发酵工程完整版考试复习资料
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发酵工程复习资料1.发酵工业的特点:1.一步生产:微生物发酵是由一系列极其复杂的生化反应组成,反应所需的各种酶均包含在微生物细胞内。
2.反应条件温和3.原料纯度要求低:常以农副产品作原料,如薯干、麸皮等。
原料来源丰富,价格低廉。
4.设备的通用性高:对微生物发酵来说,无论好氧发酵还是厌氧发酵,它们的发酵设备都大同小异,即好氧的一般都用搅拌式发酵罐加空气过滤系统。
厌氧发酵都用密封式发酵罐。
5.对环境的污染相对较小:发酵所用的原料是农副产品,废水中虽然生物需氧量(BOD)、化学需氧量(COD)较高,但有毒物质少。
6.生产受自然条件限制小2.发酵工业常用菌种类型:细菌: 枯草芽孢杆菌、醋酸杆菌、棒状杆菌、短杆菌等放线菌: 链霉菌属、小单胞菌属酵母菌: 啤酒酵母、假丝酵母、类酵母等霉菌: 根霉、毛霉、犁头霉、红曲霉、曲霉及青霉等未培养微生物3.发酵工业对菌种的要求:1,能够利用廉价的原料,简单的培养基,大量高效地合成产物2,有关合成产物的途径尽可能地简单,或者说菌种改造的可操作要强3,遗传性能要相对稳定4,不易感染它种微生物或噬菌体5,产生菌及其产物的毒性必须考虑(在分类学上最好与致病菌无关)6,生长快,发酵周期短,生产特性要符合工艺要求7,培养条件易于控制4.微生物菌种的分离筛选的步骤:样品采集→样品的预处理→目的菌富集培养→菌种初筛→菌种复筛→菌种发酵性能鉴定→菌种保藏。
5.诱变育种的基本步骤:出发菌株的选择处理菌悬液的制备诱变处理中间培养分离和筛选6.菌种变异及退化机理及其防止措施:菌种退化主要指生产菌种或选育过程中筛选出来的较优良菌株,由于进行接种传代或保藏之后,群体中某些生理特征和形态特征逐渐减退或完全丧失的现象。
主要原因:基因突变、连续传代。
防止措施:采用减少传代、经常纯化、创造良好的培养条件、用单细胞移植传代以及科学保藏等措施,不但可以使菌种保持优良的生产能力,而且还能使已退化的菌种得到恢复提高。
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1、举出几例微生物大规模表达的产品,及其产生菌的特点?A.蛋白酶表达产物一般分泌至胞外,能利用廉价的氮源,生长温度较高,生长速度快 ,纯化、分离及分析快速;安全性高,得到 FDA的批准的菌种。
B.单细胞蛋白生长迅速,营养要求不高,易培养,能利用廉价的培养基或生产废物。
适合大规模工业化生产,产量高,质量好。
安全性高,得到 FDA的批准的菌种。
C.不饱和脂肪酸生长温度较低,安全性高,能利用廉价的碳源,不饱和脂肪酸含量高,D.抗生素生产性能稳定,产量高,不产色素,,能利用廉价原料 F.氨基酸代谢途径比较清楚,代谢途径比较简单2、工业化菌种的要求?A能够利用廉价的原料,简单的培养基,大量高效地合成产物B有关合成产物的途径尽可能地简单,或者说菌种改造的可操作性要强C.遗传性能要相对稳定D.不易感染它种微生物或噬菌体E.产生菌及其产物的毒性必须考虑(在分类学上最好与致病菌无关)F.生产特性要符合工艺要求4、讨论:微生物(包括动、植物)可以生产我们所需的一切产品,但是涉及到工业化生产,对于某一种特定的产品,为何只有特定的微生物才具有大量表达的潜力?在不同的环境条件下,微生物细胞对遗传信息作选择性的表达,实现代谢的自动调节。
代谢的协调能保证在任何特定时刻、特定的细胞空间,只合成必要的酶系(参与代谢的多种酶)和刚够用的酶量。
一旦特定物质的合成达到足够的量,与这些物关系支持细胞自身的增殖(生产细胞),不支持(人的)目的产物的过量生产(生产特定的初级代谢产物)。
