降血压肽的研究及应用前景

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植物源生物活性肽的研究进展

植物源生物活性肽的研究进展

植物源生物活性肽的研究进展多肽是由天然氨基酸以不同组成和排列方式构成的从二肽到复杂的线性、环形结构的不同肽类的总称,其中可调节生物体生理功能的多肽称为生物活性肽。

与蛋白质相比,活性肽不仅有比蛋白质更好的消化吸收性能,还具有促进免疫、调节激素、抗菌、抗病毒、降血压和降血脂等生理机能。

此外活性肽还有较好的酸、热稳定性,水溶性及粘度随浓度变化迟钝等优点,易于作为功能因子添加到各种食品中。

我国农作物种类品种繁多,利用这些廉价的植物蛋白开发具有高附加值的生物活性肽产品,越来越受到重视。

本文重点综述了降血压肽、抗氧化钛、降胆固醇肽这3类生物活性肽的研究进展,将其结构特征与生理功能的关系进行了归纳,同时归纳了活性肽的生理功能,并指出其发展应用前景。

1. 生物活性肽的生理功能1.1 抗菌活性抗菌活性肽通常由细菌、真菌产生,或从动植物体中分离。

它们尽管在结构上千差万别,但几乎所有的抗菌肽都是阳离子型的,两亲结构是它们的共同特征[1]。

国内外研究成果表明,抗菌肽对部分细菌、真菌、原虫、病毒及癌细胞等均具有强大的杀伤作用。

临床试验也表明,抗菌肽能够增强机体抵抗病原微生物的能力,而且在体内还不容易产生耐药性。

[2]1.2 免疫活性免疫活性肽能够刺激机体淋巴细胞的增殖,增强巨噬细胞的吞噬功能,提高机体抵御外界病原体感染的能力,降低机体发病率。

从人乳和牛乳的酪蛋白中已检测到具有免疫刺激活性的肽片段,这些肽具有刺激巨噬细胞吞噬能力的作用。

另外,乳蛋白、大豆蛋白和大米蛋白等通过适当酶解处理也可产生具有免疫活性的肽类物质。

1.3 抗高血压活性血压是在血管紧张素转换酶(angiotensin-convertion enzyme,ACE)的作用下进行调节的,血管紧张素?在A C E的作用下可转化为有活性的血管紧张素?,使血管平滑肌收缩,引起血压升高。

降血压肽是具有抑制ACE活性的肽类,来源广泛,ACE 抑制肽的主要来源是乳制品和鱼蛋白,沙丁鱼、金枪鱼、鲣鱼,,而且从植物蛋白(大豆、小麦、玉米,、肉类、鸡蛋以及其它水产品,小虾、螃[3]蟹、海藻、牡蛎、海蜇,的酶解物中也分离得到了ACE 抑制肽。

鸡蛋蛋黄蛋白质制备降血压肽的研究的开题报告

鸡蛋蛋黄蛋白质制备降血压肽的研究的开题报告

鸡蛋蛋黄蛋白质制备降血压肽的研究的开题报告论文题目:鸡蛋蛋黄蛋白质制备降血压肽的研究研究背景:高血压是全球公认的常见病、多发病,也是心脑血管疾病、肾脏疾病等多种疾病的主要危险因素。

