细胞DNA定量分析在脱落细胞学诊断中的应用
DNA倍体联合宫颈脱落细胞p16INK4a对不典型鳞状上皮细胞病变的诊断价值
DNA倍体联合宫颈脱落细胞p16INK4a对不典型鳞状上皮细胞病变的诊断价值徐燕;徐小晶;王远航;孙勃【期刊名称】《安徽医学》【年(卷),期】2023(44)1【摘要】目的探讨DNA倍体定量法联合宫颈脱落细胞p16INK4a对不典型鳞状上皮细胞病变(ASC)的诊断价值。
方法回顾性分析2021年6月至2022年5月南阳市中心医院参加宫颈癌液基薄层细胞学筛查的608例妇女资料,比较无上皮内病变或恶性病变(NILM)与ASC患者的DNA倍体定量分析结果、宫颈脱落细胞p16INK4a检测结果。
结果 ASC患者异倍体细胞数目≥3个的检出率为21.05%,NILM异倍体细胞数目≥3个的检出率为0,检出率差异有统计学意义(P<0.05)。
ASC患者p16INK4a阳性率为30.08%,NILM的p16INK4a阳性率为7.02%,检出率差异有统计学意义(P<0.05)。
DNA倍体定量联合p16INK4a检测对ASC的诊断灵敏度为95.11%,特异度为70.18%,准确率为81.09%。
结论 DNA倍体定量法联合宫颈脱落细胞p16INK4a检测对早期诊断ASC具有良好价值,可及早筛查有癌前病变的病例。
【总页数】5页(P88-92)【作者】徐燕;徐小晶;王远航;孙勃【作者单位】南阳市中心医院妇产科【正文语种】中文【中图分类】R73【相关文献】1.宫颈不典型鳞状上皮细胞DNA倍体分析的临床意义2.细胞DNA倍体分析在宫颈不典型宫颈鳞状细胞诊断和预测中的价值3.未明确诊断意义的不典型子宫颈鳞状细胞伴DNA倍体异常的临床意义4.p16/Ki-67检查在宫颈不典型鳞状上皮细胞及低级别鳞状上皮内病变中的诊断价值5.子宫颈脱落细胞块联合p16/Ki-67双染在意义不明确的非典型鳞状上皮细胞和低级别鳞状上皮内病变的筛查意义因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
细胞DNA定量分析在脱落细胞学诊断中的应用
ＷＮ ＡＧ ０ ｎ Ａ Ｇ ｎ ＬＵＳ ｉｈｎ ，Ｙ Ｎ ｕ—ｈｉ Ａ ＧＸａ —ｎ ， Ａ ＧＺ ａ —ｏｇ Ｇ Ｏ Ｍｉｇ Ｄ ｕ ，Ｗ Ｎ ｇ， Ｉ ｈ— ｅｇ Ａ ＧＨ ｉ ａ，Ｗ Ｎ ｉｏｌ ｇ Ｗ Ｎ ｈ ｎｄ ｎ ， Ｕ ｎ ， Ｕ Ｙ ｎ ｚ ｃ ｉ
（ ｅａｔ ｅｔｆＰ ｔｏ ｇ ， ｅＦ ｕ ｏ ｉ ｌｆＨ ｂｉ ｄｃｌ ｎｖｒｔ，ｈ ｉ ｈ ａ ｇ ０ ０ １ ，ｈｎ ） Ｄｐ ｒ ｎ ｏ ａｈｌ ｙ ｔ ｏｔ Ｈ ｓ ｔ ｅｅ Ｍｅｉ ｉ ｓｙ Ｓ ｉ ｚｕ ｎ ５０ １ Ｃ ｉａ ｍ ｏ ｈ ｈ ｐａ ｏ ａ Ｕ ｅｉ ｊ ａ
脱落细胞学检查、DNA 倍体分析与血清肿瘤标志物联合检测诊断恶性胸腹水的价值
脱落细胞学检查、DNA 倍体分析与血清肿瘤标志物联合检测诊断恶性胸腹水的价值杨倩【摘要】Objective:To compare the clinical value of the detection of exfoliative cytology,serum tumor markers and DNA heteroploid analysis in the diagnosis of malignant pleural effusion and ascite. Methods:The exfoliative cytology, serum tumor markers, DNA heteroploid analysis in 128 patients with peural effusion and ascite were investigated, the sensibilities between three tests were compared. Results:The positive rate of exfoliative cytology testing was 43. 75%. The positive rate of exfoliative cytology joint DNA heteroploid analysis was 83. 33%,with individual exfoliative cytology,the positive rate was statistically significant(P<0. 01). The positive rate of serum tumor markers joint testing was 81. 25%, the difference had statistically significant compared with CA125 and AFP single detection(P<0. 01). Conclusions:The jiont detection of exfoliative cytology,serum tumor markers and DNA heteroploid analysis can improve the detection rate of malignant pleural effusion and ascite.%目的：：比较脱落细胞学检查、DNA倍体分析与血清肿瘤标志物联合检测对恶性胸腹水的诊断价值。
细胞dna定量检测报告
细胞dna定量检测报告细胞DNA定量检测报告DNA定量检测是一项常用的实验技术，用于测量细胞中的DNA含量。
本次报告将介绍一项关于细胞DNA定量检测的实验结果。
实验方法：我们采用了荧光比色法进行细胞DNA定量检测。
首先，我们使用了一种DNA结合染料，将染料与细胞中的DNA结合，形成荧光复合物。
然后，我们使用荧光光谱仪，测量荧光复合物的荧光强度。
最后，通过与已知DNA浓度的标准曲线比对，计算出细胞中的DNA含量。
实验结果：通过实验测量，我们得到了细胞中的DNA浓度为2.5 ng/μL。
这表明细胞中含有适量的DNA，足够支持细胞正常的生物活动。
讨论和结论：DNA定量检测是一项常用的实验技术，在细胞生物学和分子生物学等领域具有重要的应用价值。
本次实验结果显示细胞中的DNA浓度为2.5 ng/μL，说明细胞拥有合适的DNA含量。
细胞中的DNA浓度对于细胞的正常功能和稳态具有重要作用。
过高或过低的DNA浓度都可能导致细胞功能异常。
因此，精确地测量细胞中的DNA含量对于研究细胞的生物学过程非常重要。
细胞DNA定量检测的方法多样，包括荧光比色法、吸光度测定法等。
不同的方法适用于不同的实验目的和要求。
因此，在进行细胞DNA定量实验时，需要根据实验目的选择合适的实验方法。
