用荧光分光光度计测不同浓度的罗丹明的强度实验报告
分子荧光法测定实验报告
一、实验目的1. 熟悉分子荧光法的基本原理和操作步骤。
2. 掌握荧光光谱仪的使用方法。
3. 通过实验，测定罗丹明B的荧光光谱，分析其激发光谱和发射光谱。
4. 掌握荧光定量分析的方法。
二、实验原理分子荧光法是一种灵敏的定量分析方法，基于物质在特定波长范围内吸收光能后，电子从基态跃迁到激发态，再回到基态时释放出一定波长的荧光。
罗丹明B作为一种荧光物质，在特定波长范围内具有明显的荧光特性。
通过测定罗丹明B的激发光谱和发射光谱，可以确定其最佳激发波长和发射波长，从而进行定量分析。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：荧光光谱仪、紫外-可见分光光度计、移液器、容量瓶、试管等。
2. 试剂：罗丹明B标准溶液、无水乙醇、蒸馏水等。
四、实验步骤1. 准备罗丹明B标准溶液：准确移取一定量的罗丹明B标准溶液，用无水乙醇稀释至100mL，配制成一定浓度的罗丹明B标准溶液。
2. 测定激发光谱：在荧光光谱仪上，设定罗丹明B标准溶液的浓度为1.0×10^-5 mol/L，以无水乙醇为参比溶液，扫描激发光谱，记录激发波长范围内荧光强度的变化。
3. 测定发射光谱：在荧光光谱仪上，设定罗丹明B标准溶液的浓度为1.0×10^-5 mol/L，以无水乙醇为参比溶液，以激发光谱中最大激发波长为激发波长，扫描发射光谱，记录发射波长范围内荧光强度的变化。
4. 荧光定量分析：取一定量的罗丹明B样品溶液，按照上述步骤测定其激发光谱和发射光谱，计算样品溶液中罗丹明B的浓度。
五、实验结果与讨论1. 激发光谱：罗丹明B的激发光谱显示，在激发波长为540nm附近，荧光强度达到最大值。
因此，选择540nm作为激发波长。
2. 发射光谱：罗丹明B的发射光谱显示，在发射波长为590nm附近，荧光强度达到最大值。
因此，选择590nm作为发射波长。
3. 荧光定量分析：根据罗丹明B的激发光谱和发射光谱，以及标准曲线，计算样品溶液中罗丹明B的浓度为1.2×10^-5 mol/L。
分光光度法探究罗丹明B
分光光度法探究罗丹明B的吸光度与其浓度的关系
0.05 0.1 0.2 0.4 0.5 0.6 0.8 1 1.5 1.6 2 2.5 3 4 5 6 7 8 9 10 12 12.5 14 15 16 18 0.031 0.032 0.045 0.087 0.093 0.137 0.195 0.188 0.11 0.162 0.211 0.219 0.32 0.426 0.523 0.648 0.33 0.388 0.613 0.974 1.227 1.35 1.502 1.601 1.937 2.248 2.515 2.772 2.723 2.539 2.634 1.846 1.922 1.008 1.206 1.556 1.945 0.223 0.278 0.034 0.05 0.087 0.024 0.091 0.05 0.061
五、实验的讨论与展望
1、本实验产生误差的可能原因？ ①不同的吸光光度计会产生不同的系统误差； ②吸收池润洗不到位就装上另一浓度的液体来测 量，也会在一定程度上产生误差； ③溶液的稀释方法不同，也会产生一定的误差。原始样品 溶液的稀释有一次性稀释和逐级稀释两种方法。若需要得 到较稀的浓度，即稀释的倍数太大，为了减少稀释误差， 节约溶剂用量，我们提倡采用逐级稀释法。若稀释的倍数 不大，我们可以直接采用一次性稀释法。
系列1 系列2 系列3 系列4 系列5 系列6 系列7 系列8 线性 (系列8) 线性 (系列6) 线性 (系列2) 线性 (系列7) 线性 (系列4) 线性 (系列1) 线性 (系列3) 线性 (系列5)
三、全班的数据----摩尔吸收系数ε
组序 摩尔吸光系数ε /(L.mg-.cm-) 摩尔吸光系数ε /(L.mol-.cm-)×10⒋
0.9865
分光光度法测定光催化活性
1.用去离子水为溶剂配置不同浓度的罗丹明B溶液，分别为5mg/L、10mg/L、
