_蛋鸭血清和卵黄中禽流感抗体相关性试验研究
试验研究
后 ３０ｄ 内没有必要进行免疫抗体监测。 强 免 ３０ｄ 后 ， 血 清 与 卵 黄 直 接 稀 释 、血 清 与 萃 取 检 测 结
果的均值差都在 ０．８ 以下， Ｔ 检验结果都是差异不显著， 由此 表明， 在这个时期可以用卵黄代替血清进行免疫抗体监测。 结果见表 １。
由表 １ 还能看出， 强免 ３０ｄ 后卵黄直接稀释与萃取两种 由表 １ 还能看出， 强免 ３０ｄ 后卵黄直接稀释与萃取两种方法 检 测 结 果 的 均 值 差 都 在 ０．３５ 以 下 ， Ｔ 检 验 结 果 差 异 不 显 著 。 由此可知， 卵黄萃取与卵黄直接稀释所得结果基本一致， 因 此， 可以用卵黄直接稀释代替血清进行抗体监测。 ２．２．２ 个 值 分 析 固 定 组 和 扩 大 试 验 组 强 免 差 １ 个 效 价 以 内 的 有 ２４９ 份 占 ８９．２４％。 由 此 表明， 强免 ３０ｄ 以后， 血清、卵黄直接检测和萃取三种方法所 得结果比较一致， 尤其是卵黄直接检测和萃取结果更为吻 合。见表 ３。
３结论 试验结果表明， 蛋鸭在禽流感免疫抗体监测中在一定时
以后至整个免疫期结束， 血清抗体与卵黄抗体具有良好的一 致性和相关性， 用卵黄可以代替血清进行 ＨＩ 试验。
固定组和扩大试验组强免 ３０ｄ 以后 ２７ 次检测血清和卵 黄 ２７９ 组份， 血清－ 卵黄直接测得抗体效价等于和相差 １ 个 滴度以内的有 ２１０ 份占 ７５．２７％， 血清－ 萃 取 抗 体 效 价 等 于 和 相差 １ 个效价以 内 的 有 ２１６ 份 占 ７７．４２％； 卵 黄 直 接 测 得 和
近日 ＷＨＯ 指出鸭子是禽流感病毒的主要携带者。中美 两国研究人员还通过试验发现， 不断变异的禽流感病毒在鸭 子身上突变之后， 大大提高了对老鼠等哺乳动物的致命性， 而人类也面临着同样的危险。因此， 做好高致病性禽流感的 防控工作， 尤其是控制好鸭子这一传播途径， 已成为有关部 门及广大兽医工作者和养禽场、户的当务之急。但是， 常规的 检测方法是采集鸭的静脉血， 检测血清中免疫抗体。这种方 法在采血时对鸭造成惊吓而引起产蛋率降低甚至死亡， 使养 殖户受到很大的经济损失。因此， 养鸭户对抗体监测有很大 的 抵 触 情 绪 。本 研 究 的 目 的 就 是 对 免 疫 鸭 群 血 清 和 卵 黄 中 的 Ｈ５ 亚型高致病性禽 流 感 抗 体 进 行 监 测 ， 比 较 血 清 和 卵 黄 ＨＩ 效价的差异， 并找出其相关性， 。从而在今后的 Ｈ５ 亚型高致 病 性 禽 流 感 抗 体 监 测 中 用 鸭 蛋 代 替 血 清 。这 不 仅 保 证 了 养 鸭 户的经济利益， 消除养鸭户对抗体监测的抵触情绪， 也减少 因采血而需要的财政支出。 １ 试验材料与方法 １．１ 试 验 材 料 重 组 禽 流 感 病 毒 灭 活 疫 苗 （ Ｎ５Ｈ１ 亚 型 ， Ｒｅ－ １ 株 ， 禽 用 ） ， 批 号 为 ： ２００６０４２８， 哈 兽 研 出 品 ； 禽 流 感 Ｈ５ 亚型抗原和血清， 哈兽研出品。 １．２ 试验动物 健 康 产 蛋 麻 鸭 ７００ 只 ， 同 品 种 成 公 鸭 ６ 只 。 鸭只个体差异不显著， 未曾免过禽流感疫苗。 １．３ 试验鸭处理 １．３．１ 检测 试验前母鸭采血 ２０ 份， 公鸭 ６ 份， 检测禽流感 抗体效价均在 ３Ｌｏｇ２ 以下。 １．３．２ 分 组 随 机 将 母 鸭 分 成 ３ 组 ， Ａ 组 ８０ 只 为 随 机 采 样 组 ； Ｂ 组 ２０ 只 为 固 定 组 ； Ｃ 组 ６００ 只 为 扩 大 试 验 组 。Ａ、Ｂ 两 组鸭群在本所饲养场饲养。