F-7000荧光分光光度计使用操作步骤解析
分光光度计使用步骤方法
分光光度计使用步骤方法
1. 打开分光光度计前，先检查仪器部件是否齐全并处于良好状态，确保仪器正常运行。
2. 校准分光光度计，将一定浓度的标准溶液放入比色皿中，按照仪器使用说明进行调整，直至光谱分布符合理论曲线，光度值稳定。
3. 准备样品溶液：将待测的溶液加入比色皿中，液面不能超过比色皿的两侧刻度线。
4. 选择适当的波长：根据测量所需的吸收波长，调节分光光度计的波长选择器。
5. 调整路径长度：使用样品比色皿和纯水比色皿，先针对纯水比色皿记录一个基准值，然后换成样品比色皿，调节路径长度，直至读数稳定。
6. 测量样品吸光度：将已校准并调整好的分光光度计设置在待测波长上，置入待测样品比色皿，即可测量吸光度，并记录数据。
7. 完成测量后，关闭仪器并彻底清洗，确保干净整洁，以便下次使用。
根据实际应用需要，如果需要进行更加精细的测量，可以再进行一些控制步骤。
F-7000_简易操作(中)
日立F-7000荧光分光光度计简易操作步骤<一>开机顺序：（1）首先接通电脑及打印机电源，Win XP操作界面开始建立。
（2）然后接通光度计左侧电源开关（POWER）约5秒钟后主机右上方绿色氙灯指示灯点亮，表示氙灯已经启辉工作。
（3）点击电脑屏幕上荧光分析快捷框，进入仪器操作界面。
<二>关机顺序：（4）使用仪器操作软件退出操作系统并关闭氙灯。
（5）保持主机通电10分钟以上最后关闭主机电源开关。
（目的是让灯室充分散热）<三> 波长扫描的简易操作：（Wavelength Scan）点击快捷栏“Method”后，立即显示了分析方法（Analysis Method）的五个重叠界面，分别为“常规”（General），“仪器条件”（Instrument），“模拟画面”(Monitor)，“处理”(Processing)，“报告”(Report)。
下面详细介绍每个界面：（1）General （常规）*Measurement（测量方式）--------选择Wavelength （波长扫描）*Operator （操作者名）---------键入操作者性名*Insturment (仪器型号) ----------自动给出*Sampling (进样器类型) -------选用自动进样器后该项自动指定*Comments (注释表)-----------可输入简单注释说明*☐ Use sample table（使用样品表）----（2）Instrument （仪器条件）*Scan mode (扫描方式) ---------- Excitation (激发波长扫描)Emission（发射波长扫描）Synchronous（同步扫描）*Data mode （数据方式）---------Fluorescence （荧光采集）Luminescence （发光采集）Phosphorescence（磷光采集）*EM WL （发射波长）------------输入范围0nm, 200nm～900nm*EX Start WL （激发起始波长）----输入范围200nm～890nm*EX End WL （激发终止波长）-----输入范围210nm～900nm* EX WL (激发波长)-------------输入范围0nm, 200nm～900nm*EM Start WL （发射起始波长）-----输入范围200nm～890nm*EM End WL （发射终止波长）-----输入范围210nm～900nm*Scan speed （扫描速度）-----------30,60,240,1200,2400,12000,30000,60000nm/min八挡可选（磷光扫描仅有三挡：30,60,240nm/min）*Delay （延迟时间）----------输入范围0～9999秒（重复测量时仅对第一次测量有效）*EX Slit （激发单元狭缝）-----------1, 2.5 ,5, 10, 20,五挡可选。
分光光度计使用步骤方法
