PRIMARY STUDY OF REPAIRING PERIPHERAL NERVE GAP WITH PORCINE SMALL INTESTINAL SUBMUCOSA

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鞘内注射瞬时受体电位通道A1 shRNA对部分坐骨神经结扎小鼠神经病理性疼痛的作用及其机制

鞘内注射瞬时受体电位通道A1 shRNA对部分坐骨神经结扎小鼠神经病理性疼痛的作用及其机制

第47卷第6期2021年11月吉林大学学报(医学版)Journal of Jilin University(Medicine Edition)Vol.47No.6Nov.2021DOI:10.13481/j.1671‑587X.20210619鞘内注射瞬时受体电位通道A1shRNA对部分坐骨神经结扎小鼠神经病理性疼痛的作用及其机制赵峰1,樊少卿1,程晓燕1,李小娜1,李长生2,马浩杰1(1.河南省中医院麻醉科,河南郑州450002;2.河南省肿瘤医院麻醉与围术期医学科,河南郑州450003)[摘要]目的目的:探讨瞬时受体电位通道A1(TRPA1)在部分坐骨神经结扎(pSNL)小鼠神经病理性疼痛模型中的作用,阐明其作用机制。

方法方法:30只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组(n=6)、假手术组(n=6)和pSNL组(n=18)。

pSNL组小鼠鞘内置管成功后随机分为pSNL组、pSNL+NC shRNA组(于术后第7天鞘内注射NC shRNA)和pSNL+TRPA1shRNA组(于术后第7天鞘内注射TRPA1shRNA)。

检测注射前和注射后l、7、12和24h各组小鼠后肢机械缩足反射阈值(MWT)和热阈值(TWL)。

最后一次检测后2h处死小鼠,采用Western blotting法检测各组小鼠术侧背根神经节(DRG)中TRPA1蛋白激酶Cε型(Prkce)和星形胶质细胞激活标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,ELISA法检测各组小鼠细胞上清和血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)水平。

分离培养pSNL模型小鼠的原代星形胶质细胞,过表达或敲低TRPA1,检测星形胶质细胞中TRPA1、Prkce和GFAP蛋白表达水平以及细胞上清中TNF-α和MCP-1水平。

采用STRING数据库和免疫共沉淀(Co-IP)法预测并验证TRPA1和Prkce相互作用。

检测过表达或敲低TRPA1后空质粒组、Ad-TRPA1、sh-NC组和sh-TRPA1组星形胶质细胞中Prkce 和GFAP蛋白表达水平以及细胞上清中TNF-α和MCP-1水平。

壳聚糖导管复合自体骨髓间充质干细胞修复大鼠13mm坐骨神经缺损

壳聚糖导管复合自体骨髓间充质干细胞修复大鼠13mm坐骨神经缺损
1 2周实验组 、 细胞外基质凝 胶组再生神经 纤维排列整 齐 、 密集 , 神 经 导 管 交 界处 无 瘢 痕 , 实 验组 再 生 神 经 纤 维 多 且 直 径 较 粗
大, 排列更为规则。 透射电镜观察 : 实验组和细胞 外基质凝胶组均 见再 生的有髓神经纤维 。⑦再 生神经 纤维图像分析 : 术后
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I S S N 1 6 7 3 - 8 2 2 5 C N 2 1 - 1 5 3 9 / R

’ 河 北 大 学 髓间充质干细胞修复大鼠 1 3 mm 坐骨神经缺损
L  ̄o w e n b d @1 2 6 . c o m
高于细胞 外基 质凝胶组【 分别为 ( - 7 2 . 1 8 + 3 . 1 1 ) %, ( - 7 6 . 8 5  ̄ 2 . 7 6 ) %; ( - 6 2 . 9 1 ± 2 . 8 7 ) %, ( - 6 9 . 6 3  ̄ 2 . 5 2 ) %】 , 差 异有显著性意 义 ( F= 7 . 8 5, P<0 . 0 1 ) 。⑧ 电生 理 检 查 : 术后 1 2周 实 验 组 运 动 神 经 传 导 速 度 及 波 幅 明 显 高 于 细 胞 外 基 质 凝 胶 组 【 分别 为( 4 1 . 2 9  ̄ 3 . 8 3 ) , ( 3 2 . 6 4 ± 3 . 5 2) m/ s ; ( 3 . 2 1 ± O . 3 4) , ( 2 . 8 5  ̄ 0 . 2 2 ) m、 , 】 , 差 异有 显 著性 意 义 ( F= 6 . 3 9, P <0. 0 1 ) 。实 验组 、 细 胞 外 基 质 凝胶 组 腓肠肌肌 电图呈部分失神经电位表现 , 生理盐水对照组则为完全失神经电位。④ 腓肠肌湿质量恢 复率 : 实验组 、 细胞外基质凝 胶组腓肠肌湿质量恢复率明显高于生理盐水对照组【 分别 为( 6 9 . 3 2  ̄ 2 . 6 5) %, ( 6 6 . 7 2  ̄ 1 . 7 5 ) %, ( 5 3 . 41 ± 1 . 9 7 ) %】 , 差 异 有 非 常 显 著性意义 ( F= 9 . 3 2 , P<0 . 0 1 ) , 实验组与细胞外基质凝胶组比较差异有显著性 意义( F= 6 _ 2 5 , P<0 . 0 5 ) 。⑤ 组织学检查 : 术后