细胞DNA定量检测还可以与其他实验技术相结合，比如细胞增殖分析、基因表达分析等，以进一步了解细胞生物学过程和分子机制。
总之，本次细胞DNA定量检测实验结果显示细胞中的DNA 浓度为2.5 ng/μL，为细胞正常功能提供了适量的DNA基础。
细胞DNA定量检测是一项重要的实验技术，对于研究细胞的生物学过程具有重要意义。
细胞DNA倍体定量分析在宫颈癌早期筛查中的应用价值
细胞DNA倍体定量分析在宫颈癌早期筛查中的应用价值目的：评价细胞DNA倍体定量分析在宫颈癌早期筛查中的临床应用价值。
方法：对6910例妇女的宫颈脱落细胞进行细胞DNA倍体定量检测。
对阳性病例经阴道镜检查进行活检。
结果：检出DNA异倍体共207例（2.99%），取活检180例，经宫颈活检有异常者（CIN I及以上）为85例（47.22%）。
结论：细胞DNA倍体定量分析技术在宫颈癌早期筛查中有一定的临床价值，可作为宫颈癌筛查的方法之一。
标签：DNA倍体定量分析；宫颈癌；早期筛查宫颈癌（Cervical Cancer）是妇科常见恶性肿瘤，我国每年新发病例逾10万。
因此宫颈癌的筛查之重要性也越发凸显。
DNA的非整倍体（异倍体）出现与癌前病变增生程度和癌变率有关，是细胞癌变的一个重要指标。
在大多数宫颈癌病例中就出现了DNA倍体异常细胞。
细胞DNA倍体定量分析（DNA ploidy quantitative analysis）就是通过测定细胞核内的DNA含量或染色体倍数（因为基因突变提早发生于细胞形态学改变）进而判断细胞的生理状态或病理改变的技术，该技术具有较高的检出率，为临床广泛使用，而且还可以同时保留细胞图像，对于缺乏经验人员的基层医院尤为适用。
笔者利用此检测方法对乌兰浩特市地区妇女进行宫颈癌前病变检测，并评价筛查效果。
1 资料与方法1.1 一般资料资料来源于2013年至2014年内到我所进行宫颈癌筛查的妇女6910例，年龄最小为21岁，最大为70岁。
1.2 仪器由厦门麦克奥迪MotiCyometer医疗诊断系统有限公司提供的全自动细胞DNA倍体定量分析仪及MotiCyometer全自动细胞图像分析系统。
1.3 方法1.3.1 标本采集本所妇科医师根据操作规程认真细致采集受检者的宫颈脱落细胞样本，并将其浸泡在装有细胞保存液的标本瓶内，旋紧瓶盖并振荡摇晃，贴上“对对贴”标签（一份贴于标本瓶，一份贴于申请单），申请单上详细填写受检者相关信息，送至实验室。
DNA含量检测在尿脱落细胞病理学漏诊可疑膀胱癌患者中的临床价值
ә通信作者,E -m a i l :w h -y a n gx i n @163.c o m ㊂㊃临床研究㊃ d o i :10.3969/j.i s s n .1671-8348.2024.03.020D N A 含量检测在尿脱落细胞病理学漏诊可疑膀胱癌患者中的临床价值高渝霞1,杨 新2ә(1.丰都县人民医院病理科,重庆408200;2.中国人民解放军陆军特色医学中心病理科,重庆400042) [摘要] 目的 探讨D N A 含量检测在可疑膀胱癌但尿脱落细胞病理学检查(简称尿检)阴性或不确定患者中的应用价值㊂方法 挑选临床初诊怀疑膀胱癌但尿检(H E 染色)阴性或不确定的患者56例,采用F e u l -ge n 染色检测尿脱落细胞D N A 含量,以手术切除标本组织病理学诊断结果作为 金标准 进行比对分析㊂结果 56例患者中,尿检阴性35例,不确定21例;D N A 含量检测阴性31例,阳性患者25例;组织病理学诊断阴性23例,阳性33例㊂D N A 含量检测的灵敏度为51.52%(17/33),特异度为65.22%(15/23)㊂尿检准确度为33.93%(19/56),D N A 含量检测准确度为57.14%(32/56),两者比较差异有统计学意义(P <0.01)㊂D N A 含量检测在尿检阴性患者中的灵敏度和特异度分别为25.00%(4/16)㊁73.68%(14/19);在不确定患者中的灵敏度和特异度分别为76.47%(13/17)㊁25.00%(1/4)㊂D N A 含量检测的检出率在漏诊的高级别膀胱癌患者中为75.00%(6/8),在低级别膀胱患者中为44.00%(11/25),在阴性患者中为34.78%(8/23)㊂结论 尿脱落细胞D N A 含量检测在尿检阴性和不确定患者中的灵敏度和特异度均较高,可有效降低尿检漏检率㊂[关键词] 尿;脱落细胞;D N A 染色;膀胱癌[中图法分类号] R 446.9[文献标识码] A[文章编号] 1671-8348(2024)03-0431-04T h e c l i n i c a l v a l u e o f D N A c o n t e n t d e t e c t i o n i n s u s p e c t e d b l a d d e r c a n c e r p a t i e n t s w i t h p a t h o l o g i c a l m i s s e d d i a gn o s i s o f u r i n e e x f o l i a t e d c e l l s G A O Y u x i a 1,Y A N G X i n2ә(1.D e p a r t m e n t o f P a t h o l o g y ,P e o p l e s H o s p i t a l o f F e n g d u ,C h o n g q i n g 408200,C h i n a ;2.D e p a r t m e n t o f P a t h o l o g y ,P L A A r m y C h a r a c t e r i s t i c M e d i c a l C e n t e r ,C h o n g q i n g 400042,C h i n a ) [A b s t r a c t ] O b je c t i v e T o i n v e s t i g a t e t h e a p p l i c a t i o n v a l u e of D N A c o n t e n t d e t e c t i o n i n p a t i e n t s w i t h s u s p e c t e d b l a d d e r c a n c e r b u t n eg a t i v e o r u n c e r t a i n u r i n e c y t o l o g y.M e t h o d s A t o t a l o f 56p a t i e n t s w i t h s u s -p e c t e d b l a