA 中,嘌呤碱基的总分子数等于嘧啶碱基的总分子数,腺嘌呤(A)和胸腺嘧啶(T) 的分子数量相等,鸟嘌呤(G)和胞嘧啶(C)的分子数量相等,即A+G=T+C。

这些重要的结论统称为Chargaff 定律或碱基当量定律。

2.简述DNA 右手双螺旋结构模型的主要内容。

答案:DNA 右手双螺旋结构模型的主要特点如下:(1)DNA 双螺旋由两条反向平行的多核苷酸链构成,一条链的走向为5′→3′,另一条链的走向为3′→5′;两条链绕同一中心轴一圈一圈上升,呈右手双螺旋。

(2)由脱氧核糖和磷酸构成的骨架位于螺旋外侧,而碱基位于螺旋内侧。

(3)两条链间A 与T 或C 与G 配对形成碱基对平面,碱基对平面与螺旋的虚拟中心轴垂直。

(4)双螺旋每旋转一圈上升的垂直高度为3.4nm(即34Å),需要10 个碱基对,螺旋直径是2.0nm。

(5)双螺旋表面有两条深浅不同的凹沟,分别称为大沟和小沟。

3.简述DNA 的三级结构。

答案:在原核生物中,共价闭合的环状双螺旋DNA 分子,可再次旋转形成超螺旋,而且天然DNA 中多为负超螺旋。

真核生物线粒体、叶绿体DNA 也是环形分子,能形成超螺旋结构。

真核细胞核内染色体是DNA 高级结构的主要表现形式,由组蛋白H2A、H2B、H3、H4 各两分子形成组蛋白八聚体,DNA 双螺旋缠绕其上构成核小体,核小体再经多步旋转折叠形成棒状染色体,存在于细胞核中。

4.简述tRNA 的二级结构与功能的关系。

答案:已知的tRNA 都呈现三叶草形的二级结构,基本特征如下:(1)氨基酸臂,由7bp 组成,3′末端有-CCA-OH 结构,与氨基酸在此缩合成氨基酰-tRNA,起到转运氨基酸的作用;(2)二氢尿嘧啶环(DHU、I 环或D 环),由8~12 个核苷酸组成,以含有5,6-二氢尿嘧啶为特征;(3)反密码环,其环中部的三个碱基可与mRNA 的三联体密码子互补配对,在蛋白质合成过程中可把正确的氨基酸引入合成位点;(4)额外环,也叫可变环,通常由3~21 个核苷酸组成;(5)TψC 环,由7 个核苷酸组成环,和tRNA 与核糖体的结合有关。

5.简述真核生物mRNA 3′端polyA 尾巴的作用。

答案:真核生物mRNA 的3′端有一段多聚腺苷酸(即polyA)尾巴,长约20~300 个腺苷酸。

该尾巴与mRNA 由细胞核向细胞质的移动有关,也与mRNA 的半衰期有关;研究发现,polyA 的长短与mRNA 寿命呈正相关,刚合成的mRNA 寿命较长,“老”的mRNA 寿命较短。

6.简述分子杂交的概念及应用。

答案:把不同来源的DNA(RNA)链放在同一溶液中进行热变性处理,退火时,它们之间某些序列互补的区域可以通过氢键重新形成局部的DNA-DNA 或DNA-RNA 双链,这一过程称为分子杂交,生成的双链称杂合双链。

DNA 与DNA 的杂交叫做Southern 杂交,DNA 与RNA 杂交叫做Northern 杂交。

核酸杂交已被广泛应用于遗传病的产前诊断、致癌病原体的检测、癌基因的检测和诊断、亲子鉴定和动植物检疫等方面。

7.DNA 热变性有何特点?答案:将DNA 溶液加热到70~100℃几分钟后,双螺旋结构即发生破坏,氢键断裂,两条链彼此分开,形成无规则线团状,此过程为DNA 的热变性。