而工业化生产要求特定表达某种或某类物质,只有正常代谢被打破,代谢协调失常的微生物才能达到要求5、自然界分离微生物的一般操作步骤?样品的采取→预处理→培养→菌落的选择→初筛→复筛→性能的鉴定→菌种保藏 6、从环境中分离目的微生物时,为何一定要进行富集培养?自然界中目的微生物含量很少,非目的微生物种类繁多,进行富集培养,使目的微生物在最适的环境下迅速地生长繁殖,数量增加,由原来自然条件下的劣势种变成人工环境下的优势种,使筛选变得可能。
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发酵工程复习资料发酵工程:利用微生物的生长和代谢活动来大量生产人们所需产品的过程理论与工程技术体系。
该技术体系主要包括菌种选育与保藏、菌种扩大生产、代谢产物的生物合成与分离纯化制备等技术集成。
发酵的本质1、显微镜观察:微生物2、著名的巴斯德实验:微生物作用3、著名的毕希纳实验:酵素(酶)的作用本质:由微生物的生命活动所生产的酶的生物催化作用所致。
发酵动力学:是研究发酵过程中菌体生长、基质消耗、产物生产的动态平衡及其内在规律。
二.发酵工业菌种一、工业上常用的微生物1. 细菌醋杆菌属的醋化醋杆菌、弱氧化醋杆菌、乳酸杆菌、枯草杆菌、丙酮丁醇梭菌、大肠杆菌、谷氨酸棒状杆菌常用的细菌:大肠杆菌应用:对谷氨酸定量分析,生产天冬氨酸、苏氨酸、缬氨酸乳酸杆菌应用:乳酸、干酪、奶子酒、发面、泡菜、酸奶等的制作枯草芽孢杆菌应用:生产淀粉酶2. 酵母菌种类:酒精酵母、啤酒酵母、假丝酵母红酵母、面包酵母应用:生产酒精、啤酒、石油发酵脱蜡和制取蛋白质、生产脂肪3. 霉菌黑曲霉:应用:生产有机酸、生产淀粉酶、果胶酶、葡萄糖氧化酶黄曲霉:应用:酱油、酱类(淀粉酶)米曲霉:应用:产糖化酶和蛋白酶、主要用于酿酒制曲和酱油制曲土曲霉:应用:生产甲义丁二酸毛霉:应用:可以产生蛋白酶,我国多用于豆腐乳、豆豉等的制作根霉:种类:米根霉、华根霉、少根根霉、爪哇根霉应用:酿酒青霉:应用:生产青霉素、葡萄糖氧化酶红曲霉:应用:用于南方红曲酒(女儿红)的生产;用于红色色素的生产、豆腐乳的生产等4. 放线菌:种类:龟裂链霉菌、金霉素链霉菌、灰色链霉菌、红霉素链霉菌应用:各类抗生素。
土霉素、四环素、链霉素、红霉素5.未培养微生物定义:指迄今所采用的微生物纯培养分离及培养方法还未获得纯培养的微生物,其在自然环境微生物群落中占有非常高的比例,约为99%。
❖研究方法1.模拟自然培养法: 原位培养、培养条件优化、单细胞操作2.宏基因组分析法二、发酵工业菌种分离筛选菌种选择的总趋势❖野生菌→变异菌❖自然选育→代谢控制育种❖诱发基因突变→基因重组的定向育种❖1.分离的思路❖新菌种的分离是要从混杂的各类微生物中依照生产的要求、菌种的特性,采用各种筛选方法,快速、准确地把所需要的菌种挑选出来。
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1、名词解析2、填空题、选择频次所在页码次级代谢消毒防腐分批灭菌种子培养呼吸强度生长因子工业培养基种子扩大培养比耗氧速率初级代谢产物培养基菌种退化培养物产率杂交育种发酵工程发酵接种量灭菌除菌空气的绝对湿度、相对湿度实罐灭菌灭菌接种量种龄摄氧率菌株分离发酵热比生长速率稀释率呼吸商氧传质效率酶合成调节菌种保藏原理前体251127241126142633372792232617112115769784739962811575770121931、喷淋冷却连续灭菌流程62、加热过滤除菌流程33、氧从气泡细胞传递过程示意图64、通用式通气搅拌发酵罐图9-1 P1455、菌种保藏的基本原理6、常用的无菌技术和方法主要有哪几种7、常用的灭菌方法有38、检查发酵过程中是否染菌的方法9、发酵过程中微生物要经历的五个时期310、在发酵过程中底物消耗在三个方面11、发酵过程中参数溶解氧浓度的测试方法12、菌种培养流程13、青霉素、酒精发酵工艺流程414、酵母菌菌种选育15、无菌空气的流程16、发酵工艺流程817、种子扩大培养流程5 