d d e r c a n c e r b u t n e g a t i v e o r u n c e r t a i n u r i n e c y t o l o g y (H E s t a i n i n g )w e r e s e l e c t e d .w a s d e t e c t e d b yF e u l g e n s t a i n i n g ,a n d t h e r e s u l t s w e r e a n a l y z e d .T h e p a t h o l o g i c a l d i a g n o s i s o f s u r g i c a l s pe c i m e n w a s u s e d a s t h e s t a n d a r df o r c o m p a r a t i v e a n a l y s i s .R e s u l t s A m o ng th e 56p a ti e n t s d i a g n o s e d b y u r i n e c y t o l o g y,35c a s e s w e r e n e g a t i v e a n d 21c a s e s w e r e u n c e r t a i n .D N A c o n t e n t w a s n e ga t i v e i n 31c a s e s a n d p o s i t i v e i n 25c a s e s .A -m o n g t h e p a t i e n t s w i t h n e g a t i v e p a t h o l o g i c a l r e s u l t s o f u r i n e c y t o l o g y ,23p a t i e n t s h a d n e g a t i v e h i s t o p a t h o l o gi -c a l d i a g n o s i s a n d 33p a t i e n t s h a d p o s i t i v e h i s t o p a t h o l o g i c a l d i a g n o s i s .A m o n g t h e L B P n e ga t i v e c a s e s ,t h e h i s -t o l o g i c a l d i a g n o s i s w a s n e g a t i v e i n 23a n d p o s i t i v e i n 33.I n t h e 56c a s e s w i t h n e ga t i v e o r u n c e r t a i n r e s u l t s o f u -r i n e c y t o l o g y ,t h e s e n s i t i v i t y o f D N A c o n t e n t d e t e c t i o n w a s 51.52%(17/33)a n d t h e s p e c i f i c i t y wa s 65.22%(15/23).T h e a c c u r a c y o f u r i n e c y t o l o g y d e t e c t i o n w a s 33.93%(19/56),a n d t h e a c c u r a c y of D N A c o n t e n t d e -t e c t i o n w a s 57.14%(32/56),a n d t h e d i f f e r e n c e w a s s t a t i s t i c a l l y s ig n i f i c a n t (P <0.01).Th e s e n si t i v i t y an d s p e c i f i c i t y o f D N A c o n t e n t d e t e c t i o n i n u r i n e n e ga t i v e p a t i e n t s w e r e 25.00%(4/16)a n d 73.68%(14/19),r e -s p e c t i v e l y ;T h e s e n s i t i v i t y a n d s p e c i f i c i t y in u n c e r t a i n p a t i e n t s w e r e 76.47%(13/17)a n d 25.00%(1/4),r e -s p e c t i v e l y .T h e d e t e c t i o n r a t e o f D N A c o n t e n t d e t e c t i o n w a s 75.00%(6/8)i n h i g h -gr a d e b l a d d e r c a n c e r p a -t i e n t s w h o m i s s e d d i a g n o s i s ,44.00%(11/25)i n l o w -g r a d e b l a d d e r p a t i e n t s ,a n d 34.78%(8/23)i n n e ga t i v e p a t i e n t s .C o n c l u s i o n T h e s e n s i t i v i t y a n d s p e c i f i c i t y o f D N A c o n t e n t d e t e c t i o n i n u r i n e e x f o l i a t e d c e l l s a r e h i gh i n p a t i e n t s w i t h n e g a t i v e a n d u n c e r t a i n u r i n e c y t o l o g y ,w h i c h c a n e f f e c t i v e l yr e d u c e t h e m i s s e d d e t e c t i o n r a t e o f u r i n e e x f o l i a t e d c e l l s .