可见光分光光度计的操作方法
分光光度计的使用方法
分光光度计的使用方法一、准备工作1.检查仪器：确保分光光度计处于正常工作状态，检查是否有损坏或故障。
2.准备试剂：根据实验需要，准备好所需的试剂溶液或样品。
二、进样1.打开仪器：打开分光光度计电源，并按照仪器说明书进行启动和预热。
2.选择光程：根据样品的吸收强度选择适当的光程，一般来说，如果样品浓度较高，可选择较短的光程，反之则选择较长的光程。
3.选择波长：根据实验需要选择适当的波长。
一般情况下，可根据物质的吸收峰选择最大吸收光的波长。
4.进样：将试剂溶液或待测样品倒入透明的样品池中，注意不要溢出或弄脏边缘。
三、调零1.调节零位：根据仪器说明书调节零位，通常为调整样品池为空极或将样品池填满纯溶剂。
确保读数为零或接近零。
2.稳定仪器：根据仪器要求等待一段时间，使仪器系统稳定。
四、测量样品1.设置参比：根据需要选择一个参考物质，可以是纯溶剂或者与待测样品相似的物质，通过与参考物质的比较，可以减少溶液浑浊、杂质等因素对测量结果的影响。
2.读取数据：进行光度值的测量。
读取数据的方法有两种：直接读取和保存数据。
直接读取：先置于比色池中参比物，调节至零位，再将样液置入比色池中，测量吸收度，读取显示屏上的数值。
保存数据：通过设置保存模式，将测量数据保存到仪器的内存中，后期可以通过导出功能将数据导出到计算机或者其他设备中进行分析和处理。
五、数据处理1.曲线绘制：若需要进一步分析和比较各组数据，可以根据测得的吸光度数据绘制吸光度-浓度曲线。
2.数据分析：根据实验需要进行吸光度数据的定量或定性分析，例如计算样品的浓度、比较各组数据等。
3.定量测定：根据标准曲线或者已知吸光度和浓度的关系，计算样品的浓度。
六、使用注意事项1.操作规范：按照仪器操作说明进行操作，避免操作失误。
2.避免污染：保持样品池的清洁，避免样品残留对后续测量的影响。
3.避免干扰：仪器放置在稳定的平台上，避免机械振动对测量结果的影响。
4.选择适当的波长：根据样品的物理、化学性质选择适当的波长进行测量。
可见分光光度计使用的基本步骤
可见分光光度计使用的基本步骤分光光度计是一种用于测量溶液中化合物浓度的仪器，它基于吸光度的原理进行测量。
下面将详细介绍分光光度计的使用基本步骤。
一、准备工作1.打开分光光度计电源，保证仪器正常工作。
2.确保分光光度计所在的工作台位于水平状态，以避免测量误差。
3.检查检测室，确保其中没有异物。
如有异物，应及时清除。
二、仪器校准1.将光度计调到“校准”模式，并选择所需的波长，一般为所测化合物的最大吸光峰。
2.将空白试剂（只含溶剂）或去离子水倒入比色皿中，将该比色皿放入纳克型反射比色皿架中。
3.按下“校准”按钮，待光度计读数稳定后，将该读数设为零点。
4.拿出空白试剂，将化合物溶液倒入比色皿中，将该比色皿放入纳克型反射比色皿架中。
5.按下“读数”按钮，待光度计读数稳定后，记录下该读数。
三、测量样品1.将所需样品溶液倒入比色皿中，将该比色皿放入纳克型反射比色皿架中。
2.选择所需的波长，一般为所测化合物的最大吸光峰。
3.按下“读数”按钮，待光度计读数稳定后，记录下该读数。
四、数据处理1.将校准时的读数减去空白试剂时的读数，即得到化合物溶液的吸光度。
2.使用比色皿中的溶液浓度和吸光度的标准曲线，可以根据比例关系计算出溶液中化合物的浓度。
五、仪器关机1.保存实验数据并断开与计算机的连接。
2.关闭分光光度计电源，将相关仪器部件归位。
分光光度计使用的基本步骤如上所述，下面将进一步详细介绍几个需要注意的事项。