P7918、KLa的测定方法19、空气除菌的流程220、基因工程操作过程321、大肠杆菌在不同温度下残留曲线P6622、两级法冷却水523、底物消耗与产物生成的关系224、常规育种选育方法225、第五主要消耗的三个方面326、微生物发酵培养过程的方法27、常用的菌种分离方法28、分批灭菌的三个阶段29、发酵罐放大过程中要遵守的原则30、发酵工业发展史31、微生物的分类鉴定指标32、单级连续发酵的稳态方程33、判断放罐的指标34、影响发酵成本的主要因素35、可在线检测的发酵控制参数36、工业化生产中,常采用?来进行高细胞密度发酵注:后面数字表示频数,P开头为页码3、简答题1、简述发酵工业对生产菌种的要求及菌种来源102、举列说明工业菌种的筛选方法43、谷氨酸发酵工业培养基、举例说明工业发酵培养基的设计和优化过程104、简介培养基的灭菌方法75、举例说明种子扩大培养过程(7)、目的要求及一般步骤36、简介酵母乙醇发酵的底物消耗动力学模型及其本征参数的确定97、简介发酵过程中氧的传递方程及其参数的测定方法88、影响氧传递的因素有哪些109、常见的菌种选育有哪些,简介自然选育或紫外线诱变育种的操作步骤710、简述优良种子应具备的条件及种子制备的大致步骤411、谷氨酸、酒精、青霉素的工艺流程712、空气预处理流程设计313、提高除菌效率的主要措施有哪几种214、发酵培养基的特点、要求15、微生物发酵的种子具备哪几方面的条件16、通用发酵罐的结构及几何数据17、写出单机连续培养两个稳态方程,如何解决连续培养中的污染和菌种突变的问题218、不同时期杂菌对发酵有什么影响,杂菌如何控制。
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1.生物学基础:微生物学,微生物的代谢调节(代谢调节(regulation of metablism)是指微生物的代谢速度和方向按照微生物的需要而改变的一种作用。
酶量的调节酶活性的调节),酶合成的调节,酶活性的调节方式,初级代谢的调节,次级代谢的调节2.生物化学基础:糖的微生物代谢(糖酵解),脂类和脂肪酸的微生物代谢,氨基酸和核酸的微生物代谢,微生物的次级代谢,芳香族化合物的微生物代谢,H2和CO2等的微生物代谢,微生物的光合作用,常见发酵产品的发酵机制3.淀粉的糖化和糊化P714.培养基怎么配置,原则P67,69,原材料P57常用原料的化学组成•碳水化学物:主要是单糖和双糖,发酵微生物的碳源和能源。
一些多糖则需转化为单糖或双糖后才被利用。
•蛋白质:蛋白质经蛋白酶分解后产生的多肽或氨基酸,是糖化菌和酵母菌生长繁殖的氮源。
•脂肪:针对不同的发酵产品其作用有较大差别•灰分:主要是P、Mg、K、S、Ca等元素,是微生物生长和代谢所必需的培养基设计的基本原则•培养基的组成必需满足细胞的生长和代谢产物所需的元素,并能提供生物合成和细胞维持活力所需要的能量。
如何进行培养基的设计(1)作出细胞生长和产物形成的化学计算的平衡碳源和能源+氮源+其他需要→细胞+产物+CO2+H2O+热量•通过计算可以获得生产一定数量的细胞时所需的营养物的低数量。
在了解一定数量的生物体所能产生的产物数量后;就有可能计算出形成产物时所需的底物数量。
(2)组成微生物的元素包括C、H、O、 N、S、P、Mg和K(见下表),这些元素都要在方程式中予以平衡(3)有些微生物无力的合成特定营养物,如氨基酸、维生素或核苷酸。
一旦测出其中一种是生长因子,就要在培养基中加入适量的纯净的化合物或含有该物质的混合物。
(4)碳源具有生物合成的底物和能源的双重作用,在需氧条件下,对碳源的需要量可以从菌体对底物的产率系数(Yx/s) 推算而得。