Ｃ 组在保定市焦庄乡夏某的鸭场 饲养。以上 ３ 组鸭群试验期间采用相同的饲料和饲养管理措 施。 １．３．３ 免疫 按常规免疫剂量（ １ｍＬ／ 只） ， 对试验鸭群进行 免 疫 接 种（ 公 鸭 除 外 ） ， 并 于 首 免 后 ２４ｄ 使 用 同 样 剂 量 进 行 加强免疫。 １．４ 免疫监测 １．４．１ 采样 于加强免疫 后 ， 每 １０～２０ｄ 各 组 分 别 采 血 １０～ ２０ 份。在采血的同时收集各组相对应的鸭蛋 １０～２０ 枚。 １．４．２ 测 定 血 清 样 品 按 照 《ＧＢ／Ｔ １８９３６～２００３ 高 致 病 性 禽 流 感 诊 断 技 术 》规 定 的 方 法 检 测 。卵 黄 采 取 直 接 稀 释 和 萃 取两种方法进行 ＨＩ 效价测定。萃取方法为： 取卵黄 １ 份， 加 ＰＢＳ 液 １ 份 做 １：１ 稀 释 ， 然 后 再 加 氯 仿 ２ 份 ， 充 分 振 荡 均 匀 ，
室 温 静 置 ３０ｍｉｎ， ３０００ 转 ／ｍｉｎ 离 心 ５～１０ｍｉｎ， 取 上 清 液 用 于 检测， 其测定方法同血清。 ２ 结果与分析 ２．１ 宏观分析 由图 １～图 ３ 可 以 看 出 ， 首 免 后 ５４ｄ（ 图 中 D 标志） 内（ 即 强 免 后 ３０ｄ 内 ） ， 血 清 抗 体 上 升 快 ， 卵 黄 抗 体 的 上升要滞后于血清抗体的上升。因此， 图中三条曲线比较分 散； 而强免 ３０ｄ 后， 三种试验方法所得试验数据基本一致， 图 中三条曲线也比较吻合。
图 １ （ 注： ５４* 即强免后 ３０ｄ）
图 ２ （ 注： ５４* 即强免后 ３０ｄ）
３４ 畜牧兽医科技信息 ２００７．０８
２．２ 数据分析 ２．２．１ 平均值分析 对随机组、固定组和扩大试验组 ４５ 次 近 ７００ 个样品组份检测 的 结 果 均 值 进 行 Ｔ 检 验 ， 强 免 后 ３０ｄ 内 ， 血 清 与 卵 黄 直 接 稀 释 、血 清 与 萃 取 检 测 结 果 的 均 值 差 都 在 １．９ 以上， Ｔ 检验结果都是差异极显著， 说明在这个时期不 能用卵黄代替血清进行免疫抗体监测； 而在生产实践中免疫
试验研究
蛋鸭血清和卵黄 中禽流感抗体相关性试验研究
白玉坤 １， 孟 艳 ２， 杨秀女 ２， 冯雪岭 ３， 武秋双 ２， 郑丽丽 １， 景建江 ４
（ １． 河北省疫病防控中心， 保定 ０７１０００； ２． 河北省畜牧兽医研究所， 保定 ０７１０００；
３． 河北省畜牧兽医局， 石家庄 ０５００３１； ４． 河北省邢台县农业局， 邢台 ０５４００１）
由于卵黄萃取和卵黄直接稀释所得检测结果基本一致， 而用卵黄直接稀释进行监测， 操作简便， 成本低廉， 因此， 仅 使用卵黄直接稀释就可以代替血清进行监测， 而没必要用卵 黄萃取法。
畜牧兽医科技信息 ２００７．０８ ３５
检测血清和卵黄 ４６ 组份， 血清 ＨＩ 抗体高于卵黄直接测得抗 体效价 ２ 个效价以上的有 ３７ 份占 ８０％， 血清 ＨＩ 抗体高于卵 黄萃取抗体效价 ２ 个效价以上的有 ４０ 份占 ８７％， 由此可以 看出， 在免疫抗体上升阶段卵黄抗体的上升滞后于血清抗体 的上升， 同时还表明， 在免疫抗体上升阶段血清抗体效价与 卵黄抗体效价相差较大。见表 ２。
鸭流感
鸭流感鸭流行性感冒俗称鸭流感，是国家一类传染病，特别是H5或H7来型毒株，引起鸭大批量死亡，H9为温和型流感。
临床症状：雏鸭表现沉郁，眼眶湿润、流泪、流鼻汁，呼吸困难，食欲废绝和下黄、绿、白色稀粪，后期出现神经症状、扭颈、摇头、仰翻或横冲直撞等，死亡率可高达90%以上。
产蛋鸭多发生于气候骤变，应激大时，突然发病，表现为产蛋率急剧下降，1周内可以由95%下降到10%，甚至停产，后期恢复缓慢，出现畸形蛋，软壳蛋，很难恢复到原有的水平。
