实验二-显微镜的使用-细菌三型的观察-霉菌的形态观察
实验三、霉菌的形态观察和酵母菌的形态观察及死活细胞鉴别
芽细胞
酿酒酵母
假丝酵母
子囊
子囊孢子
裂殖
毛霉
根霉
、霉菌形态 霉菌可产生复杂的分枝菌丝， 霉菌可产生复杂的分枝菌丝 ， 其菌丝可分为基 内菌丝和气生菌丝， 内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化 产生繁殖菌丝， 由繁殖菌丝产生孢子。 产生繁殖菌丝 ， 由繁殖菌丝产生孢子 。 霉菌菌丝 尤其是子实体） （尤其是子实体）及孢子的形态特征是识别不同种 类霉菌重要依据。 类霉菌重要依据。 霉菌菌丝和孢子的宽度比细菌粗得多， 霉菌菌丝和孢子的宽度比细菌粗得多， 通常是 细菌菌体宽度的几倍到几十倍，因此， 细菌菌体宽度的几倍到几十倍，因此，有低倍显微 镜即可观察。 镜即可观察。
四、操作步骤
1、酵母菌形态观察和死活细胞鉴别
1）在载玻片上滴加0.1%吕氏碱性美蓝染色液 在载玻片上滴加0 酵母菌菌悬液，与染液混匀， 酵母菌菌悬液，与染液混匀，盖上盖玻片 放置3min后镜检 放置3min后镜检
操作要点： 操作要点： • 染液不宜过多或过少，否则影响观察。 染液不宜过多或过少，否则影响观察。 • 盖玻片不宜平着放下，以免产生气泡影响观察。 盖玻片不宜平着放下，以免产生气泡影响观察。 • 先用低倍镜找到适当视野，再换高倍镜观察。 先用低倍镜找到适当视野，再换高倍镜观察。
三、实验器材
1、菌种：酿酒酵母、青霉菌、曲霉菌、毛霉菌等 菌种：酿酒酵母、青霉菌、曲霉菌、 2、染色剂： 0.1%吕氏碱性美蓝染色液，棉蓝染色 染色剂： 0.1%吕氏碱性美蓝染色液， 吕氏碱性美蓝染色液 液 3、仪器或其他用具：载玻片、生理盐水、酒精灯、 仪器或其他用具：载玻片、生理盐水、酒精灯、 接种环、解剖针、盖玻片、显微镜、擦镜纸、 接种环、解剖针、盖玻片、显微镜、擦镜纸、滤纸 等
霉菌形态观察实验
霉菌的形态观察实验一．实验目的1．掌握配制合成马铃薯培养基（PDA）的一般方法。
2．学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。
3．了解并掌握四类霉菌（根霉、毛霉、曲霉、青霉）的基本形态特征。
二．实验原理1．霉菌霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。
霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。
霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约 3-10μm ），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。
观察霉菌的形态有多种方法，常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法，本节课用载玻片培养观察法。
2．载玻片培养法（小培养法）用无菌操作将培养基琼脂薄层小块（约1cm2）置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。
培养一定时间后，将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。