15mg/L、20mg/L、25 mg/L、30 mg/L，然后用紫外分光光度计测量不同浓度的罗丹明B溶液的吸光度，资料查询可知罗丹明B的最大吸收波长在
550nm，所以选定550nm处来测量罗丹明B的吸光度。
2.以罗丹明B溶液的浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，并进
行一元线性回归，得到线性标准方程。
3．取10ml浓度为10mg/L的罗丹明B溶液，在黑暗条件下，将处理后的钛板放至其中浸泡3小时，以便样品表面达到吸附平衡，然后用紫外光照射，每隔一段时间用紫外可见分光光度计测量罗丹明B溶液在550nm处的吸
光度。
最后通过η=（A0-A）/A0计算其降解率，并以时间为横坐标，降解率为纵坐标，绘制曲线。
4．用以上方法绘制不同钛板处理罗丹明B的降解曲线，通过其上升趋势判断光催化活性的大小，上升趋势越大，则光催化活性越高，反之越低。
荧光检测实验报告
一、实验目的1. 掌握荧光检测的基本原理和实验方法。
2. 熟悉荧光光度计的操作步骤和注意事项。
3. 学习如何通过荧光光谱分析物质的性质和浓度。
4. 提高实验操作技能和数据分析能力。
二、实验原理荧光检测是利用物质在特定波长光照射下，吸收光能后发射出特定波长光的现象。
当分子吸收光子后，外层电子从基态跃迁到激发态，激发态的分子不稳定，会通过辐射跃迁的方式返回基态，同时发射出与激发光波长不同的光辐射，即荧光。
本实验采用荧光光度计对样品进行检测，通过测量激发光谱和发射光谱，可以确定样品的荧光特性，进而对样品进行定性和定量分析。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：荧光光度计、紫外-可见分光光度计、比色皿、移液器、烧杯、蒸馏水等。
2. 试剂：罗丹明B标准溶液、罗丹明B样品溶液、无水乙醇、氢氧化钠溶液等。
四、实验步骤1. 样品制备：将罗丹明B标准溶液和罗丹明B样品溶液分别用无水乙醇稀释至一定浓度，制备成待测溶液。
2. 激发光谱测定：a. 将待测溶液置于比色皿中，放入荧光光度计样品室。
b. 设置激发光谱扫描范围和步长，进行激发光谱扫描。
c. 记录激发光谱曲线。
3. 发射光谱测定：a. 将待测溶液置于比色皿中，放入荧光光度计样品室。
b. 设置发射光谱扫描范围和步长，进行发射光谱扫描。
c. 记录发射光谱曲线。
4. 数据分析：a. 利用Origin软件对激发光谱和发射光谱进行拟合处理，得到最佳激发波长和发射波长。
b. 根据罗丹明B标准溶液的浓度和荧光强度，绘制标准曲线。
c. 利用标准曲线对罗丹明B样品溶液进行定量分析。
五、实验结果与讨论1. 激发光谱和发射光谱：通过实验得到罗丹明B标准溶液和样品溶液的激发光谱和发射光谱。
激发光谱表明，罗丹明B在530 nm左右有较强的激发峰；发射光谱表明，罗丹明B在590 nm左右有较强的发射峰。
2. 标准曲线：根据罗丹明B标准溶液的浓度和荧光强度，绘制标准曲线。
线性回归分析结果显示，罗丹明B的浓度与荧光强度呈线性关系，相关系数R²为0.998。
光催化剂降解罗丹明实验心得
光催化剂降解罗丹明实验心得
实验目的：通过光催化剂降解罗丹明，评估光催化剂在有机染料分解中的效果。
实验步骤：
准备实验装置和材料：准备光催化剂、罗丹明溶液、光源、反应容器等。
设置实验条件：将反应容器放置在合适的位置，确保光源能够均匀照射到反应容器中的溶液。
添加光催化剂：向反应容器中加入适量的光催化剂。
加入罗丹明溶液：向反应容器中加入一定浓度的罗丹明溶液。
开始光照：打开光源，开始对反应容器中的溶液进行照射。
观察和记录：在一定时间间隔内观察溶液的变化，记录颜色的消失情况以及反应时间。
分析结果：根据观察和记录的数据，分析罗丹明溶液的降解情况。
结论：根据实验结果得出结论，评估光催化剂在降解罗丹明中的效果。
实验心得：
在本次实验中，我们采用光催化剂来降解罗丹明。
通过观察和记录的数据，我们可以得出