有以下特点:变性温度范围很窄;260nm 处的紫外吸收增加;粘度下降;生物活性丧失;比旋度下降;酸碱滴定曲线改变。

8. 试述下列因素如何影响DNA 的复性过程:(1)阳离子的存在;(2)低于Tm 的温度;(3)高浓度的DNA 链。

答案:(1)阳离子可中和DNA 分子中磷酸基团的负电荷,减弱DNA 链间的静电作用,促进DNA 的复性;(2)低于Tm 的温度可以促进DNA 复性;(3)DNA 链浓度增高可以加快互补链随机碰撞的速度和机会,从而促进DNA 复性。

9.对一双链DNA 而言,若一条链中(A+G)/(T+C)= 0.8,则:(1)互补链中(A+G)/(T+C)= ?(2)在整个DNA 分子中(A+G)/(T+C)= ?(3)若一条链中(A+T)/(G+C)= 0.8,则互补链中(A+T)/(G+C)= ?(4)在整个DNA 分子中(A+T)/(G+C)= ?答案:(1)互补链中(A+G)/(T+C)= 1/0.8 =1.25(2)在整个DNA 分子中,因为A = T,G = C,所以,A+G = T+C,(A+G)/(T+C)= 1(3)互补链中(A+T)/(G+C)= 0.8(4)整个DNA 分子中(A+T)/(G+C)= 0.810.在pH7.0,0.165mol/L NaCl 条件下,测得某一组织DNA 样品的Tm 为89.3℃,求出四种碱基百分组成。

答案:大片段DNA 的Tm 计算公式为: (G+C)% =(Tm-69.3)×2.44%,小于20bp 的寡核苷酸的Tm 的计算公式为: Tm =4(G+C)+2(A+T)。

(G +C)% = (Tm – 69.3) × 2.44 %= (89.3-69.3) × 2.44 %=48.8%,那么G%= C%= 24.4%(A +T)% = 1-48.8% =51.2%,A %= T% = 25.6%]11. 为什么说蛋白质是生命活动所依赖的重要物质基础?答案:1. ①论述蛋白质的催化、代谢调节、物质运输、信息传递、运动、防御与进攻、营养与贮存、保护与支持等生物学功能。

②综上所述,蛋白质几乎参与生命活动的每一个过程,在错综复杂的生命活动过程中发挥着极其重要的作用,是生命活动所依赖的重要物质基础。

没有蛋白质,就没有生命。

12.谷胱甘肽分子在结构上有何特点?有何生理功能?答案:谷胱甘肽(GSH)是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成的三肽。

GSH 的第一个肽键与一般肽键不同,是由谷氨酸以γ-羧基而不是α-羧基与半胱氨酸的α-氨基形成肽键。

GSH 分子中半胱氨酸的巯基是该化合物的主要功能基团。

GSH 的巯基具有还原性,可作为体内重要的还原剂保护体内蛋白质或酶分子中巯基免遭氧化,使蛋白质或酶处在活性状态。

此外,GSH 的巯基还有嗜核特性,能与外源的嗜电子毒物如致癌剂或药物等结合,从而阻断这些化合物与机体DNA、RNA 或蛋白质结合,以保护机体免遭毒物损害。

13. 简述蛋白质变性与沉淀的关系。

答案:蛋白质沉淀和变性的概念是不同的。

沉淀是指在某些因素的影响下,蛋白质从溶液中析出的现象;而变性是指在变性因素的作用下蛋白质的空间结构被破坏,生物活性丧失,理化性质发生改变。

变性的蛋白质溶解度明显降低,易结絮、凝固而沉淀;但是沉淀的蛋白质却不一定变性,如加热引起的蛋白质沉淀是由于蛋白质热变性所致,而硫酸铵盐析所得蛋白质沉淀一般不会变性。