小间隙缝合联合神经碎片对大鼠坐骨神经缺损修复的实验研究

小间隙缝合联合神经碎片对大鼠坐骨神经缺损修复的实验研究

( 1 . 内蒙古 大学 生命 科 学 学院 , 内蒙古 呼和 浩特
2 .内蒙 古 包钢 医院骨科 , 内蒙古 包头
0 1 4 0 1 0 )
[ 摘 要 ]目的 : 研 究神 经碎 片联 合神 经外 膜 小 间 隙缝 合在 周 围神 经损 伤修 复 中的 作 用。 方 法 : ① 实验动 物 随机 分 为对 照组 、 单纯 小 间隙缝合 组 、 小间 隙缝 合 +神 经碎 片组 ; ② 术后 2周观 察神 经 吻合 口大体 形 态 ; ③ 术后 8周组 织观 察神 经 纤维再 生情 况 ; ④ 术后 8周检 测腓肠 肌 湿重 比 ; ⑤病 理切 片图像分 析各 组再 生神 经纤 维数 目、 直径 、 髓鞘 厚 度 。结果 : ① 术后 2周 , 传统 缝合 吻合 口处黏 连 , 疤 痕组 织形 成 ; 单 纯 小 间隙缝 合 , 无 明 显 粘连 。 小 间隙缝合 +神 经碎 片组 , 吻合 口处无 明显 粘连 , 小 间隙外 膜 处 变细 ; ② 小 间 隙缝合 组 与 正 常对 照
组相比, 湿 重 比明显 增加 , 小间 隙加 神 经碎 片组 与 小间隙组 相 比 , 湿 重 比明显增 加 ; ③ 小间隙缝 合 +神 经碎 片
组、 单纯小间隙缝合组与对照组相比, 有髓神经纤维总数、 直径及髓鞘厚度均明显增加 , 小间隙+神经碎片组 神 经 纤维数 、 直径及 髓鞘厚 度 与单 纯 小 间隙缝 合 组相 比 明显增加 。④ 组 织学 显示 , 小 间隙加 神 经碎 片组 与单 纯小 间 隙组相 比 , 神 经 纤维 密集度增 加 , 排 列整 齐 。结论 : 神 经碎 片联 合 神 经外 膜 小 间 隙缝合 在 周 围神 经损
w e e k s . ③t e s t i n g n e r v e f i b e r r e g e n e r a t i o n a f t e r e i g h t we e k s . ④t e s t i n g g a s t r o c n e mi u s we t we i g h t r a t i o a f 蔷 e i g h t

魔芋甘露低聚糖增强肠道屏障功能改善酒精性中枢神经损伤的实验研究

魔芋甘露低聚糖增强肠道屏障功能改善酒精性中枢神经损伤的实验研究

网络出版时间:2024-03-0710:46:18 网络出版地址:https://link.cnki.net/urlid/34.1086.R.20240306.1725.018魔芋甘露低聚糖增强肠道屏障功能改善酒精性中枢神经损伤的实验研究陈晶晶1,钟文艳1,2,沈文卓1,肖 莉1,2,袁成福1,2(三峡大学1.基础医学院、2.肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室,湖北宜昌 443002)收稿日期:2023-12-20,修回日期:2024-01-26基金项目:国家自然青年科学基金资助项目(No81903916);三峡大学湖北肿瘤微环境与免疫治疗重点实验室开放基金项目(No2023KZL035)作者介绍:陈晶晶(1998-),女,硕士,研究方向:代谢性疾病及药物干预,E mail:jingjingchen0924@163.com;肖 莉(1979-),女,博士,副教授,硕士生导师,研究方向:代谢性疾病及药物干预,通信作者,E mail:xiaoli cn@163.com;袁成福(1976-),男,博士,教授,硕士生导师,研究方向:代谢性疾病及药物干预,通信作者,E mail:yuancf46@ct gu.edu.cndoi:10.12360/CPB202310079文献标识码:A文章编号:1001-1978(2024)03-0447-08中国图书分类号:R 332;R322 45;R322 81;R364 5;R595 6摘要:目的 慢性酒精摄入导致的大脑过度神经炎症是中枢神经损伤的重要危险因素。