[K e y wo r d s ] u r i n e ;e x f o l i a t e d c e l l ;l i q u i d -b a s e d p r e p a r a t i o n s ;D N A s t a i n i n g ;b l a d d e r c a n c e r 134重庆医学2024年2月第53卷第3期膀胱癌是泌尿系统恶性肿瘤中最常见的恶性肿瘤,复发率较高[1]㊂临床上常用的检查方法包括尿脱落细胞病理学检查(简称尿检)和膀胱镜检查,但尿检的灵敏度较低[2-3],且对于较早期的少量异型细胞并不足以通过形态学给予诊断㊂膀胱镜检查费用昂贵,又具有侵入性,且对于微小的肿瘤病灶依然难以发现[4]㊂故临床期待寻找一种灵敏度㊁特异度均较高且无创的膀胱癌诊断方法㊂D N A染色是一种病理科常规的染色技术,用F e u l g e n染色法可显示D N A的含量,用于肿瘤的诊断和研究,有助于判断肿瘤的良恶性及分化程度,并评估肿瘤患者的预后㊂对于泌尿系统肿瘤D N A含量检测是一项较新型的检测方法[5],检测的标本类型可以是尿脱落细胞㊁常规手术切除组织等㊂本研究利用尿脱落细胞进行D N A含量检测,专门挑选常规尿检阴性的患者进行比对分析,探讨其临床应用价值㊂1资料与方法1.1一般资料选取2019年1月至2020年6月在中国人民解放军陆军特色医学中心住院且病理科尿检3次为非阳性的患者56例,其中男37例,女19例,中位年龄62.3岁(25.0~86.0岁)㊂纳入标准:(1)年龄25~86岁;(2)行膀胱术;(3)行组织病理学检查;(4)患者及家属签署知情同意书㊂排除标准:尿脱落细胞病理学检查确诊为膀胱癌㊂1.2方法1.2.1薄层白片制作取清晨起床后第1次尿的中后段100m L送检病理科㊂取50m L500ˑg离心10m i n,弃上清液,再取50m L,重复离心,至肉眼可观察到底部沉淀㊂向沉淀中加5m L缓冲液,振荡均匀,转移至10m L离心管中500ˑg离心5m i n,弃上清液㊂加0.5~1.0m L 缓冲液,振荡均匀,制成重悬细胞液,用于苏木素-伊红(H E)染色制片和F e u l g e n染色制片,H E染色制片采用沉降法液基细胞制片技术(l i q u i d-b a s e d p r e p a r a-t i o n s,L B P):取300~500μL重悬细胞液,滴到直径为13mm的沉降仓,静置30m i n,倒掉上清液,滴无水乙醇1m L固定细胞,倒掉,再滴无水乙醇1m L再次固定,倒掉,制成薄层白片㊂F e u l g e n染色制片采用离心甩片法:取1m L重悬细胞液,滴入甩片仓,调整离心甩片机转速至4000r/m i n,离心4m i n(要求在低倍镜下细胞紧凑平铺,不重叠,高倍镜下可见8~12个上皮细胞),取出玻片,即制成薄层白片㊂1.2.2 H E染色L B P法所制细胞薄层白片苏木素染色1m i n,水洗,无水乙醇脱水2m i nˑ3次,0.5%伊红染色30s,无水乙醇脱水2m i nˑ3次,自然风干,封片㊂片子由1名住院医师初诊,1名主治医师复诊,1名副主任医师对疑难标本会诊㊂诊断结果按照2022版‘尿液细胞学巴黎报告系统“[6],将 未查见肿瘤细胞 未见癌细胞 尿液巴黎2类划为阴性, 查见极个别非典型异型细胞 不确定 尿液巴黎3类划为不确定, 癌 可疑癌 尿液巴黎4类及以上划为阳性㊂1.2.3 F e u l g e n染色F e u l g e n染色是一种D N A染色,所制细胞薄层白片染色后可用D N A定量图像分析仪自动分析,自动出具结果㊂F e u l g e n染色步骤:离心甩片法所制细胞薄层白片,垂直放入95%乙醇染缸中固定10m i n,再转入无水乙醇固定15m i n,在320m L甲醇+60m L 甲醛+20m L冰醋酸的混合液中分化15m i n,水漂洗5~6次㊂5m o l/L盐酸60m i n,水漂洗5~6次㊂D N A染液染色约67m i n(根据染液配制时间长短,可进行调整,需在25ħ电热恒温培养箱中避光操作),水漂洗5~6次㊂95%乙醇脱水2m i n,伊红染色约15 s(具体时间根据染液使用情况定)㊂95%乙醇浸泡(2次,2m i n/次)洗去多余染液,无水乙醇(2次,2m i n/次)进一步洗去多余染液并脱水,晾干,封片㊂片子由1名住院医师初诊,1名主治医师复诊,1名副主任医师对疑难标本会诊㊂1.2.4 D N A图像分析本研究采用武汉兰丁医学高科技有限公司的全自动扫描分析系统,根据细胞着色深浅㊁形态㊁面积㊁积分光密度(i n t e g r a t e d o p t i c a l d e n s i t y,I O D),分析其D N A含量㊂这里的D N A含量不是绝对值,是一个相对值,标准对照细胞为同张玻片上的100个正常上皮细胞,对每张玻片上6000个以上细胞核进行扫描,扫描细胞的变异系数(c o e f f i c i e n t o f v a r i a n t i o n,C V)< 5%㊂D N A含量检测以D N A指数(D N A i n d e x,D I)来表示,D I1~<2为正常细胞,不正常细胞的情况有以下3种:(1)D I>2.5的细胞;(2)D I=2的细胞,即在M期,细胞数大于被检测细胞总数的10%(正常细胞M期约占整个细胞生长周期的5%~10%);(3)出现非整倍体细胞峰㊂1.3统计学处理采用S P S S23.0软件进行数据统计学分析,计数资料采用例数和百分比表示,比较行χ2检验,以P< 0.05为差异有统计学意义㊂2结果2.1尿检结果与组织病理学诊断结果比较56例患者中,尿检阴性35例,其中16例组织病理学诊断为阳性,19例为阴性;尿检不确定21例,其中17例组织病理学诊断为阳性,4例为阴性㊂尿检与组织病理学诊断一致率(即准确度)为33.93%(19/ 56)㊂234重庆医学2024年2月第53卷第3期2.2 D N A含量检测与组织病理学诊断结果比较组织病理学诊断为阳性的33例患者中,D N A含量检测阳性17例(真阳),D N A含量检测阴性16例(假阴);组织病理学诊断为阴性的23例患者中,D N A 含量检测阳性8例(假阳),D N A含量检测阴性15例(真阴);故D N A含量检测的灵敏度为51.52%(17/ 33),特异度为65.22%(15/23),准确度为57.14% (32/56),高于尿检准确度,差异有统计学意义(P< 0.01)㊂2.3 D N A含量检测、尿检与组织病理学诊断比较尿检阴性的35例患者中,D N A含量检测阳性9例,其中组织病理学诊断阳性4例,组织病理学诊断阴性5例;D N A含量检测阴性26例,其中组织病理学诊断阳性12例,组织病理学诊断阴性14例㊂尿检不确定的21例中,D N A含量检测阳性16例,其中组织病理学诊断阳性13例,组织病理学诊断阴性3例;D N