–该系数的定义是:细胞干物质的产量/碳源底物的被利用量5.培养基的灭菌,灭菌方式 P79培养基灭菌的定义•是指从培养基中杀灭有生活能力的细菌营养体及其孢子,或从中将其除去。
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绪论1. 如何理解发酵技术处于生物工程产业化的基础地位?答:○1发酵工程是生物技术产业化的基础和关键技术,是生物技术四大支柱的核心。
○2是生物技术产品走向工业化的必由之路。
2.为什么微生物发酵能成为一种工业,微生物发酵工程的特点是什么?答:○1.微生物发酵产物种类多样,需求量大,广泛应用于医药、食品、农业等。
○2.微生物发酵产量高、培养周期短、成本低、可控制、可大规模化、完全性好等使发酵能实现工业化。
○1催化作用由细胞完成。
○2巨大的比表面积。
○3原料广、价格低廉天然。
○4反应过程温和、生产安全。
○5设备多能性、代谢途径多样化。
○6易变异性,通过菌种改良,提高产量和生活特性。
3.现代微生物发酵工程研究的内容○1菌种的选育和扩大○2最经济地利用营养物,按需确定培养基○3灭菌○4微生物在最优条件下产物的大规模生产○5发酵产物的提取纯化○6废物的处理、再生和生产环境的净化初级代谢产物:初级代谢产物是与菌体生长相伴随的产物。
主要是构成细胞高分子物质(蛋白质、核酸、多糖、脂类)的单体物质。
次级代谢产物:次级代谢产物是以初级代谢产物、中心代谢产物等为原料而进行合成的,与生长不相伴随,生物功能不明确,其合成易受环境影响,结构远比初级代谢复杂。
发酵工程:(微生物工程,发酵技术),是指利用微生物的特定代谢,通过现代工程技术,在生物的反应器中生产有用物质的一种技术系统。
发酵工程是“研究利用微生物的工业,即微生物参与的工艺过程”。
微生物菌种及其复壮与保藏1.菌种退化有哪些原因?如何避免?答:原因:基因突变、连续移代、质粒的脱落、培养和保藏条件的影响避免:(1)尽量减少传代(2)菌种经常纯化(2)创造良好的培养条件(3)用单核细胞移植传代(4)采用有效的菌种保藏方法2.列举出3种微生物保藏法并说出其适用范围答:斜面保藏法—特点:简便有效,易变异,退化甚至死亡。
适合:不要求长期保藏的及不适合冷冻干燥的。
保存期: 3个月液体石蜡油保藏—特别适合:在固体培养基上不能形成孢子的丝状担子菌,如大型食用真菌和药用真菌以及镰刀菌、红曲霉等.注意:保藏温度,液体石蜡需灭菌和除水保存期: 2-3年,甚至5年传代一次.冷冻干燥保藏—特点:不易发生变异,5-10年。
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发酵⼯程复习资料发酵⼯程复习资料第⼀章绪论1、发酵及发酵产品各包括哪些类型答案要点:⼀)发酵的类型:按发酵原料分类:糖类物质发酵、⽯油发酵、废⽔发酵;按发酵形式分类:固体发酵、液体发酵;按发酵⼯艺流程分类:分批发酵、连续发酵、流加发酵;按发酵过程对氧的需求分类:厌氧发酵、通风发酵;按发酵产物分类:氨基酸发酵、有机酸发酵、抗⽣素发酵、酒精发酵、维⽣素发酵、酶制剂发酵⼆)发酵产品的类型:以菌体为产品、以微⽣物的酶为产品、以微⽣物的代谢产物为产品、⽣物转化过程2、了解发酵⼯程的组成、基本要求及主要特点。
答案要点:⼀)组成:上游⼯程:菌种选育、种⼦培养、培养基设计与制作、接种等。
发酵⼯程:发酵培养。
下游⼯程:产物的提取纯化、副产品的回收、废物处理等。
⼆)基本要求:发酵设备、合适的菌种、合适的培养基、有严格的⽆菌⽣长环境三)主要特点:1)发酵过程⼀般来说都是在常温常压下进⾏的⽣物化学反应,反应安全,要求条件简单;2)发酵所⽤的原料主要以再⽣资源为主;3)发酵过程通过⽣物体的⾃动调节⽅式来完成的,反应的专⼀性强,因⽽可以得到较为单⼀的代谢产物;4)获得按常规⽅法难以⽣产的产品;5)投资少,见效快,经济效率⾼;6)维持⽆菌条件是发酵成败的关键;7)环境污染⼩。