高血压病的发病率和死亡率在各个国家和地区均呈上升趋势,对人类生命安全和健康构成很大的危害。

近年来,降血压肽作为一种新的降血压药物,受到了广泛的研究。

作为一种自然产生的生理活性物质,降血压肽具有相对较少的不良反应,可以发挥稳定而较快的降低血压的效果。

鸡蛋蛋黄蛋白质含有丰富的营养成分以及多种生物活性物质,其成分中特定的肽类可以具有降血压效果。

因此,通过对鸡蛋蛋黄蛋白制备降血压肽的研究,可以开发出一种低成本、低毒副作用、易于获取的天然降压剂,对保障全球人民的健康具有重要的意义。

研究内容:1. 鸡蛋蛋黄蛋白的提取:使用适宜的方法提取出蛋黄蛋白,制备出鸡蛋蛋黄蛋白。

2. 鸡蛋蛋黄蛋白质的鉴定:使用酰胺水解-气相色谱质谱法鉴定鸡蛋蛋黄蛋白质的种类和含量。

3. 鸡蛋蛋黄蛋白质的水解:选择合适的蛋白水解酶并对鸡蛋蛋黄蛋白进行水解,制备出降血压肽。

4. 降血压肽的纯化和检测:利用柱层析技术对水解后的产物进行纯化,并使用HPLC等方法检测产物的纯度和含量。

5. 降血压肽的功能评价:利用离体和in vivo实验评价制备出的降血压肽的生物学功能和药理学效应。

研究意义:本研究将通过制备出鸡蛋蛋黄蛋白质以及将其水解制备出降血压肽的方法,为高血压的治疗提供一种新途径,具有降低制备成本、扩大生产规模等优势。

同时,鸡蛋作为一种富含蛋白质的食材,在制备中使用鸡蛋蛋黄蛋白质,可以实现鸡蛋资源的利用和提升,具有较好的经济和社会效益。

研究方法:本研究需要开展以下几个步骤:1. 鸡蛋蛋黄蛋白的提取:将鸡蛋蛋黄进行纯化处理,并用适宜的方法提取出蛋黄蛋白。

2. 鸡蛋蛋黄蛋白质的鉴定:使用酰胺水解-气相色谱质谱法鉴定鸡蛋蛋黄蛋白质的种类和含量。

3. 鸡蛋蛋黄蛋白质的水解:选择合适的蛋白水解酶并对鸡蛋蛋黄蛋白进行水解,制备出降血压肽。

2024年调节血压保健品市场分析现状

2024年调节血压保健品市场分析现状

2024年调节血压保健品市场分析现状1. 引言随着现代生活方式的改变和老龄化人口的增加,高血压成为了一种全球性的健康问题。

为了降低血压,许多人开始转向使用调节血压的保健品。

本文将对调节血压保健品市场的现状进行分析。

2. 调节血压保健品的定义调节血压保健品是指能够通过营养补充或其他非药物手段来调节人体血压的产品。

这些产品通常包括天然成分、维生素、矿物质和其他有益于降低血压的元素。

3. 调节血压保健品市场规模根据市场研究数据,调节血压保健品市场正经历着快速增长。

预计到2025年,全球调节血压保健品市场的价值将超过100亿美元。

4. 主要市场驱动因素调节血压保健品市场的增长受到多种因素的推动,其中最主要的包括:4.1 人口老龄化随着人口老龄化程度的加深,高血压患者数量也呈上升趋势。

老年人群体对调节血压的需求增加,推动了市场的扩大。

4.2 健康意识的提高随着健康意识的提升,人们越来越重视自身的血压管理。

调节血压保健品作为一种安全、自然的方法受到了广泛追捧。

4.3 市场推广和宣传调节血压保健品的生产商通过广告、网络宣传以及医学专家的推荐来加强市场推广,提高了消费者对产品的认知度。

5. 市场竞争格局调节血压保健品市场存在着激烈的竞争。

目前,市场上的主要参与者包括制药公司、保健品公司和传统草药制造商。

这些公司通过不同的产品定位、品牌推广和渠道拓展来争夺市场份额。

6. 市场前景与挑战调节血压保健品市场的前景仍然广阔,但也面临一些挑战。

其中包括:6.1 法规监管调节血压保健品需要符合相关食品药品监管部门的规定。

监管政策的不断变化可能会限制市场的发展。

6.2 产品质量与效果的问题一些调节血压保健品的质量和效果未经充分验证。

消费者对产品的品质和功效存在疑虑,这可能会影响市场的增长。

7. 结论调节血压保健品市场正处于快速增长阶段。

市场驱动因素包括人口老龄化、健康意识的提高和市场推广等。

然而,市场竞争激烈,同时也面临法规监管和产品质量的问题。

重组降血压肽IYPR的分离与稳定性研究

重组降血压肽IYPR的分离与稳定性研究

重组降血压肽IYPR的分离与稳定性研究黄六容;王薇薇;马海乐;白慧敏;鞠英姿;雷雪香【摘要】研究了大肠杆菌表达的降血压肽IYPR(Ile—Tyr—Pro—Arg)的分离纯化过程,并分析了其活性稳定性。