这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。
三．实验器材1．菌种：曲霉 ( Aspergillus sp. ) ，青霉（Penicillium sp.），根霉( Rhizopus sp. ) 和毛霉（Mucor sp. ）培养 2-5d 的斜面培养物。
2. 培养基：马铃薯培养基（PDA）3. 仪器或其他用具：超净台，无菌吸管，接种环，酒精灯，平皿，载玻片，盖玻片， U 型玻棒，解剖刀，镊子， 50% 乙醇， 20%的甘油，滤纸片，以及显微镜等。
四．实验步骤载玻片培养观察法（小培养法）1．培养小室的准备及灭菌在平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片，再放一 U 形玻棒，其上放一块洁净载玻片和两块盖玻片，盖上皿盖、包扎后于 110 ℃ 灭菌20-30min ，不烘干，备用。
2．琼脂块的制作取已灭菌的马铃薯培养基（PDA）无菌操作注入两个已灭菌平皿中，使之凝固成薄层。
实验五霉菌的形态观察
实验五霉菌的形态观察一、实验目的1、掌握观察霉菌形态的基本方法，观察常见几种霉菌的菌丝形态2、观察霉菌个体形态及各种无性孢子的形态二、实验原理霉菌是由许多较之在一起的菌丝体构成。
在超市的条件下，霉菌可以生长出丝状，绒毛状或蜘蛛网状的菌丝体。
单个菌丝在显微镜下观察呈管状，有的霉菌其菌丝有横隔膜，将菌丝分割为多细胞，成为有隔菌丝。
有点霉菌，其菌丝没有横隔膜，称为无隔菌丝。
菌丝的直径比一般细菌和放线菌菌丝大几倍到几十倍。
菌落形态较大，质地较疏松，其疏松程度不等，颜色各异。
菌丝体经制片后可用低倍或高倍显微镜观察。
在观察时，要注意菌丝直径大小，菌丝体有无横隔膜，营养菌丝有无假根，无性繁殖或有性繁殖时形成的孢子种类及着生方式。
三、实验仪器及试剂（1）菌种：曲霉、青霉、根霉和毛霉（2）仪器：显微镜、擦镜纸等。
四、实验步骤根据需要可以取出各种霉菌载玻片置低倍镜下观察，必要时换高倍镜，绘制霉菌的形态，记录各种霉菌的形态特征。
五、数据记录和处理表格：四种霉菌的形态特征六、实验心得1•观察根霉时，注意观察其菌丝有无横隔、假根、孢子囊柄、孢子囊、囊轴、囊托、孢子囊孢子及厚垣孢子。
2•观察毛霉时，注意观察其菌丝无横隔、孢子囊柄、囊轴、孢子囊孢子及后垣孢子。
3•观察曲霉时，注意观察其菌丝有横隔、足细胞、分生孢子梗、顶囊、小梗（形状、层数及着生情况）、分生孢子。
4•观察青霉时，注意观察其菌丝有横隔、分生孢子梗、帚状枝（小梗的轮数及对称性）、分生孢子七、实验考核表2实验成绩自评及组评成绩表八、实验纪实青霉4*10 青霉10*10青霉40*10 毛霉4*10毛霉10*10 毛霉40*10曲霉4*10 曲霉10*10曲霉40*10 根霉4*10根霉10*10 根霉40*10。
霉菌的形态观察实验报告
霉菌的形态观察实验报告
实验目的，通过观察霉菌的形态特征，了解霉菌的生长规律和形态特点。
实验材料和方法，将霉菌培养基均匀涂抹在培养皿上，接种霉菌，放置在25摄氏度下培养一周。
观察霉菌的生长情况，记录下霉菌的形态特征。
实验结果，经过一周的培养，我们观察到霉菌在培养皿上呈现出不同的形态特征。
首先，我们发现霉菌的生长呈现出不规则的菌丝状，有的呈现出圆形，有的呈现出分枝状，有的呈现出丝状。
其次，霉菌的颜色也各不相同，有的呈现出白色，有的呈现出绿色，有的呈现出黑色。