3、为什么说发酵⼯程在国民经济中有着重要的地位答案要点:因为发酵⼯程在医药、⾷品、能源、化⼯、冶⾦、农业、环境保护等⽅⾯均有着⼗分重要的作⽤,例如:抗⽣素的⽣产;饮料⾷品等的制造;沼⽓、微⽣物采油、⽣物肥料、⽣物农药以及三废处理等⽅⾯都有很重要的应⽤。
所以说发酵⼯程在国民经济中有着重要的地位。
4、了解发酵⼯业的类型及必备条件。
答案要点:⼀)发酵⼯业类型:⾷品发酵⼯业:⾷品、酒类1)传统分类⾮⾷品发酵⼯业:抗⽣素、有机酸、氨基酸、酶制剂、核苷酸、单细胞蛋⽩酿造业:利⽤微⽣物⽣产具有较⾼风味要求的发酵⾷品。
2)现代分类发酵⼯业:经过微⽣物纯种培养后,提炼、精制⽽获得成分单纯、⽆风味要求的产品。
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发酵工程复习题第一章绪论一名词解释发酵,发酵工程,现代发酵工程,巴氏灭菌法,需氧发酵,厌氧发酵,兼性厌氧发酵,液体发酵,固体发酵(浅盘固体发酵和深层固体发酵),半固体发酵,分批发酵,连续发酵,补料分批发酵。
二简答题1. 简述发酵工业的特点;2。
简述发酵的一般工艺流程(菌种制备、培养基的制备、灭菌、接种、控制发酵条件、产物的提取与精制、回收处理三废物质)。
第二章发酵工业菌种一名词解释菌落,芽孢,荚膜,鞭毛,富集培养,比生长速率,连续培养,诱变育种,菌种退化,菌种的复壮。
二简答题1。
简述酵母菌的形态结构及繁殖方式;2. 菌种分离筛选步骤。
第三章发酵工业培养基设计一名词解释培养基,基础培养基,选择培养基,加富培养基:也称营养培养基,即在培养基中加入有利于某种微生物生长繁殖所需的营养物质,使这类微生物的增殖速度比其他微生物快,从而使这类微生物能够在混有多种微生物的情况下占优势地位的培养基.鉴别培养基;在培养基中加入某种试剂或化学药品,使培养后会发生某种变化,从而区别不同类型的微生物斜面培养基:固体培养基的一种形式;制作时应趁热定量分装于试管内,并凝固成斜面的称为斜面培养基,用于菌种扩大转管及菌种保藏.种子培养基:供孢子发芽、生长和大量繁殖菌丝体,并使菌体长得粗壮,成为活力强的“种子”发酵培养基:供菌种生长、繁殖和合成产物之用。
它既要使种子接种后能迅速生长,达到一定的菌丝浓度,又要使长好的菌体能迅速合成需产物。
二简答题1. 培养基设计的基本原则答:目的明确、营养协调、经济节约、物理化学条件适宜适宜于大规模工业微生物发酵的培养基应具有以下几点共性:①单位培养基能够产生最大量的目的产物。
②能够是目的产物的合成速率最大.③能够使副产物的合成量最少④所采用的培养基应该质量稳定、价格低廉、易于长期获得⑤所采用的培养基尽量不影响工业好气发酵中的通气搅拌性能以及发酵常务的后期处理一般设计适宜于工业大规模发酵的培养基应遵循以下原则:①必须提供合适微生物细胞和发酵产物的基本成分②有利于减少培养基原料的单耗③有利于提高产物的浓度,以及提高单位容积发酵罐的生产能力④有利于提高产物的合成速度,缩短发酵周期⑤尽量减少副产物的形成,便于产物的分离纯化,并尽可能减少产生“三废”物质⑥原料价格低廉,质量稳定,取材容易⑦所用原料尽可能减少对发酵过程中通气搅拌的影响,利于提高氧的利用率,降低能耗.第四章发酵工业的无菌技术一名词解释灭菌:用物理或化学方法杀死物料或设备中所有生命物质的过程消毒:用物理或化学方法杀死空气、地表以及容器和器具表面的微生物除菌:用过滤方法除去空气或液体中的微生物及其孢子防腐:用物理或化学方法杀死或抑制微生物的生长和繁殖分批灭菌:将配置好的培养基放入发酵罐或其他装置中,通过蒸汽将培养基和所用设备仪器进行灭菌的操作过程,也称实罐灭菌连续灭菌:将配置好的培养基向发酵罐等培养装置输送的同时进行加热、保温和冷却等灭菌操作过程二简答题1.发酵过程污染的危害;答:①使发酵培养基因杂菌的消耗而损失,造成生产能力的下降②杂菌合成一些新的代谢产物,或杂菌污染后改变了发酵液的某些理化性质,使发酵产物的提取和分离变得困难,造成产物收率降低后产品质量下降③杂菌代谢会改变原反应体系的pH,使发酵发生异常④杂菌分解产物,使生产失败⑤细菌发生噬菌体污染,微生物细胞被裂解,导致整个发酵失败2.发酵工业常用的无菌技术;答:①干热灭菌法②湿热灭菌法③射线灭菌法④化学药剂灭菌法⑤过滤除菌法⑥火焰灭菌法3。
