高等仪器分析实验荧光分光光度计的使用
荧光分光光度计的使用流程
荧光分光光度计的使用流程1. 准备工作在使用荧光分光光度计之前，需要进行一些准备工作。
以下是一些必要的准备事项： - 确保荧光分光光度计已经连接到电源，并且通电正常。
- 检查荧光分光光度计的灯泡是否正常工作，灯泡是否需要更换。
- 确保荧光分光光度计的样品室是干净的，没有任何杂质或污垢。
2. 打开荧光分光光度计软件打开荧光分光光度计的软件，通常会有一个图形界面供用户使用。
以下是打开软件的步骤： 1. 双击荧光分光光度计软件的图标，启动软件。
2. 在软件界面上找到并点击“打开”按钮，选择要分析的样品文件。
3. 样品的输入在荧光分光光度计软件中，需要输入样品的相关信息。
以下是样品输入的步骤：1. 在软件界面上找到并点击“新建样品”按钮，创建一个新的样品文档。
2. 在样品文档中填写样品的名称、浓度、体积等信息。
4. 调整荧光分光光度计的参数荧光分光光度计的参数调整非常重要，直接影响到后续的实验结果。
以下是参数调整的步骤： 1. 在软件界面上找到并点击“参数设置”按钮，进入参数设置界面。
2. 根据实验要求，调整荧光分光光度计的激发波长、发射波长、积分时间等参数。
5. 测量样品的荧光信号完成参数调整后，可以开始测量样品的荧光信号了。
以下是测量样品荧光信号的步骤： 1. 将准备好的样品放入荧光分光光度计的样品室中。
2. 在软件界面上点击“开始测量”按钮，荧光分光光度计开始记录样品的荧光信号。
3. 等待一段时间后，荧光分光光度计会自动停止测量。
6. 分析和保存实验结果测量完成后，需要对实验结果进行分析和保存。
以下是实验结果分析和保存的步骤： 1. 在软件界面上找到并点击“数据分析”按钮，进入数据分析界面。
2. 根据需要，选择相应的数据分析方法，进行实验结果的分析。
3. 点击“保存”按钮，将实验结果保存到指定文件夹中。
7. 清洁和关闭荧光分光光度计实验结束后，需要进行荧光分光光度计的清洁和关闭。
以下是清洁和关闭荧光分光光度计的步骤： 1. 关闭荧光分光光度计软件，确保所有操作已保存。
分光光度计使用方法
分光光度计使用方法一、仪器准备1.打开分光光度计电源，并等待仪器进行自检和初始化。
2.根据需要选择合适的波长范围，并设置好光源的强度。
二、校准1.使用空白试剂（比如去离子水）进行校准。
2.将空白试剂放入样品池中，关闭池盖，通过界面上的按钮选择“空白”模式。
3.调节光源的强度，使得光学通道中没有样品的情况下，检测到的光强度为基准值。
三、样品处理1.准备好带有试剂的样品，将样品移至样品池或比色皿中。
2.确保所有试剂和样品都处于相同的温度和搅拌状态下。
3.注意避免样品与池壁或污染物接触，以免影响测量结果。
四、测量1.将样品池或比色皿插入光度计的样品槽中，并关闭池盖。
2.通过界面上的按钮选择所需测量的波长。
3.选择测量模式，通常有吸光度测量和浓度测量两种模式。
根据实际需求选择。
-吸光度测量模式：用于直接测量样品的光吸收情况，通常用于检测样品的纯度或含量检测。
-浓度测量模式：通过预先建立吸光度与浓度的标准曲线，来计算样品的浓度。
五、数据处理1.根据测量所得的吸光度值和浓度标准曲线，计算出样品的浓度。
2.将结果记录并保存，可以在计算机上进行进一步的数据分析和绘图。
六、维护和保养1.定期清洁光度计的样品槽，以确保准确测量。