分光光度计使用步骤方法分光光度计是一种用于测定样品溶液中物质浓度或化学反应速率的仪器。
它通过测量溶液对特定波长的光的吸收或透射来实现这一目的。
下面将介绍分光光度计的使用步骤方法，帮助大家更好地掌握这一实验技术。
1. 准备工作。
在使用分光光度计之前，首先要进行一些准备工作。
确保仪器处于正常工作状态，检查光源、检测器和光路是否正常。
同时，检查样品室和比色皿是否清洁，避免杂质影响测量结果。
另外，还需要根据实验需求选择合适的光源和滤光片。
2. 样品处理。
将待测样品处理成透明的溶液，确保没有悬浮物或气泡。
如果需要测定多个样品，可以将它们分别装入比色皿中。
在进行测量之前，还需要将纯溶剂作为空白对照进行校准。
3. 调试仪器。
打开分光光度计的电源，待仪器稳定后，选择合适的波长和检测模式。
根据实验需求，可以选择吸光度测量、透射率测量或荧光测量等模式。
在选择波长时，需要根据待测物质的吸收峰进行调节，以获得最佳的测量效果。
4. 测量样品。
将准备好的样品装入样品室中，调节比色皿的位置，使其与光路对齐。
然后进行测量，记录下吸光度或透射率的数值。
如果需要进行多次测量，可以对样品进行搅拌或等待一段时间后再次测量，以获得更加准确的结果。
5. 数据处理。
在完成样品测量后，需要对数据进行处理。
根据实验目的，可以进行标准曲线法、内标法或对照比较法等不同的数据处理方法。
通过这些方法，可以计算出样品中目标物质的浓度或反应速率等参数。
6. 结果分析。
最后，根据测得的数据进行结果分析。
比较不同样品之间的测量结果，分析样品中目标物质的含量差异。
同时，还可以将实验结果与文献数据进行对比，验证测量结果的准确性。
总结。
分光光度计是一种非常重要的实验仪器，在化学、生物、环境等领域都有着广泛的应用。
掌握其使用步骤方法对于开展相关实验具有重要意义。
通过本文介绍的步骤，相信大家对分光光度计的使用有了更深入的了解，希望能够在实验中取得准确可靠的数据。
荧光分光光度计的操作流程
荧光分光光度计操作流程荧光分光光度计是一种用于测量物质荧光发射和吸收的仪器。
它通过激发样品中的分子发生电子跃迁，然后测量这些分子返回基态时所发射的荧光强度，从而确定样品中特定物质的含量。
以下是荧光分光光度计的操作流程步骤：步骤一：准备工作1.打开荧光分光光度计电源，并确保仪器正常启动。
2.检查仪器是否连接到电脑或其他数据采集设备，以便记录和保存实验数据。
3.清洁测量室并检查样品池是否干净，如果有杂质应先清洗。
步骤二：校准仪器1.进行荧光分光光度计的校准，以确保仪器测量结果的准确性和可靠性。
2.根据仪器使用说明书选择适当的参考物质（例如标准溶液）进行校准。
3.将参考物质放入样品池中，并在仪器上设置相应参数（例如激发波长、发射波长和积分时间）。
4.进行校准测量，并记录校准曲线。
步骤三：设置实验参数1.根据实验需要，确定激发波长和发射波长，并在仪器上进行设置。
2.设置积分时间，以确保荧光信号能够充分积累并获得准确的测量结果。
步骤四：样品处理1.准备样品溶液，并将其转移到荧光透明的样品池中。
2.确保样品池中无气泡或杂质，以避免对测量结果产生干扰。
3.根据实验需要，可以对样品进行稀释或前处理，以提高测量灵敏度和准确性。
步骤五：测量荧光信号1.将样品池放入仪器的样品室中，并关闭仪器的盖子以避免外界干扰。
2.启动荧光分光光度计并开始测量。
3.仪器会自动激发样品并记录返回的荧光信号。
4.测量完成后，仪器会显示荧光强度值或荧光曲线图。
步骤六：数据分析和处理1.将测量得到的荧光强度值或荧光曲线导出到电脑或其他数据处理软件中。
2.进行数据分析，例如计算样品中目标物质的浓度或比较不同样品之间的荧光强度差异。
3.根据实验需要，绘制荧光谱图、浓度曲线等图表以可视化展示结果。
步骤七：清洁仪器1.测量完成后，及时清洁样品池和仪器表面，避免样品残留对下次实验产生干扰。
2.关闭荧光分光光度计电源，并进行必要的维护和保养。
以上就是荧光分光光度计的操作流程步骤。