最后，我们还观察到霉菌在培养基上形成了孢子，孢子的形态也各异，有的呈现出囊状，有的呈现出杆状，有的呈现出球状。
实验分析，通过观察和记录，我们发现霉菌的形态特征具有多样性，不同的霉菌在不同的培养条件下呈现出不同的形态特征。
这些形态特征与霉菌的生长环境、营养条件、气候等因素密切相关。
霉菌的形态特征对其生长繁殖、传播途径等具有重要意义，也为我们研究霉菌的生物学特性提供了重要的参考。
实验结论，通过本次实验，我们对霉菌的形态特征有了更深入的了解。
霉菌的形态特征具有多样性和变异性，这为我们研究霉菌的分类、鉴定和防治提供了重要的依据。
同时，我们也意识到了霉菌的生长环境对其形态特征的影响，这对我们预防和控制霉菌的生长具有一定的指导意义。
总结，本次实验通过对霉菌的形态特征进行观察和记录，增加了我们对霉菌的认识，也为我们今后的研究工作提供了重要的参考。
希望通过我们的努力，能够更好地认识和理解霉菌，为人类的健康和生活环境做出更大的贡献。
实验二普通显微镜的使用及细菌形态观察
动物镜转换器将其他物镜转到工作位置进展观察时，物象 将保持根本聚焦的状态，这种现象称为物镜的同焦 〔parfocal〕。利用这种同焦现象，可以保证在使用高倍 镜或油镜等放大倍数高、工作距离短的物镜时仅用细调节 器即可对物像清晰聚焦，从而防止由于使用粗调节器时可 能的误操作而损坏镜头或载玻片。
实验二 普通光学显微镜的使用 和细菌形态观察
一 实验目的
1、学习并掌握油镜的原理和使用 方法。
2、学习普通台式显微镜的构造、 各局部的功能和使用方法。
3、了解细菌的三种根本形态
二、根本原理
微生物是个体微小、构造简单、肉眼无法看到的 微小生命体。因此，我们要借助显微镜来进展观 察。显微镜的种类很多，但根本构造可分为两大 局部 ：一是机械装置，二是光学系统
在聚光器的数值孔径确定后，假设需要改变光照强度， 可通过升降聚光器或改变光源的亮度来实现，原那么上不 应再通过光圈的调节。当然，有关虹彩光圈、聚光器高度 和照明光源强度的使用原那么也不是固定不变的，只要能 获得良好的观察效果，有时也可根据不同的具体情况灵活 运用，不一定拘泥不变。
2、显微观察
在目镜保持不变的情况下，使用不同放大倍数的物镜所能 到达的分辨率及放大率都是不同的。一般情况下，特别是初 学者，进展显微观察时应遵从由低倍镜到高倍镜再到油镜的 观察程序，因为低倍数物镜视野相对大，易发现目标及确定 检查的位置。
显微镜的放大倍数和分辨率 1.放大倍数=接物镜放大倍数×接目镜放大倍数 2. 显微镜的分辨率 是表示显微镜辨析物体 〔两端〕两点之间距离的能力，可用公式表示为： D=λ/2n·sin(α/2 ) 式中D：物镜分辨出物体两点间的最短距离。
：可见光的波长〔平均0.55 m) n: 物镜和被检标本间介质的折射率。
霉菌的形态观察
实验三、霉菌的形态观察
一、实验目的：
（1）观察霉菌的群落特征
（2）观察霉菌个体形态及各种无性孢子的形态
（3）掌握霉菌的制片方法
二、实验原理：
霉菌是由许多较之在一起的菌丝体构成。
在超市的条件下，霉菌可以生长出丝状，绒毛状或蜘蛛网状的菌丝体。
单个菌丝在显微镜下观察呈管状，有的霉菌其菌丝有横隔膜，将菌丝分割为多细胞，成为有隔菌丝。
有点霉菌，其菌丝没有横隔膜，称为无隔菌丝。
菌丝的直径比一般细菌和放线菌菌丝大几倍到几十倍。
菌落形态较大，质地较疏松，其疏松程度不等，颜色各异。
菌丝体经制片后可用低倍或高倍显微镜观察。