2.注意定期校准仪器，校准周期可根据实验室标准进行调整。
总结：分光光度计是一种非常常用的实验仪器，可以用于各种领域的分析检测。
使用分光光度计时，需要准备好试剂和样品，并正确设置仪器的波长范围和光源强度。
在进行测量前需要进行校准，并注意样品的处理和池壁的清洁。
通过选择合适的测量模式和数据处理方法，可以得到准确的浓度或吸光度值。
使用完成后，需要定期进行维护和保养，以保证仪器的正常工作和准确性。
高等仪器分析实验-荧光分光光度计的使用
高等仪器分析实验(荧光分光光度计的使用)实验目的1．掌握荧光分光光度计的基本使用方法：扫描激发光谱，发射光谱，荧光强度，同步荧光光谱2．掌握荧光定量分析方法实验原理荧光分光光度计是常用的光学仪器，在定量分析，样品的光谱性质表征时经常用到。
荧光分光光度计的基本功能是完成激发光谱，发射光谱的扫描，进行相对荧光强度的测量。
从激发光谱可以获得样品激发态能级的分布情况，用来选择定量分析的最佳激发波长。
从发射光谱可以知道样品基态能级的分布情况，用来选择定量分析的最佳发射波长。
荧光定量分析法的方法与紫外可见吸收光谱法类似，但需要注意荧光强度值是相对值，同一样品，同一仪器在不同仪器参数时获得的荧光强度是不同的。
只有当测量时仪器参数完全相同时，不同样品荧光强度的相互比较才有意义。
与紫外可见吸收光谱类似，分子荧光光谱也是分子光谱，其谱峰较宽，特征性不是很强，谱峰重叠现象比较普遍。
为了减小谱峰宽度，避免谱峰重叠，提高分析的选择性，在定量分析时常采用同步荧光的方法进行。
同步荧光是同时扫描荧光分光光度计的激发和发射单色仪得到的谱图，通过选择合适的扫描参数，可以使样品谱峰变窄，并避免不同组份的谱峰重叠，得到比较好的分析效果。
同步荧光扫描有固定波长同步荧光法，固定能量同步荧光法，可变角同步荧光法，导数同步荧光法等，其中以固定波长同步荧光法最为常用。
扫描已知样品荧光激发和发射光谱时，可先根据参考波长来进行。
扫描未知样品的荧光光谱，可以将发射波长先每隔一定波长（例如50nm）扫描一个激发光谱。
对比不同位置的激发光谱，从最强的激发光谱中选择最大激发波长，设定该波长为激发波长，扫描发射光谱。
再从新得到的发射光谱中找到最大发射波长，在最大发射波长处重新扫描激发光谱。
扫描样品激发光谱和发射光谱时，需要注意：扫描激发光谱时，激发单色器扫描范围的长波端一般应小于发射波长；扫描发射光谱时，发射单色器扫描范围的短波端应大于激发波长。
否则在发射光谱（激发光谱）中与激发波长（发射波长）波长相同的位置会出现很强的散射谱峰，这不是样品的荧光引起的，应注意区分。
荧光分光光度计操作规程
荧光分光光度计操作规程
一、开机
1、确保分光光度计与个人电脑是通过随机配带的USB数据线连接
2、将电脑打开，打开荧光分光光度计的电源开关。
3、检查表示氙灯是否被点着及仪器处于工作状态的批示灯是亮的。
4、双击桌面上荧光分析软件快捷图标。
5、等待程序初始化，系统将自检，如果出现错误提示，立即关闭荧光分光光度计，过15
分钟再重新启动。
二、关机
1、选择文件菜单里的“关闭”命令，点击“是”终止联机。
2、出现是否关机的图示，点击“是”关灯并退出荧光分析软件。
3、等氙灯充分冷却后再关荧光分光光度计。
三、操作
1、创建一个分析方法
从工具菜单中，选择配置命令来设置分析条件。
扫描类型选择波长扫描，根据标准再设定扫描模式、数据模式、发射波长、激发波长等参数。