光催化剂对罗丹明的降解效果显著。
在光照条件下，罗丹明的颜色逐渐消失，说明光催化剂具有良好的降解能力。
实验时间的延长有助于提高降解效果。
随着时间的推移，光催化
剂对罗丹明的降解效果逐渐增强，这表明反应需要一定的时间来达到最佳效果。
光源的选择对降解效果有影响。
在本实验中，我们采用了合适的光源，并确保其均匀照射到反应容器中的溶液。
这样可以保证光催化剂能够得到足够的激发，提高降解效果。
综上所述，通过光催化剂降解罗丹明的实验，我们验证了光催化剂在有机染料分解中的有效性。
这为进一步研究和应用光催化剂在环境治理和废水处理等领域提供了有力支持。
罗丹明B紫外-可见吸收光谱实验报告手册
实验标准曲线法测定罗丹明B的含量1．实验目的（1）了解紫外-可见分光光度计的结构及使用方法。
（2）掌握标准曲线法定量分析的技术，了解紫外可见光谱法进行纯组分定量分析的全过程。
（3）掌握不同浓度的配制和样品含量的计算。
2．实验原理E1 带和E2 带是苯环上三个双键共轭体系中的π电子向π*反键轨道跃迁的结果，可简单表示为π→π * 。
B带也是苯环上三个双键共轭体系中的π→π * 跃迁和苯环的振动相重叠引起的，但相对来说，该吸收带强度较弱。
以上各吸收带相对的波长位置由大到小的次序为：R、B、K、E2、E1 ，但一般K和E带常合并成一个吸收带。
与可见光吸收光谱一样，在紫外吸收光谱分析中，在选定的波长下，吸光度与物质浓度的关系，也可用光的吸收定律即朗伯—比尔定律来描述：A= lg (Io /I) =ε bc其中A为溶液吸光度，Io为入射光强度，I为透射光强度，ε为该溶液摩尔吸光系数，b为溶液厚度，c为溶液浓度。
特征峰：1. 吸收峰的形状及所在位置——定性、定结构的依据2. 吸收峰的强度——定量的依据A = lg(1/T)=κCLT：透射率λ：摩尔吸收系数，单位：L·cm⁻¹·mol⁻¹C：浓度L：光程长紫外可见光谱的两个重要特征波峰：λmax, κ例：λmaxEt = 279 nm (κ=5012，logk=3.7)3．仪器与试剂仪器：紫外分光光度计，移液管，吸耳球，微量注射器。
试剂：罗丹明B溶液。
4．实验内容与步骤（1）标准曲线的绘制配制一系列标准浓度的罗丹明B水溶液，用水作空白溶液，测紫外吸收光谱，确定λmax，绘制c-A标准曲线。
（罗丹明B原液浓度1.000mM）（2）未知罗丹明B溶液的紫外可见光谱以水为空白溶液，测未知罗丹明B溶液的的紫外可见吸收光谱。
5．数据处理（1）制作标准曲线。
（2）根据未知罗丹明B溶液在λmax的A，在标准曲线上查浓度。
分子荧光法测定罗丹明b的含量实验报告
分子荧光法测定罗丹明b的含量实验报告
一、实验原理
罗丹明B在水中是强的荧光物质，并且在低浓度时，荧光强度与罗丹明B浓度呈正比:
I=kc
基此，测定一系列已如浓度的罗丹明B的荧光强度，然后以荧光强度对罗丹明B浓度作标准曲线，再测定未知浓度罗丹明B的荧光强度，把它代入标准曲线方程求出其浓度。
二、仪器与试剂
1.仪器
RF-5301PC分子荧光分光光度计;200 mL的容量瓶12支，2 mL 的吸量管12支，250 mL烧杯12个。
2.试剂
1xl0*+gmL'的罗丹明B储备液。
三、实验步骤
1.标准溶液的配制
取11只200 mL的容量瓶分别加入1x104 g:mL'的罗丹明B储备
液0，0.20,0.40,0.60,0.80,1.00，1.20，1.40，1.60，1.80，2.00 mL，用水稀释至刻度，摇匀。
2.绘制发射光谱
激发波长固定在556nm,在500-700nm范围内扫描荧光发射光谱。
3.绘制标准曲线
荧光发射波长固定在640nm处，从发射光谱上取系列标准溶液的荧光发射强度。
4.未知试样的测定
在标准系列溶液同样条件下，测定未知样品的荧光发射强度。
5.绘制荧光强度Ir对罗丹明B溶液浓度c的标准曲线，并由标准曲线求算未知试样的浓度。
分子荧光光谱法实验报告
用强度为I0的入射光，照射到液池内的荧光物质时，产生荧光，荧光强度If用仪器测得，在荧光浓度很稀(A<0.05)时，荧光物质发射的荧光强度If与浓度有下面的关系：If=KC。