大肠杆菌细胞经过超声提取和亲和层析得到重组蛋白,然后经过肠激酶和胰蛋白酶酶切、凝胶过滤得到肽IYPR,测定了IYPR经过不同的温度、pH和消化道酶处理后的活性变化。

结果表明,亲和层析后重组蛋白的纯度达到了约90%,肠激酶酶切重组蛋白后利用透析法将串联多肽IYPR和6×His标签成功分离,串联多肽经过胰蛋白酶酶切和凝胶过滤后得到了单体肽IYPR。

IYPR在90℃处理1h时,其活性为原来的98%,在pH为2—10的水溶液处理5h时活性保持不变,经过胃蛋白酶消化后,其活性升高了13%。

这些特性为重组降血压肽IYPR作为高血压病的防治药物的深入研究提供了参考。

%This research mainly dealt with the purification and stability of recombinant peptide IYPR(Ile-Tyr- Pro-Arg) expressed in E. coli. The inclusion bodies were washed, separated from the cells by ultrasound assisted ex- traction. After purification by affinity chromatography, recombinant protein was cleaved with enterokinase and trypsin. The purified IYPR was collected from gel filtration. The information had also been realized regarding the activity of purified IYPR under different conditions including temperature, pH and gastrointestinal proteases. The results showed that the recombinant protein was recovered with a high purity of about 90 % by affinity chromatography. The series peptide of IYPR and the 6 x His tag were successfully isolated by dialysis. Peptide IYPR was obtained by cleavage of the recombinant protein with trypsin. When the sample washeated at 90 ℃ for 1 h, the activity of IYPR was reduced to 98 % of the original. Incubation in aqueous solutions (from pH 2 to 10) for 5 h didn' t change the activity of IYPR. When the peptide was digested by pepsin, its activity was increased by 13.0 %. The data obtained provided a good reference for further development of peptide IYPR into an effective antihypertensive agent for prevention and treatment of hypertension.【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2012(038)009【总页数】5页(P33-37)【关键词】降血压肽;纯化;稳定性;活性【作者】黄六容;王薇薇;马海乐;白慧敏;鞠英姿;雷雪香【作者单位】江苏大学食品与生物工程学院江苏省农产品物理加工重点实验室,江苏镇江212013;江苏大学食品与生物工程学院江苏省农产品物理加工重点实验室,江苏镇江212013;江苏大学食品与生物工程学院江苏省农产品物理加工重点实验室,江苏镇江212013;江苏大学食品与生物工程学院江苏省农产品物理加工重点实验室,江苏镇江212013;江苏大学食品与生物工程学院江苏省农产品物理加工重点实验室,江苏镇江212013;江苏大学食品与生物工程学院江苏省农产品物理加工重点实验室,江苏镇江212013【正文语种】中文【中图分类】TS201.21高血压是常见的心血管疾病,发病率高,常伴有心脏、血管、肺以及肾脏等器官功能性或器质性改变,是引发心、脑、肾和眼血管等各种并发症的一个重要危险因素[1]。

ACE抑制肽的生理功能和研究进展

ACE抑制肽的生理功能和研究进展

文章篇号:1007-2764(2006)03-0251-090ACE抑制肽的生理功能和研究进展吴炜亮,吴国杰,梁道双 杨帆(广东工业大学轻工化工学院,广东广州 510006)摘要:血管紧张素转化酶(ACE)在人体血压调节方面起着重要的生理作用。