日立F-7000荧光分光度计的操作规程
日立F-7000荧光分光度计的操作规程F-7000 偏振稳态荧光光谱仪使用说明一、荧光光谱仪的开启开启电脑，待Win XP操作界面显示后，接通光度计左侧电源开关（POWER），约5秒钟后主机右上方绿色氙灯指示灯点亮，表示氙灯已经启动工作，预热15分钟。
二、基本操作步骤1．双击桌面快捷方式FL Solutions，进入仪器操作主界面；2．待仪器初始化完成后，点击快捷栏Method按钮后，立即显示了分析方法(Analysis method)的五个重叠界面，分别为“常规”（General），“仪器条件”（Instrument），“模拟画面”（Monitor），“处理”（Processing），“报告”（Report）五个界面；3．点击常规(General)按钮，在测量方式(Measurement)中选择实验所需的扫描方式；4．点击实验条件(Instrument)按钮，依次在扫描模式(Scan mode)中选择扫描模式；在数据模式(Data mode)中选择采集类型；并在相应位置设置扫描波长，扫描波长范围、扫描速度、电压（一般为400V）、响应时间（一般为Auto）、狭缝等参数。
点击“OK”按钮，返回仪器操作主界面；5．点击Sample按钮，编辑样品名称(Sample name)，勾选自动保存(Auto File)和选择文件存放路径(File name) 。
点击OK按钮，确认上述设置，返回主界面；6．取四面透光的石英比色皿，手指捏住上端棱角处，先用蒸馏水润洗3次，再用样品液润洗3次，然后装入约1cm高度的样品溶液，用擦镜纸吸干比色皿外壁；7．打开试样室盖，将比色皿放入试样槽中。
若为固体样品时，则放到专用的样品架上测定。
盖上试样室盖。
三、数据的采集及处理1．点击Measure按钮，开始数据采集；2．待检测自动完成，屏幕出现扫描图谱后，点击工具栏中功能(Utility)下拉菜单的Lamp off，关闭氙灯；3．点击Report按钮，打印报告；4．关掉图谱窗口，系统自动保存图谱文件。
Hitachi荧光分光光度计F-7000说明书
Diffraction grating
■ Stigmatic concave diffraction grating, mechanically ruled, resulting in a very bright monochromator of F-number 2.2.
Ruling engine. A dividing engine for ruling diffraction gratings, invented in 1880s by Henry Augustus Rowland of Johns Hopkins University. Compared to a holographic grating, mechanically ruled gratings have the following advantages: (1) Mirror-finished groove surface results in high diffraction efficiency. (2) Groove spacing required for aberration correction can be adjusted,
● High-resolution multi-stage slit with a resolution as small as 1nm
● Shutter control for minimizing sample deterioration
4
Fluorescent intensity Ca2+ (nM)
The acquisition of these data was made possible by the 3-D measurement function and high-speed scanning capability of the F-7000.