1.校准时应选择空白试剂或去离子水，以保证零点读数的准确性。
2.在更换波长时，应注意待测溶液的最大吸光峰，并选择相应的波长。
3.比色皿应清洁干燥，以避免污染溶液和产生读数误差。
4.比色皿应在光度计指定位置放置，以免影响读数准确性。
5. 要根据实验需要确定内格宽度，一般范围为1nm至5nm。
6.在读数时要等待读数稳定后再记录，以保证数据的准确性。
7.使用分光光度计时，应避免与其他电子设备或光源的干扰，以免影响测量结果。
可见分光光度计使用方法
721可见分光光度计使用方法一、开机预热仪器在使用前应预热30分钟。
二、波长调整转动波长旋钮，并观察波长显示窗,调整至需要的测试波长。
注意事项：转动测试波长调100％T/0A后，以稳定5分钟后进行测试为好（符合行业标准及质监局检定规程要求）.三、设置测试模式按动“功能键”，便可切换测试模式.相应的测试模式循环如下：＊开机默认的测试方式为吸光度方式四、结果打印(721型无此功能)在得到测试结果后按动“打印”键便可打印结果（需外接标准串行打印机)。
五、光源切换（适用于752、754、755B型)因为仪器在紫外区和可见区使用不同的光源，所以需要波动光源切换杆来手动的切换光源.建议的光源切换波长为340nm，即200nm-339nm适应氘灯,340nm—1000nm使用卤素灯。
注意事项:如果光源选择不正确,或光源切换杆不到位，将直接影响仪器的稳定性。
特殊测试要求除外。
六、比色皿配对性仪器所附的比色皿是经过配对测试的,未经配对处理的比色皿将影响样品的测试精度.适应比色皿一套两只,供紫外光谱区使用，置入样品架时，两只石英比色皿上标记Q或箭头方向要一致。
玻璃比色皿一套四只，供可见光谱区使用.石英比色皿和玻璃比色皿不能混用，更不能和其他不经配对的比色皿混用.用手拿比色皿应握比色皿的磨砂表面，不应该接触比色皿的头光面，即透光面上不能有手印或溶液痕迹，待测溶液中不能有气泡、悬浮物，否则也将影响样品的测试精度。
比色皿在使用完毕后应立即清洗干净。
七、调T零(0％T)1。
在T模式时,将遮光体置入样品架（如图七所示），合上样品室盖，并拉动样品架拉杆使其进入光路。
然后按动“调0%T"键，显示器上显示“00。
0"或“—00.0”，便完成调T零，完成调T零后,取出遮光体。
注意事项：1。
测试模式应在透射比(T）模式;2。
如果未置入遮光体合上样品室盖，并使其进入光路便无法完成调T零;3。
调T零时不要打开样品室盖、推拉样品架；4。
紫外可见光分光光度计操作规程
1 仪器的使用1.1 将设备平稳地安置在一个通风，无阳光直射，干净整洁的房间内，空压机与设备保持一定的距离，最好分室而放。
1.2 打开箱盖，搁置好漏斗架，将集雾器上的硅胶管分别和对应的漏斗接好。
1.3 连接设备及空压机的电源。
打开仪器电源开关，面板低水位指示灯亮，在底部加蒸馏水至面板左边低水位指示灯灭为止。
1.4 安装喷雾系统，样品架，并将样品放置于样品架上。
1.5 在密封槽内加入适量蒸馏水，盖上箱盖。
在空气饱和器内加入蒸馏水或去离子水，水位高度以液面计上部4/5为准。
1.6 从盐水加入口加入配置好的浓度为5%的盐溶液。
1.7 检查各种管道的连接状况，将排雾管用软管引出使盐雾排出室外或下水道。
1.8 打开运转开关，按标准设定好试验温度及饱和器温度值，设定好试验时间。
1.9 将空压机的出气口与设备第一级调压阀连接，打开空压机电源充气。
打开连续开关，调节压力到规定范围：进气压力0.4~0.5mPa之间；喷雾压力0.07~0.17mPa之间。
