微生物实验室现场检查
微生物实验室要求
微生物检验实验室操作技术要求
第一节实验室管理制度
一、实验室管理制度
1 ．实验室应制定仪器配备管理、使用制度，药品管理、使用制度，玻璃器皿管理，使用制度，并根据安全制度和环境条件的要求，本室工作人员应严格掌握，认真执行。
2 ．进入实验室必须穿工作服，进入无菌室换无菌衣、帽、鞋，戴好口罩，非实验
室人员不得进入实验室，严格执行安全操作规程。
3 ．实验室内物品摆放整齐，试剂定期检查并有明晰标签，仪器定期检查、保养、
检修 , 严禁在冰箱内存放和加工私人食品。
4 ．各种器材应建立请领消耗记录，贵重仪器有使用记录，破损遗失应填写报告；
药品、器材、菌种不经批准不得擅自外借和转让，更不得私自拿出，应严格执行《菌种保管制度》。
5 ．禁止在实验室内吸烟、进餐、会客、喧哗，实验室内不得带入私人物品，离开
实验室前认真检查水、电、暖气、门窗，对于有毒、有害、易燃、污染、腐蚀的物品和废弃物品应按有关要求执行。
6 ．科、室负责人督促本制度严格执行，根据情况给于奖惩，出现问题立即报告，
造成病原扩散等责任事故者，应视情节直至追究法律责任。
二、仪器配备、管理使用制度
1 ．食品微生物实验室应具备下列仪器：培养箱、高压锅、普通冰箱、低温冰箱、厌氧培养设备、显微镜、离心机、超净台、振荡器、普通天平、千分之一天平、烤箱、冷冻干燥设备、匀质器、恒温水浴箱、菌落计数器、生化培养箱，电位 pH 计、高速离心机。
2 ．实验室所使用的仪器、容器应符合标准要求，保证准确可靠，凡计量器具须经
计量部门检定合格方能使用。
3 ．实验室仪器安放合理，贵重仪器有专人保管，建立仪器档案，并备有操作方法，保养、维修、说明书及使用登记本，做到经常维护、保养和检查，精密仪器不得随意移动，若有损坏需要修理时，不得私自拆动、应写出报告、通知管理人员，经科室负责人同意填报修理申请、送仪器维修部门。
4 ．各种仪器（冰箱、温箱除外），使用完毕后要立即切断电源，旋钮复原归位，
待仔细检查后，方可离去。
5 ．一切仪器设备未经设备管理人员同意，不得外借，使用后按登记本的内容进行
登记。
6 ．仪器设备应保持清洁，一般应有仪器套罩。
7 ．使用仪器时，应严格按操作规程进行，对违反操作规程的因管理不善致使仪器
械损坏，要追究当事者责任。
三、药品管理、使用制度
1 ．依据本室检测任务，制定各种药品试剂采购计划，写清品名、单位、数量、纯度、包装规格，出厂日期等，领回后建立帐目，专人管理，每半年做出消耗表，并清点剩余药品。
2 ．药品试剂陈列整齐，放置有序、避光、防潮、通风干燥，瓶签完整，剧毒药品
加锁存放、易燃、挥发、腐蚀品种单独贮存。
3 ．领用药品试剂，需填写请领单、由使用人和室负责人签字，任何人无权私自出
借或馈送药品试剂，本单位科、室间或外单位互借时需经科室负责人签字。
4 ．称取药品试剂应按操作规范进行，用后盖好，必要时可封口或黑纸包裹，不使
用过期或变质药品。
四、玻璃器皿管理、使用制度
1 ．根据测试项目的要求，申报玻璃仪器的采购计划、详细注明规格、产地、数量、要求，硬质中性玻璃仪器应经计量验证合格。
2 ．大型器皿建立帐目，每年清查一次，一般低值易耗器皿损坏后随时填写损耗登
记清单。
3 ．玻璃器皿使用前应除去污垢，并用清洁液或 2% 稀盐酸溶液浸泡 2
4 h 后，用清水冲洗干净备用。
4 ．器皿使用后随时清洗，染菌后应严格高压灭菌，不得乱弃乱扔。
五、安全制度
1 ．进入实验室工作衣、帽、鞋必须穿戴整齐。
2 ．在进行高压、干烤、消毒等工作时，工作人员不得擅自离现场，认真观察温度、时间，蒸馏易挥发、易燃液体时，不准直接加热，应置水浴锅上进行，试验过程中如产生毒气时应在避毒柜内操作。
3 ．严禁用口直接吸取药品和菌液，按无菌操作进行，如发生菌液，病原体溅出容器外时，应立即用有效消毒剂进行彻底消毒，安全处理后方有离开现场。
4 ．工作完毕，两手用清水肥皂洗净，必要时可用新洁尔灭、过氧乙酸泡手，然后用水冲洗，工作服应经常清洗，保持整洁，必要时高压消毒。
5 ．实验完毕，即时清理现场和实验用具，对染菌带毒物品，进行消毒灭菌处理。
6 ．每日下班，尤其节假日前后认真检查水、暖气、电和正在使用的仪器设备，关好门窗，方可离去。
六、环境条件要求
1. 实验室内要经常保持清洁卫生，每天上下班应进行清扫整理，桌柜等表面应每
天用消毒液擦拭，保持无尘，杜绝污染。
2. 实验室应井然有序，不得存放实验室外及个人物品、仪器等，实验室用品要摆
放合理，并有固定位置。
3. 随时保持实验室卫生，不得乱扔纸屑等杂物，测试用过的废弃物要倒在固定的
箱筒内，并及时处理。
4. 实验室应具有优良的采光条件和照明设备。
5. 实验室工作台面应保持水平和无渗漏，墙壁和地面应当光滑和容易清洗。
6. 实验室布局要合理，一般实验室应有准备间和无菌室，无菌室应有良好的通风
条件，如安装空调设备及过滤设备，无菌室内空气测试应基本达到无菌。
7. 严禁利用实验室作会议室及其他文娱活动和学习场所。
第二节实验室技术操作要求
一、无菌操作要求
食品微生物实验室工作人员，必须有严格的无菌观念，许多试验要求在无菌条件下进行，主要原因：一是防止试验操作中人为污染样品，二是保证工作人员安全，防止检出的致病菌由于操作不当造成个人污染。
1. 接种细菌时必须穿工作服、戴工作帽。
2. 进行接种食品样品时，必须穿专用的工作服、帽及拖鞋，应放在无菌室缓冲间，工作前经紫外线消毒后使用。
3. 接种食品样品时，应在进无菌室前用肥皂洗手，然后用 75 ％酒精棉球将手擦干净。
4. 进行接种所用的吸管，平皿及培养基等必须经消毒灭菌，打开包装未使用完的
器皿，不能放置后再使用，金属用具应高压灭菌或用 95% 酒精点燃烧灼三次后使用。
5. 从包装中取出吸管时，吸管尖部不能触及外露部位，使用吸管接种于试管或平
皿时，吸管尖不得触及试管或平皿边。
6. 接种样品、转种细菌必须在酒精灯前操作，接种细菌或样品时，吸管从包装中
取出后及打开试管塞都要通过火焰消毒。
7. 接种环和针在接种细菌前应经火焰烧灼全部金属丝，必要时还要烧到环和针与
杆的连接处，接种结核菌和烈性菌的接种环应在沸水中煮沸5min ，再经火焰烧灼。
8. 吸管吸取菌液或样品时，应用相应的橡皮头吸取，不得直接用口吸。
二、无菌间使用要求
1. 无菌间通向外面的窗户应为双层玻璃，并要密封，不得随意打开，并设有与无
菌间大小相应的缓冲间及推拉门，另设有 0.5 -0 .7m 2 的小窗，以备进入无菌间后
传递物品。
2. 无菌间内应保持清洁，工作后用 2%-3% 煤酚皂溶液消毒，擦拭工作台面，不得存放与实验无关的物品。
3. 无菌间使用前后应将门关紧，打开紫外灯，如采用室内悬吊紫外灯消毒时，需
30W 紫外灯，距离在 1.0m 处，照射时间不少于 30min ，使用紫外灯，应注意不
得直接在紫外线下操作，以免引起损伤，灯管每隔两周需用酒精棉球轻轻擦拭，除去上面灰尘和油垢，以减少紫外线穿透的影响。
4. 处理和接种食品标本时，进入无菌间操作，不得随意出入，如需要传递物品，
可通过小窗传递。
5. 在无菌间内如需要安装空调时，则应有过滤装置。
三、消毒灭菌要求
微生物检测用的玻璃器皿、金属用具及培养基、被污染和接种的培养物等，必须
经灭菌后方能使用。
（一）干热和湿热高压蒸气锅灭菌方法
1 ．灭菌前准备
（ 1 ）所有需要灭菌的物品首先应清洗晾干，玻璃器皿如吸管、平皿用纸包装严密，如用金属筒应将上面通气孔打开。
（ 2 ）装培养基的三角瓶塞，用纸包好，试管盖好盖，注射器须将管芯抽出，用纱布包好。
2 ．装放
（ 1 ）干热灭菌器：装放物品不可过挤，且不能接触箱的四壁。
（ 2 ）大型高压蒸气锅：放置灭菌物品分别包扎好，直接放入消毒筒内，物品之间不能过挤。
3 ．设备检查
（ 1 ）检查门的开关是否灵活，橡皮圈有无损坏，是否平整。