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一、名词解释1传统发酵工程:通过微生物生长的繁殖和代谢活动,产的生物反应过程。
将DNA重组细胞融合技术、酶工程技综合对发酵过程控制、优化及放大指迄今所采用的微生物培养分离及培养微生物。
(特别是极端微生物)4富集培养主要方法:是利用不同种类的微生物其生长繁求不同,如温度、PH、培养基C/N等,是目的微生物在最适条件下迅速生长繁殖,数量增加,成为人工环境下的优势种。
方法:⑴控制培养基的营养成消毒仅仅是杀死生物体或非生物体表死营养细胞,而不能杀死细菌芽孢和真菌孢子等,特别适合与发酵车间的环境和发酵设备、器具的灭菌处理。
灭菌杀灭所有的生命体,因此灭菌特别适的灭菌处理。
法及其区别:湿热灭菌法:指将物品置高压饱和蒸汽、过热水喷淋等手段使微生物菌体中的蛋白质、核酸发生变性而杀灭微生物的方法。
该法灭菌能力强,为热力灭菌中最有效、应用最广泛的灭菌方法。
药品、容器、培养基、无菌衣、胶塞以及其他遇高温和潮湿不发生变化或损坏的物品,均可采用本法灭菌。
干热灭菌法:指将物品置于干热灭菌柜、隧道灭菌器等设备中,利用干热空气达到杀灭微生物或消除热原物质的方法。
适用于耐高温但不宜用湿热灭菌法灭菌的物品灭菌,如玻璃器具、金属制容器、纤维制品、固体试药、液用本法灭菌。
即在规定温度下杀死一定比例的微生物所用8致死温度:杀死微生物的极限温在致死微生物所需要对的致死时间。
制好的培养基放入发酵罐或其他装置中,基和所用设备一起(实罐灭菌)进行灭菌10连续灭菌:将配制好的培养基向发酵罐等培养装置输热、保温盒冷却等灭菌操作过程。
是指将冷冻干燥管,沙土管中处于休眠状入试管斜面活化后,再经过摇瓶及种子罐逐级扩大培养而和质量的纯种的过程纯培养物称为种是指种子的龄:是指种子始移入下一级的培养是指移入的种子液体积和影响呼吸所能允许的最低溶氧浓13稀释度D:单位时间内连续连续流入发酵罐中的新鲜的培养总体积的比值。
把导致菌体开始从系统中洗出时的稀发酵过程中,引起温度变化的原因是由于生的净物在生长繁殖过程中,本身产生的耗氧培养的发酵罐都有一定功率的做机械运动,造成液体之间、液体与设备之间的摩擦,由此产生。
依靠无菌压缩空气作为液体的提升力,翻动实现混合和传质传热过程。
其特点是结构简单,无轴封,不易污染,氧传质效率高,能耗低,安装维修方便。
缺点:不适合高粘度或含大量固体感菌体的生产。
培养基中某些成分的加入有助于生长因子、前体。
产物抑制和促进剂。
微生物生长不可缺少的微量的有机物质,不是必需。
18前体:指加入到发酵培养基中能直接被微生物在生物到产物分子中去,其自身的结构并没有多大变化,但是产物的产量却因其加入而有较大提高的一类那些细胞生长非必需的,但加入量的一些物质,常以添加剂的形式20分批发酵(序批式发酵):指一次性投料、接种直到发留在发酵罐内。
在发酵过程中,连续向发酵罐流加培养基,培养液。
搅拌器输入搅拌液体的功率,具用以客服介质阻力所需用的功率。
23供氧:指空气中的氧气从空气泡里通过气膜、气液界液体主指氧气从液体主流通内。
生产菌种或选育过程中筛选出来的优良传代和保藏之后,群体中某些生理特征和形态特征逐渐减退或完全丧失的现象。
25氨基酸发酵:指合成菌体蛋白质的氨基酸脱离其正常是对产品使污染物产生量、流失量和治理量达到最小,使资源充分利用。