（一般情况下无需调节）连续喷雾即开始运行。
.如需“间隙”喷雾时，关闭连续开关，打开间隙开关，分别设定好喷雾时间值、停喷时间值，间隙喷雾即开始运行。
1.10 试验结束设备自动停止，应先切断设备和空压机电源，待取出样品后，将饱和器、箱体及盐水箱中的水全部排掉，并用清洁的水将整个箱体冲洗干净。
1.11 仪器使用开始前和结束后，操作人员应对仪器的状态进行检查，并认真填写使用记录。
2 仪器的维护和保养2.1保持设备外观整洁，干净。
2.2试验完毕后清洗试验室内部，并将加热水槽内水排放使箱内清洁，尽量使试验箱处于干燥环境中。
2.3定期更换饱和器内存水。
若长久不做试验，打开饱和器将水放光。
2.4定期对空气压缩机加润滑油，并定期检查空气调节阀功能。
2.5长期未使用情况下重新开机做试验，应先对全部电气系统进行检查。
2.6控制面板上的的电器元件，如发生故障需要调换，应在厂家的指导下进行，以免造成不必要的麻烦。
可见分光光度计使用的基本步骤
可见分光光度计使用的基本步骤一、仪器准备1. 确保可见分光光度计处于稳定的工作状态，检查电源是否正常连接，并确保仪器内部的光源和检测器没有损坏。
2. 清洁仪器的光路系统，包括光源、单色器、样品室和检测器，以确保准确的测量结果。
3. 使用标准溶液校准仪器，确保测量的准确性和可靠性。
二、样品处理1. 准备待测样品，并确保样品溶解彻底，避免出现悬浮物或沉淀物影响测量结果。
2. 如果样品浓度过高，可以适当稀释以在可见光范围内进行测量。
3. 样品应尽量避免与外界光源接触，以防止光散射和吸收的影响。
三、测量操作1. 打开仪器电源，并等待一段时间，使仪器达到稳定状态。
2. 将样品放入样品室中，确保样品室的盖子牢固关闭，避免外界光线的干扰。
3. 选择合适的波长范围进行测量，通常可见光范围为380-780nm。
4. 设置所需的光谱扫描参数，如扫描速度、积分时间等，根据实际情况进行调整。
5. 点击开始测量按钮，仪器将自动进行光谱扫描，并显示测量结果。
四、数据分析1. 分析测量结果，观察样品的吸光度和透过率，根据需要可以绘制吸光度-波长曲线或透过率-波长曲线。
2. 根据吸光度的变化确定样品的浓度或反应程度。
3. 如果需要测量多个样品或进行对比分析，可以依次更换样品并重复上述测量步骤。
五、注意事项1. 避免将样品直接接触到仪器的光路系统，以防止污染和损坏。
2. 在测量前，应先校准仪器，使用标准溶液进行校准，确保测量结果的准确性。
3. 注意选择合适的光源和滤光片，以获得所需的波长范围和光强度。
4. 仪器操作过程中应轻拿轻放，避免碰撞和摔落。
5. 定期清洁仪器的光路系统，以保持仪器的灵敏度和准确性。
六、常见问题解答1. 为什么在测量前需要校准仪器？校准仪器可以消除仪器本身的误差，并确保测量结果的准确性。
2. 为什么在测量样品前需要稀释？样品浓度过高会使光通过样品时发生较大的吸收，导致测量结果不准确。
3. 为什么样品需要避免与外界光源接触？外界光源会干扰测量结果，影响测量的准确性。
TU-1901紫外可见光分光光度计操作规程
1 仪器的使用1.1 依次打开打印机、计算机、主机电源。
1.2 打开测试程序，仪器开始初始化，如果自检各项都“OK”则初始化成功，预热30分钟。
如不成功对照未自检通过项进行排查，如自己无法解决报仪器设备管理员处理。
1.3 在样品池放上黑挡块，点击暗电流校正按钮进行暗电流校正。
1.4 清洗比色皿备用。
在一侧透光面做好标记。
1.5 光谱扫描：点击光谱扫描按钮，进入光谱扫描对话框。