（ 2 ）压力表蒸气排尽时是否停留在零位，关好门和盖，通蒸气或加热后，观察是否漏气，压力表与温度计所标示的状况是否吻合，管道有无堵塞。
（ 3 ）对有自动电子程序控制装置的灭菌器，使用前应检查规定的程序，是否符合于进行灭菌处理的要求。
4 ．灭菌处理
(1) 干热灭菌法：此法适应于在干热情况下，不损坏、不变质、不蒸发的物品、较常用于玻璃器皿、金属制品、陶瓷制品等的灭菌。
a. 器械器皿应清洗后再干烤，以防附着在表面的污物炭化。
b. 灭菌时安放物品不能过挤，不要直接接触底和箱壁，物品之间留有空隙。
c. 灭菌时将箱门关紧，接上电源，先将排气孔打开约 30min ，排除灭菌器中的冷空气，温度升至 160 ℃调节指示灯，维持 1.5 –2h 。
d. 灭菌完毕后或温度升温过程中，须在 60 ℃以下才能打开箱门。
(2) 手提式高压锅或立式压力蒸气灭菌器的使用应按下列步骤进行：
a. 手提式高压锅在主体内加入 3L 清水，立式高压锅加水 16L （重复使用时应将水量补足，水变混浊需更换）。
b. 手提式压力锅将顶盖上的排气管插入消毒桶内壁的方管中（无软管或软管锈蚀破裂的灭菌器不得使用）。
c. 盖好顶盖拧紧，勿使漏气；置灭菌器于火源上加热，立式压力锅通上电源，并打开顶盖上的排气阀放了冷气（水沸腾后排气 10-15min ）。
d. 关闭排气阀，使蒸气压上升到规定要求，并维持规定时间（按灭菌物品性质与有关情况而定）。
e. 达到规定时间后，对需干燥的物品，立即打开排气阀排出蒸气，待压力恢复到零时，自然冷却至 60 ℃后开盖取物，如为液体物品，不要打开排气阀，而应立即将锅去除热源，待自然冷却，压力恢复至零，温度降到 60 ℃以下再开盖取物，以防突然减压液体剧烈沸腾或容器爆破。
(3) 卧式压力锅蒸气灭菌器的使用按下列步骤进行：
a. 关紧锅门，打开进气阀，将蒸气引入夹层进行预热，夹层内冷空气经阻气器自
动排出。
b. 夹层达到预定温度后，打开锅室进气阀，将蒸气引入锅室，锅室内冷空气经锅
室阻气器自动排出。
c. 待锅室达到规定的压力与温度时，调节进气阀，使保持恒定至规定时间。
d. 自然或人工降温至 60 ℃再开门取物，不得使用快速排出蒸气法，以防突然降压，液体剧烈沸腾或容器爆破。
e. 使用自动程序控制式压力蒸气灭菌器，在放好物品关紧门后，应根据物品类别按动相应开关，以便按要求程序自动进行灭菌，灭菌时必须利用附设仪表记录温度与时间以备查，操作要求应严格按照厂家说明书进行。
5 ．灭菌温度与时间
(1) 干热灭菌器灭菌温度 160 ℃， 1.5-2h 。
(2) 压力蒸气灭菌锅灭菌温度与时间见表 34-1 。
表 34-1
物品灭菌时间， min
115 ℃121 ℃
不含糖等耐热物质培养基
含糖类等不耐热培养基染菌培养物
器械器皿15-20 30
30
（二）间歇灭菌方法
1 ．灭菌方法系利用不加压力的蒸气灭菌，某些物质经高压蒸气灭菌容易破坏，可用此法灭菌。
（ 1 ）将欲灭菌物品置于锅内，盖上顶盖，打开排水口，使器内余水排尽。
（ 2 ）关闭排水口，打开进气门，根据需要消毒 10 ～ 20min.
（ 3 ）灭菌完毕关闭进气门，取出物品待冷至室温温度，放入 37 ℃温箱过夜，次日仍按上述方法消毒，如此三次，即可达到灭菌目的。
2 ．血清凝固器使用方法，培养基中含有血清或鸡蛋特殊成份时，因高热会破坏其营养成份，故用低温，可使血清凝固，又可达到灭菌目的。
（ 1 ）在使用该法灭菌的血清等分装时，需严格遵守无菌操作，试管、平皿也经灭菌后使用。
（ 2 ）将培养基按要求使成斜面或高层，加足水后，接上电源，升温 75 ～ 90 ℃1h 灭菌，放 37 ℃温箱过夜，再如此灭菌三次。
3. 煮沸消毒：可用煮锅或煮沸消毒器，水沸腾后再煮 5 ～ 15 min ，也可在水中加入 2 ﹪石炭酸煮沸 5 min ，加入 0.02 ﹪甲醛 , 80 ℃煮 60 min 均可达到灭菌目的 , 但选用煮沸消毒的增消剂时 , 应注意对物品的腐蚀性 .
4. 灭菌处理 : 灭菌后物品 , 按正常情况已属无菌 , 从灭菌器中取出应仔细检查放置 , 以免再度污染 .
(1) 物品取出 , 随即检查包装的完整性 , 若有破坏或棉塞脱掉 , 不可作为无菌物品使用 .
(2) 取出的物品 , 如为包装有明显的水浸者 , 不可作为无菌物品使用 .
(3) 培养基或试剂等 , 应检查是否符合达到灭菌后的色泽或状态 , 未达到者应废弃 .
(4) 启闭式容器 , 在取出时应将筛孔关闭 .
(5) 取出的物品掉落在地或误放不洁这处 , 或沾有水液 , 均视为受到污染 , 不可作为无菌物品使用 .
(6) 取出的合格灭菌物品 , 应存放于贮藏室或防尘柜内 , 严禁与未灭菌物品混放 .
(7) 凡属合格物品 , 应标有灭菌日期及有效期限 .
(8) 每批灭菌处理完成后 , 记录灭菌品名、数量、温度、时间、操作者。
四、有毒有菌污物处理要求
微生物实验所用实验器材、培养物等未经消毒处理，一律不得带出实验室。
1. 经培养的污染材料及废弃物应放在严密的容器或铁丝筐内，并隼中存放在指定地点，待统一进行高压灭菌。
2. 经微生物污染的培养物，必须经 121 ℃ 30 min 高压灭菌。
3. 染菌后的吸管，使用后放入 5 ﹪煤酚皂溶液或石炭酸液中，最少浸泡 24h （消毒液体不得低于浸泡的高度）再经 121 ℃ 30 min 高压灭菌。
4. 涂片染色冲洗片的液体，一般可直接冲入下水道，烈性菌的冲洗液必须冲在烧
杯中，经高压灭菌后方可倒入下水道，染色的玻片放入 5 ﹪煤酚皂溶液中浸泡 24
h 后，煮沸洗涤。做凝隼试验用的玻片或平皿，必须高压灭菌后洗涤。
5. 打碎的培养物，立即用 5 ﹪煤酚皂溶液或石炭酸液喷洒和浸泡被污染部位，浸
泡半小时后再擦拭干净。
污染的工作服或进行烈性试验所穿的工作服、帽、口罩等，应放入专用消毒袋内，经高压灭菌后方能洗涤。
五、培养基制备要求
培养基制备的质量将直接影响微生物生长。因为各种微生物对其营养要求不完全相同，培养目的的不同，各种培养基制备要求如下：
1. 根据培养基配方的成分按量称取，然后溶于蒸馏水中，在使用前对应用的试剂
药品应进行质量检验。
2. PH 测定及调节： PH 测定要在培养基冷至室温时进行，因在热或冷的情况下，
其 PH 有一定差异，当测定好时，按计算量加入碱或酸混匀后，应再测试一次。培
养基 PH 值一定要准确，否则会影响微生物的生长或影响结果的观察。但需注意因
高压灭菌可影响一些培养基的 PH 降低或升高，故不宜灭菌压力过高或次数太多，
以免影响培养基的质量，指示剂、去氧胆酸钠、琼脂等一般在调完 PH 后再加入。3. 培养基需保持澄清，便于观察细菌的生长情况，培养基加热煮沸后，可用脱脂
棉花或绒布过滤，以除去沉淀物，必要时可用鸡蛋白澄清处理，所用琼脂条要预先洗净凉干后使用，避免因琼脂含杂质而影响透明度。
4. 盛装培养基不宜用铁、铜等容器，使用洗净的中性硬质玻璃容器为好。
5. 培养基的灭菌既要达到完全灭菌目的，又要注意不因加热而降低其营养价值，
一般121 ℃15min 即可，如为含有不耐高热物质的培养基如糖类、血清、明胶等，则应采用低温灭菌或间歇法灭菌，一些不能加热的试剂如亚碲酸钾、卵黄、TTC 、抗菌素等，待基础琼脂高压灭菌后凉至 50 ℃左右再加入。
6. 每批培养基制备好后，应做无菌生长试验及所检菌株生长试验。如果是生化培
养基，使用标准菌株接种培养，观察生化反应结果，应呈正常反应，培养基不应贮存过久，必要时可置 4 ℃冰箱存放。
7. 目前各种干燥培养基较多，每批需用标准菌株进行生长试验或生化反应观察，
各种培养基用相应菌株生长试验良好后方可应用，新购进的或存放过久的干燥培养基，在配制时也应测 PH ，使用时需根据产品说明书用量和方法进行。