A含量检测阴性5例,组织病理学诊断阳性4例,组织病理学诊断阴性1例㊂D N A含量检测在尿检阴性患者中的灵敏度和特异度分别为25.00%(4/16)㊁73.68%(14/19);在不确定患者中的灵敏度和特异度分别为76.47%(13/17)㊁25.00%(1/4)㊂2.4不同级别患者尿脱落细胞D N A含量检测结果对比在组织病理学诊断为高级别膀胱癌的8例患者中,D I>2.5的患者6例(75.00%),1例细胞数高达627个(图1);在组织病理学诊断为低级别膀胱癌的25例患者中,D I>2.5的患者11例(44.00%),1例出现非整倍体细胞峰;在组织病理学诊断为阴性23例中,D I>2.5的患者8例(34.78%)㊂图1 D N A含量检测结果3讨论尿液在肾脏形成,流经肾小管㊁肾盂㊁输尿管㊁膀胱,最后由尿道排出,故尿液中混入了泌尿系统各部位的脱落细胞,同时由于尿液中细胞易发生退变,且细胞本身存在细胞形态非典型性特点,时常给细胞学诊断带来困难,漏诊颇多㊂D N A含量检测,并不是一种新兴技术,但是在泌尿系统肿瘤方面的研究较少㊂有研究显示,非整倍体现象在正常情况下非常罕见,是癌症的标志特征之一[7]㊂细胞发生癌变时,M 期(有丝分裂期)发生错误,造成染色体的不稳定性和非整倍性[8-10]㊂近年研究发现,D N A倍体分析在诸多恶性肿瘤的鉴别诊断中具有良好的应用价值,如宫颈癌[11]㊁口腔癌[12-13]等㊂1992年之前在美国主要盛行流式细胞术对细胞内D N A含量进行评估[14],但1993年的一篇研究利用自动图像分析系统分析了膀胱癌石蜡标本D N A含量,确立了自动化图像分析的地位,该技术也可应用于尿液沉淀物的涂片或经尿道切除的肿瘤切片[15]㊂本研究采用国内武汉兰丁医学高科技有限公司的全自动图像分析仪进行分析[16-18],对D N A采用F e u l g e n染色,国内此技术在肺癌[19-22]㊁宫颈癌[23-26]等诸多癌症中已取得良好效果㊂本研究前期成果证实,D N A含量检测联合尿检,可明显提高尿路上皮癌的检出率[27]㊂国内亦有很多研究证实了D N A倍体检测可提高早期癌变的诊断率,并能客观评估癌症的恶性程度,联合尿检能有效减少漏诊率[28-29]㊂本研究重点分析尿检结果不能佐证临床可疑膀胱癌的患者,实验结果显示,尿检为阴性和不确定的56例患者中,经组织病理学诊断确诊为膀胱癌的患者33例,证明尿检存在很大漏检㊂D N A含量检测阳性的患者25例中有17例组织病理学确诊为真阳㊂之所以存在D N A含量检测检出率高于尿检,很大一部分原因可能是细胞核内染色体数目的对数改变先于形态学改变,故较早期的癌变很难用肉眼根据形态学做出正确评估㊂假阴患者可能与肿瘤的部位有关,如果肿瘤部位较深,脱落的肿瘤细胞不足或当次尿液中并没有癌细胞,故不易检出㊂综上所述,尿脱落细胞D N A含量检测可通过对染色体倍数的测定诊断出病变,对肿瘤细胞的良恶性鉴别做出判断,尤其在怀疑膀胱癌患者但尿检阴性和不确定患者中,D N A含量检测可为临床提供一个补充依据,有效减少尿检的漏检率,具有很高的临床应用价值㊂参考文献[1]S U N G H,F E R L A Y J,S I E G E L R L,e t a l.G l o b a lc a n c e r s t a t i s t i c s2020:G L O B O C A N e s t i m a t e s o fi n c i d e n c e a n d m o r t a l i t y w o r l d w i d e f o r36c a n c e r s i n185c o u n t r i e s[J].C A C a n c e r J C l i n,2021,71:209-249.[2]MA A S M,B E D K E J,S T E N Z L A,e t a l.C a n u-r i n a r y b i o m a r k e r s r e p l a c e c y s t o s c o p y[J].W o r l d J U r o l,2019,37:1741-1749. [3]徐涛,秦彩朋.尿液D N A甲基化检测在膀胱癌无创诊断中的研究进展[J].中华泌尿外科杂志, 2020,41:721-723.[4]T S E R T,Z H A O H,WO N G C Y,e t a l.U r i n a r yc e l l-f r e e D N A i n b l ad de r c a n c e r d e t e c t i o n[J].334重庆医学2024年2月第53卷第3期D i a g n o s t i e s(B a s e l),2021,11:306.[5]李金泽,曹德宏,魏强,等.尿游离D N A在膀胱癌诊治中应用的研究进展[J].中华泌尿外科杂志,2022,6(43):469-472.[6]W O J C I K E M,K U R T Y C Z D F I,R O S E N T H A LD L.W e l l a l w a y s h a v e p a r i s t h e p a r i s s y s t e m f o r r e p o r t i n g u r i n a r y c y t o l o g y2022[J].J A m S o c C y-t o p a t h o l,2022,11(2):62-66.[7]S I MO N E T T I G,B R U N O S,P A D E L L A A,e ta l.A n e u p l o i d y:c a n c e r s t r e n g t h o r v u l n e r ab i l i-t y[J].I n t J C a n c e r,2019,144(1):8-25.[8]W I L H E L M T,S A I D M,N A I M V.D N A r e p l i-c a t i o n s t r e s s a nd c h r o m o s o m a l i n s t a b i l i t y:d a n-ge r o u s l i a i s o n s[J].G e n e s(B a s e l),2020,11(6): 642.[9]R O S S J S.D N A p l o i d y a n d c e l l c y c l e a n a l y s i s i nc a n c e rd i a g n o s i s a n d p r o g n o s i s[J].O n c o l o g y, 1996,10(6):867-890.[10]王文芳,吴忆寒,侯岩峰,等.机会性宫颈癌筛查中D N A倍体分析的临床价值[J].当代临床医刊,2022,35(3):51-52.[11]G U O Y,P E N G Q,WA N G Y,e t a l.T h e a p p l i-c a t i o n o f D N A p l o id y a n a l y s i s i n l a r g e-s c a l ep o p u l a t i o n s c r e e n i n g f o r c e r v i c a l c a n c e r[J].A c-t a C y t o l,2021,65(5):385-392. 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细胞dna定量分析报告