解剖症状：全身出血感染，主要表现在卵巢的卵泡呈菜花状，胰腺表面有大量针尖大小的坏死灶，输软管有白色分泌物或蛋清，腹部脂肪有大量出血点。
预防：本病一旦发生，无药可治，唯一的防治方法只能用疫苗接种防治本病的发生，但也要注意流感的血清型，由于型号较多，而且不产生交叉保护力，所以为禽流感的防治带来较大的困难，温和型禽流感有一个过渡期，在这个阶段，想办法消除蛋鸭各个组织器官的炎症，是广大养殖户的首选方案。
治疗方法：1、禽流感多价卵黄抗体或抗血清，雏鸭用量为1--2毫升，中大鸭为2-3毫升，及时肌内注射，每天1次，连用2天。
2、恩诺沙星按每千克体重25毫克，病毒灵（利巴韦林）按每千克体重30毫克，加入水中，连用5天。
注意：继发或并发大肠杆菌病、鸭疫里氏杆菌等，还可选用头孢噻呋钠、舒巴坦钠、盐酸克林霉素、利福平、治菌必妥等。
由于鸭流感引起产蛋量下降时，可添加增蛋添加剂增蛋宝或多蛋多。
3、金丝桃素（贯众叶、连翘提取物），预防剂量为每吨饲料添加400克，连用7天；治疗剂量为每只鸭用50-70毫克，连用3-4天。
注意：也可选用金银花、黄芪多糖；金刚乙胺；干扰素、聚肌胞合剂（应在疾病的早期使用）。
4、中草药治疗：大黄、黄芩、黄芪、板蓝根、地榆、槟榔各10克、栀子、松针粉、生石膏、知母、藿香、秦艽、芒硝各5克（50只鸭1天的治疗量或100只鸭1天的预防量），用开水泡一夜，上清液饮用，药渣拌料，也可共粉碎过30目筛，拌料饲喂，连用2--3天。
鸭卵黄免疫球蛋白IgY研究进展
的完 整 型 ＩＹ 的和 ５７ ｇ ．Ｓ的缺 失型 的 ＩＹ，鸡 和 火鸡 ｇ
仅有完整型的 Ｉ ｇ Ｙ分子嘲 。 Ｈｅ （９ １ 发 现 在 Ｉ 的 Ｃ ｌ Ｃ ２和 ｌ Ｂ Ａ １９ ） ｍ ｖ— ｖ
Ｃ ２ Ｃ３ ｖ一 ｖ 之间有一段脯氨酸和甘氨酸残基区域 ，他 推断此 区域可能使 Ｉ ｇ Ｙ分子具有 一定的可折叠性 ， 疫球 蛋白 （ｏ Ｇ Ｙ ｌ Ｉ ）简称 ＩＹ 。鸭卵黄免疫球 蛋 或者被看作是哺乳动物免疫球蛋白中描述的 “ ｋｇ ｇ 转型 白ＩＹ是鸭血清中转移富集在卵黄中的大量特异性 区 ” ｇ ，并且认为这个区域 与ＩＹ的功能形成有关 。 ｇ 多克隆抗体。由于鸭 Ｉ ｇ Ｙ与哺乳动物产生 的抗体相 比具有许多突出的优 点 ，因此各 国科 学 家对 它 的研 究产生 了浓厚 的兴趣 。本文就 鸭 Ｉ ｇ Ｙ的结构、功 能、性质，分离纯化方法、应用前景以及 同传统抗 体 的 比较 等方 面作 一综述 。 １ ＩＹ的结构 、功 能和 性质 ｇ １１ Ｉ 的结构 Ｉ ． ｇ Ｙ ｇ Ｙ包括两条重链和两条轻链 ，
［ 要］ 卵黄抗体 ＩＹ 为一种特异性多克隆抗体 ，被称为新生代抗体 。它有 完 摘 鸭 ｇ作 型 的和缺 失型 的 两种 类 型的 ＩＹ ｇ ，其缺 失型 ＩＹ （ ｃ 可 以有 效 的排 除假 阳性反 ｇ △Ｆ ） 能够与别的特异性抗原有效结合而不会发生交叉反应。两种类型的 ＩＹ ｇ 仅在一定
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综述译文
单 ；Ｉ 免 疫 球 器 白 ， 乌Ｉｉ 『黄 Ｉ ｇＹ 研 克 弛 展
袁
中图分类号 ￥ ５ ． ２ ．． ８ ８ ３ ２ ４３
涛 ，聂
Ａ
奎
（ 大学动物科技 学院，重庆 西南
文献标码
北碚
接种禽流感疫苗对湖区蛋鸭产蛋率的影响试验
是对 蛋 鸭 产 蛋 率 的影 响 目前 研 究 报 道 较 少 。 为 了掌 握 禽 流感 疫 苗接 种后 对 蛋 鸭 产 蛋 率 的 影 响 ， 日后 蛋 鸭 养殖 提 供 理 论 依 据 ， 行 了 为 进