8. 每批制备的培养基所用化学试剂、灭菌情况及菌株生长试验结果、制作人员等
应做好记录，以备查询。
六、样品采集及处理要求
1. 所采集的检验样品一定要具有代表性，采样时应首先对该批食品原料、加工、
运输、贮藏方法条件、周围环境卫生状况等进行详细调查，检查是否有污染源存在。
2. 根据食品的种类及数量，采样数量及方法应按标准检验方法的要求进行。
3. 采样应注意无菌操作，容器必须灭菌，避免环境中微生物污染，容器不得使用
煤酚皂溶液，用新洁尔灭、酒精等消毒药物灭菌，更不能含有此类消毒药物或抗生素类药物，以避免杀死样品中的微生物，所用剪、刀、匙用具也需灭菌方可应用。
4. 样品采集后应立即送往检验室进行检验，送检过程中一般不超过 3h ，如路程较远，可保存在 1 ～ 5 ℃环境中，如需冷冻者，则在冻存状态下送检。
5. 检验室收到样品后，进行登记（样品名称、送检单位、数量、日期、编号等），观察样品的外观，如果发现有下列情况之一者，可拒绝检验。
(1) 样品经过特殊高压、煮沸或其他方法杀菌者，失去代表原食品检验意义者。
(2) 瓶、袋装食品已启开者，熟肉及其制品、熟禽等食品已折碎不完整者，即失去
原食品形状者（食物中毒样品除外）。
(3) 按规定采样数量不足者。
对送检符合要求的样品，检验室收到后，应立即进行检验，如果条件不具备，应置4 ℃冰箱存放，及时准备创造条件，然后进行检验。
6. 样品检验时，根据其不同性状，进行适当处理。
(1) 液体样品接种时，应充分混合均匀，按量吸取进行接种。
(2) 固体样品，用灭菌刀、剪取其不同部位共 25g ，置于 225ml 灭菌生理盐水或
其他溶液中，用均质器搅碎混匀后，按量吸取接种。
(3) 瓶、袋装食品应用灭菌操作启开，根据性状选择上述方法处理后接种。
七、样品检验、记录和报告的要求
1. 检验室收到样品后，首先进行外观检验，及时按照国家标准检验方法进行检验，检验过程中要认真、负责、严格进行无菌操作，避免环境中微生物污染。
2. 样品检验过程中所用方法、出现的现象和结果等均要用文字写出试验纪录，以作为对结果分析、判定的依据，记录要求详细、清楚、真实、客观、不得涂改和伪造。
检验科微生物实验室生物安全事件应急预案
检验科微生物实验室生物安全事件应急预案 This manuscript was revised by JIEK MA on December 15th, 2012.
检验科微生物实验室生物安全事件应急预案为了有效的预防微生物实验室生物污染，有效应对实验室突发污染事件，保证实验结果的科学准确，保障实验工作人员的健康、生命财产安全，防止实验室污染对周围环境造成严重污染，加强检验工作的质量控制和实验室的管理，根据《中华人民共和国传染病防治法》、《突发公共卫生事件应急条例》和《实验室生物安全通用要求》等相关法律法规的规定，特制定本预案，确保一旦发生实验室污染事件及安全事故时，能及时、规范、科学、迅速有效地控制。 一、适用范围 本预案适用于微生物实验室发生的、与实验室安全相关的、危害科室工作人员健康以及社会公众健康和社会稳定的所有事件。主要包括：1．病原微生物的实验室污染事件； 2．工作人员受到实验室内有毒病原微生物的感染或侵害； 3．病原微生物被泄漏出实验室事件。 4．由于停电、火灾等不可预测因素所引起的实验室其他污染事件。 当出现以上适用范围中的任意情况，启动本预案。 二、应急管理小组 有微生物实验室生物安全事件应急管理小组，科主任任组长，制定实验室生物安全防护指导方针，规划对实验室的硬件建设、组织实施科学管理。在实验室生物安全事件发生时，决策指挥，调动人员，全面部署。发生突发事件后应急处理小组全体成员，应立即按实验室污染突发事件处理
的技术规范，采取有效措施控制事件、调查原因，减少人员伤亡和财产损失。 三、预防措施 1．加强实验室标准化建设，对实验室设备的配置、个人防护和实验室安全行为应按《实验室生物安全通用要求》做出明确规定。 2．建立实验室病原微生物专库，对于传染病病原样本建立严格的监督管理制度。 3．增强安全意识，合理完善实验室生物安全的各项规章制度。把生物安全管理责任和措施落到实处，消除安全隐患。实验室工作人员应自觉遵守实验室生物安全管理规定，严格按照操作规程和技术规范开展研究工作。 4．提高警惕，加强安全保卫，防止不法之徒盗窃病原微生物和有毒有害化学试剂，用于对人群进行生物化学恐怖攻击，对公众健康产生严重损害，影响社会稳定。 5．建立有效的预警机制，为各种病原微生物和有毒有害化学试剂建立档案和使用纪录，填写准确。每次使用后及时登记，发现遗失或被盗，立即报告。 6．建立实验室工作人员健康档案，定期体检。发现与实验室生物安全有关的人员感染或伤害应立即报告。 7．定期开展自查，及时发现安全隐患，发出预警通报。 四、应急控制措施
微生物实验室建设标准
微生物实验室建设标准 一、设计 微生物实验室由准备室、洗涤室、灭菌室、无菌室、恒温培养室和普通实验室六部分组成。这些房间的共同特点是地板和墙壁的质地光滑坚硬，仪器和设备的陈设简洁，便于打扫卫生。 二、微生物实验室基本要求 一准备室准备室用于配制培养基和样品处理等。室内设有试剂柜、存放器具或材料的专柜、实验台、电炉、冰箱和上下水道、电源等。 二洗涤室洗涤室用于洗刷器皿等。由于使用过的器皿已被微生物污染，有时还会存在病原微生物。因此，在条件允许的情况下，最好设置洗涤室。室内应备有加热器、蒸锅，洗刷器皿用的盆、桶等，还应有各种瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等。 三灭菌室灭菌室主要用于培养基的灭菌和各种器具的灭菌，室内应备有高压蒸汽灭菌器、烘箱等灭菌设备及设施。 四无菌室无菌室也称接种室，是系统接种、纯化菌种等无菌操作的专用实验室。在微生物中，菌种的接种移植是一项主要操作，这项操作的特点就是要保证菌种纯种，防止杂菌的污染。在一般环境的空气中，由于存在许多尘埃和杂菌，很易造成污染，对接种工作干扰很大。 1. 无菌室的设置 无菌室应根据既经济又科学的原则来设置。其基本要求有以下几点： （1）无菌室应有内、外两间，内间是无菌室，外间是缓冲室。房间容积不宜过大，以便于空气灭菌。最小内间面积2×2.5＝5m2，外间面积1×2＝2m2，高以2.5m以下为宜，都应有天花板。 （2）内间应当设拉门，以减少空气的波动，门应设在离工作台最远的位置上；外间的门最好也用拉门，要设在距内间最远的位置上。
（3）在分隔内间与外间的墙壁或“隔扇”上，应开一个小窗，作接种过程中必要的内外传递物品的通道，以减少人员进出内间的次数，降低污染程度。小窗宽60cm、高40cm、厚30cm，内外都挂对拉的窗扇。 （4）无菌室容积小而严密，使用一段时间后，室内温度很高，故应设置通气窗。通气窗应设在内室进门处的顶棚上（即离工作台最远的位置），最好为双层结构，外层为百叶窗，内层可用抽板式窗扇。通气窗可在内室使用后、灭菌前开启，以流通空气。有条件可安装恒温恒湿机。 2. 无菌室内设备和用具 （1）无菌室内的工作台，不论是什么材质、用途的，都要求表面光滑和台面水平。（2）在内室和外室各安装一个紫外灯（多为30W）。内室的紫外线灯应安装在经常工作的座位正上方，离地面2m，外室的紫外线灯可安装在外室中央。 （3）外室应有专用的工作服、鞋、帽、口罩、盛有来苏儿水的瓷盆和毛巾、手持喷雾器和5%石炭酸溶液等。 （4）内室应有酒精灯、常用接种工具、不锈钢制的刀、剪、镊子、70%的酒精棉球、工业酒精、载玻璃片、特种蜡笔、记录本、铅笔、标签纸、胶水、废物筐等。 3. 无菌室的灭菌消毒 （1）薰蒸：这是无菌室彻底灭菌的措施。无菌室使用了较长时间，污染比较严重时，应进行薰蒸灭菌。可用甲醛、乳酸或硫磺薰蒸。 （2）喷雾：在每次使用无菌室前进行。喷雾可促使空气中微粒及微生物沉降，防止桌面、地面上的微尘飞场，并有杀菌作用。可用5%石炭酸喷雾。 （3）紫外线照射：在每次使用无菌室前进行。紫外线有较好的杀菌效果。通常应开启紫外线灯照射30～60min。