细胞dna定量分析报告细胞DNA定量分析报告。
细胞DNA定量分析是一项重要的实验技术，可以帮助科研人员了解细胞内DNA含量的变化，为后续的实验研究提供重要的数据支持。
本报告将对细胞DNA定量分析的实验方法、结果数据和数据分析进行详细介绍，以期为相关研究工作提供参考。
实验方法。
首先，我们需要从实验样本中提取DNA，并通过紫外分光光度计测定DNA的浓度。
接着，利用荧光素染料染色，将待测样品与标准品一同加载至流式细胞仪中进行检测。
在检测过程中，我们需要设置合适的激光波长和滤光片，以确保获得准确的荧光信号。
最后，通过流式细胞仪获得的数据，结合之前测得的DNA浓度，即可计算出待测样品中DNA的含量。
结果数据。
在实验过程中，我们对多个样本进行了DNA定量分析。
经过计算和统计，得到了各样本的DNA含量数据。
以样本A为例，其DNA含量为2.5 ng/μl；样本B的DNA含量为3.2 ng/μl；样本C的DNA含量为2.8 ng/μl。
通过对比不同样本的数据，我们可以初步了解到它们之间DNA含量的差异。
数据分析。
通过对实验结果的分析，我们可以发现样本B的DNA含量明显高于其他样本，而样本A和样本C的DNA含量相对较低。
这些差异可能与样本来源、处理方法等因素有关。
此外，我们还可以进一步探究不同条件下细胞DNA含量的变化规律，为后续的细胞生物学研究提供重要的参考依据。
结论。
细胞DNA定量分析是一项重要的实验技术，可以帮助我们了解细胞内DNA含量的变化情况。
通过本次实验，我们成功地获得了多个样本的DNA含量数据，并对其进行了初步分析。
这些数据将为我们后续的研究工作提供重要的支持和参考。
同时，我们也意识到在实验过程中仍存在一些不足之处，需要进一步完善和改进实验方法，以提高实验数据的准确性和可靠性。
综上所述，细胞DNA定量分析是一项具有重要意义的实验技术，通过对细胞DNA含量的测定和分析，可以为细胞生物学研究提供重要的数据支持。
细胞DNA定量分析在脱落细胞学诊断中的应用
细胞DNA 定量分析在脱落细胞学诊断中的应用王永军，王珩，刘世正，杨会钗，王小玲，王占东，郭明，杜芸摘要：目的探讨自动细胞DNA 定量分析系统在良恶性胸水、腹水、心包积液及乳腺包块诊断中的价值。
方法297例浆膜腔积液（胸水185例、腹水94例、心包积液18例），经细胞采集器处理，每例制成4张薄层细胞片，2张细胞片做巴氏染色，用于常规细胞学检查。
另2张经Feulgen 染色，用自动细胞DNA 定量分析系统检测。
122例乳腺包块住院患者，诊断医师进行针吸穿刺后每例制成2张薄层涂片，1张涂片做巴氏染色，用于常规细胞学检查。
另1张经Feulgen 染色，用自动细胞DNA 定量分析系统检测。
每例均有病理结果证实。
结果297例浆膜腔积液标本常规检测138例（44.5%）异常，而同样的标本中DNA 定量检测131例（44.1%）异常。
常规细胞学诊断为癌及可疑癌细胞84例中100%出现异倍体细胞，常规诊断为找到异型细胞的54中有47例（87%）出现异倍体细胞。
122例乳腺肿物经病理证实，41例为乳腺良性肿瘤，81例为恶性。
常规细胞学方法对良恶性乳腺包块的诊断阳性率分别为92.7%、91.4%，AICM 的诊断阳性率分别为100%、90.1%。
结论应用自动细胞DNA 定量分析系统可弥补常规形态学工作的不足，二者协同诊断，可发现早期癌变的细胞，提高诊断率，为临床制定治疗方案提供有价值的信息，使细胞学检查工作更完善、客观。
关键词：细胞学；DNA 分析；异倍体中图分类号：Q 24文献标识码：A文章编号：1001－7399（2011）02－0150－04Celluar DNA quantitative analysis in cytology for clincal application in diagnosisWANG Yong-jun ，WANG Heng ，LIU Shi-zheng ，YANG Hui-chai ，WANG Xiao-ling ，WANG Zhan-dong ，GUO Ming ，DU Yun （Department of Pathology ，the Fouth Hospital of Hebei Medical University ，Shijiazhuang 050011，China ）Abstract ：PurposeTo differentially diagnose the benign and malignant ，peritioneal effusions ，pericarditis effusions and breast massesby using automatic imaging cytometer．MethodsIn 297samples of serous effusions ，including 185samples of hydrothorax ，94peri-tioneal effusions ，18pericarditis effusions ）were processed with a cell collectioner ，4slides were prepared for each sample ：2sliders were stained by Papanicolaou method for cytology analysis ，and other 2sliders were stained with Feulgen method for DNA imaging cy-tometer．In 122patients with breast masses ，2smears were prepared by fine-needle aspiration puncture for each patient ：1for Papanico-laou stain for cytology analysis ，and other 1for Feulgen stain for DNA imaging cytometer．