近年来天然食品来源的ACE抑制肽已成为生物活性肽研究领域的热点。

ACE抑制肽通过抑制ACE活性起降血压作用。

文章综述了ACE抑制肽的作用机制、结构特点、评价方法和研究进展。

关键词:ACE;ACE抑制肽;食品蛋白质The Physiological Function and Research Progress ofAngiotensin-I-converting Enzyme Inhibitory PetidesWu Wei-liang, Wu Guo-jie, Liang Dao-shuang, Y ang Fan(Faculty of Chemical Engineering and Light Industry, Guangdong University of Technology, Guangzhou510006, China) Abstract: Angiotensin-I-converting enzyme (ACE) plays an important physiological function in the blood pressure of people. In the recent years, Angiotensin-I-converting enzyme inhibitory petides from natural food has been the hotspot in the physiological bioactive peptides. Angiotensin-I-converting enzyme inhibitory peptides let the blood pressure down by restraining the bioactive of the Angiotensin-I-converting enzyme. Angiotensin-I-converting enzyme inhibitory peptides effective principle, structure characteristic, estimate method and research progress have been review in this thesis.Keywords: Angiotensin-I-converting enzyme; Angiotensin-I-converting enzyme inhibitory peptides; Food protein生物活性肽是自然界中种类极多,功能复杂的一类化合物。

降血压肽ACE抑制活性及降压功能研究(一)

降血压肽ACE抑制活性及降压功能研究(一)

降血压肽ACE抑制活性及降压功能研究(一)【摘要】探讨了ACE(血管紧张素转换酶)抑制活性的检测方法,并以贻贝为原料制取降血压肽,研究了不同酶解条件对其ACE抑制活性的影响,然后利用SHR饲喂试验检测其降血压活性。

结果表明,降血压肽有较好的ACE抑制活性:其ACE抑制率可达88.08%。

同时动物试验表明其降压效果明显,在SHR饲喂后2~6h之内均有显著降压效果,平均降低为16~28mmHg。

【关键词】降血压肽血管紧张素转换酶抑制活性降血压【Abstract】ThetestingmethodofACEinhibitoryactivitieswasstudied,andtheantihypertensivepeptideswerederiv edfrommytiluscoruscus,thentheACEinhibitoryactivitieswerestudiedondifferentconditions;theanti hypertensiveeffectsweretestedbySHR-feedingmethod.Theresultswereasfollows:theantihypertensi vepeptidehadstrongACEinhibitoryactivities,theACEinhibitoryratiowas88.08%,andtheantihyperten siveeffectwasobviousin2to6hours,theaveragereducedbreadthis16~28mmHg.【Keywords】antihypertensivepeptide;angiotensin-convertingenzyme(ACE)inhibitoryactivities;antihypertensiveeffects降血压肽实质是一种血管紧张素转换酶抑制肽,它通过抑制血管紧张素转换酶(ACE),阻碍有升高血压作用的血管紧张素Ⅱ的生成,同时抑制具有降血压作用的血管舒缓激肽的分解,从而使血压下降,此即降血压肽的作用机理〔1〕。