在观察时，要注意菌丝直径大小，菌丝体有无横隔膜，营养菌丝有无假根，无性繁殖或有性繁殖时形成的孢子种类及着生方式。
由于霉菌的菌丝较大，而且孢子容易飞散，如将菌丝体制与水中易变形，故观察时用浸片法将其置于乳酸石碳酸棉溶液中、菌丝和孢子染成蓝色，保持菌丝体圆形，使细胞不易干燥，并有杀菌作用。
三、实验材料：
（1）菌种：产黄青霉、黄曲霉、黑根霉
（2）时间和溶液：乳酸石炭酸棉溶液
（3）仪器和其他物品：显微镜、接种环、载片、擦镜纸等
四、实验内容：
产黄青霉：顶囊分生孢子梗分生孢子小梗分生孢子有横隔膜黄曲霉：分生孢子梗分生孢子小梗分生孢子有横隔膜
黑根霉：假根匍匐枝孢子顶囊孢子囊舟孢子囊孢子囊孢子
五、实验结果：
六、讨论
（1）霉菌的无性繁殖和有性繁殖的孢子各有几种？
无性繁殖——无形孢子：游动孢子、包囊孢子、分生孢子、节孢子、厚垣孢子、芽孢子掷孢子
有性繁殖——有性孢子：卵孢子、接合孢子、子囊孢子、担孢子。
微生物学 实验5 霉菌的形态观察
实验五
一、实验目的
霉菌的形态观察
(1)观察霉菌的菌落特征。 (2) 观察根霉、青霉、曲霉的形态构造及无 性孢子。
(3)学习并掌握霉菌的制片方法。
二、实验原理
霉菌为真核微生物，菌丝较粗大，有分枝或不 分枝的。菌丝体为无色透明或暗褐色至黑色，或呈 现鲜艳的颜色。在显微镜下观察时，菌丝皆呈管状。 在固体培养基上生长，为绒毛状或棉絮状。一些较 高等的霉菌丝状管道中皆有横隔，将菌丝隔成许多 细胞。霉菌细胞易收缩变形，而且孢子很容易分散， 所以制标本时常用乳酸石炭酸棉兰染色液。该染色 液①可使细胞不变形；②具有防腐杀菌作用；④不 易干燥，能保持较长时间；⑤溶液本身呈蓝色，有 一定的染色效果。
三、实验材料
1.菌种 黑曲霉、青霉、黑根霉。
2. 其他 显微镜、培养箱、养皿、乳酸 石炭酸棉蓝染色液、载玻片、盖玻片、 无菌水、接种环、接种钩、解剖针、酒 精灯、火柴、滤纸、玻璃铅笔等。
四、操作方法
(一)制片观察法（水浸片法制作标本片）
(1) 在一洁净载玻片上，滴一滴乳酸石炭酸棉兰 染色液；按无菌操作，用解剖针挑取少量带有 孢子的霉菌菌丝于染色液中（注：挑取带有颜 色的菌丝），再细心地把菌丝挑散开，然后用 盖玻片盖上（注：不要产生气泡）。 (2)置于显微镜下，观察霉菌菌丝的形态（观察 菌丝有无隔膜、假根、匍匐枝、足细胞；以及 无性或有性孢子的形态、大小和颜色等）。
显微形态：菌丝体无隔，有 假根和匍匐枝，其中，匍匐 黑根霉（匍枝根霉） 枝无色，假根发达呈褐色。 孢子囊簇生呈黑色或褐色， 菌落：初期白色，老熟 可形成球状接合孢子。 后灰褐色
根霉
孢子囊
匍匐枝 假根 接合孢子
孢囊孢子
接合孢子
黑曲霉
曲霉
实验二-显微镜的使用-细菌三型的观察-霉菌的形态观察-刘
先用 10x 物镜直接观察生长在培养皿盖上的根霉菌丝，
因菌丝是立体形态，观察时应将显微镜载物台上下移动， 以便看清菌丝全貌。
再取一载玻片，滴一滴蒸馏水，解剖针挑取少量根霉 菌丝浸入水滴中，用解剖针将菌丝拨散、分开，盖 上盖玻片。10x 物镜观察菌丝、假根、孢子囊。
接合孢子
观察根霉菌丝情况和子囊 孢子情况（着重辨认孢 子囊、包囊梗、假根）
第十一页，共21页。
五、实验结果
❖ 绘制青霉 (40x)、黑曲霉 (40x)、根霉(10x) 的形态，注明各部分名称。
第十二页，共21页。
六、思考题
❖ 你认为在显微镜下，细菌和霉菌的主要区别 是什么？
❖ 在霉菌的制片过程中，你觉得要注意哪些环 节才能制得好的片子?