14. 概述蛋白质一级结构测定的一般程序。

答案:蛋白质一级结构测定的一般程序为:①测定蛋白质(要求纯度必须达到97%以上)的相对分子质量和它的氨基酸组成,推测所含氨基酸的大致数目。

②测定多肽链N-末端和C-末端的氨基酸,从而确定蛋白质分子中多肽链的数目。

然后通过对二硫键的测定,查明蛋白质分子中二硫键的有无及数目。

如果蛋白质分子中多肽链之间含有二硫键,则必须拆开二硫键,并对不同的多肽链进行分离提纯。

③用裂解点不同的两种裂解方法(如胰蛋白酶裂解法和溴化氰裂解法)分别将很长的多肽链裂解成两套较短的肽段。

④分离提纯所产生的肽段,用蛋白质序列仪分别测定它们的氨基酸序列。

⑤应用肽段序列重叠法确定各种肽段在多肽链中的排列次序,即确定多肽链中氨基酸排列顺序。

⑥如果有二硫键,需要确定其在多肽链中的位置。

15. 试论蛋白质一级结构与空间结构的关系。

答案:①以RNA 酶变性与复性实验、有活性牛胰岛素的人工合成为例证实蛋白质一级结构决定其空间结构。

②Anfinsen 发现蛋白质二硫键异构酶(PDI)能加速蛋白质正确二硫键的形成;如RNA 酶复性的过程是十分缓慢的,有时需要几个小时,而PDI 在体外能帮助变性后的RNA 酶在2min 内复性。

分子伴侣在细胞内能够帮助新生肽链正确组装成为成熟的蛋白质。

由此可见,蛋白质空间结构的形成既决定于其一级结构,也与分子伴侣、蛋白质二硫键异构酶等助折叠蛋白的助折叠作用密不可分。

16. 概述凝胶过滤法测蛋白质相对分子质量的原理。

答案:层析过程中,混合样品经过凝胶层析柱时,各个组分是按分子量从大到小的顺序依次被洗脱出来的;并且蛋白质相对分子质量的对数和洗脱体积之间呈线性关系。

因此,将几种已知相对分子质量(应小于所用葡聚糖凝胶的排阻极限)的标准蛋白质混合溶液上柱洗脱,记录各种标准蛋白质的洗脱体积;然后,以每种蛋白质相对分子质量的对数为纵坐标,以相对应的洗脱体积为横坐标,绘制标准曲线;再将待测蛋白质溶液在上述相同的层析条件下上柱洗脱,记录其洗脱体积,通过查标准曲线就可求得待测蛋白质的相对分子质量。

17. 概述SDS-PAGE 法测蛋白质相对分子质量的原理。

答案:(1)聚丙烯酰胺凝胶是一种凝胶介质,蛋白质在其中的电泳速度决定于蛋白质分子的大小、形状和所带电荷数量。

(2)十二烷基硫酸钠(SDS)可与蛋白质大量结合,结合带来两个后果:①由于SDS 是阴离子,故使不同的亚基或单体蛋白质都带上大量的负电荷,掩盖了它们自身所带电荷的差异;②使它们的形状都变成杆状。

这样,它们的电泳速度只决定于其相对分子质量的大小。

(3)蛋白质分子在SDS-PAGE 凝胶中的移动距离与指示剂移动距离的比值称相对迁移率,相对迁移率与蛋白质相对分子质量的对数呈线性关系。

因此,将含有几种已知相对分子质量的标准蛋白质混合溶液以及待测蛋白溶液分别点在不同的点样孔中,进行SDS-PAGE;然后以标准蛋白质相对分子质量的对数为纵坐标,以相对应的相对迁移率为横坐标,绘制标准曲线;再根据待测蛋白的相对迁移率,即可计算出待测蛋白的相对分子质量。

18.简述蛋白质的抽提原理和方法。

答案:抽提是指利用某种溶剂使目的蛋白和其他杂质尽可能分开的一种分离方法。

其原理:不同蛋白质在某种溶剂中的溶解度不同,所以可以通过选择溶剂,使得目的蛋白溶解度大,而其他杂蛋白溶解度小,然后经过离心,可以去除大多数杂蛋白。

方法:溶剂的选择是抽提的关键,由于大多数蛋白质可溶于水、稀盐、稀碱或稀酸,所以可以选择水、稀盐、稀碱或稀酸为抽提溶剂;对于和脂类结合比较牢固或分子中非极性侧链较多的蛋白质分子可以选用有机溶剂进行抽提。

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