降血压肽分离的研究现状与展望

降血压肽分离的研究现状与展望
s p r t n o n i y e e sv e t e . e a a i n a t p r n ie p p i s o h t d Ke r s n i y e tn i ep p i e ; e a ae g l l a in c r mao r p y y wo d :a t p r sv e t s s p r t ; e f t t h o tg a h h e d r o i
r RE ENT S TU I) HE P S I AT (N AND DEVE MEN AL T : NC Y l 0P T FNDE 0F S P E ARAT ON 0N ANT HYP S VE P PF DES I I ER F EN I E I
HUANG h o mig KONG F n d n , U Gu — e , UN Ha ,lYig J n Z a— n , a — o g Z o r n S o J n ,INig
( olg fBi&F o ce c , ain T si t f ih n u t , l n l 0 4,la nn ,h n ) C l eo o o d S in e D l n tueo g tId sr Dai 6 3 e a t L y a 1 , o igC ia i
降血压肽 ,又称为血管 紧张素转化酶( ni A g卜 t es — ovrn ny e 简称 A E 抑 制肽 , ni l neig z , n C t E m C) 是 从食物蛋白中分离出的一类具有显著 降低血压功 效的多肽短链物质。 从来源上 , 可分为乳蛋 白( 包括 酪蛋白、 乳清蛋 白)发酵食 品, , 动物蛋 白, 植物蛋白 以及天然 A E抑制肽。这些来源于食 品的降血压 C 肽通常由蛋 白酶在温和条件下水解蛋 白质而获得 , 食用安全性高 , 其共 同突出优点是只对高血压患者 起到降压作用 , 对血压正常者无降压作 用 , 因而不 会有降压过度现象发生… 除降压功能, 。 往往具有免 疫促进 , 抗凝血 , 易消化吸收和抗肿瘤等功能。 而化 学合成的降压药物( 如卡托普利等 )虽然治疗高血 , 压的效果非常明显 , 但其对 肾脏 的毒副作用 , 以及 服药后 出现低血压 、 咳等症状 , 干 使人们对其安全 性产生忧虑。 高m压病容易引发冠心病 , 心肌梗塞 , 脑卒 中和肾功能衰竭等 , 因此成为一个十分严重的 社会公共卫生问题[ 2 1 。 降血压肽的开发,以及关键的分离提纯过程 , 具有很大的现实意义。降血压肽的分离 , 是在食物 蛋白经过化学酶解处理之后 , 明确降压效果的 将有 短肽分离 出来 , 得到的产品一部分 可作为功能食 品

鱼降压肽文献综述

鱼降压肽文献综述

鱼降压肽文献综述降血压肽就是一类具有降血压作用的多肽,简称ACEIP,又称血管紧张素转化酶抑制剂。

由于食源性降血压肽相对于化学降血压药物,具有安全性高、消化吸收性强的优点,然而其突出优点是只对高血压患者起到降压作用,对血压正常者无降压作用,因而不会有降压过度现象发生。

除降压功能,ACEIP还具有免疫促进,抗凝血,易消化吸收和抗肿瘤等功能。

而化学合成的降压药物,如赖诺普利、培哚普利等,虽然治疗高血压的效果非常明显,但是长期服用易引起皮疹、蛋白尿等不良反应,于是人们便把目光转向了天然降血压物质,食源性降血压肽己经成为生物活性肽研究领域最热门的方向之一。

源于食品的降血压肽,由于其降血压效果明显且对正常血压无影响、无副作用等优点,已成为目前研究的热点。

本文主要从降血压肽作用机理、酶解法制备鱼降压肽、开发应用前景及展望等几个方面介绍降血压肽的研究进展。

引言采用高效液相色谱法对ACE抑制肽样品相对分子质量进行检测,相对分子质量为1.0-1.6*106(即10-16肽),所占比率约为49.66%;0.6-1.0*106(即5-10肽),所占比率约为15.73%;0.2-0.6*106(即2-4肽),所占比率约为7.96%.(1)鱼降压肽中可溶性氮含量较高,达到了81.26%,肽含量为72.81%。

灰分和水分含量分别为9.47%和3.54%,脂肪含量较低,为0.12%。

(2)大孔吸附树脂DA201.C 对鱼降压肽的吸附性能最好,吸附率达到了88.59%。

75%乙醇对鱼降压肽的洗脱效果较佳,鱼降压肽的得率为33.34%,其IC50为1.52mg/ml。

(3)从鱼蛋白、鱼皮、鱼鳞及一些鱼的下脚料中都能分离出降压肽。

1、降血压肽的作用机理体内的肾素一血管紧张系统(RAS)和激肽释放酶一激肽系统(KKS)对血压的调节起着重要作用,ACE通过影响RAS和KKS之间的平衡从而使血压升高。

RAS为升压系统,血管紧张素原在肾素的作用下转化为血管紧张素I(AngI),ACE 把原先无活性的AngI转换为(AngII),AngⅡ一方面作用于小动脉,使血管平滑肌收缩,导致血压升高;同时刺激醛固酮分泌,并减少肾血流量及促进Na 、K 的重吸收,引起钠贮量和血容量增加,使血压升高;KKS为降压系统,舒缓激肽为降压物质,它能舒缓毛细血管,增加其通透性,使血压下降。