1.不准擅自拆卸显微镜的任何部件，以免损坏。 2.镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，以保证光洁
度
3.观察标本时，必须依次用低、中、高倍镜，最后用油镜。 当目视接目镜时，特别在使用油镜时，切不可使用粗调节 器，以免压碎玻片或损伤镜面。
4.拿显微镜时，一定要右手拿镜臂，左手托镜座，不可单手拿，
更不可倾斜拿。
第十三页，共21页。
实验(二) 油镜的使用
实验目的
❖ 学习并掌握普通光学显微镜的构造和油镜的 使用技术及维护的基本知识
❖ 初步认识细菌的基本形态
第十四页，共21页。
实验原理
❖显微镜的构造
1.光学部分:目镜 、物镜 、照明装 置(聚光镜、虹彩光圈、反光 镜等)。它使检视物放大，生 成物象。
2.机械部分:镜座、镜臂、镜筒、 物镜转换器、载物台、载物台转 移器、粗调节器、细调节器等部 件。它起着支持调节 固定等作 用。
浸没油与玻璃的折射率相近
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3
黑曲霉
❖ 属于半知菌亚门, 菌丝有隔, 细胞多核；部分气生菌丝细 胞形成特化的厚壁、膨大的 足细胞，由足细胞的中间稍 呈垂直地向上延长，形成分 生孢子梗。
4
青霉
❖ 属于半知菌亚门,分 生孢子梗基部无足细 胞，孢子梗顶端不膨 大成囊，而是多次分 枝形成扫帚状，小梗 末端形成分生孢子。
8
2、葡枝根霉水浸片的制作
先用 10x 物镜直接观察生长在培养皿盖上的根霉菌丝， 因菌丝是立体形态，观察时应将显微镜载物台上下 移动，以便看清菌丝全貌。
再取一载玻片，滴一滴蒸馏水，解剖针挑取少量根霉 菌丝浸入水滴中，用解剖针将菌丝拨散、分开，盖 上盖玻片。10x 物镜观察菌丝、假根、孢子囊。
9
黑曲霉
❖ 初步认识细菌的基本形态源自15实验原理❖显微镜的构造
1.光学部分:目镜 、物镜 、 照明装置(聚光镜、虹彩光圈、 反光镜等)。它使检视物放大， 生成物象。
2.机械部分:镜座、镜臂、镜筒、 物镜转换器、载物台、载物台 转移器、粗调节器、细调节器 等部件。它起着支持调节 固定 等作用。
16
倒立的虚像
5
根霉
❖ 横向生长的菌丝产生 假根，附着在基质上。
❖ 菌丝无隔、无性生殖 产生孢囊孢子，有性 生殖产生接合孢子。
6
三、实验材料
❖ 真菌培养物
1. 黑曲霉、根霉、青霉的培养物。 2. 黑曲霉、根霉、青霉示范片。
❖ 显微镜、载玻片、接种环、解剖针、酒精灯、镊子 等。
❖ 50％酒精、蒸馏水等。
7
四、实验步骤：霉菌水浸片的制作和观察：
洁度 3.观察标本时，必须依次用低、中、高倍镜，最后用油
镜。当目视接目镜时，特别在使用油镜时，切不可使 用粗调节器，以免压碎玻片或损伤镜面。 4.拿显微镜时，一定要右手拿镜臂，左手托镜座，不可 单手拿，更不可倾斜拿。 5.显微镜应存放在阴凉干燥处，以免镜片滋生霉菌而腐 蚀镜片。
20
实验结果
❖ 绘制细菌三型。 ❖ 思考题： P47：1、3
1、黑曲霉、青霉的水浸片的制作
取一块干净的载玻片，滴加50％的乙醇一滴 →用解剖针挑取少量有孢子的霉菌菌丝（注意
曲霉和青霉需要适当挑取一点培养基）浸入 乙醇洗涤 →于另一干净载玻片上加一滴蒸馏水，再将洗 涤后的菌丝置于蒸馏水中，用解剖针将菌丝 尽量分散， →盖上盖玻片，用橡皮或塑料请轻轻敲击。 →镜检：10x ，40x物镜观察。
21
本次实验课结束
所用器皿自己洗净！
请第二组同学留下值日
下周再见！
22
假根）
12
五、实验结果
❖绘制青霉 (40x)、黑曲霉 (40x)、根霉 (10x)的形态，注明各部分名称。
13
六、思考题
❖ 你认为在显微镜下，细菌和霉菌的主要区别 是什么？
❖ 在霉菌的制片过程中，你觉得要注意哪些环 节才能制得好的片子?