微生物实验室常用仪器配置
微生物实验室常用仪器配置 微生物学实验室就是生物学领域得一个基本实验室,对于一个完备得微生物学实验室,我们需要配置哪些仪器呢?环凯为您得微生物学实验仪器配置提供如下参考. 1、超净工作台 微生物得培养都就是在特定培养基中进行无菌培养，那么无菌培养必然需要超净工作台提供一个无菌得工作环境。 ２、培养箱 培养箱有多种类型，它得作用在于为微生物得生长提供一个适宜得环境。生化培养箱只能控制温度，可作为一般细菌得平板培养；霉菌培养箱可以控制温度与湿度，可作为霉菌得培养;ＣＯ２培养箱适用于厌氧微生物得培养。 ３、天平 天平用于精确称量各类试剂。实验室常用得就是电子天平，电子天平按照精度不同有不同得级别. 4、微生物均质器
用于从固体样品中提取细菌。用微生物均质器制备微生物检测样本具有样品无污染、无损伤、不升温、不需要灭菌处理，不需洗刷器皿等特点,就是微生物实验中使用较为方便得仪器。 ５、菌落计数器 菌落计数仪可协助操作者计数菌落数量。通过放大,拍照，计数等方式准确得获取菌落得数量。有些高性能得菌落计数器还可连接电脑完成自动计数得操作。 6、微波炉/电炉 用于溶液得快速加热，微生物固体培养基得加热溶化。 7、高压灭菌锅 微生物学所用到得大部分实验物品、试剂、培养基都应严格消毒灭菌。灭菌锅也有不同大小型号,有些就是手动得，有些就是全自动得。用户需要根据自己得需要选购。 8、移液器 液体量器用于精密量取各类液体。常见得液体量器有量筒、移液管、微量取液器、刻度试管、烧杯。 9、低温冰箱 冰箱就是实验室保存试剂与样品必不可少得仪器。微生物学实验中用到得试剂有些要求就是4度保存,有些要求就是负20度保存，实验人员一定要瞧清试剂得保存条件,放置在恰当得温度下保存。 10、生物安全柜 微生物实验中涉及得试剂与样品微生物有些就是有毒得，对于操作人员来说伤害较大.为了防止有害悬浮微粒、气溶胶得扩散，可以利用生物安全柜对操作人员、样品及样品间交叉感染与环境提供安全保护。 11、摇床 摇床就是实验室常用得一种仪器，在微生物实验操作过程中,液体培养基培养细菌时需要在特定温度下振荡使用。 12、纯水装置 纯水装置包括蒸馏水器与纯水机。蒸馏水器得价格便宜，但在造水过程中需要有人值守；纯水机价格高些，但就是使用方便，可以储存一定量得纯水.纯水使用也有不同得级别,实验中配制试剂,配制培养基均需用纯水。
微生物实验室现场检查
微生物实验室要求 微生物检验实验室操作技术要求 第一节实验室管理制度 一、实验室管理制度 1 ．实验室应制定仪器配备管理、使用制度，药品管理、使用制度，玻璃器皿管理，使用制度，并根据安全制度和环境条件的要求，本室工作人员应严格掌握，认真执行。 2 ．进入实验室必须穿工作服，进入无菌室换无菌衣、帽、鞋，戴好口罩，非实验 室人员不得进入实验室，严格执行安全操作规程。 3 ．实验室内物品摆放整齐，试剂定期检查并有明晰标签，仪器定期检查、保养、 检修 , 严禁在冰箱内存放和加工私人食品。 4 ．各种器材应建立请领消耗记录，贵重仪器有使用记录，破损遗失应填写报告； 药品、器材、菌种不经批准不得擅自外借和转让，更不得私自拿出，应严格执行《菌种保管制度》。 5 ．禁止在实验室内吸烟、进餐、会客、喧哗，实验室内不得带入私人物品，离开 实验室前认真检查水、电、暖气、门窗，对于有毒、有害、易燃、污染、腐蚀的物品和废弃物品应按有关要求执行。 6 ．科、室负责人督促本制度严格执行，根据情况给于奖惩，出现问题立即报告， 造成病原扩散等责任事故者，应视情节直至追究法律责任。 二、仪器配备、管理使用制度 1 ．食品微生物实验室应具备下列仪器：培养箱、高压锅、普通冰箱、低温冰箱、厌氧培养设备、显微镜、离心机、超净台、振荡器、普通天平、千分之一天平、烤箱、冷冻干燥设备、匀质器、恒温水浴箱、菌落计数器、生化培养箱，电位 pH 计、高速离心机。 2 ．实验室所使用的仪器、容器应符合标准要求，保证准确可靠，凡计量器具须经 计量部门检定合格方能使用。 3 ．实验室仪器安放合理，贵重仪器有专人保管，建立仪器档案，并备有操作方法，保养、维修、说明书及使用登记本，做到经常维护、保养和检查，精密仪器不得随意移动，若有损坏需要修理时，不得私自拆动、应写出报告、通知管理人员，经科室负责人同意填报修理申请、送仪器维修部门。
关于病原微生物实验室生物安全管理自查报告
病原微生物实验室生物安全 管理工作自查材料 尊敬的各位领导、专家： 大家好！ 为加强医院病原微生物实验室生物安全管理工作，确保医院平安目标的实现，实验室各项工作的有效有序进行，确保微生物实验室不发生生物安全事件，保障公众健康，维护社会稳定，我院检验科根据湖北省《病原微生物实验室生物安全管理条例》《2015年度全省病原微生物实验室生物安全督导检查工作方案》的相关内容，对医院实验室安全管理工作进行了自查。现总结汇报如下： 一、组织机构与管理制度 医院检验科根据《病原微生物实验室生物安全管理条例》的相关规定进行学习，于2013年8月搬迁之际成立了微生物实验室，建立了生物安全管理制度，并于2014年5月成立生物安全专家委员会及工作领导小组，由院党委书记院长魏华任组长，副院长叶 志伟、李正宇任副组长，委员会明确了职责，建立了工作制度， 详细了规划了生物安全管理的工作细则。检验科在此基础上建立 实验室安保制度，并定期对有关生物安全各项规章制度的运行情 况进行检查，对存在的问题及时进行整改。实验室所从事的实验 活动均严格遵守有关的国家标准和实验室技术规范、操作规程， 并指定专人监督检查实验室技术规范和操作规程的落实情况。同
时，对检查情况进行详细记录，定期召开会议讨论工作中发现的问题，及时纠正。 二、实验室资质和备案情况 医院检验科已于2013年在卫计委进行了了BSL-2实验室备案。检验科目前是HIV检测点，可做HIV的快速检查，筛查实验室的资质已于2015年8月向市疾控中心申报，等待评审验收！PCR实验室（进行乙肝DNA 检测）资质已于2015年10月向湖北省临检中心申报，等待现场评审！ 三、生物安全管理制度的落实 建立实验室生物安全管理体系文件，制定了相关规章制度，并严格执行。非工作人员不得进入实验室工作区域，生物安全员和科主任对实验室生物安全每月进行一次自查自检，及时发现问题，纠正问题。有应急预案，计划年底进行一次应急演练。有完善的个人防护及健康监护制度，建立个人健康档案，定期对实验室人员及医院相关职能科室人员进行生物安全培训，有随时可阅的生物安全手册，规范了血液、体液外溢在台面、地面和其他表面的的处理原则、皮肤刺伤(破损)的处理原 则、离心管发生破裂的处理原则。在实验室的显着位置张贴了实验负责人、实验室工作人员、消防、医院、公安、工程技术人员、水、电气维修部门电话。日常标本在鉴定完毕后进行高压灭菌销毁时，要做到灭菌指示标志明确，达到灭菌效果，才能转运到医疗废物处理中心，并做好销毁登记等内容。同时对检验科的各类仪器作好定期维护校准工作，并在设备使用登记本上作好详细记录。
2020年(生物科技行业)CLSI临床微生物实验室标准解读
（生物科技行业）CLSI临床微生物实验室标准解读