禽 流感 是 由正 黏 病 毒科 流感 病 毒 属 Ａ型
养 殖 基 地 进 行 。时 间 从 ２ ｏ ｏ ５年 １ ０月 ９ 日至
流 感 病 毒 引起 的 禽类 的一 种 急 性 、高度 接 触 ２ ０ ０ ５年 ｌ 月 １日， 中前 ４天为预试 期 ， ２ １ 其 后 ０ 性 烈 性 传 染 病 。 世 界 动 物卫 生组 织 将 其 列 为 Ａ类 动 物 疫 病 ， 国将 其 列 为 一 类 动 物 疫病 。 我
而且 对人 们 生命 健康 构 成威 胁 。近几 年来 ， 该
病在 世界 各 地 广 泛 流 行 ，并 导致 了人 员 的感
南湖村 １ 组刘 充才养殖 户 ，洞庭 麻鸭 ８ ０羽 ， １ ８ Ｃ组 为南 大镇 新 湖村 ４ 南正平 养殖 户 ，洞 庭 组
染 和 死 亡 。因此 ， 人们 越来 越 重 视对 禽 流感 的 麻 鸭 ８ ０羽 。其 中 Ｂ、 ３ Ｃ二组 为试 验 组 ， Ａ组 为
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ｆ南 － 亩放兽虚 ｉ
２０ 年第２ ０６ 期
接神禽流感疫苗对湖区蛋鸭产蛋率的影响试验
刘竹 青 。 少杰 。 张 高 华 ． 少才 ， 曾 冷小 玲 ． 冯双球 ． 孙 健。 刘 伟 ， 国平 蔡
（ 南省 沅江 市畜牧局 ， 南 益 阳 湖 湖 ４３０ ） １ １０
卵黄替代血清检测蛋鸡H_(5)、H_(7)免疫抗体试验
与 禽业技术|资源育繁卵黄替代血清检测蛋鸡出、H7免疫抗体试验厉磊 秦燕刘维红王冠东邵春雷王雷之(山东省临沂市畜牧发展促进中心276000)摘要：用卵黄和血清样本监测巴、H 7亚型禽流感抗体，对两种结果进行相关性试验。
对180-190日龄蛋鸡免疫重组禽流感(H 5+H 7)三价灭活疫苗，免疫后对固定鸡群采样(血清和鸡蛋)，进行免疫抗体监测。
结果表明，免疫28d 后，卵黄和血清HI 抗体效价呈正相关性，差异不显著。
表明用卵黄替代血清检测蛋鸡高致病性禽流感免疫抗体是一种简单、有效的方法。
关键词：卵黄；血清；H s 、H 7亚型禽流感；免疫抗体临沂市是畜牧业大市，其中蛋鸡养殖是部分农民发家致富 的重要手段。
禽流感是由A 型禽流感病毒引起的一种高度接触 性、急性传染病。
H s 、H 7亚型高致病性禽流感给养禽业造成的经济损失巨大，被我国列为一类动物疫病。
2004年，我国开始 对H 5亚型高致病性禽流感实施强制免疫政策，2017年又对H 7 亚型实行强制免疫。
如何评价疫苗免疫效果尤为重要。
每年本市根据省兽医主管部门(省畜牧兽医局)动物疫病监测计划下 达本行政区域的动物疫病监测计划。
鸡高致病性禽流感免疫效果的监测，需要按一定比例采样，抽取鸡血析岀血清后，做血凝和血凝抑制试验来判定结果。
采取鸡血需要专业技术人员操作，并且需要采取必要的防护隔离措施，消耗大量的人力、物 力。
并且捉鸡、采血使鸡产生较大的应激反应，对蛋鸡产蛋有一定的影响。
母鸡以特定抗原免疫后，能产生相对应的特应性 抗体，抗体除存在于血清中外，还可以储存于卵黄中，称为卵黄抗体。
因此，卵黄抗体与血清抗体应存在一定的相关性，若 能收集蛋样检测卵黄抗体，则可以减少鸡群采血应激|1],而且操作更为方便。
鉴于此，本中心于2019年10-12月，选择了 部分蛋鸡场进行高致病性禽流感免疫注射和抗体水平检测， 并对血清抗体效价和卵黄抗体效价进行了比较分析，为生产实践中产蛋鸡卵黄抗体检测H s 、H 7亚型禽流感免疫抗体提供依据。
鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体的研制-论文