设置波长范围[从长波到短波]、测光方式、扫描速度、采样间隔、记录范围等参数。
将参比池和样品池中放入参比溶液，合上样品仓门，点击基线校正按钮进行基线校正。
在样品池的比色皿中依次更换测试样品溶液，合上仓门，点击测试按钮“RUN”进行扫描，扫描完成后，可检出图谱的峰、谷波长值及吸光度Abs值。
1.6 光度测量：设置波长数、相应波长值[从长波到短波]、测光方式、重复次数等参数。
将参比池和样品池中放入参比溶液，合上样品仓门，点击“ZERO”按钮进行零点校正。
在样品池的比色皿中放入样品溶液，合上仓门，点击测试按钮“RUN”即可测出样品的吸光度Abs值。
1.7 定量测量：设置测量模式、测量波长、参考项输入[标准样品个数][对应的标样浓度][是否插入零点][选择曲线方式]等参数。
将参比池和样品池中放入参比溶液，合上样品仓门，点击“ZERO”按钮进行零点校正。
在样品池的比色皿中依次放入测量标准溶液，点击测试吸光度值，仪器自动绘制工作曲线，确认线性大于0.9999。
在样品池的比色皿中依次放入样品溶液，点击测试样品吸光度值，计算样品浓度。
1.8 测试完毕退出操作系统，依次关掉主机、计算机、打印机。
1.9仪器使用开始前和结束后，操作人员应对仪器的状态进行检查，并认真填写使用记录。
2 仪器的维护和保养2.1 仪器应安装在清洁，干燥，无尘，无腐蚀性气体，较暗的平稳工作台上。
2.2 比色皿每次更换液体，应用蒸馏水洗净，用专用擦镜纸擦拭避免损坏透光面。
测试完成将其清洗干净倒置晾干，存放于比色皿的盒子里。
实验七 可见光分光光度计的操作方法
可见光分光光度计的操作方法学时：2学时一、实验原理利用可见光等测定物质的吸收光谱，利用此光谱对物质进行定性定量分析和物质结构分析的方法，称为分光光度法，使用的仪器是分光光度计。
分光光度计灵敏度高，测定速度快，应用范围广，是生物化学研究中必不可少的基本手段之一。
可见光光谱：光是电磁波，可用波长“λ”表示，电磁波谱是由不同性质的连续波长的光谱所组成，对于生物化学来说，最重要的波长区域是可见光和紫外光。
光的波长是二个相邻的波峰之间的距离。
λ=C/V 其中，λ-波长；C-光速；V-频率；单位时间要通过一个定点的波数。
可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了可见辐射光后，发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。
它是带状光谱，反映了分子中某些基团的信息。
可以用标准光图谱再结合其它手段进行定性分析。
根据朗伯-比尔（Lambert- Beer）定律：A=εbc，（A为吸光度，ε为摩尔吸光系数，b为液池厚度，c为溶液浓度）可以对溶液进行定量分析。
ε越大，吸收光的能力越强，相应的分光光度法测定的灵敏度就越高。
ε值越大，说明电子跃迁的几率越大，通常ε=10～105：一般认为ε>104为强吸收；ε=103～104为较强吸收；ε<102为弱吸收，此时分光光度法不灵敏。
通常使用分光光度计可检测出的最小吸收度A=0.001，所以b=1cm，ε=105时，可检测的溶液最小浓度是C=10-8mol/L。
二、分光光度计的基本参数和组成与构造1. 722S可见光分光光度计的基本参数波长范围：340-1000nm波长精度：±2nm（360-600nm）表面刻度：（T）0-100%（A）0-22. 组成与结构各种型号的分光光度计不论是何种型式，基本上都是由五部分组成：（1）光源；（2）单色器（包括产生平行光和把光引向检测器的光学系统）；（3）样品室；（4）接受检测放大系统；（5）显示或记录器。