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28年第4期总第135期JIANG SU SHI PIN YU FA JIAO降血压肽(ACEIP),又称为血管紧张素转化酶(Angioensin-I ConvertingEnzyme,EC3.4.15.1,简称ACE)抑制肽,通常由蛋白酶在温和条件下水解蛋白质而获得,食用安全性高,其突出优点是只对高血压患者起到降压作用,对血压正常者无降压作用,因而不会有降压过度现象发生。

除降压功能,ACEIP还具有免疫促进,抗凝血,易消化吸收和抗肿瘤等功能。

而化学合成的降压药物,如赖诺普利(Lisinopril),培哚普利(Perindopril),虽然治疗高血压的效果非常明显,但是长期服用易引起皮疹、蛋白尿等不良反应,于是人们便把目光转向了天然降血压物质。

源于食品蛋白质的降压肽具有独特的优点,已成为目前研究的热点。

本文主要从降血压肽作用机理、提取制备工艺、目前需要解决的问题等几个方面作介绍。

1降血压肽的作用机理及已有研究1.1作用机理人体内的血压受许多因素调节,其中最重要的因素是升压系统-肾素-血管紧张素系统(Renin-Angiotensin System,RAS)和降压系统-激肽释放酶-激肽系统(Kallikrein-Kinin System,KKS)之间的平衡。

而系统中存在的血管紧张素转化酶则是影响2个系统平衡的重要因素。

ACE通过把原先无活性的血管紧张素I(AngI)碳端的两个氨基酸(His-Leu)切除,将RAS系统中的血管紧张素I转换为血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),而AngⅡ是活性很强的血管收缩剂,导致血压升高;另一方面。

ACE也能作用于KKS系统中的降血压物质缓激肽,使其失活。

从而使KKS系统处于抑制状态,同样导致了血压的升高。

ACE还可刺激肾上腺皮质释放醛固酮,醛固酮的作用是减少肾脏对水分和盐的排泄,增加细胞外液量和血浆量,加大静脉回流量,间接引起高血压[1]。

可见,如果抑制了ACE的活性,就能够有效地防治高血压。

降血压肽对ACE活性的抑制主要由2个因素决定:多肽的分子质量以及多肽的氨基酸组成和结构。

Oshima等[2]人的试验结果表明,一般具有活性的部分其分子质量为1000Dal以下。

1.2已有研究摘要:降血压肽是一种具有降血压作用的蛋白水解产物。

文章阐述了降血压肽在降血压方面的作用功能,并对由食品蛋白资源获得的降血压肽的发展趋势、存在问题及应用前景进行了讨论。

关键词:降血压肽;血管紧张素;作用机理;制备作者简介:段涛(1986-),男,硕士,研究方向为食品生物技术。

降血压肽的研究及应用前景段涛,叶磊(西南大学食品科学院,重庆北碚400715)142008年第4期总第135期最早报道由食品蛋白资源而来的ACEIP 是用细菌胶原酶降解明胶获得的生物活性肽。

随后又从植物蛋白,如小麦谷蛋白、玉米蛋白和大麦醇溶蛋白中分离出ACE的抑制物;从沙丁鱼肌肉组织的酶解物中获得的5个六肽和从东方狐鲣鱼水解物中获得的十余种二肽具有ACE 抑制活性。

ACEIP 的另外一个来源是蛇的毒液。

1982年,Marayama 和Suzuki 就发现酪蛋白的胰蛋白酶水解产物在体外能抑制ACE 活性,从牛β-乳球蛋白、人乳β-和κ-酪蛋白中也得到有抑制ACE 活性的肽,具有抗高血压作用。

Calpis 是日本的一种由脱脂乳经Lactobacillus Helve -ticus 和Saccharomyces Cerevisiae 发酵得到的软饮料,从它里面分离到了ACE 抑制肽。

最初由α-和β-酪蛋白中得到的抗高血压肽Val -Pro -Pro 和Ile -Pro -Pro ,也是由Lb .Helveticus 发酵的牛奶,以及酪蛋白的Lb .Helveticus CP790胞外蛋白酶酶解物中发现的。