②末端治理:把环境责任放在保护研究、管理等人员身上,产生的污染物的处理上,总是处于一种被动的、消极的地位。
③因为工业生产无法完全避免污染的产生,推行清洁生产的同时还需要末端治理。
二、选择填空1染菌概率:在实际生产过程中,要实现每批次发酵都完染几乎是不可能的,一般采用“染菌概率”一般为10-3①细菌②放线菌③酵母菌④霉菌⑤未培养采集样品→样品预处理→目的菌富酵性能鉴定→菌种保藏层的微生物数量最多,秋季采土样物理方法、化学方法、诱饵法。
因突变;直接原因:连续传菌种保藏方法:①斜面低温保藏法②砂土管保藏法③冷液保藏法⑥液体石蜡保藏据微生物生理、生化特点,人为地于不活泼、生长繁殖受抑制的持菌种存活率②减少变异③保持优良性状7液氮超低温保藏法:原理:在超低温(-130℃)状态下延续,且不发生加保护剂(甘油等)制成菌悬液封于安瓿管内温速度的冻结后,贮藏在-150~-190℃液氮冰箱内;特点:适合各类微生物①适合各类微生物②保存时间长③需特殊设备④操作较复杂8培养基成分:①碳源(糖类,导致PH下降;油和脂肪,,导致PH上升)②氮源(有机、无量元素④水⑤生长调节物质。
⑴一般首先是通过单因子实验确定培养基成因子实验确定培养基个组分及其适宜的浓度;⑵响应面分析法对培养基进行优化①最陡爬坡实验10检测染菌方法:镜检查法②平板划线培养检法④发酵过程异常现象观察法(溶CO2、粘度)。
种子带菌②过滤空气带菌③设备的培养基霉菌不彻底⑤操作不当⑥噬干热灭菌法,湿热灭菌法,射线灭菌法,除菌法,火焰灭菌法13空气除菌方法:辐射杀菌,加热杀菌,静电除菌,过乙醇发酵;部分相关型,中间复杂发酵类型:抗生15DO值只是发酵与配合起OUR:CER:CO2的产品的质量和经济效式、固定化、指在一定的搅拌转速下,在搅拌罐中增加而漩涡基本消18发酵罐构件:搅拌器,挡板,空气分布器,换热装置。
罐的基本体积上升,单位发酵液清洁生产过程,清洁产品和理,改进生产工艺,废20工艺技术改革方式:改变原料,改进生产设备,改革经济效益,环境效益,社会效,反应过程,后23总成本费用=成本+销售费用+管理费用+财务费用①气泡与包围着气泡的液体之间体分子处于层流状态,氧气以浓度差方式透过双膜,任何一点的氧浓度氧分压相等;②在双膜之间的界面上,氧分压与溶于液体中的氧浓度处于平衡状态;③氧传递过程处于稳定状态时,传递途径上各间而变化。
为了提高分离效率,通常富集培养课增加数量。
是为了获得大量的活力强的种子,以便中尽可能的缩短延迟期,种子最好是在对数生长期接种。
27. S0 为底物初始St为发酵时间为t时底物的残留小。
、传热及混合效30发酵罐放大极限为100级成本的20% ~30%32酒精发酵原料:淀粉质原料、糖质原料、纤维质原料。
三、简答1影响微生物耗氧因素:①微生物本身遗传特征的影响菌龄④发酵条件⑤代谢类影响③碳氮比对菌体代谢调节的重要性④ PH对不同3发酵工艺过程:①用作种子扩大培养及发酵生产的各种基、发酵罐及其附属设备的灭菌;③扩大培养有活性的适量纯种,以一定比例形成大量的代谢产物;④控制最适的发酵条件使微生物生长并形成大量的代谢产物;⑤将产物提取并精制,以得到合格的产品;酵过程中所产生的三废物质。
(P8图)①能在廉价原料制成的培养基上生长,且生量高、易于回收;②生长较快,发酵周期短;③培养条件易于控制;④抗噬菌体及杂菌污染的能力强;⑤菌种不易变异退化,以保证发酵生产和产品质量的稳定;⑥对放大设备的适应性强;⑦菌种不是病原菌,不性物质和毒素。
必须提供合成微生物细胞和发酵产少培养基原料的单耗,即提高单位营养物质的转化率。
③有利于提高产物的浓度,以提高单位容积发酵罐的生产能力。
④有利于提高产物的合成速度,缩短发酵周期。
⑤尽量减少副产物的形成,便于产物的分离纯化,并尽可能减少“三废”物质。
⑥原料价格低廉,质量稳定,取材容易。