三、实验试剂NaCl : 1mol/lL 、5mol/L；NaOH: 1mol/lL 、10mol/L ；其他溶液。
可见分光光度计使用的基本步骤
可见分光光度计使用的基本步骤可见分光光度计是一种常用的实验仪器，广泛应用于化学、生物、药学等领域的定量分析和质量控制中。
下面将介绍可见分光光度计使用的基本步骤。
一、准备工作1. 检查光度计的电源是否接通，仪器是否处于正常工作状态。
2. 清洁光度计的样品室和光学系统，确保无灰尘和杂质。
二、设置参数1. 打开光度计软件，选择所需的波长范围。
2. 调节光源强度，使其适合样品的吸光度范围。
3. 选择合适的滤光片或光栅，以获得所需的波长。
三、校零与调零1. 进行校零操作，即将空白试剂或溶剂放入样品室中，校正仪器读数为零。
2. 若仪器支持自动调零功能，则可直接进行自动调零，否则需手动调整零点。
四、样品处理1. 准备待测样品，将其转移至光度计的样品室中。
2. 注意避免样品外部的杂质进入样品室，以免干扰测量结果。
五、测量操作1. 点击光度计软件中的“开始测量”按钮，开始记录样品的吸光度数据。
2. 确保样品室的盖子关闭，以防止外部光线的干扰。
3. 等待一段时间，直到测量结果稳定后，记录下吸光度数值。
六、数据处理1. 将测得的吸光度值与已知标准曲线或参考值进行比对，得出样品的浓度或含量。
2. 若需要进行多个波长的测量，重复以上步骤，记录各个波长下的吸光度数据。
3. 可使用光度计软件进行数据处理和分析，如绘制标准曲线、计算浓度等。
七、清洁与保养1. 使用完毕后，关闭光度计电源，清洁样品室和光学系统。
2. 定期检查仪器的光源和滤光片/光栅是否需要更换，保证仪器性能稳定。
3. 注意避免样品溢出或污染仪器，避免对仪器造成损坏。
八、记录与报告1. 将测得的数据记录下来，包括样品的吸光度数值和相关的实验条件。
2. 根据实验要求，编写实验报告或记录，详细描述实验过程和结果。
可见分光光度计使用的基本步骤包括准备工作、设置参数、校零与调零、样品处理、测量操作、数据处理、清洁与保养以及记录与报告。
正确的操作步骤和仪器的维护保养对于获得准确可靠的测量结果至关重要。
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可见光分光光度计的操作方法
学时：2学时
一、实验原理
利用可见光等测定物质的吸收光谱，利用此光谱对物质进行定性定量分析和物质结构分析的方法，称为分光光度法，使用的仪器是分光光度计。
分光光度计灵敏度高，测定速度快，应用范围广，是生物化学研究中必不可少的基本手段之一。
可见光光谱：光是电磁波，可用波长“λ”表示，电磁波谱是由不同性质的连续波长的光谱所组成，对于生物化学来说，最重要的波长区域是可见光和紫外光。
光的波长是二个相邻的波峰之间的距离。
λ=C/V 其中，λ-波长；C-光速；V-频率；单位时间要通过一个定点的波数。
可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了可见辐射光后，发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。
它是带状光谱，反映了分子中某些基团的信息。
可以用标准光图谱再结合其它手段进行定性分析。
根据朗伯-比尔（Lambert- Beer）定律：A=εbc，（A为吸光度，ε为摩尔吸光系数，b为液池厚度，c为溶液浓度）可以对溶液进行定量分析。