一项以无效的安慰剂作对照的实验发现,高血压患者在每天摄取95mL 含有上述两种三肽的酸奶4到8周后,他们的血压显著下降。

Ryhanen 等从用Lactobacillus Acidophilus 和双歧杆菌(Bifidobacteria)发酵的奶酪中分离出三种有ACE 抑制活性的肽,其氨基酸序列分别对应于α-酪蛋白N 端的1~9、1~7、1~6氨基酸残基序列。

尽管从奶制品中获得的ACE 抑制肽的药效不如通常用来治疗高血压的药物,但它们也具有调节活性[3~6]。

2降血压肽的制备现在采用的提取降血压肽工艺主要有3种:酶解法、从自溶产物中提取法和直接从发酵食品中分离提取法。

2.1酶解法肽是蛋白质经酸、碱或蛋白酶作用后的水解产物。

蛋白质的酸碱水解虽然工艺简单、成本低廉,但是在生产过程中酸水解会生成有毒物质,碱水解产物有异味,并且水解程度难于控制,在食品工业中应用很少。

相比之下酶法水解具有反应条件温和、专一性强、副产物少以及易于控制等特点,既不会导致营养成分的损失,也不会产生毒性方面的问题,因此成为目前研究最多的一种方法。

其工艺流程为:原料→碱处理→离心→上清液调pH (沉降蛋白质)→加蛋白酶→酶灭活→层析/超滤→成品。

2.1.1酶的选择由于一般不知道原料蛋白质的一级结构,并且ACE抑制肽也没有固定的结构,故酶法生产ACE 抑制肽存在一定的盲目性,应根据酶的专一性从众多的蛋白酶中进行筛选。

随着酶工程和生物技术的发展,目前已经有许多蛋白酶应用于降血压肽生产。

在选择酶时最好选择内肽酶,避免水解产物中过多的游离氨基酸出现,根据不同原料及工艺要求选择不同种类的酶。

河村幸雄用胃蛋白酶酶解大豆蛋白,获得了较高ACE 抑制活性的短肽。

Se.Kwon Kim 等[7]利用五种不同的蛋白酶对牛皮胶质进行水解,比较各产物的活性,发现链霉蛋白酶E ,Alcalase 和胰凝乳蛋白酶的水解产物活性比其它二种蛋白酶产物的活性高;然后他们将这几种蛋白酶进行组合,发现蛋白酶加入的时间和顺序不同,产物的活性也各不相同,Alcalase 与链霉蛋白酶E 组合产物的降血压活性最高。

然而吴建平等[8]的研究却表明,双酶法的作用效果与单酶法相比,并没有明显优势。

笔者认为,酶的选择直接影响着产物的降血压活性,双酶作用的组合有待优化。

2.1.2分离纯化在酶法生产降血压肽的研究中,不同种类的酶和水解条件都会使目的产物产生差异,包括分子质量分布、氨基酸组成、带电量、pH 值、极性等方面,因此降血压肽的分离纯化至关重要。

肽类分离提取常用的方法包括:凝胶过滤层析、离子交换层析、凝胶电泳、高压液相色谱、毛细管电泳等。

将分离原理不同的两种或多种手段结合使用,可以使得到的目的产物更纯。

Kunio Sue-tsuna 等[9]用阳离子交换树脂Dowex 50W (H +)、Sephadex G-25凝胶和SP-Sephadex C-25从裙带菜(wakame )的酶解产物中分离出降血压肽并分析了其结构;Hee -Guk Byun [10]在Sephadex G-25凝胶层析和SP-Sephadex C-25离子交换层析的基础上,进一步用ODS 柱进行反相高效液相色谱,从Alaska Pollack skin 的酶解产物中分离提取了降血压肽;Made Astawan 等[11]用Sephadex G-25凝胶层析和SP Sephadex C-25离子交换层析分离纯化金枪鱼的酶解产物得到至少4种降血压肽。