Pathological results were confirmed in each case．ResultsIn 297samples of serous effusion ，138（44.5%）were abnormal by cytology analysis ，and 131（44.1%）were abnormalby DNA imaging cytometer．By cytology analysis 84were found as cancer cells and dubious cells ，and 100%were found heteroploid cells．By cytology analysis 54were found a few proliferating cells ，and 47（87%）were found heteroploid cells．In the pathologically confirmed breast masses ，41were classified as benign and other 81as malignant．Cytological investigation showed 92.7%sensitivity for benign and 91.4%sensitivity for malignant ，while DNA imaging analysis revealed 100%sensitivity for benign and 90.1%sensitiv-ity for malignant．ConclusionsThe automatic imaging cytometer can remedy insufficiency of routine cytology ，and collaboration of thetwo methods could improve the diagnostic rate of breast cancer ，which provides valuable information for clinical manegement and makes cytology analysis more perfective and objective．Key words ：cytology ；DNA analysis ；heteroploicl cells收稿日期：2010－04－20基金项目：河北省科技厅科技支撑计划（09276174）作者单位：河北医科大学第四医院病理科，石家庄050011作者简介：王永军，女，副主任技师。
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细胞DNA 定量分析在脱落细胞学诊断中的应用王永军，王珩，刘世正，杨会钗，王小玲，王占东，郭明，杜芸摘要：目的探讨自动细胞DNA 定量分析系统在良恶性胸水、腹水、心包积液及乳腺包块诊断中的价值。
方法297例浆膜腔积液（胸水185例、腹水94例、心包积液18例），经细胞采集器处理，每例制成4张薄层细胞片，2张细胞片做巴氏染色，用于常规细胞学检查。
另2张经Feulgen 染色，用自动细胞DNA 定量分析系统检测。
122例乳腺包块住院患者，诊断医师进行针吸穿刺后每例制成2张薄层涂片，1张涂片做巴氏染色，用于常规细胞学检查。
另1张经Feulgen 染色，用自动细胞DNA 定量分析系统检测。
每例均有病理结果证实。
结果297例浆膜腔积液标本常规检测138例（44.5%）异常，而同样的标本中DNA 定量检测131例（44.1%）异常。
常规细胞学诊断为癌及可疑癌细胞84例中100%出现异倍体细胞，常规诊断为找到异型细胞的54中有47例（87%）出现异倍体细胞。
122例乳腺肿物经病理证实，41例为乳腺良性肿瘤，81例为恶性。
常规细胞学方法对良恶性乳腺包块的诊断阳性率分别为92.7%、91.4%，AICM 的诊断阳性率分别为100%、90.1%。
结论应用自动细胞DNA 定量分析系统可弥补常规形态学工作的不足，二者协同诊断，可发现早期癌变的细胞，提高诊断率，为临床制定治疗方案提供有价值的信息，使细胞学检查工作更完善、客观。
关键词：细胞学；DNA 分析；异倍体中图分类号：Q 24文献标识码：A文章编号：1001－7399（2011）02－0150－04Celluar DNA quantitative analysis in cytology for clincal application in diagnosisWANG Yong-jun ，WANG Heng ，LIU Shi-zheng ，YANG Hui-chai ，WANG Xiao-ling ，WANG Zhan-dong ，GUO Ming ，DU Yun （Department of Pathology ，the Fouth Hospital of Hebei Medical University ，Shijiazhuang 050011，China ）Abstract ：PurposeTo differentially diagnose the benign and malignant ，peritioneal effusions ，pericarditis effusions and breast massesby using automatic imaging cytometer．MethodsIn 297samples of serous effusions ，including 185samples of hydrothorax ，94peri-tioneal effusions ，18pericarditis effusions ）were processed with a cell collectioner ，4slides were prepared for each sample ：2sliders were stained by Papanicolaou method for cytology analysis ，and other 2sliders were stained with Feulgen method for DNA imaging cy-tometer．