ε越大，吸收光的能力越强，相应的分光光度法测定的灵敏度就越高。
ε值越大，说明电子跃迁的几率越大，通常ε=10～105：一般认为ε>104为强吸收；ε=103～104为较强吸收；ε<102为弱吸收，此时分光光度法不灵敏。
通常使用分光光度计可检测出的最小吸收度A=0.001，所以b=1cm，ε=105时，可检测的溶液最小浓度是C=10-8mol/L。
二、分光光度计的基本参数和组成与构造
1. 722S可见光分光光度计的基本参数
波长范围：340-1000nm
波长精度：±2nm（360-600nm）
表面刻度：（T）0-100%（A）0-2
2. 组成与结构
各种型号的分光光度计不论是何种型式，基本上都是由五部分组成：（1）
光源；（2）单色器（包括产生平行光和把光引向检测器的光学系统）；（3）样品室；（4）接受检测放大系统；（5）显示或记录器。
三、实验试剂
NaCl : 1mol/lL 、5mol/L ；NaOH: 1mol/lL 、10mol/L ；其他溶液。
四、实验步骤
1. 将波长调至550nm ，打开样品池盖；
2. 开启电源开关，预热20 min ；
测定透明材料的透射比 测定透明溶液的吸光度
预热
设定波长 设置空白
置标尺为“吸光度” 调0%τ
置入样品
读出数据
光源
单色器
样品室
检测放大系统
显示器
预热
设定波长
设置空白
置标尺为“透射比”
调100%τ
置入样品
读出数据
用标准曲线法对物质定量
取已知含量的标准样品
按样品各自的分析规定制备样品溶液及背景溶液
设波长，置空白，条；调零，置“吸光度”，读出样品吸光度
重复上述读出各标准溶液的吸光度
绘制已知含量及读得吸光度绘制坐标图并画出最佳曲线
读未知样品的吸光度，在曲线表上找出对应的浓度
直接使用浓度直读功能
直接使用浓度因子功能
五、注意事项：
1、仪器在运行中禁止将样品池盖长时间盖上，以防光电管疲劳；
2、使用时必须把比色皿外面的液体用滤纸吸干，方可放入样品池架内；
3 、仪器使用完后，必须关闭电源，并将比色皿用高纯水冲洗干净，将外部的水用滤纸吸干后放入样品池架内待用。
六、实验结果与分析
1. 已知溶液的吸光度和透射比的测定（波长为：550nm）
溶液名程浓度透射比吸光度
NaCl 1mol/lL
5mol/L
2. 绘制NaOH的标准曲线（浓度梯度：10mol/lL，5mol/lL，1mol/lL，0.1mol/lL，
0.01mol/lL）
七、说明
NaCl：
分子量：58.44
性质：密度2.165g/ml；熔点801 °C；沸点1461 °C；水溶性360 g/L (20°C)。
纯净的氯化钠晶体是无色透明的立方晶体，由于杂质的存在使一般情况下的氯化钠为白色立方晶体或细小的晶体粉末，密度为 2.165（25/4℃），熔点801℃，沸点1442℃，味咸，PH值呈中性，易融于水和甘油，难融于乙醇。
常温下，100克水中溶解36克氯化钠固体。
NaOH：
固体溶于水放热；又称烧碱、火碱、苛性钠，是常见的、重要的碱，英文名称sodiun hydroxide（别名Caustic soda）。
化学式：NaOH
分子量：40.01。
密度2.130克/厘米3，熔点318.4℃，沸点1390℃。
纯的无水氢氧化钠为白色半透明，结晶状固体。
氢氧化钠极易溶于水，溶解度随温度的升高而增大，溶解时能放出大量的热。
它的水溶液有涩味和滑腻感，溶液呈强碱性，具备碱的一切通性。
常温下，100克水中溶解53克氢氧化钠固体。