CLSI临床微生物实验室标准解读 CLSI2010更新 CLSI临床微生物实验室标准解读第三辑 2010年CLSI药敏试验的更新 中国医学科学院北京协和医学院杨启文王辉 美国临床和实验室标准化研究所(TheClinicalandLaboratoryStandardsInstitute,CLSI)是壹个国际性、跨学科、非营利的、致力于发展操作标准的教育组织。其抗菌药物敏感性试验小组委员会(SubcommitteeonAntimicrobialSusceptibilitytesting)每年组织该领域专家和药厂代表等对药敏相关文件M100进行壹次修订。目前我国的临床微生物实验室均以CLSI文件作为药敏指导文件进行试验操作和报告，本文将CLSIM100-S20(2010年)的主要更新点总结如下： 壹、主要格式的更新： 下表显示了壹些在M100-S19(2009年)中位于最后的附录在M100-S20(2010年)文件中新的命名、编号和位置。表1.M100-S20的格式更新 (1)修订了“非敏感”的定义：M100-S20中对“非敏感”的定义是由于耐药菌株缺失或稀少因而仅确立了敏感性解释标准。当药物对菌株的MIC高于或抑菌圈直径低于此折点时需报告为非敏感。非敏感且不意味着菌株携带某种耐药机制。有可能MIC高于敏感折点的菌株缺乏耐药机制且且属于野生菌株，只不过其出现于敏感性折点确立后。对于“非敏感”的菌株，菌株鉴定和药敏结果需被再次确认。 (2)对“使用头孢噻吩的折点仅用于预测对其他头孢菌素的敏感性”增加注释：在M100-S20中，头孢噻吩的折点仅可用于预测菌株对口服药物，包括孢羟氨苄，头孢泊肟，头孢氨苄和氯碳头孢的敏感性。旧的数据认为头孢噻吩的结果能够预测某些其他头孢菌素的敏感性可能仍然正确，但目前的数据尚不能支持此论点。 (3)在M100-S20的第26页增加第VII部分来描述筛选试验且总结他们的局限性以及对应的确证试验。该部分总结了 肠杆菌科菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肠球菌和肺炎链球菌的耐药表型初筛试验和对应的确证试验。 (4)在表1和1A的警告框内，M100-S20将头霉素类药物加入脑脊液分离菌株中不能常规报告的抗菌药物列表中。在M100-S19中，口服抗菌药物、第壹代和第二代头孢菌素(除外静脉用头孢呋辛)、克林霉素、大环内酯类、四环素类和氟喹诺酮类被列为脑脊液分离菌株中不能常规报告的抗菌药物，因为这些药物不是脑脊髓感染的选择药物，在M100-S20中，头霉素类药物(如头孢西丁、头孢美唑和头孢替坦)也被纳入此类药物。 三、肠杆菌科菌相关的更新 (1)修订了头孢唑啉、头孢噻肟、头孢他啶、头孢唑肟、头孢曲松和氨曲南的折点，且在折点后增加了对应 的用药方案。
(仅供参考)9203 药品微生物实验室质量管理指导原则
9203药品微生物实验室质量管理指导原则 药品微生物实验室质量管理指导原则用于指导药品微生物检验实验室的质量控制。 药品微生物的检验结果受很多因素的影响，如样品中微生物可能分布不均匀、微生物检验方法的误差较大等。因此，在药品微生物检验中，为保证检验结果的可靠性，必须使用经验证的检测方法并严格按照药品微生物实验室质量管理指导原则要求进行检验。 药品微生物实验室质量管理指导原则包括以下几个方面：人员、培养基、试剂、菌种、环境、设备、样品、检验方法、污染废弃物处理、检测结果质量保证和检测过程质量控制、实验记录、结果的判断和检测报告、文件等。 人员 从事药品微生物试验工作的人员应具备微生物学或相近专业知识的教育背景。 实验人员应依据所在岗位和职责接受相应的培训，在确认他们可以承担某一试验前，他们不能独立从事该项微生物试验。应保证所有人员在上岗前接受胜任工作所必需的设备操作、微生物检验技术等方面的培训，如无菌操作、培养基制备、消毒、灭菌、注平板、菌落计数、菌种的转种、传代和保藏、微生物检查方法和鉴定基本技术等，经考核合格后方可上岗。 实验人员应经过实验室生物安全方面的培训，保证自身安全，防止微生物在实验室内部污染。 实验室应制定所有级别实验人员的继续教育计划，保证知识与技能不断的更新。 检验人员必须熟悉相关检测方法、程序、检测目的和结果评价。微生物实验室的管理者其专业技能和经验水平应与他们的职责范围相符，如：管理技能、实验室安全、试验安排、预算、实验研究、实验结果的评估和数据偏差的调查、技术报告书写等。 实验室应通过参加内部质量控制、能力验证或使用标准菌株等方法客观评估检验人员的能力，必要时对其进行再培训并重新评估。当使用一种非经常使用的方法或技术时，有必要在检测前确认微生物检测人员的操作技能。
常见实验室仪器设备清单!(附实验室图)
一、疾病预防控制中心实验室仪器设备清单 1 气相色谱仪：定性定量分析 2 阿贝折射仪：测透明半透明液体或固体的折射率和平均色散 3 氨气分析仪：测样品中氨的含量 4 测汞仪：测固、体液体样品中汞含量 5 电导率仪：测电解质溶液电导率值 6 二氧化硫测定仪：大气环镜中二氧化硫浓度的自动监测 7 二氧化碳测定仪：大气环镜中二氧化碳浓度的自动监测 8 离子交换纯水器：使用离子交换法制纯水 9 粉层采样器：该采样器适用于煤矿及其它粉层作业环镜中进行粉层采样 10 光电浊度仪：测量浊度 11 光照度计：测定光照强度 12 火焰光度计：监床化验用病理研究 13 激光粉层仪：检测粉层浓度 14 紫外可见分光光度计：测量物质对不同波长单色辐射的吸收程度、定量分析 15 紫外辐射照度计：紫外辐射照度测量 16 自动量程照度计：测定光照强度 17 自动旋光仪：测物质旋光度，分析物质的浓度、纯度、含糖量 18 酶标仪：定性定量 19 冷原子荧光测汞仪：专用测贡仪器，测痕量贡 20 离子计：测离子浓度 21 CO分析仪：测大气环镜中一氧化碳含量 22 双道原子荧光光度计：固、液体中汞、砷、硒、锑、锗、锡含量测定析 23 手持糖量计：测体的含糖量 24 生化分析仪：测定样品的浓度，酶反映速率和酶的活性等数十种生化参数 25 洗板机：与酶标仪配套使用 26 微量可调移液器：移微量液体 27 显微镜：观察微小物质 28 荧光分光光度计：分析和测试各类微生物，氨基酸、蛋白质、核酸及多种监床药物 29 医用净化工作台：提供无尘无菌高洁净工作环镜 30 便携式红外线人析器：测定公共场所中的CO2浓度 31 电子微风仪：适用于工厂企业通风空调，镜污染览测动压平衡自动跟踪等速烟尘采样器的采样 32 放射性污染计量仪：测试放射性污染是否超标 33 热敏电阻（测辐射热计）：用于辐射探测 34 紫外光功力计：测试检测紫外光功率 35 热球式电风速仪：测定室内外或模型的气流速度时，是一种测量低风速的基本仪器 36 红血蛋白仪：检测血红蛋白
微生物实验室技术操作规范
实验室技术操作规范 一、无菌操作要求 食品微生物实验室工作人员，必须有严格的无菌观念，许多试验要求在无菌条件下进行，主要原因：一是防止试验操作中人为污染样品，二是保证工作人员安全，防止检出的致病菌由于操作不当造成个人污染。 1.接种细菌时必须穿工作服、戴工作帽。 2. 进行接种食品样品时，必须穿专用的工作服、帽及拖鞋，应放在无菌室缓冲间，工作前经紫外线消毒后使用。 3. 接种食品样品时，应在进无菌室前用肥皂洗手，然后用75％酒精棉球将手擦干净。 4. 进行接种所用的吸管，平皿及培养基等必须经消毒灭菌，打开包装未使用完的器皿，不能放置后再使用，金属用具应高压灭菌或用95%酒精点燃烧灼三次后使用。 5. 从包装中取出吸管时，吸管尖部不能触及外露部位，使用吸管接种于试管或平皿时，吸管尖不得触及试管或平皿边。 6. 接种样品、转种细菌必须在酒精灯前操作，接种细菌或样品时，吸管从包装中取出后及打开试管塞都要通过火焰消毒。 7. 接种环和针在接种细菌前应经火焰烧灼全部金属丝，必要时还要烧到环和针与杆的连接处，接种结核菌和烈性菌的接种环应在沸水中煮沸5min，再经火焰烧灼。 8. 吸管吸取菌液或样品时，应用相应的橡皮头吸取，不得直接用口吸。 二、无菌间使用要求 1. 无菌间通向外面的窗户应为双层玻璃，并要密封，不得随意打开，并设有与无菌间大小相应的缓冲间及推拉门，另设有0.5-0.7m2的小窗，以备进入无菌间后传递物品。 2. 无菌间内应保持清洁，工作后用2%-3%煤酚皂溶液消毒，擦拭工作台面，不得存放与实验无关的物品。 3. 无菌间使用前后应将门关紧，打开紫外灯，如采用室内悬吊紫外灯消毒时，需30W紫外灯，距离在1.0m处，照射时间不少于30min，使用紫外灯，应注意不得直接在紫外线下操作，以免引起损伤，灯管每隔两周需用酒精棉球轻轻擦拭，除去上面灰尘和油垢，以减少紫外线穿透的影响。 4. 处理和接种食品标本时，进入无菌间操作，不得随意出入，如需要传递物品，可通过小窗传递。 5. 在无菌间内如需要安装空调时，则应有过滤装置。 三、消毒灭菌要求 微生物检测用的玻璃器皿、金属用具及培养基、被污染和接种的培养物等，必须经灭菌后方能使用。 1．灭菌前准备 （1）所有需要灭菌的物品首先应清洗晾干，玻璃器皿如吸管、平皿用纸包装严密，如用金属筒应将上面通气孔打开。 （2）装培养基的三角瓶塞，用纸包好，试管盖好盖，注射器须将管芯抽出，用纱布包好。