ＤＶ Ｈ 弱 毒 疫 苗 由 黑 龙 江 省 兽 医 卫 生 防 疫 站 提 供 ，一 １ ５℃冷冻 保存 。 １ ． ３ 肝 组织 上清液 油剂 灭活苗 制备
１ ． ３ ． １制水相
中和 １ ｈ 后，接种 ９日龄健康鸡胚，每个稀释度接种
无 菌手 术法 ，取 新鲜 且 具有 ＤＶ Ｈ 典 型病 变 的肝 ５ 枚 ， 同时 设 阴性 ， 阳性对 照 ，观 察鸡 胚病 变 及死 亡 脏 ， 除去 胆囊 、称 重 、剪 碎 ，按 １ ： ３比例 ，用 生理 盐 情 况 ，按 Ｒ ｅ ａ ｄ － Ｍｕ ｅ ｎ ｃ ｈ法计算 卵黄 抗体 中和 效价 。 水 稀释 捣碎装 入瓶 中， 加双抗， 置 冰箱反 复冻 融 ３次 ， ３ 无 菌检 验和 安全试 验 离 心 ，取 上 清 ， 再 加 入 肝 组 织 ， 按 上 述 方 法 处 理 ， 取其 上清液 （ 保留 ２ ０ ０ ｍＬ冻 存 备 用 ） ，加 ０ ． ５ ％ 福 尔马林 （ 分 析 纯 ）混 匀 ，于 ３ ７℃条 件 下 灭 活 ２ ４ ｈ ， ５ｍｉ ｎ ，装瓶 ，即为水 相 。
鸭 病 毒 性肝 炎 （ Ｄ ｕ ｃ ｋ Ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ Ｈ ｅ ｐ ａ ｔ ｉ ｔ ｉ ｓ ）是 由鸭 甲
将 Ｄ Ｖ Ｈ 弱 毒 苗 用 生 理 盐 水 稀 释 ， 每 只 以 ２倍
肝病毒 （ Ｄｕ ｃ ｋ ｈ ｅ ｐ ａ ｔ ｉ ｔ ｉ ｓ Ａ ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ ，ＤＨ Ａ Ｖ）或 鸭 星 状病 量 饮 水接 种 疫 苗 ，然 后 于第 １ ０ ｄ和 ２ ０ ｄ分 别 接 种 上 毒 （ Ｄｕ ｃ ｋ ａ ｓ ｔ ｒ ｏ ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ ，ＤＡ ｓ ｔ Ｖ） 引 起 的 一 种 高 度 致 死 述 ＤＶ Ｈ油 剂 灭活 苗 ２ ｍＬ和 ４ ｍＬ 。 经 上 述 免 疫 后 性急 性传 染病 ［ １ － ２ ］ ｏ尤 其是 ３ ～ ２ ０日龄 的雏 鸭发病 ，临 １ ０ ｄ ，采鸡 血清 测 定抗 Ｄ ＨＡ Ｖ 中和抗 体 效价 ， 中和 效
鸭出血症高免卵黄抗体的研制和应用[1]
![鸭出血症高免卵黄抗体的研制和应用[1]](https://360docs-1393072327.cos.ap-beijing.myqcloud.com/9d84a3dbd15abe23482f4d02.webp)
!""0 年《福建畜牧兽医》杂志征订启事
《福建畜牧兽医》杂志是由福建省农科院畜牧兽医 研究所、福建省畜牧兽医学会、福建省农业厅畜牧兽医 局、福建农林大学动物科学学院、福建省畜牧兽医总站 联合主办，具有 5)0. 2 **"0 9 ;、<;;)*""0 2 (00* 刊号， 向全国公开发行的综合性畜牧兽医优秀科技期刊，全 国畜牧兽医专业核心刊物。
并发其它疫病 , 如鸭传染性浆膜炎、大肠杆菌病、鸭病 毒性肝炎、鸭球虫病和鸭流感等 - 的病鸭群，应用 =>= 高免卵黄抗体进行治。
参考文献 *’ 黄 瑜，李文杨，程龙飞等 ’ 鸭流行性出血症的初步调查 ’ 中国兽医杂志 ’ *++:，!( , ( - ：*( 4 *.’ !’ 黄 瑜，程龙飞，李文杨等 ’ 鸭疱疹病毒 ! 型 , 暂定名 - 的分 离与鉴定 ’ 中国预防兽医学报 ’ !""*，!0 , ! - ：+. 4 +:’ 0’ 林世棠，黄 瑜，黄纪铨等 ’ 一种新的鸭传染病研究 ’ *’ 流 行情况与初步诊断 ’ 中国畜禽传染病 ’ *++#，(：*( 4 *3’
!"