日立F-7000荧光分光光度计的使用
日立F-7000焚光分光光度计的规格见表1。
项目 灵敏度 最小样品量
表 1 F-7000的规格*
噪 音 ：背 景 噪 音 ：峰
内容
S / N 15,000#1 以上 8 0 0 以 上 #2
液 体 仅 需 〇.6 m L (采 用 标 准 1 0 m m 比 色 池 样 品 池 ） 粉 末 样 品 1 0 p L (采 用 微 量 粉 末 夹 具 ）
光度类型 光源
单色光比例控制 150 W 氙 灯 ，自 动 除 臭 氧
波长测定范围 (激 发 波 长 和 发 射 波 长 ）
2 0 0 至 750 n m ，且 为 零 阶 光 (采 用 选 装 检 测 器 可 扩 展 至 900 nm )
波长扫描速度 工 作 温 度 /湿度 F L Solution 程 序
分 为 3 0 、6 0 、2 40、1200、2400、12000、30000、60000 n m / m i n 温 度 〜 35°C
湿 度 〜 80% 标准软件
* 1:激 发 波 长 为 350 n m ，狭 缝 10 n m ，响 应 4 s * 2:激 发 波 长 为 350 rnn，狭 缝 5 n m ，响 应 2 s
基金项 目 ：广 东 省 研 究 生 教 育 创 新 计 划 项 目 （2017JG X M -M S0 4 ) ; 广 东 省 功 能 分 子 工 程 重 点 实 验 室 资 助 课 题 （2017kf0 5 ) 。
2018年第 4 期
分析仪器 Analytical Instrumentation
光经单色器(滤光片）处理后特定波长的光照射到样 品池中，激发样品中的荧光物质而发出荧光，荧光经 过 滤 过 和 反 射 后 ，光 信 号 被 光 电 倍 增 管 放 大 后 ，然后 以图或数字的形式在控制软件上显示出来（图 2)。
分光光度计的使用方法和步骤
分光光度计的使用方法和步骤分光光度计是一种常用的实验仪器，用于测量溶液中的吸光度。
它通过将入射光束分成不同波长的光，然后测量样品对不同波长光的吸收情况，从而得到溶液的吸光度。
下面将介绍分光光度计的使用方法和步骤。
一、准备工作1. 首先，确保分光光度计处于正常工作状态。
检查设备的电源是否接通，仪器是否正常通电。
2. 清洁光度计的光学部件，如反射镜、透射镜和样品室。
使用干净的纯棉布轻轻擦拭，避免刮伤光学部件。
二、调节仪器1. 打开分光光度计软件，并选择适当的测量模式，如吸光度、透射率或浓度。
2. 选择所需的波长范围。
根据样品的特性和实验要求，选择适当的波长范围。
3. 对仪器进行零点校准。
将空白试剂（如去离子水）放入样品室，并调节零点使吸光度为零。
4. 校准参比标准品。
放入已知浓度的标准品，调节仪器使吸光度与标准品对应的浓度相匹配。
三、测量样品1. 准备待测样品。
将待测样品制备好，确保样品的浓度适宜，并且不含干扰物质。
2. 将样品放入样品室。
打开样品室，将样品放入透明的石英或玻璃池中，确保样品室没有任何杂质。
3. 设置测量参数。
选择所需的测量模式和波长范围，并输入相关参数，如样品的浓度计算公式。
4. 进行测量。
关闭样品室盖子，点击开始测量按钮，仪器将自动开始测量样品的吸光度。
5. 重复测量。
为了保证测量结果的准确性，可以进行多次测量，然后取平均值作为最终结果。
四、数据处理1. 分析测量结果。
根据实验需要，对测量结果进行相应的数据处理和分析，如计算样品的浓度或透过率。
2. 记录和保存数据。
将测量结果记录下来，并保存在电脑或其他媒体上，以备后续分析和研究使用。
五、清洁和维护1. 关闭仪器。
在使用完毕后，及时关闭分光光度计的电源，避免浪费电能。
2. 清洁仪器。
使用干净的纯棉布轻轻擦拭仪器的外壳和光学部件，保持仪器的清洁和良好的工作状态。
3. 定期维护。
根据使用频率和实验要求，定期进行仪器的维护，如更换灯泡、校准仪器等。
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• ！！Attention：激发光终止与起始波长差不 小于10nm。
– 选择扫描速度“Scan Speed”（通常选 240nm/min）。 – 选择激发/发射狭缝（EX/EM Slit）。 – 选择光电倍增管负高压“PMT Voltage”（一 般选700V）。 – 选择仪器响应时间“Response”（一般选 Auto）。 – 选择光闸控制“□Shutter Control”打√，以使 仪器在光谱扫描时自动开启，而其他时间关闭。 – 选择“Report”设定输出数据信息、仪器采集 数据的步长（通常选0.2nm）及输出数据的起 始和终止波长（Data Start/End）。