检验科微生物室室内质量控制流程
检验科微生物室室内质量控制流程 一、实验室仪器设备的性能维护 微生物室常用仪器设备主要包括：细菌培养箱、细菌鉴定及药敏测试仪、显微镜、高压灭菌器、冰箱、水浴箱等。这些仪器设备的质量维护对于检验结果的质量保证至关重要。性能维护方法及维护频率参照制造商提供的使用手册进行。如使用手册中未详细注明或实验室自身无法完成，由生产厂家协助解决，每年至少一次。 二、培养基的质量控制 要求对培养基进行两方面的质量控制：无菌试验以及已知菌生长试验。无菌试验一般为随机抽样3-5%，在35℃条件下培养48h，每批培养基至少进行一次无菌试验；已知菌生长试验的前提条件是实验室有足够的已知菌储备，其中包括标准菌株(如ATCC或NCTC标准菌株)及经过准确鉴定的临床分离菌。如果条件允许，提倡使用标准菌株。已知菌生长试验应明确预期结果。每批培养基至少进行一次已知菌生长试验。三、细菌染色的质量控制 在临床细菌学检查过程中，革兰染色和抗酸染色使用频率最高。 1．革兰染色IQC要求：利用标准菌株(金黄色葡萄球菌ATCC25923及大肠埃希菌ATCC25922)或其他已知的革兰阳性菌及革兰阴性菌至少每周进行一次质量验证。 2．抗酸染色：利用已知的抗酸杆菌(AFB)阳性涂片每周或在更新炭酸复红染液时至少进行一次质量验证。 四、细菌鉴定或鉴别常用试验的质量控制 细菌鉴定或鉴别试验的IQC就是利用已知菌或标准菌株(如ATCC或NCTC标准菌株)进行鉴定或鉴别试验相关影响因素的质量监控。应用频率较高的试验IQC每周至少一次，频率较低的试验IQC随标本一同进行。五、微生物药物敏感试验的质量控制 临床常用抗微生物药物敏感试验包括一般β-内酰胺酶测试、超广谱β-内酰胺酶(ELBLs)测试、纸片扩散法药敏试验以及定量药敏试验(即MICs测定法)。 1．一般β-内酰胺酶测试的质量控制：至少每周一次。质控菌株可使用临床分离的已知菌株，但最好使用标准菌株，如淋病奈瑟菌ATCC31426(β-内酰胺酶阳性绿脓杆菌ATCC27853)和淋病奈瑟菌ATCC43069(β-内酰胺酶阴性或金黄色葡萄球菌ATCC25923)。 2．ESBLs测试的质量控制：美国临床实验室标准化协会(CLSI：原NCCLS)目前仅提供了肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、大肠埃希菌和奇异变形杆菌ESBLs的测试标准。其测试标准参照最新的CLSI文件。质量控制随临床测试菌株一同进行。 3．纸片扩散法及MIC测定法药敏试验的质量控制：质控试验条件、质控菌株选择及质控允许范围参照最新的CLSI规定。频率为每周至少一次。 4．某些耐药菌检测的质量控制：一些耐药菌株如高水平氨基糖苷类耐药的肠球菌、苯唑西林耐药的金黄色葡萄球菌以及万古霉素耐药的肠球菌等的IQC具体方法、质
微生物实验室要求
微生物检验实验室操作技术要求 第一节实验室管理制度 一、实验室管理制度 1．实验室应制定仪器配备管理、使用制度，药品管理、使用制度，玻璃器皿管理，使用制度，并根据安全制度和环境条件的要求，本室工作人员应严格掌握，认真执行。 2．进入实验室必须穿工作服，进入无菌室换无菌衣、帽、鞋，戴好口罩，非实验室人员不得进入实验室，严格执行安全操作规程。 3．实验室内物品摆放整齐，试剂定期检查并有明晰标签，仪器定期检查、保养、检修, 严禁在冰箱内存放和加工私人食品。 4．各种器材应建立请领消耗记录，贵重仪器有使用记录，破损遗失应填写报告；药品、器材、菌种不经批准不得擅自外借和转让，更不得私自拿出，应严格执行《菌种保管制度》。 5．禁止在实验室内吸烟、进餐、会客、喧哗，实验室内不得带入私人物品，离开实验室前认真检查水、电、暖气、门窗，对于有毒、有害、易燃、污染、腐蚀的物品和废弃物品应按有关要求执行。 6．科、室负责人督促本制度严格执行，根据情况给于奖惩，出现问题立即报告，造成病原扩散等责任事故者，应视情节直至追究法律责任。 二、仪器配备、管理使用制度 1．食品微生物实验室应具备下列仪器：培养箱、高压锅、普通冰箱、低温冰箱、厌氧培养设备、显微镜、离心机、超净台、振荡器、
普通天平、千分之一天平、烤箱、冷冻干燥设备、匀质器、恒温水浴箱、菌落计数器、生化培养箱，电位pH计、高速离心机。 2．实验室所使用的仪器、容器应符合标准要求，保证准确可靠，凡计量器具须经计量部门检定合格方能使用。 3．实验室仪器安放合理，贵重仪器有专人保管，建立仪器档案，并备有操作方法，保养、维修、说明书及使用登记本，做到经常维护、保养和检查，精密仪器不得随意移动，若有损坏需要修理时，不得私自拆动、应写出报告、通知管理人员，经科室负责人同意填报修理申请、送仪器维修部门。 4．各种仪器（冰箱、温箱除外），使用完毕后要立即切断电源，旋钮复原归位，待仔细检查后，方可离去。 5．一切仪器设备未经设备管理人员同意，不得外借，使用后按登记本的内容进行登记。 6．仪器设备应保持清洁，一般应有仪器套罩。 7．使用仪器时，应严格按操作规程进行，对违反操作规程的因管理不善致使仪器械损坏，要追究当事者责任。 三、药品管理、使用制度 1．依据本室检测任务，制定各种药品试剂采购计划，写清品名、单位、数量、纯度、包装规格，出厂日期等，领回后建立帐目，专人管理，每半年做出消耗表，并清点剩余药品。 2．药品试剂陈列整齐，放置有序、避光、防潮、通风干燥，瓶签完整，剧毒药品加锁存放、易燃、挥发、腐蚀品种单独贮存。
微生物实验室常用仪器配置
微生物实验室常用仪器配置 1 超净工作台（已有）微生物的培养都是在特定培养基中进行无菌培养，那么无菌培养必然需要超净工作台提供一个无菌的工作环境 2、培养箱（已有）培养箱有多种类型，它的作用在于为微生物的生长提供一个适宜的环境。生化培养箱只能控制温度，可作为一般细菌的平板培养;霉菌培养箱可以控制温度和湿度，可作为霉菌的培养;CO2培养箱适用于厌氧微生物的培养。 3、天平（已有待完善）天平用于精确称量各类试剂。实验室常用的是电子天平，电子天平按照精度不同有不同的级别。 4、微生物均质器（无）用于从固体样品中提取细菌。用微生物均质器制备微生物检测样本具有样品无污染、无损伤、不升温、不需要灭菌处理，不需洗刷器皿等特点，是微生物实验中使用较为方便的仪器 5、菌落计数器（无）菌落计数仪可协助操作者计数菌落数量。通过放大，拍照，计数等方式准确的获取菌落的数量。有些高性能的菌落计数器还可连接电脑完成自动计数的操作。 微波炉/ 电炉用于溶液的快速加热，微生物固体培养基的加热溶化。 7、高压灭菌锅（已有坏）微生物学所用到的大部分实验物品、试剂、培养基都应严格消毒灭菌。灭菌锅也有不同大小型号，有些是手动的，有些是全自动的。用户需要根据自己的需要选购。 8、移液器（无）液体量器用于精密量取各类液体。常见的液体量器有量筒、移液管、微量取液器、刻度试管、烧杯。 9、低温冰箱（已有）冰箱是实验室保存试剂和样品必不可少的仪器。微生物学实验中用到的试剂有些要求是 4 度保存，有些要求是负20 度保存，实验人员一定要看清试剂的保存条件，放置在恰当的温度下保存。 11、摇床（已有）摇床是实验室常用的一种仪器，在微生物实验操作过程中，液体培养基培养细菌时需要在特定温度下振荡使用。 12、纯水装置 13、生物显微镜（无）由于微生物体积较小，所以在观察时需要借助生物显微镜。生物显微镜用于微生物和微小物品结构，形态等的观察。 16、恒温干燥箱 17、恒温水浴锅（已有------ 其他实验室） 水浴锅是一种控温装置，水浴控温对于样品来说比较快速且接触充分。有些微生物反应需要在37度，42度，56度下水浴进行，所以恒温水浴锅可以提供需要的温度。 （18）酸度计（无） 用于配置试剂时精确测量PH 值，从而保证配置的溶液的精确性。有时也需要利用pH 计测定样品溶液的酸碱度。 （19）离心机（无）用于收集微生物菌体以及其他沉淀物。离心机有冷冻和常温之分。 有些样品由于在常温下不太稳定，需要低温环境，要视样品的种类而定。 20 接种仪器：试管（有）、接种针、牛角勺（无）、药勺、接种环、接种钩，解剖刀、培养皿（无）、镊子、酒精灯、接种锄、玻璃刮刀（无）