2、测量样品
选择好测量方法后，进入波长测量界面，将样品入入指定的样品槽，点击菜单工具－扫描进行测量或点击扫描按钮进行测量，如果中途暂停测量，点击工具条上的停止按钮。
扫描完毕后，图谱处理窗口或打印窗口将会自动弹出。
峰值表将显示峰数、峰的起始位置、峰的终止位置、峰高值、谷位置、谷值、半峰宽等信息。
3、谱图处理
对样品和标准按照同样的方法进行处理，并对数据结果进行打印。
分光光度计操作说明
分光光度计操作说明分光光度计是一种测定样品溶液浓度和反应性质的仪器，广泛应用于医药、生化、环境和工业等领域。
本文将介绍分光光度计的操作方法，包括准备工作、测量步骤和数据解析等。
一、准备工作1、打开电源，接通仪器，进行前置滤器预热，选择所需的光源和检测器，调整波长选择器至想要的波长。
2、选择样品，在仪器背面的样品仓（0.5ml或1.5ml）中加入样品溶液，盖紧盖子。
3、选择参比溶液，在仪器另一个样品仓中加入参比溶液，并盖紧盖子。
4、根据总体路径长度选择测量池品质，将测量池放于样品仓中，排走空气泡。
5、打开机门使光波进入，调整光程长度，使其透光，保证测量精度和精确度。
二、测量步骤1、调零：按下ZERO键，仪器进行调零，在没有样品和参比溶液的情况下，按操作键零点校准，确保每次测量的精准性。
2、预扫描：本步骤主要是用于确定样品光谱特性。
选择扫描范围(一般是200-800 nm)，以及所设的波长间隔，点击预扫描按钮得出纯品溶液的吸光度光谱图以及信号波形，对分析样品光谱的信噪比/背景的测量基线进行预处理.3、样品光谱测量：在预扫描结果的基础上，调整波长选择器至想要的波长，测量样品的吸光度，保存数据。
4、参比溶液光谱测量：同时测量参比溶液的吸光度，保存数据。
5、空白校正：计算每个样品的净吸光度差，通过参比溶液的吸光度减去背景吸光度的方式，使最小的净吸光度在空白校正后为零。
6、浓度计算，由已知浓度的标准样品得出标准曲线，然后由电脑根据吸光度值自动计算尚未知道的样品浓度。
三、数据解析测量得到的数据可用于确定样品的溶液浓度，计算方法是根据表格或图形中给出的标准曲线来计算。
在此过程中，需要根据不同实验的要求进行不同的数据处理，例如，可以进行半定量分析、多元素分析和标记物分析等。
其他需要注意的事项：1、用干净、无静电的棉布或纸巾擦拭测量池，防止表面的污垢或污染物对测量结果产生影响。
2、在测量之前，确保测量池中没有气泡或杂质，以避免误差的出现。
荧光分光光度计操作注意事项介绍 光度计操作规程
荧光分光光度计操作注意事项介绍光度计操作规程荧光分光光度法是依据物质的荧光谱线位置及其强度进行物质鉴定和含量测定的方法。
该方法借助不同物质吸取的紫外—可见光波长和发射光的波长也不同的特点，通过将待测物产生的光谱与标准物质光谱进行比较，做到对待测物定性、定量的分析。
荧光分光光度计是一种用于荧光分光光度法检测待测物的光学仪器，具有灵敏度高、选择性好、样品用量少、操作简便等特点。
今日，我就大家了解一下这种仪器使用时的注意事项。
一、初次使用无论是什么仪器，初次使用时都应当认真的阅读使用说明书，并依据使用者及检测目标的情况，对系统及配置进行调整设置。
二、试验环境由于荧光分光光度计适合在试验室环境中作荧光分光的分析测试，所以，假如需在其他生产或施工现场使用之时，现场的工作环境应当基本符合试验室的环境要求。
除此之外，假如要移动荧光分光光度计，那么在移动的过程中需要使用仪器的原包装来进行包装运输。