《福建畜牧兽医》#$$# 年第 % 期 &’() #*) +’) %
鸭出血症高免卵黄抗体的研制和应用!
李文杨 黄 瑜 程龙飞 彭春香 江 斌 施少华 福建省农科院畜牧兽医研究所 ,-$$!,
鸭出血症 . /0/ 1 是由鸭疱疹病毒 # 型 . 鸭新型疱 疹病毒 1 引起的以病鸭双翅羽毛管内出血呈紫黑色、脏 器及肠道出血为特征的一种新的传染病。自 !22$ 年秋 以来，经临床流行病学调查和送检病例发现我省福州、 莆田、漳州、厦门、南平等地区以及浙江省金华、义乌等 和广东省佛山、湛江等地鸭均有发生。该病可侵害番 鸭、樱桃谷鸭、北京鸭、半番鸭、麻鸭、野鸭等，但以番鸭 最易感，各日龄鸭均可发病，以 !$3 4 ,$3 鸭更为多见， 发病率高低不一，鸭日龄愈小发病率愈高，多种抗菌药 物治疗无效，使用现有的鸭病疫苗、高免血清或高免卵 黄抗体及药物均未能防治该病，给我国养鸭业 . 尤其是 番鸭养殖业 1 已造成严重经济损失。为了有效地控制该 病，我们进行了 /0/ 高免卵黄抗体研制，并通过大量 田间应用试验，取得了令人满意的效果。现报道如下： ! 材料与方法 !) ! 病毒来源 系本室分离、鉴定 和保存的一株鸭出血症病毒 . /0/& 1 ，供病毒的培养增 殖和 /0/ 高免卵黄抗体液的预防保护率测定。 !) # 病 毒 的 培 养 以 /0/& 经 尿 囊 腔 途 径 接 种 !!3 4 !#3 番鸭胚，在无菌条件下收集接种 #*5 后死亡 的番鸭胚胚液，冻结保存。 !) , /0/ 免疫用抗原的制备 将上述冻存的 /0/& 胚液毒融化后 *6 下 " $$$7 8 9:; 离心 *-9:;<，取上清按 常规方法以 =>? . @A B #$ $$$ 1 反透析浓缩后，加入一 定量的甲醛溶液，,C6 灭活 #*5 后取出，再加以适当的 佐剂制备免疫用的 /0/ 抗原，置 *6 下保存备用。 !) * /0/ 高免卵黄抗体的制备 选取某养鸭户饲养 的健康麻鸭群若干羽，按常规方法分别进行首免 . 每羽 肌注免疫用抗原 !) $9( 1 、二免 . 首免后 !$ 天，每羽肌注 免疫用抗原 !) -9( 1 、三免 . 二免后 !$ 天，每羽肌注免疫 用抗原 #) $9( 1 ，三免后 !- 天开始收集免疫蛋，按常规 方法在无菌条件下制备 /0/ 高免卵黄抗体液，同时冻 存按不同稀释度 . # 倍、* 倍、" 倍 1 稀释的 /0/ 高免卵 黄抗体液待检。 !) - /0/ 高免卵黄抗体液的检验 !) -) ! 菌检和 安全性检验：取上述冻存的不同稀释度的 /0/ 高免卵 黄抗体液分别接种于马丁琼脂平板、麦康凯琼脂平板， 置 ,C6 下恒温培养 *"5，观察结果。
禽流感血清抗体和卵黄抗体的比较研究
价基本一致 。这些试验都证 明了用卵黄抗体代替血清抗体检测
效价 是 可行 的 。
２ ． ２ 卵 黄 抗 体 的 特 点
卵黄抗 体 的优 点有很 多 。第 １ ，卵黄抗 体 的产量 很 高 。产 蛋母 鸡经特异性抗原免疫后，可以产生持久性应答反应 ，抗体效价可 维持 数月 之久 ；第 ２ ，卵黄抗 体耐 酸 、耐 碱 、耐热 ，理 化性 质非 常 稳定 ；第 ３ ，卵黄 抗体 免 疫 测定 中的干 扰 小 ，Ｉ ｇ Ｙ Ｔ ［ ＜ 会 和 免疫 球 蛋 Ｉ ｇ Ａ 和Ｉ ｇ Ｇ 结 合 ，可 避免 这些 因素 所造 成假 阳性 或假 阴性 结果 ； 第 四 ，简单方 便 ，从 卵黄 中检 测Ｉ ｇ Ｙ 比从 动物 血清 中检 测抗 体更 加 方便 ，也 免去 了免疫 动物采 血 的痛苦 。
免 疫 效果 、了解雏 鸡母 源性 抗 体水 平 的 高低 以便 建 立科 学 的 免疫 计 划 ，确定 是 否 实施 强 化免 疫 等 ，常 规 的监 测方 法 是 检测 免 疫家 禽 血 清 中 的免 疫抗 体 水平 。但 是这 种 方法 的弊端 在 于 ，在 采 血过 程 中容 易使 家 禽 受到 惊 吓 ，引 起应 激 反 应 ，使 产蛋 鸡 的产 量 急剧 下 降 ，甚 至导 致 家 禽死 亡 ，给 养 殖 户造 成不 必 要 的经 济 损失 ，而 且 采 血 过 程也 比较 麻 烦 ，采 血 中 如果 稍 微不 注 意造 成 血 液污 染或 者溶 血等 情况 发生 ，会影 响检 测结 果 的准 确性 。