图6 关闭运行软件
• （2）约十分钟后，关闭仪器主机电源，即按下仪 器主机左侧面板下方的黑色按钮（POWER）。 （目的是仅让风扇工作，使Xe灯室散热）。
•
（3）关闭计算机。
寻找激发波长的方法
测试前，激发波长未知，可以按照以下步骤寻找激发波长。
• 1. 首先在发射光谱设置中输入一个激发光波长数 值，如300 nm，设置发射光谱范围，通常起始值 大于激发波长，小于激发波长的二倍，得到一个 发射光谱，得到一个或几个发射波长的峰值 • 2. 重新在激发光谱中设置，输入步骤一中得到的 发射波长，设置激发光谱范围，通常起始值大于 发射波长的一半，小于发射波长，得到激发波长 的峰值 • 3. 按照步骤二的过程，将几个发射波长都输入， 得到几个激发波长 • 4. 重复步骤一的过程，输入步骤二，三中得到的 激发波长，观察发射光谱的峰形，确定发射光谱。
• ！！Attention：Data Start/End需与 “Instrument”选项中设置一致，否则所得 到的数据点会逐渐减少，而无法作图。
（4）参数设置好后，点击“确定”。
4、设置文件存储路径
（1）点击扫描界面右侧“Sample”
图4 。
，如
图4 Sample选项的界面
• （2）样品命名“Sample name”。
F-7000荧光分光光度计使用操作步骤
1、开机： （1）开启计算机。 （2）开启仪器主机电源。按下仪器主机 左侧面板下方的黑色按钮（POWER）。 同时，观察主机正面面板右侧的Xe LAMP 和RUN指示灯依次亮起来，都显示绿色。
2、计算机进入Windows XP视窗后，打开运 行软件（如图1）。 • （1）双击桌面图标 （FL Solution 2.1 for F-7000）。主机自行初 始化，扫描界面自动进入。 • （2）初始化结束后，须预热15-20分钟，按 界面提示选择操作方式。
(3)在“InstrumenFra bibliotek”选项中设置仪器参数和扫描参 数，如图3。
图3 Method--- “Instrument”选项设置界 面
主要参数选项包括：
– 选择扫描模式“Scan Mode”： Emission/Excitation/Synchronous（发射光谱、 激发光谱和同步荧光）。 – 选择数据模式“Data Mode”：
图1 FL Solution 2.1扫描界面
3、测试模式的选择：波长扫描（wavelength scan）
• (1) 点击扫描界面右侧“Method”
。
• (2) 在“General”选项中的“Measurement”选 择“wavelength scan”测量模式，如图2。
图2 Method--“General”选项的界面
Fluorescence/Phosphprescence/Luminescence(荧光测 量、磷光测量、化学发光)。
– 设定波长扫描范围。
• 扫描荧光激发光谱(Excitation)：需设定激发光的起始/ 终止波长（EX Start/End WL）和荧光发射波长（EM WL）; • 扫描荧光发射光谱(Emission)：需设定发射光的起始/ 终止波长（EM Start/End WL）和荧光激发波长（EX WL）; • 扫描同步荧光（Synchronous）：需设定激发光的起 始/终止波长（EX Start/End WL）和荧光发射波长 （EM WL）。
• （1）选中自动弹出的数据窗口，如图5。 • （2）选择“Trace” 操作。 • （3）上传数据。 ，进行读数并寻峰等
图5 扫描谱图窗口
3、关机顺序（逆开机顺序实施操作）：
• （1）关闭运行软件FL Solution 2.1 for F-7000， 弹出窗口，如图6。 • （2）选中“○Close the lamp，then close the monitor windows？”，打“⊙”。 • （3）点击“Yes”。窗口自动关闭。同时，观察 主机正面面板右侧的Xe LAMP指示灯暗下来，而 RUN指示灯仍显示绿色。
• （3）选中“□Auto File”， 打√。可以自动保存 原始文件和TXT格式文本文档数据。 • （4）参数设置好后，点击“OK”。
5、扫描测试
（1）打开盖子，放入待测样品后，盖上盖子。（请 勿用力）。
（2）点击扫描界面右侧“Measure” 捷键F4），窗口在线出现扫描谱图。
（或快
6、数据处理