三、排热风扇荧光分光光度计每次在开机之后，不要焦虑焦虑焦急进行其他各种分析试验，而应当先确认荧光分光光度计侧面的排热风扇运转正常之后才能开始进行试验，以确保仪器能够正常工作。
如发觉排热风扇有故障，则要立刻停机对其进行检修。
四、光电倍增管为了保护光电倍增管，在使用荧光分光光度计时要注意当仪器的增益，假如增益较高则不能让强光进入样品室内。
在进行未知浓度试样测试的时候，要注意增益应当从低位向高位渐渐设置。
需要注意的是，无论是什么仪器，对样品进行讨论的时候，都应当严格依照说明要求进行。
只有珍惜本身的工具，工具才可以给我们牢靠的检测结果。
原子吸取分光光度计的安装要求原子吸取分光光度计是通过蒸气相中被测元素的基态原子对其原子共振辐射的吸取强度来测定试样中被测元素的含量。
被广泛的应用于地质、冶金、机械、化工、农业、食品、轻工、生物医药、环境保护、材料科学等各个领域。
那么在安装原子吸取分光光度计有哪些要求呢？下文为您讲解：1、安装环境：①安装环境相近应无强电磁场和强热辐射源。
高等仪器分析实验-荧光分光光度计的使用
高等仪器分析实验(荧光分光光度计的使用)实验目的1．掌握荧光分光光度计的基本使用方法：扫描激发光谱，发射光谱，荧光强度，同步荧光光谱2．掌握荧光定量分析方法实验原理荧光分光光度计是常用的光学仪器，在定量分析，样品的光谱性质表征时经常用到。
荧光分光光度计的基本功能是完成激发光谱，发射光谱的扫描，进行相对荧光强度的测量。
从激发光谱可以获得样品激发态能级的分布情况，用来选择定量分析的最佳激发波长。
从发射光谱可以知道样品基态能级的分布情况，用来选择定量分析的最佳发射波长。
荧光定量分析法的方法与紫外可见吸收光谱法类似，但需要注意荧光强度值是相对值，同一样品，同一仪器在不同仪器参数时获得的荧光强度是不同的。
只有当测量时仪器参数完全相同时，不同样品荧光强度的相互比较才有意义。
与紫外可见吸收光谱类似，分子荧光光谱也是分子光谱，其谱峰较宽，特征性不是很强，谱峰重叠现象比较普遍。
为了减小谱峰宽度，避免谱峰重叠，提高分析的选择性，在定量分析时常采用同步荧光的方法进行。
同步荧光是同时扫描荧光分光光度计的激发和发射单色仪得到的谱图，通过选择合适的扫描参数，可以使样品谱峰变窄，并避免不同组份的谱峰重叠，得到比较好的分析效果。
同步荧光扫描有固定波长同步荧光法，固定能量同步荧光法，可变角同步荧光法，导数同步荧光法等，其中以固定波长同步荧光法最为常用。
扫描已知样品荧光激发和发射光谱时，可先根据参考波长来进行。
扫描未知样品的荧光光谱，可以将发射波长先每隔一定波长（例如50nm）扫描一个激发光谱。
对比不同位置的激发光谱，从最强的激发光谱中选择最大激发波长，设定该波长为激发波长，扫描发射光谱。
再从新得到的发射光谱中找到最大发射波长，在最大发射波长处重新扫描激发光谱。
扫描样品激发光谱和发射光谱时，需要注意：扫描激发光谱时，激发单色器扫描范围的长波端一般应小于发射波长；扫描发射光谱时，发射单色器扫描范围的短波端应大于激发波长。
否则在发射光谱（激发光谱）中与激发波长（发射波长）波长相同的位置会出现很强的散射谱峰，这不是样品的荧光引起的，应注意区分。
分光光度计的操作规程
分光光度计的操作规程
《分光光度计操作规程》
一、目的：
为了正确、安全地操作分光光度计，保证实验数据的准确性和可靠性。
二、操作步骤：