中国畜 牧兽医 文摘 ２ ０ ｌ ５ 年 ３ １ ＠ 第ｌ ０ 期
叁
兰
禽流感血清抗体和 卵黄抗体 的比较研 究
何贤海
（ 贵州省德江 县农牧科技局动物疫病预防控制 中心，贵州德江 ５ ６ ５ ２ ０ ０ ）
安徽农业大学攻克鸭黄病毒防治关键技
狂犬病的实验室诊断
Ｇ Ｉ Ｃ Ａ ） 在病 原及 小 分子 物质 检 测领 域 的快 速 发 狂 犬 病 的 实 验 室诊 断／ 姚真蓝 （ 南 京农 业 大 学 动 物 医 学院 胶体 金 免疫 层析 法 （ 动 物 医学 系 江 苏南 京 ２ １ ０ ０ ９ ５ ） ，黄 国庆 ／ ／ 国外畜 牧学 展， 近年 还 出现 了该技 术用 于狂 犬 病抗 原检 测 的研 究 ， 且 取得 了较 好 效果 。此外 ， 小 鼠颅 内接种 （ Ｍ Ｉ Ｔ ） 和细 胞培 养分 离 （ Ｃ ｌ Ｔ ） 除了可 用 （ 猪 与禽 ） ． － ２ ０ １ ２ ， （ ７ ）． － ４ ９ ～５ ｌ
［ ３ 】 崔华敏 ，董兵 ，张芳 ，等． 河北部分地 区鸭新城 疫血清学调查［ Ｊ ］ ． 中国兽 医杂志 ，２ ０ ｏ ８ ，４ ＿ ４（ ７）：４ ０ — ４ １ ． ［ ４ 】 吴 峻华 ，福州市部分 鸭场新城疫感染 情况的调查 ［ Ｊ ］ ． 养 禽与禽病 防治 ，２ ０ ｏ ８ 。 （ ２ ）：４ ２ — ４ ３ ．
还可单 独作 为诊 断手 段， 或 者配 合Ｆ Ａ Ｔ 进行 病 狂犬 病 是 由弹状 病 毒科 、狂犬 病 病毒 属 的嗜 神经 病 毒 引起 的 于 狂犬病 病毒 培养 外，
一
种 世 界 性 的人 兽共 患病 。一 旦 出现 症 状 ， 病 死 率近 １ ０ ０ ％ 。 由于 原 诊 断 。新鲜 材料 得 到 的单份 阴性 结果往 往 需要 进 行 以Ｍ Ｉ Ｔ 和Ｃ Ｉ Ｔ
表现临 床症状 。但 自１ ９ ９ ７ 年 以来 ，国内不断 有水禽 感染Ｎ Ｄ Ｖ 发病 的 参 考 文 献 报道 ，特别近 两年来 某些鸭 源Ｎ Ｄ Ｖ 强 毒株对 鸭具有 明显的致 病性 。 ［ １ 】 陈伯伦． 鸭病【 Ｍ ］ ． 北京 ：中国农业 出版社 ，２ ０ ０ ８ ． ２ ２ ］ 周锦萍 ，孙 泉云 ，刘佩红 ，等 ． 上海地区近几年 鸭新发病毒性传 用禽 副黏病 毒 Ｉ 型 （ Ｎ Ｄ） 抗 原对 鸭 的Ｎ Ｄ 抗 体进 行检测 ，可以较好 『 染病的血清学调查 ［ Ｊ 】 ． 中国家禽． ，２ ０ ０ ５ ，２ ７（ ３ ）：９ － １ １ ． 的反 映鸭Ｎ Ｄ Ｖ 感染或 疫苗免 痰 隋况 ，这对 鸭新城疫 的研究 具有一定 的意义 。从 检测 结果 看 ，云南 省部 分 鸭场 的Ｎ Ｄ 抗 体 阳性 率较 高 ， 达６ ２ ． ８ ６ ％，检测 样 品 的 阳性率 ５ ０ ． ８ ９ ％，这 与 国 内周 锦 萍 ］ 、崔华 敏 ］ 、吴 峻华 ［ ４ 等在 上海 、河北 、福 州等 地对 鸭群 的Ｎ Ｄ Ｖ 血清 学调
鸭禽流感疫苗免疫程序研究报告
鸭禽流感疫苗免疫程序研究报告作者：杨峻罗青平艾地云罗玲王红琳张蓉蓉温国元张腾飞汪宏才邵华斌来源：《湖北农业科学》2014年第21期摘要：为了科学制定鸭的禽流感疫苗免疫程序，进行了以下三方面的试验：①不同品种雏鸭母源抗体消长情况测定。
结果表明，5～7日龄雏鸭AI-HI抗体可维持较高水平，15～17日龄下降至4.0log2以下。
②疫苗首免后抗体检测。
结果表明，鸭首次免疫后2周可测出AI-HI 抗体，4周时达到高峰;抗体水平持续4周后开始下降。
肉鸭免疫一次抗体水平差异较大，不能完全预防禽流感的发生。
③肉种鸭及蛋种鸭免疫程序及抗体消长规律的测定。
结果表明，7～14日龄初免，60日龄二次免疫和120日龄加强免疫（三次免疫），种鸭的AI-HI抗体水平最高分别可达到9log2、11 log2，二次免疫后8个月其AI-HI平均抗体水平为5.6 log2，三次免疫后10个月其AI-HI平均抗体水平为7.6 log2以上。