⑦所用原料尽可能减少对发酵过程中通气搅拌的影响,利于提高氧的利用率,降低能①原材料质量:生产过程中经常其主要原因在于原材料质量波动;②培养温度:温度对多数微生物的斜面孢子质量有显著影响;③湿度:斜面孢子培养基的湿度对孢子的数量和质量都有较大影响。
湿度低,孢子生长快;湿度高,孢子生长慢;④通气与搅拌:在种子罐中培养的种子除保证供给易于利用的营养物质外,应有足够的通气量,以保证菌种代谢的正常,提高种子的质量;⑤斜面冷藏时间:斜面冷藏时间对孢子的生产能力有较大影响,通常冷藏时间越长,生产能力降低越多;⑥培养基:一般来说,种子罐是培养菌体的,培养基的糖分要少而对微生物生长起主导作用的氮源要多,而且其中无机氮源所占比例要大些;⑦pH:各种微生物都有自己生长和合成酶的最适pH,为了达到微生物的打了繁殖和酶合成的目的,培养基必须要保①能在廉价原料制成的培养基上生长,且生量高、易于回收;②生长较快,发酵周期短;③培养条件易于控制;④抗噬菌体及杂菌污染的能力强;⑤菌种不易变异退化,以保证发酵生产和产品质量的稳定;⑥对放大设备的适应性强;⑦菌种不是病原菌,不性物质和毒素。
①分批作业操作简单,周期短,染菌程产品质量易控制;②不利于测定其过程动力学,存在底物限制或抑制问题,出现底物分解阻遏效应以及二次生长现象;③对底物类型及初始浓度敏感的次级代谢产物如一些抗生素等就不适合采用分批发酵;④营养层分很快耗竭,无法维持微生物继续生长和生产;①添加新鲜培养基,克服养分不足所延长对数期生长期,增加生物量等;②长时间发酵,菌种易变异,易染菌;③操作不当,新加入的培养基与原有培养基不易完全混合。
10补料分批发酵优缺点:①可以解除底物的抑制,产物应;③避免在分批发酵中因一次性投糖过多造成细胞大量生长,耗氧量过多,以致通风搅拌设备不能匹配的状况;③菌体可被控制在一续的过度态阶段,可用来作为控制细胞质量的手段①无菌要求低;②菌体变异11分批补料发酵的应用:①消除分解阻遏作用,保障通浓度培养基的抑制作用并延配置合适的培养基,调节培养基初始使其具有很好的缓冲能力;②培养过程中加入非营养物质的酸碱调节剂;③培养过程中加入基质性酸碱调节剂;④加入生理酸性或碱性盐基质;⑤将pH控制与代谢结合起来,通过补料来控制pH。
13搅拌式、气升式结构特征及其应用:①搅拌式:带有机械搅拌的作用是使发酵液充分混合,保持液体中的固性物料呈悬浮状态,并能打破空气气泡以提高气液间的传氧速率。
较适合对剪切力生长,不适于高粘度或含大量固体的培依靠无菌压缩空气作为液体的提升力,下翻动实现混合和传质传热过程,特点是结构简单、无轴封、不易污染、氧传质效率高、能耗低、安装维修方便。
14清洁生产与末端治理的比较:①清洁生产:是对产品使污染物量和治理量达到最小,使资源充分利用。
②把环境责任放在保护研究、管理等人员身上,产生的污染物的处理上,总是处于一种被动的、消极的地位。
③因为工业生产无法完全避免污染的产生,推行清洁生产的同时还需15味精清洁生产工艺优点:①取消离子交换工艺,减少温结晶,节约大量冷冻耗电;③因为采用闭路循环工艺,除了副产品中夹带少量目标产物外,没有其他损失,故产品得率高;④实现物料主体闭路循环,达到经济、环境和社会效应的三统一;⑤冷凝水可循环作为工艺用水,实现废水零排放。
①当发酵能力和生产效率时,可采用分批发酵,因为分批发酵对设备的要求低;②某些发酵产品的生产成本主要决定于发酵阶段的生产能力和基质的转换率,如菌体蛋白、酒精的发酵:如果发酵采用的微生物能高效的利用基质,菌种遗传性能稳定,以及抗菌能力强,这时可采用连续发酵,因为其经济效益高于分批发酵;③已发酵后期处理成本为主的发酵类型不适于进行连续发酵,因为连续发酵的培养液中产物浓度低,提取成本高,尽管其总生产率较高,但总成本费用高得多,此时,可采用分批补料发酵,因为其产物浓度高,易于分离纯化。