本实验主要研究魔芋甘露低聚糖(Konjacmannanoligosaccharides,KMOS)保护酒精喂养小鼠中枢神经炎症的作用及其机制。

方法 C57BL/6J小鼠采用Gao binge法制备慢性酒精喂养小鼠模型,同时使用不同剂量的KMOS灌胃干预,喂养6周。

评估脑组织皮层和海马区域神经元损伤和小胶质细胞活化情况,观察结肠组织损伤情况和炎症反应,检测血清LPS浓度。

鞘内注射2R,_6R-HNK_缓解雌性小鼠的神经病理性疼痛

鞘内注射2R,_6R-HNK_缓解雌性小鼠的神经病理性疼痛

第 44卷第4期2023 年7月Vol.44 No.4July 2023中山大学学报(医学科学版)JOURNAL OF SUN YAT⁃SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)鞘内注射2R, 6R-HNK缓解雌性小鼠的神经病理性疼痛刘安然1,林震嘉2,彭湘格2,李莹2,郑钰凡2,谈智2,周利君2,冯霞1(1. 中山大学附属第一医院麻醉疼痛科,广东广州 510080; 2. 中山大学中山医学院生理教研室//中山大学疼痛研究中心,广东广州 510080)摘要:【目的】 初步探究鞘内注射2R, 6R-羟化去甲氯胺酮(2R, 6R-HNK)对慢性神经病理性疼痛(CNP)的镇痛作用及其机制。

【方法】 采用坐骨神经选择性损伤(SNI)诱导的CNP模型。

将雌性小鼠随机分不同组:假手术或SNI术后3 周或术前30 min/1 d给予溶剂、2R, 6R-HNK、S-ketamine(10 mg/kg腹腔注射或7、21 μmol/L鞘内注射)(每组3 ~ 7只)。

采用机械缩足阈值(PWT)和镇痛效率评估2R, 6R-HNK的治疗或预防效果。

再用免疫荧光和RT-PCR方法检测背根神经节(DRG)和脊髓背角中蛋白转录及表达水平,并探讨其可能的作用机制。

【结果】 鞘内注射2R, 6R-HNK剂量依赖地缓解雌性小鼠SNI建模3 周的双侧机械痛敏;其中21 μmol/L 2R, 6R-HNK的镇痛效率达峰时间为2 d,峰值为(75.32±7.69)%。

预先鞘内2R, 6R-HNK还能延迟SNI诱导双侧机械痛敏产生2 ~ 3 d。

机制上,2R, 6R-HNK预处理不仅显著抑制SNI引起的双侧DRG和脊髓背角浅层神经元异常兴奋,还下调DRG内降钙素基因相关肽(CGRP)及脑源性神经生长因子(BDNF)的高表达。

【结论】 鞘内注射2R, 6R-HNK通过抑制上行痛觉通路神经元异常兴奋并下调DRG神经元CGRP和BDNF表达从而对CNP产生镇痛作用。

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jo nl ofShanghai Second Medical University2007 Vol・l9 No・2 PRIMARY STUDY OF REPAIRING PERIPHERAL NERVE GAP WITH PORCINE SMALL INTESTINAL SUBMUCOSA 

su Yan(苏琰),ZHANG Chang—qing(张长青), ZHANG Kai—gang(张开刚), ZENG Bing-fang(曾炳芳) Depa 撇 ofOrthop伽dics.the Sixth People's HospitⅡl,ShⅡnghⅡi Jiaot。ng University,ShⅡnghⅡi 2002刀, № 

Abstract Objectire To investigate the role ofporcine small intestinal submucosa(SIS)conduit in ax’ onal 譬明8ration of rat sciatic nerve with a 10 mln gap. Methods Forty eight rats were randomly diVided ,l thre8譬加工‘p (,l=16).Following n 10 mln gap was made in one side ofthe sciatic nerve of each rat;preViously prepnred SIS nnd n王‘to.,l8,v8 g, were interposed into the gap to reconnect the proximal and distal ends of the ne e.respectively.In the control group。the nerve gap remained unconnected.The samples ofthe SIS,graft,and distal,l8 8 in group and group 2 were harvested at 6 weeks and 10 weeks after operation,respectively・Axonal re’ generation was evaluated by histology, electrophysiology, and quantitated by using computer analyzed tmag8・ Results Regenerative nervefibers were evident which contained much myelinated axons and grew over the gap in the SIS conduits at 10 weeks.Electroph),siological examination and computer—ana zed image showed that axonal re一 譬8,l8ratio,l in the SIS group was similar to that in the auto.nerve grafting group at 10 weeks. Conclusion SIS as n conduitpossesses the abilityforaxonal regeneration ofthe peripheral nerve,thereby having apotential to be an al— ternative bio..material instead ofthe autograft to repair the peripheral nerve gap. Key words sciatic nerve 