关键词：鸭;禽流感;灭活疫苗;免疫程序中图分类号：S859.79;S858.32 ; ; ; 文献标识码：A ; ; ; 文章编号：0439-8114（2014）21-5213-04DOI：10.14088/ki.issn0439-8114.2014.21.042Immune Procedure of Avian inFluenza Vaccine for DuckYANG Jun， LUO Qing-ping， AI Di-yun， LUO Ling， WANG Hong-lin， ZHANG Rong-rong， WEN Guo-yuan， ZHANG Teng-fei， WANG Hong-cai， SHAO Hua-bin（Institute of Animal and Veterinary Science， Hubei Academy of Agricultural Sciences/Hubei Key Laboratory of Animal Embryo and Molecular Breeding， Wuhan 430064， China）Abstract： In order to scientifically make the immune procedure of avian influenza vaccine for duck， three tests including the detection of the variety of maternal antibody levels in different breeds， the antibody detection after first immunization， and the relationship of immune procedure and antibody levels variety were made. The results showed that the AI-HI antibody levels of 1 week old ducks were relative higher， and then dropped to 4 log2 or even lower at 15 to 17 days old. ;The AI-HI antibody in ducks was detected at 2 weeks after first immunization， and antibody level reached peak at four weeks after first immunization （4.8log2）. The antibody level was stable 4 weeks and then began to drop. The antibody levels in meat ducks had great difference after first immunization. AIV was not prevented completely. The AI-HI antibody level of breeding ducks reached to 9～11 log2 when the ducks got first immunization at 8 days old， the second immunization at 60 days old， and booster immunization were at 120 days old. The antibody level maintained at 6～9 log2 after 10 months.Key words： duck; avian influenza; inactived vaccine; immune procedure研究表明，水禽是禽流感病毒的天然宿主，禽流感病毒不仅可长期在其体内寄居，而且可通过其迁徙经消化道排毒污染水域而感染其他鸟类和哺乳动物[1]。