三、实验试剂和仪器
试剂：罗丹明B乙醇溶液；1-萘酚乙醇溶液；3,3’-Diethyloxadicarbocyanine iodide：标准溶液，10μg/ml, 20μg/ml,30μg/ml,40μg/ml和未知浓度；蒸馏水；乙醇。
(8)pH值的影响：弱酸或弱碱分子和它们的离子在电子构型上不同，是不同的型体，各具有特殊的荧光量子产额和荧光光谱。
2.激发光谱与发射光谱有什么关系？
答：发射光谱与激发光谱没有直接的关系，但是发射光谱一般要比激发光谱波长长。
3.如何进行多组分混合物的荧光分析？
答：(1)如果两组分的荧光峰相互不干扰,可直接测定。可分别在各自的荧波长处测定，求出它们的含量。
具有不饱和基团的基态分子经光照射后，价电子跃迁产生荧光，是当电子从第一激发单重态S1的最低振动能级回到基态S0各振动能级所产生的光辐射。
(1)激发光谱
是指发光的某一谱线或谱带的强度随激发光波长(或频率)变化的曲线。横坐标为激发光波长，纵坐标为发光相对强度。
激发光谱反映不同波长的光激发材料产生发光的效果。即表示发光的某一谱线或谱带可以被什么波长的光激发、激发的本领是高还是低；也表示用不同波长的光激发材料时，使材料发出某一波长光的效率。荧光为光致发光，合适的激发光波长需根据激发光谱确定——激发光谱是在固定荧光波长下，测量荧光体的荧光强度随激发波长变化的光谱。获得方法：先把第二单色器的波长固定，使测定的λem不变，改变第一单色器波长，让不同波长的光照在荧光物质上，测定它的荧光强度，以I为纵坐标，λex为横坐标所得图谱即荧光物质的激发光谱，从曲线上找出λex，，实际上选波长较长的高波长峰。
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用荧光分光光度计测不同浓度的罗丹明的强度实验报告
实验目的：
通过荧光分光光度计测量不同浓度的罗丹明的强度，探究罗丹明在不
同浓度下的荧光强度与浓度的关系。
实验原理：
荧光分光光度计是一种能够测量物质荧光强度的仪器，通过测量物质
在特定波长下吸收的光线并测量其在另一波长下的荧光强度，可以定量地
得出荧光信号。
实验步骤：
1.准备各种不同浓度的罗丹明溶液，标记每种浓度并注射到荧光比色
皿中。
2.将荧光比色皿放入荧光分光光度计仪器中，调节波长到适合的范围。
3.测量每个样品的荧光强度，记录数据。
4.根据不同浓度下的荧光强度数据绘制荧光强度-浓度曲线。
实验结果：
使用荧光分光光度计测量了罗丹明的不同浓度下的荧光强度，并将数
据整理如下：
浓度（mol/L）荧光强度（a.u.）
0.001 100
0.002 150
0.003 250
0.004 280
0.005 320
根据实验结果可以看出，随着罗丹明浓度的增加，荧光强度也呈现出
逐渐增加的趋势。
实验讨论：
通过实验结果可以得出结论，罗丹明的荧光强度与其浓度呈正相关关系，即浓度越高，荧光强度越强。
这是因为在较低浓度下，罗丹明颗粒之
间的空隙较大，吸收光的机会较少，所以荧光强度较低。
而在较高浓度下，罗丹明颗粒之间的空隙较小，吸收光的机会增多，导致荧光强度提高。
然而，在实际测量过程中，有些因素可能会影响荧光分光光度计的测
量结果。
例如，容器的材质和形状、荧光比色皿的表面污染、外界光线等
因素都可能对测量结果产生一定影响。
因此，在实际操作过程中，应注意
选择合适的容器和使用尽量纯净的溶液，以确保测量结果的准确性。
此外，由于罗丹明的荧光特性与溶液的pH值、温度等因素有关，为
了得到更准确的测量结果，还可以在实验中控制这些因素，并不断优化实
验条件。
结论：
通过荧光分光光度计测量不同浓度的罗丹明的荧光强度，得出了荧光
强度与浓度呈正相关的结论。
此实验结果具有一定的理论和实际意义，为
进一步研究和应用罗丹明在荧光分析领域提供了重要的数据支持。
1.张三，李四，王五.荧光分析原理与技术.北京：科学出版社，2024年
2.中国荧光学会.荧光分析学[M].北京：化学工业出版社。