检验科微生物实验室菌种
任县医院检验科微生物实验室菌种、毒株管理规定与 流程 1．目的 对本实验室菌种、毒种的申购、保存、保管、领用、处理等各个环节实行有效的监督控制，防止意外事故发生，确保疾病预防与控制检验业务及科研教学工作。 2．适用范围及菌种、毒种专职管理人员 适用于本科微生物实验室菌种、毒株的管理； 菌种、毒种专职管理人员：宋素玲乔伟涛 3．职责 3．1微生物实验室负责菌、毒种的出入库保管、保存及处理等日常管理。 3．2科室指定宋素玲乔伟涛2名菌种、毒种库管理人员承担菌、毒种日常管理。 3．3科室负责人负责一、二类菌、毒种的出入库和向上级索取及对下级发送的审核。 3．4技术管理层批准本实验室一、二类菌、毒种的出入库和向上级索取及对下级发送的审批。 4．工作程序 4．1报送及入库 4．1．1当微生物实验室检出菌、毒株应及时报送市疾病预
防控制中心。 4．1．2新发现的菌、毒种，要做好原始记录，逐级报送进行复核确认，报送时须宋素玲乔伟涛2人参加。 4．1．3一、二类菌、毒种入库前，科室审核，技术管理层批准后入库 4．1．4个人不得擅自保留菌、毒种，必须由科室进行统一编号、登记入库管理 4．1．5菌、毒种入库时，宋素玲乔伟涛2名菌、毒种保管人员须认真做好菌毒种的编号、登记工作。 4．2日常管理 4．2．1保管人员由宋素玲乔伟涛2名检验人员组成。4．2．2菌、毒种入库时，保管人员应及时验收，统一编号，填写《菌、毒种登记表》 4．2．3严禁随意将菌、毒种置于非菌、毒种专用保存场所，应做到三专（专室、专柜、专锁）。 4．2．4菌、毒种库由2名保管人员双锁管理，铁门与锁必须牢固有效，发现损坏须及时报修。未经各科室负责人同意，不得擅自将钥匙委托他人代管。 4．2．5菌、毒种保管人员应定期对库内温度、湿度、通风及冰箱、冰柜等菌、毒种保藏设备运转情况进行检查，并做好记录。 4．2．6菌、毒种保管人员根据菌、毒种的保存期限，及时
微生物实验室常用仪器配置
微生物实验室常用仪器配置 微生物学实验室是生物学领域的一个基本实验室，对于一个完备的微生物学实验室，我们需要配置哪些仪器呢?环凯为您的微生物学实验仪器配置提供如下参考。 1、超净工作台 微生物的培养都是在特定培养基中进行无菌培养，那么无菌培养必然需要超净工作台提供一个无菌的工作环境。 2、培养箱 培养箱有多种类型，它的作用在于为微生物的生长提供一个适宜的环境。生化培养箱只能控制温度，可作为一般细菌的平板培养;霉菌培养箱可以控制温度和湿度，可作为霉菌的培养;CO2培养箱适用于厌氧微生物的培养。 3、天平 天平用于精确称量各类试剂。实验室常用的是电子天平，电子天平按照精度不同有不同的级别。 4、微生物均质器
用于从固体样品中提取细菌。用微生物均质器制备微生物检测样本具有样品无污染、无损伤、不升温、不需要灭菌处理，不需洗刷器皿等特点，是微生物实验中使用较为方便的仪器。 5、菌落计数器 菌落计数仪可协助操作者计数菌落数量。通过放大，拍照，计数等方式准确的获取菌落的数量。有些高性能的菌落计数器还可连接电脑完成自动计数的操作。 6、微波炉/电炉 用于溶液的快速加热，微生物固体培养基的加热溶化。 7、高压灭菌锅 微生物学所用到的大部分实验物品、试剂、培养基都应严格消毒灭菌。灭菌锅也有不同大小型号，有些是手动的，有些是全自动的。用户需要根据自己的需要选购。 8、移液器 液体量器用于精密量取各类液体。常见的液体量器有量筒、移液管、微量取液器、刻度试管、烧杯。 9、低温冰箱 冰箱是实验室保存试剂和样品必不可少的仪器。微生物学实验中用到的试剂有些要求是4度保存，有些要求是负20度保存，实验人员一定要看清试剂的保存条件，放置在恰当的温度下保存。 10、生物安全柜 微生物实验中涉及的试剂和样品微生物有些是有毒的，对于操作人员来说伤害较大。为了防止有害悬浮微粒、气溶胶的扩散，可以利用生物安全柜对操作人员、样品及样品间交叉感染和环境提供安全保护。 11、摇床 摇床是实验室常用的一种仪器，在微生物实验操作过程中，液体培养基培养细菌时需要在特定温度下振荡使用。 12、纯水装置
检验科微生物室sop文件检验科微生物实验室
检验科微生物室sop文件检验科微生物实验室检验科微生物室SOP文件检验科微生物实验室 作业指导书细菌室工作守则文件编号:LAB,SOP,JX001 细菌室工作守则 1.每日工作前用紫外线照射实验室半小时以上。 2.入室前应穿工作服，并做好实验前的各项准备工作。 3.实验室内应保持肃静，不准吸烟、吃东西及用手触摸面部。尽量减少室内活动，以免引起风动，无关人员禁入。 4.非必要物品禁止带入实验室，必要资料和书籍带入后，应远离操作台。 5.做好标本的登记、编号及试验记录。未发出报告前，请勿丢弃标本。 6.标本处理及各项试验应在操作间进行，接种环用完后应立即火焰灭菌，沾菌吸管、玻片等用后应浸泡在消毒液内。 7.实验时手部污染，应立即用过氧乙酸消毒或浸于3%来苏儿溶液中5-10分，再用肥皂洗手并冲洗干净;如误入口内，应立即吐出，并用1:1000高锰酸钾溶液或3%双氧水漱口，根据实际情况服用有关药物。 8.实验过程中，如污染了实验台或地面，应用3%来苏儿覆盖其上半小时，然后清洗;如污染工作服，应立即脱下，高压灭菌。 9.若出现着火情况，应沉着处理，切勿慌张，立即关闭电闸，积极灭火。易燃物品(如酒精、二甲苯、乙醚和丙酮等)必须远离火源，妥善保存。 10.工作结束时检查电器、酒精灯等是否关闭，观察记录培养箱、冰箱温度及工作情况，用浸有消毒液的抹布将操作台擦拭干净，并将试剂、用具等放回原处，清理台面，未污染的废弃物扔进污物桶，有菌废弃物应送高压灭菌后处理。 11.离室前工作人员应将双手用消毒液消毒，并用肥皂和清水洗净。
12.爱护仪器设备，经常清洁，注意防尘和防潮。 作业指导书细菌室消毒隔离措施文件编号:LAB,SOP,JX002 细菌室消毒隔离措施 1.每天工作前用消毒液消毒工作台，上班前、下班后开紫外灯(最少半小时)进行空气消毒。 2.非必要品禁止带入实验室，必要资料和书籍带入后，应远离操作台。 3.使用后的载玻片、盖片、平皿、试管等用消毒液浸泡，经煮沸后清洗或丢弃。 4.试验后的血液标本用消毒液浸泡后煮沸消毒，所有用于试验的反应板、吸头等用消毒液浸泡(至少24小时以上)后清洗或丢弃。 5.所有微生物培养物(细菌、支原体、真菌等培养物)，不管标本阳性或阴性均用消毒液浸泡后，经煮沸消毒，才能清洗或丢弃。 6.取材、最好采用一次性工具，不能采用一次性工具者，每次取材前均应彻底消毒。 7.用于浸泡各种器械如刮菌刀、持物钳、镊子等的消毒液要定期更换。 8.不慎发生临床标本或培养物污染工作台，不要立即用水冲洗，应先用纸巾、布等敷料加上消毒液(如5%石炭酸、3%来苏儿等)消毒30分钟以上，然后再清洗。如污染工作服，应立即脱下，高压灭菌。 9.实验时手部污染，应立即用肥皂洗手并冲洗干净，再外用消毒药水，如误入口内，应立即吐出，并用1:1000高锰酸钾溶液或3%双氧水漱口，必要时根据实际情况服用有关药物。作业指导书微生物实验室安全与防护文件编 号:LAB,SOP,JX003 在工作区内禁止饮食，吸烟和存放食物及使用化妆品。 实验室里应保持整洁，不存放与工作无关的杂物。 工作台每天至少用消毒剂清洁一次，在溢渗传染物后要立即消毒、清洗; 进入无菌室必须穿工作服，戴口罩、帽子。 在各种操作进程中均应尽量避免或减少气溶胶产生。