Treatment of the injured peripheral nerve with a long defect remains one of the most difficult problems in nerve reconstructive surgery.Although using an autologous nerve graft is the golden standard clinical— lv.this method is limited when the source of donor nerve is insufficient,in particular when considering the morbidity in the donor site[ .Searching alterna— 

tive approaches to instead of autologous nerve grafts, therefore,is well motivated. A variety of materials have been studied to bridge nerve gaps.However,up to date,axonal re— generation using neither synthetic nor natural materi— als has reached to the equivalent level of the use of further investigation to search al— temative nerve conduit is demanded. Small intestinal submucosa(SIS)is a multilam— inar portion of the small intestine and has been印一 plied as a biomaterial scaffold for tissue engineering applications[。一 .Encouraging results with appropri— ate tissue regeneration and functional recovery have been reported in each of these applications.There— fore,SIS appears to have potential to facilitate host tissue regeneration without concurrent immunologic rejection or alteration .Using porcine SIS as a nerve conduit,this study evaluated axonal regenera— tion following bridging a sciatic nerve gap in the rat. MATERIALS ANDⅣⅡ THoDS SIS preparation Preparation of porcine SIS was followed previous description by others .Brie— fly,segment of fresh jejunum was harvested from healthy swine(weighting over 200 kg)purchased from Qixing Farm,Shanghai.After gently cleaning in water.the segment was everted in 0.9%saline solu— tion and the tunica mucosa was abraded using longi— tudinal wiping motions with a scalpel handle wrapped with moistened gauze.The treated jejunal segment 

‘Supported by National Natural Science Foundation of China(30371444). Corresponding author:ZENG Bing-fang(曾炳芳)yansu2004@yhaoo.com.cn 

维普资讯 http://www.cqvip.com 维普资讯 http://www.cqvip.com 维普资讯 http://www.cqvip.com 维普资讯 http://www.cqvip.com Journal ofShanghai SecondMedical University 2007 Vo1.19No.2 quently,SIS is comprehensively researched for tissue repairing at varied tissues and organs and has gained encouraging results[。一 .Recently.several Success- fully clinical applications have been reported[。一 。。. Taken together,the characteristics of SIS appear to be ̄( ̄)surviving in a xenogenic host without obviously adverse immunologic consequences;②corresponding to local biomechanical effects and mieroenvironment, and contributing to tissue remodeling;③accelerating cell proliferation and differentiation in special tis- sues;( ̄)indueing a body response to resist infection; and( ̄)harvested easily 。一 ' ' ¨. In the present study,a single layer of porcine SIS was used to offer a tubular conduit for axonal spur and growth.As a scaffold,porcine SIS is thicker and has greater mechanical strength than rat SIS.Histo- logical examination demonstrated that axons with well structured myelin were able to CroSS SIS and migrate into the distal nerve.Electrophysiologieal results fur- ther confirmed that regenerated axons in the SIS group regained certain function which was similar to the auto-grafting group.Our results concurred with that in a recent study_l2j.In another study,however, a rolled rat SIS with monolayer Schwann cell was used to repair rat sciatic nerve defect.Although ax- onal regeneration indeed happened,the rolled SIS contained thick lamellae of backbone material and n0 spacers lapsing to keep the area between lamellae from col- onto one another,thereby preyenting further axonal regeneration[ . The exact mechanisms of how SIS contributes to nerve repair are unclear.However, SIS-contained proteoglycan and cellular factors may play important roles.It is known that many cellular factors,such as nerve growth factor(NGF)and fibroblast growth fac— tor-2(FGF-2)demand special proteoglycan to COB- bine their receptors before they can function to the nerve[14].Thus.proteoglyean compositions in SIS may facilitate cellular factors to promote axonal sprou- ting and growth.Furthermore,extractable growth factors from SIS include FGF-2,TGF-B,and VasCU- lar endothelial growth factor(VEGF)[7j.Studies have shown that FGF-2 is important in degeneration 

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