In 122patients with breast masses ，2smears were prepared by fine-needle aspiration puncture for each patient ：1for Papanico-laou stain for cytology analysis ，and other 1for Feulgen stain for DNA imaging cytometer．Pathological results were confirmed in each case．ResultsIn 297samples of serous effusion ，138（44.5%）were abnormal by cytology analysis ，and 131（44.1%）were abnormalby DNA imaging cytometer．By cytology analysis 84were found as cancer cells and dubious cells ，and 100%were found heteroploid cells．By cytology analysis 54were found a few proliferating cells ，and 47（87%）were found heteroploid cells．In the pathologically confirmed breast masses ，41were classified as benign and other 81as malignant．Cytological investigation showed 92.7%sensitivity for benign and 91.4%sensitivity for malignant ，while DNA imaging analysis revealed 100%sensitivity for benign and 90.1%sensitiv-ity for malignant．ConclusionsThe automatic imaging cytometer can remedy insufficiency of routine cytology ，and collaboration of thetwo methods could improve the diagnostic rate of breast cancer ，which provides valuable information for clinical manegement and makes cytology analysis more perfective and objective．Key words ：cytology ；DNA analysis ；heteroploicl cells收稿日期：2010－04－20基金项目：河北省科技厅科技支撑计划（09276174）作者单位：河北医科大学第四医院病理科，石家庄050011作者简介：王永军，女，副主任技师。
Tel ：（0311）86095374，E-mail ：shan_jianli@126．com王小玲，女，硕士生导师，教授，通讯作者。
Tel ：（0311）86095663，E-mail ：wangxiaoling5412@163．com疾病的诊断，既要从整体、器官和细胞水平上认识和分析，还应从蛋白质、mRNA 和DNA 水平上来认识和分析［1］。
随着新技术的发展，肿瘤细胞DNA含量的研究被广泛、深入的应用，使肿瘤的研究提高到了定量研究的分子水平。
细胞病理学医师除对病变作出诊断外，还应考虑到细胞学的改变与制定治疗方案和评估预后的关系，而DNA 定量分析技术能在形态学改变的基础上提供更准确、客观、重复性好的增添信息［2］。
因此利用脱落细胞常规检测结合细胞DNA 定量分析，可以极大的完善脱落细胞的检查工作，使其更加准确、快捷，为临床治疗提供有价值的信息。
1材料与方法1．1临床资料选取2009年5月 10月间河北医科大学第四医院住院患者所送病理科的浆膜腔积液标本297例（其中胸水标本185例、腹水标本94例、心包积液18例）。
122例乳腺包块住院病人行穿刺细胞学检查，详细记录其病史、症状、乳腺包块大小并追踪术后病理结果。
1．2方法将所送胸、腹水及心包积液标本经一次性细胞采集器采集处理后，分别制备4张薄层涂片，2张用于常规巴氏染色，2张用于DNA染色程序（Feulgen染色法）。
乳腺包块患者经细胞学医师用20ml针管7号针头注射器在患者包块中央位置抽吸少许细胞，按常规进行细胞涂片。
每位患者分别制备2张薄层涂片，1张用于常规巴氏染色，1张用于DNA染色程序。
1．2．1常规细胞学诊断所有巴氏染色片由细胞病理学医师做出。
浆膜腔积液标本常规细胞学诊断结果分为4类：①未找到癌细胞；②找到癌细胞；③找到可疑癌细胞；④找到少许异型细胞。
乳腺针吸诊断结果分为3类：①增生的乳管上皮细胞；②重度增生的乳管上皮细胞；③找到癌细胞。
1．2．2细胞DNA定量分析所有Feulgen染色片用全自动细胞图像分析系统（AICM）行扫描处理［3，4］，系统对每张玻片上4000个以上细胞核进行扫描。
根据细胞DNA定量分析系统所做的分析结果有如下3种情况：①以正常2C细胞为主，未见异倍体细胞及异倍体细胞峰；②出现DNA指数（DI）＞2.5细胞和1 2之间的细胞数高于被检测细胞总数的10%；③出现异倍体细胞峰及大量DI≥2.5细胞（即≥5C细胞）。
凡是有DI＞2.5以上细胞的玻片，都要通过细胞诊断医师在显微镜下逐一对DI ＞2.5细胞进行核实，以排除系统将垃圾和重叠细胞误认为癌细胞或异常细胞。
1．2．3组织病理学诊断所有做过针吸及DNA检测的乳腺包块患者，其术后病理由病理医师进行大体取材及诊断。
乳腺癌标本均有组织学分类及淋巴结转移情况。
2结果在297例浆膜腔积液标本中常规发现159例（53.5%）正常，138例（44.5%）异常，异常包括70例（23.6%）找到癌细胞，14例（4.7%）找到可疑癌细胞，54例（18.2%）找到少许异型细胞。
而同样的标本中DNA定量检测166例（55.9%）正常，131例（44.1%）异常（有DI＞2.5细胞或异倍体细胞峰）。
常规细胞学诊断找到癌细胞的为70例，而细胞DNA定量分析出现大量异倍体细胞的高达90例（表1）。
122例乳腺包块患者中，经临床病理诊断证实41例为良性肿瘤，6例为乳腺腺上皮重度不典型增生癌变，75例乳腺癌。
常规细胞学对良性肿瘤的正确诊断率为92.7%（38/41），AICM DNA诊断正确诊断率为100%（41/41）；常规细胞学对恶性肿瘤诊断阳性率91.4%（74/81），AICM DNA定量诊断阳性率90.1%（73/81表2）。
良性与恶性肿瘤中AICM扫描细胞点阵分布图有所不同。