第11章微生物实验室常用仪器设备及使用
A1/A2型题42．病毒实验中用于浸泡和清洁玻璃器材的清洁浸泡液含有下列哪些化学成分 A．硫酸和重酪酸钾 B．硫酸 C．盐酸 D．醋酸 E．重酪酸钾 【答案】A 77．选定分光光度计测定颜色反应光的波长 680nm A． 580nm B． 560nm C． 450nm D． 200nm E． D 【答案】．选定分光光度计测定细菌浓度，光的波长为108 A．600nm ．530nm B ．430nm C ．330nm D ．230nm E A【答案】 ．选定分光光度计测定蛋白浓度，光的波长为109 A．680nm B．280nm C．260nm D．230nm ．200nm E 【答案】B 110．选定分光光度计测定核酸浓度，光的波长为A．680nm B．280nm 260nmC． ．D230nm ．200nm E C 【答案】．丙烯酰胺凝胶电泳通常采用何种装置111 ．柱状装置 A B．垂直装置 C ．水平装置．多柱装置 D E ．其他装置B【答案】 60．盐析法主要用途 A．蛋白的分离和纯化 B．盐的分离 C．糖的分离 D．核酸的分离和纯化 E．水的净化 【答案】A 72．下列哪种仪器能作微生物化学成分的分析 A．蛋白测序仪 B．DNA扩增仪 C．气相色谱仪 D．酶标仪 E．分光光度计 【答案】C 73．吕氏血清斜面培养基，尿素蛋黄琼脂培养基适用培养何种细菌 ．分离鼠疫杆菌 A ．布鲁司杆菌培养 B ．白喉杆菌培养 C ．肠道菌培养 D ．百日咳杆菌培养 E C 【答案】．哪一种显微镜能够用于病毒的检查74 ．普通光学显微镜 A ．暗视野显微镜 B C．荧光显微镜 D．相位差显微镜 E．电子显微镜【答案】E 75．哪一种培养箱更适合无电地区野外调查使用．直热式培养箱 A ．隔水式培养箱 B ．电
微生物实验室的要求
微生物实验室的基本要求 实验室总体面积应在70平米以上，要求水、电供应充足，畅通，排污设施与安全措施齐备。 一、选址： 1. 实验室应选择在清洁安静的场所，远离生活区，锅炉房与交通要道； 2. 实验室应选择在光线充足，通风良好的场所，要与生产加工车间有一定距离； 3. 实验室应选择在方便取样与检验，距离车间较近的工作场所。 二、结构和布局： 应设置细菌与理化检验兼有的综合实验室，主要包括以下三大部分：细菌实验室、理化实验室、办公室。 1. 办公室 2. 理化分析实验室：（或者和细菌检验操作室合并） ①理化分析室（兼作感观检验室） ②仪器室（兼放细菌室显微镜等少量仪器） 3．细菌实验室： ①细菌检验操作室； ②无菌室； ③培养基制作室； ④洗涮消毒室； 一般布局要求如下： 1. 办公室：办公室是化验人员进行原始记录等各项工作的场所，是与非化验室人员交往较多的场所，因此，应设在整体综合化验室的最外层，只需有桌、椅等简单设施即可。 2. 细菌检验操作室（常规操作）细菌检验操作室是细菌培养与检验主要操作室，主要设施是实验台。 对实验台的要求： a.实验台面积一般不小于2.4×1.3m； b.实验台位置应在实验室中心位置，要有充足光线；也可以做边台。
c.实验台两侧安装小盆与水龙头； d.实验台中间设置试剂架，架上装有日光灯与插座； e.实验台材料要以耐热、耐酸碱为宜； f. 实验室围护结构采用彩钢板材料，表面光滑、耐腐蚀、防水，所有缝隙可靠密封，便于清洁消毒，且防震、防火； g. 墙面、吊顶：彩钢板：钢板厚度0.426，15克覆膜。 3. 无菌室：无菌室是处理样品和接种培养的主要工作间，应与细菌检验操作室紧密相连。为满足无菌室无菌要求，无菌间应满足以下布局： a.入口避开走廊，设在细菌检验操作室内； b.与操作室用两道缓冲间隔开； c.无菌室与缓冲间均装有紫外灯，要求每3平米安装30ｗ紫外灯一盏； d.无菌室内设有工作台（中心与边台皆可），紫外灯距工作台面要小于1.5m； e. 微生物室结构应坚固、严密、防尘、光线明亮，地面应光滑，并应有缓冲间，设双层传递窗传递物件； f.门窗应是不锈钢的； g．室内温度18～26℃，相对湿度为45～65%，室内必须保持整洁； h．墙面、吊顶：彩钢板：钢板厚度0.426，15克覆膜； i. 地面采用PVC材料，防渗漏、无接缝、光洁、防滑。 4. 培养基制作室：培养基室是制作、配制微生物培养所需培养基及检验用试剂的场所，其主要设备应为边台与药品橱。 a.边台上要放置电炉，以满足熔化煮沸培养基时用； b.边台材料要耐高热、耐酸碱； c.药橱分门别类存放一些一般药品及试剂； d.危险、易腐易燃有毒有害药品单独设保险柜存放； e.边台上要放天平，以称取药品用。 5. 洗涮消毒室：洗涮消毒室用以消毒洗涮待用与已用之玻璃器皿，培养基及污物，其面积应大于10平米。 为满足洗涮消毒的功能，洗涮消毒室应设有： a.1-2个洗涮池，洗涮池上下水网要畅通；
检验科微生物室上岗考核试题(有答案)
微生物室上岗、轮岗考核 1.目前实验室保存菌种的最好方法是( ) A.冷冻保存法 B.半固体保存法 C.冷冻真空干燥法 D.普通琼脂斜面保存法 E.干燥保存法 39.双糖铁培养基属于( ) A.基础培养基 B.鉴别培养基 C.营养培养基 D.选择培养基 E.厌氧培养基 3.革兰染色结果判定G一应为( ) A.红色 B.紫色 C.蓝色 D.黄色 E.白色 4.肠毒素型大肠埃希菌( ) A.EIEC B.ETEC C.EPEC D.EHEC E.EAggEC 5.临床上病人留取痰标本后，应( ) A.立即温箱干燥后，送实验室 B.置于4℃生理盐水中保存 C.立即送实验室检测 D.置于增菌液中保存 E.室温过夜 6.下列细菌中血浆凝固酶试验阳性的是( ) A.表皮葡萄球菌 B.溶血葡萄球菌 C.金黄色葡萄球菌 D.腐生葡萄球菌 E.模仿葡萄球菌 7.肺炎链球菌在血平板上生长时，菌落周围常常会出现溶血环，其特征为( ) A.草绿色 B.褐色 C.暗红色 D.砖红色 E.黄色
8.罗氏培养基适用于培养下列哪种细菌( ) A.霍乱弧菌 B.肠道细菌 C.白喉杆菌 D.破伤风梭菌 E.结核杆菌 9.细菌诊断中标本采集和运送的原则包括( ) A.标本必须新鲜，采集后尽快送检 B.在送检过程中，对脑膜炎球菌标本要进行保温 C.在检验容器上要贴好标签 D.尽可能采集病变明显部位的材料 E.以上都是 10.淋病是由下列何种病原体引起的( ) A.梅毒螺旋体 B.淋病奈瑟菌 C.淋病螺旋体 D.淋病杆菌 E.衣原体 11.与革兰染色无关的染料是( ) A.结晶紫 B.亚甲蓝 C.稀释石炭酸复红 D.卢戈碘液 E.95％乙醇 12.哪种创伤最适宜引起破伤风梭菌感染( ) A.深度刺伤或战伤 B.膝肘部大面积擦伤 C.因瘙痒挠破的伤痕 D.被猫抓破的伤口 E.被树枝刮破表皮 13.下列描述，哪项不正确( ) A.消毒是指杀死物体上所有微生物的方法 B.灭菌是指杀灭物体上所有微生物的方法 C.防腐是指防止或抑制细菌生长繁殖的方法 D.无菌为不含活菌的意思 E.消毒不一定能杀死含芽胞的细菌和非病原微生物 14.与其他肺部感染病原菌相比较，铜绿假单胞菌的毒力特点是( ) A.产生外毒素 B.具有内毒素 C.产生溶血素 D.产生绿脓素 E.具有菌毛 15.MIC是( )