1. 打开分光光度计电源，并预热30分钟。
2. 打开分光光度计软件，进行系统自检，并调整仪器为待测物质的最佳波长。
3. 调整仪器的光谱扫描参数，包括扫描范围、扫描速度等。
4. 使用洁净的玻璃仪器盖，将待测溶液倒入比色皿中，放入分光光度计样品舱。
5. 调节光路长度，使得样品舱内的溶液透光度最大。
6. 在软件中启动光谱扫描，记录扫描结果。
7. 将待测溶液倒出，用纯水清洗比色皿和样品舱，然后用吸水纸吸干。
8. 关闭分光光度计软件，关闭仪器电源，清洁并整理工作台面。
三、注意事项：
1. 操作人员必须穿戴实验服和实验手套，避免对待测溶液的污染。
2. 切勿将溶液倒入分光光度计内部，防止对仪器造成损坏。
3. 操作过程中要注意光谱扫描的速度和范围，避免错过待测物质的吸收峰。
4. 定期对分光光度计进行维护保养，保证仪器的稳定性和准
确性。
四、总结：
分光光度计是一种精密的仪器，操作规程的严格执行可以确
保实验数据的准确性和可靠性。
操作人员应严格按照规程进行操作，同时定期对仪器进行维护保养，以保证其长期稳定运行。
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高等仪器分析实验(荧光分光光度计的使用)
实验目的
1．掌握荧光分光光度计的基本使用方法：扫描激发光谱，发射光谱，荧光强度，同步荧光光谱
2．掌握荧光定量分析方法
实验原理
荧光分光光度计是常用的光学仪器，在定量分析，样品的光谱性质表征时经常用到。
荧光分光光度计的基本功能是完成激发光谱，发射光谱的扫描，进行相对荧光强度的测量。
从激发光谱可以获得样品激发态能级的分布情况，用来选择定量分析的最佳激发波长。
从发射光谱可以知道样品基态能级的分布情况，用来选择定量分析的最佳发射波长。
荧光定量分析法的方法与紫外可见吸收光谱法类似，但需要注意荧光强度值是相对值，同一样品，同一仪器在不同仪器参数时获得的荧光强度是不同的。
只有当测量时仪器参数完全相同时，不同样品荧光强度的相互比较才有意义。
与紫外可见吸收光谱类似，分子荧光光谱也是分子光谱，其谱峰较宽，特征性不是很强，谱峰重叠现象比较普遍。
为了减小谱峰宽度，避免谱峰重叠，提高分析的选择性，在定量分析时常采用同步荧光的方法进行。
同步荧光是同时扫描荧光分光光度计的激发和发射单色仪得到的谱图，通过选择合适的扫描参数，可以使样品谱峰变窄，并避免不同组份的谱峰重叠，得到比较好的分析效果。
同步荧光扫描有固定波长同步荧光法，固定能量同步荧光法，可变角同步荧光法，导
数同步荧光法等，其中以固定波长同步荧光法最为常用。
扫描已知样品荧光激发和发射光谱时，可先根据参考波长来进行。
扫描未知样品的荧光光谱，可以将发射波长先每隔一定波长（例如50nm）扫描一个激发光谱。
对比不同位置的激发光谱，从最强的激发光谱中选择最大激发波长，设定该波长为激发波长，扫描发射光谱。
再从新得到的发射光谱中找到最大发射波长，在最大发射波长处重新扫描激发光谱。
扫描样品激发光谱和发射光谱时，需要注意：扫描激发光谱时，激发单色器扫描范围的长波端一般应小于发射波长；扫描发射光谱时，发射单色器扫描范围的短波端应大于激发波长。
否则在发射光谱（激发光谱）中与激发波长（发射波长）波长相同的位置会出现很强的散射谱峰，这不是样品的荧光引起的，应注意区分。