2.2从自溶产物中提取法动物原料在适宜温度、pH 等条件下,一定时间后激活细胞内自溶酶系统,水解自身蛋白质产生具有降血压活性的多肽。

Nobyyasu Matsumura 等[12]从鲣鱼内脏的自溶产物中分离出了6种具有降血压活性的三肽和四肽,其中4种有很强的降血压活性。

他们所采用的工艺流程为:鲤鱼内脏→压碎→加水→60℃保温3h ,轻微搅拌→90℃加热停止反应→冷却→超滤。

152008年第4期总第135期JIANG SU SHI PIN YU FA JIAO此法得到的产物虽然比较理想,但由于原料来源狭窄,提取效率有限,因此难以用来规模化生产。

2.3直接从发酵食品中提取法奶酪、豆奶等很多发酵食品中都含有降血压肽,从中提取降血压肽的基本原理是多肽盐析沉淀。

一般选溶解度大、pH 范围广的盐来沉淀多肽。

工艺流程为:发酵液→离心→取上清液→硫酸铵盐析(沉淀)→离心→脱色→超滤→干燥→成品。

Akiko Okamoto 等[13]综合比较了多种不同发酵食品的降血压活性,发现大豆、奶酪等食品经发酵后含有较高活性的降血压肽。

Masuda O 等[14]从酸奶中提取出一种具有较高活性的三肽,它能够不被降解,从而可以直接通过口服降低SHR 的血压,其分子质量在400~500Dal 之间。

3降血压肽实际运用中存在的问题3.1溶解度溶解度是降血压肽在实际应用中必须要考虑的一个问题。

降血压肽虽然富含疏水性氨基酸,但由于其分子量较小,因此溶解度比较大。

人们研究了大豆蛋白水解度与浓度的关系,发现在一定的范围内,大豆多肽的溶解度与水解度呈直线关系,经过酶解的大豆多肽具有较好的溶解性,因此添加到流体食品中不会影响其感官品质。

有人测定了大豆肽在不同环境条件下的物化特性,结果发现蛋白酶水解后的产物的溶解度比未经水解的大豆分离蛋白有了极大的提高,均达到了90%以上,并且在任何pH 下都不会沉淀[15~17]。

根据以上事实可以得出,在实际生产中只要控制产品的分子量在一定范围内,就可以使产品具有较高的溶解度。

3.2苦味降血压肽产品常有一定的苦味,从而影响了其口服性。

产生苦味的原因主要有以下几点:①蛋白质水解过程中,生成一定量的游离氨基酸,如Val ,Leu ,lie ,Met ,Phe ,Thr ,Arg ,His 和Pro ,在游离状态时均带有一定的苦味。

②有些氨基酸本身并不具有苦味,但在水解过程中可转化成呈苦味的衍生物,如酪氨酸在衍变成龙胆酸化合物后,其苦味十分强烈;有些氨基酸与其它成分结合后,也可生成有苦味的结合产物,如精氨酸、赖氨酸等与盐酸反应生成的盐类产物都具有一定的苦味,这类苦味物质的特点是分子量较小,水溶性高,流动性大,其苦味扩散速度比较迅速,故很容易产生苦味。

③由于水解不完全,所生成的一些具有苦味的含疏水性氨基酸的小分子肽类,也是导致蛋白质水解物产生苦味的一个主要原因[18~22]。

所以具有高降血压活性的多肽一般都具有较强的苦味。

消除苦味是降血压肽实际应用必须解决的一个问题。

到目前为止,蛋白质水解物的脱苦方法有以下几种:①掩盖法:采用环状糊精、多磷酸盐、谷氨酸、天门冬氨酸、柠檬酸等物质来掩盖苦味肽的苦味;②膜分离法:利用苦味物质分子量较小的特性,进行超滤膜分离;③酶法或微生物降解法:利用外切型蛋白酶水解掉苦味肽未端的疏水性氨基酸,从而消除苦味。

④选择性分离法:利用苦味物质的疏水性,采用乙醇抽提或疏水性树脂吸收,去除苦味。

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