14
实验(二) 油镜的使用
实验目的
❖ 学习并掌握普通光学显微镜的构造和油镜的 使用技术及维护的基本知识
❖ 观察黑曲霉菌丝分隔情况 和分生孢子着生情况（着 重辨认分生孢子梗、足细 胞和分生孢子）
10
青霉的帚状枝与分生孢子
副枝
梗基 小梗
❖ 观察青霉 分生孢子 着生情况 （着重辨 认分生孢 子梗和分 生孢子）
11
葡枝根霉
囊囊轴轴
孢子囊
囊托 孢子囊梗
接合孢子
观察根霉菌丝情况和子
囊孢子情况（着重辨
认孢子囊、包囊梗、
实验三 显微镜的使用、霉菌的形态 及细菌三型的观察
主讲人：刘 涛 李开
1
实验（一） 霉菌的形态观察
一、实验目的
❖ 观察霉菌的形态结构特征 ❖ 学习掌握霉菌水浸片制作的基本方法P74
2
霉菌：凡在营养基质上形成绒毛状、棉絮状或蜘蛛网形 丝状菌体的真菌，统称为霉菌。霉菌包括分类学上许多 不同纲或类的真菌，它们分别属于藻状菌纲、子囊菌纲、 担子菌纲和半知菌类。霉菌菌丝分为有隔菌丝和无隔菌
图1-1-2 光学显微镜的成像原理
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油镜使用的原理
油浸接物镜。当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时， 由于空气与玻片的密度不同，使光线受到曲折，发生散射， 降低了视野的照明度。若中间的介质是一层油（其折射率 与玻片的相近），则几乎不发生折射，增加了视野的进光 量，从而使物象更加清晰。
浸没油与玻璃的折射率相近
镜头上的油，然后再用擦镜纸沾取少量二甲苯擦去
残留的油，最后用擦镜纸擦去残留的二甲苯，后将 镜体全部复原。
注意：油镜使用完毕后一定要用二甲苯擦拭镜头
用油镜观察细菌三型永久装片。
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显微镜保养和使用中的注意事项
1.不准擅自拆卸显微镜的任何部件，以免损坏。 2.镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，以保证光
很多原来由于在透镜及载片表面的反射和折射而损失的 光线可以进入物镜，使照明亮度提高，改善观察效果1。8
二、显微操作
现场演示
1.低倍镜观察：粗调、细调。依次再进行中倍、高倍 观察
2.油镜观察：高倍镜下找到清晰的物象后，在标本中 央滴一滴香柏油，使油镜镜头浸入香柏油中，细调 至看清物象为止。
3.换片：另换新片，必须从第1条开始操作。 4.用后复原：观察完毕，上悬镜筒，先用擦镜纸擦去