如果样品不是真正的溶液，或包含有不溶颗粒物，或是固体样品，如果扫描范围较宽时，通常在发射光谱（激发光谱）中激发波长（发射波长）整数倍波长的位置也会出现弱的散射谱峰，称为倍频峰，在分析光谱情况时也应注意区分。
对散射倍频峰或样品荧光峰，可通过适当改变激发波长来进行区分，散射倍频峰的位置会随着激发峰位置的变化而变化，而荧光峰位置通常是不变的。
如果倍频峰对样品的测量有干扰，可使用合适的滤光片消除倍频峰。
合适的消倍频峰滤光片应可以使发射光透过，而阻挡激发光不能透过。
如果样品荧光较弱，使用高灵敏度档测定时，通常会观察到溶剂的拉曼峰，也应注意与样品荧光进行区分。
拉曼峰的位置也与激发波长有关，同时会随着激发波长的变化而变化。
其位置估算方法：?laman=1/(1/?ex-?H2O/107),其中波长单位为nm，?H2O为溶剂的红外吸收波长，单位为波数，溶剂为水时，主要的红外吸收是O-H伸缩振动，波长在3300波数。
狭缝的选择：激发和发射狭缝通常并不要求严格一致，为获得较好的灵敏度和准确反应谱峰形状，测定激发光谱时，选用较大的发射狭缝和较小的激发狭缝是比较好的。
而测定发射光谱时则恰好相反。
灵敏度档的选择：灵敏度档与仪器中光电倍增管的放大倍数有关，对荧光比较弱的样品，应选择灵敏度较高的档位，反之亦反。
但注意不同档位之间的荧光强度值没有确定的换算关系，不能相互比较。
进行定量分析时，所有样品必须在同样的狭缝和灵敏度档位测量。
仪器及试剂
970MC荧光分光光度计
缓冲溶液：10-2mol/L Na2HPO4-NaOH缓冲溶液，pH=11-12
1-萘酚储备液：10?g/ml
实验内容
1.溶液配制
1-萘酚溶液：取一定量10?g/ml 1-萘酚储备液到25mL容量瓶中，加入3mL pH=11-12缓冲溶液，用蒸馏水稀释到刻度。
得到1-萘酚浓度为2.0?g/ml的标准溶液。
2.1-萘酚荧光光谱的扫描
分别以400，450，500纳米为发射波长，测量样品的激发光谱，初步找到样品发光最强的激发和发射位置，然后以最佳激发波长扫描发射光谱，再从中找到最佳发射
波长扫描激发光谱。
3.同步荧光光谱的扫描
分别以??＝60，90，120，150纳米为波长差扫描样品的波长固定同步荧光光谱。
观察光谱的区别和变化，说明同步荧光和普通激发和发射光谱的区别及如何选择最佳的??。
4.观察水中杂质的荧光
分别取自来水，去离子水，二次蒸馏水，饮用纯净水，以激发波长370纳米，发射范围380－600纳米，测定样品的发射光谱，观察光谱的情况。
5.观察荧光光谱中的瑞利散射
取去离子水，1-萘酚样品，分别按如下条件扫描发射光谱，观察不同样品中拉曼光谱的差别
6.观察荧光光谱中的拉曼散射
取去离子水，1-萘酚样品，分别按如下条件扫描发射光谱，观察不同样品中拉曼光谱的差别
7.狭缝宽度对样品荧光强度和谱峰形状的影响
取1-萘酚样品，固定激发波长为332纳米，发射范围350-600纳米，调整不同狭缝宽度，观察荧光强度和发射光谱的变化。
8.灵敏度档次对荧光强度和谱峰形状的影响
取1-萘酚样品，固定激发波长为332纳米，发射范围350-600纳米，固定激发和发射狭缝宽度均为5纳米，调整不同的灵敏度档次，观察荧光强度和发射光谱的变化。
9.荧光光谱仪的稳定性
取1-萘酚样品，固定激发波长为332纳米，发射波长为460纳米，固定激发和发射狭缝宽度均为5纳米，灵敏度档次为？，选择动力学扫描时间为5分钟，时间间隔为0.5秒，扫描样品的荧光强度的变化。