酶联免疫检测技术的应用
酶联免疫检测试剂盒的原理和应用(广州培训)
袋重新密封；标准物质和无色的发色剂对光敏感，因此要避免直接暴露 在光线下。 9、试剂变质的迹象显色液若有任何颜色表明变质，应当弃之。0标准的 吸光度值小于个单位（OD450nm<0.5 ）时，表示试剂可能变质。
二、磺胺类药物等 ELISA检测方法 的介绍与注意事项
1、磺胺类药物ELISA试剂盒 2、氟喹诺酮类药物ELISA试剂盒 3、莱克多巴胺ELISA试剂盒 4、克仑特罗ELISA试剂盒 5、样本前处理与酶标分析注意事项
残留限量要求
磺胺类药物：在肌肉、肝脏样品中总量最高残留限量为100 g/kg 恩诺沙星、环丙沙星：在肌肉样品中最高残留限量为100 g/kg 莱克多巴胺：在猪肉样品中为不得检出。 克仑特罗：在猪肉样品中中为不得检出。
------农业部第235号文件
1、磺胺类药物试剂盒
试剂盒种类：磺胺三合一（SM2,SDM,SM1）、磺胺七合一(SMZ,SDZ,SMM,ST等)、 磺胺喹恶啉
的洗板顺序操作是ELISA测定程序中的要点。在洗板过程中如果出现板孔干燥 的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板排干后应立即 进行下一步操作。
5、注意事项
6、反应终止液为2M硫酸，避免接触皮肤。 7、不要使用过了有效日期的试剂盒，稀释或搀杂使用会引起灵敏度、
OD值的变化。不要交换使用不同批号的盒中试剂。 8、储存条件保存试剂盒于2-8℃，不要冷冻；将不用的微孔板放进自封
酶联免疫法国内外的技术发展
酶联免疫法国内外的技术发展酶联免疫法是一种常用的生物技术方法，被广泛应用于医学诊断、生物学研究和药物开发等领域。
本文将对酶联免疫法的国内外技术发展进行介绍和分析。
一、酶联免疫法的基本原理酶联免疫法是一种利用酶和抗体相互作用的免疫学方法。
其基本原理是将待测物与标记有酶的抗体或抗原结合，形成特异性的抗原-抗体复合物。
通过酶的催化作用，可以将待测物定量转化为颜色、荧光或发光等信号，从而实现对待测物的检测和定量。
二、国内酶联免疫法技术发展在国内，酶联免疫法的技术发展取得了长足进步。
首先是检测方法的改进。
近年来，随着技术的发展，新的检测方法不断涌现，如发展了高灵敏度的酶标仪和多光子显微镜等设备。
这些新方法的应用，提高了检测的灵敏度和准确性。
其次是标记物的改进。
传统的酶联免疫法常用酶标记物是辣根过氧化物酶（HRP）和碱性磷酸酶（AP），而近年来，越来越多的新型标记物被引入，如金纳米颗粒、荧光染料和荧光蛋白等。
这些新型标记物不仅具有更好的稳定性和灵敏度，还可以实现多重检测。
此外，还有一些新颖的酶联免疫法技术被开发出来，如电化学酶联免疫法和微流控酶联免疫法等。
三、国外酶联免疫法技术发展国外对酶联免疫法的研究和应用也非常活跃。
一方面，国外在酶联免疫法的基础上进行了许多改进，提高了其灵敏度和准确性。
例如，引入了放射性同位素标记物，使得检测的灵敏度大幅提高。
另一方面，国外还开发了一些新的酶联免疫法技术，如酶放大技术和磁性颗粒酶联免疫法。
这些新技术不仅可以提高检测的灵敏度和速度，还可以实现高通量和自动化。
四、酶联免疫法的应用领域酶联免疫法在医学诊断、生物学研究和药物开发等领域有着广泛的应用。
在医学诊断中，酶联免疫法可以用于检测各种疾病标志物，如肿瘤标志物、感染性病原体和自身免疫性疾病相关的抗体等。
在生物学研究中，酶联免疫法可以用于研究蛋白质相互作用、细胞信号传导和基因表达调控等。
在药物开发中，酶联免疫法可以用于筛选药物靶点和评估药物的效力。
酶联免疫吸附技术的原理及应用
酶联免疫吸附技术的原理及应用引言酶联免疫吸附技术是一种常用的免疫学实验方法，通过标记酶的抗体来检测特定的抗原。
它具有高灵敏度、高特异性的优点，在生物医学研究、临床诊断和药物开发等领域得到广泛应用。
本文将详细介绍酶联免疫吸附技术的原理和应用。
原理酶联免疫吸附技术是基于免疫反应的原理进行设计的。
主要原理包括免疫反应、酶标记和酶促反应三个方面。
1.免疫反应–酶联免疫吸附技术是基于抗原-抗体反应的原理，特异性抗原与其对应的抗体结合形成免疫复合物。
–免疫反应的特异性保证了酶联免疫吸附技术能够准确检测目标抗原。
2.酶标记–在酶联免疫吸附技术中，为了使免疫复合物形成可检测的信号，常用酶对抗体进行标记。
–常用的酶标记物包括辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶（AP）等。
这些酶具有较高的特异性和灵敏度。
3.酶促反应–酶联免疫吸附技术利用标记酶的催化作用，将底物转化为可见的色素或荧光信号。
–常用的底物包括TMB（3,3’,5,5’-四甲基苯基亚硝基态苯胺）、ABTS（2,2’-氨基二乙基三甲基苯并噻唑磺酸盐）等。
应用酶联免疫吸附技术在生物医学研究、临床诊断和药物开发等领域有着广泛的应用。
1.生物医学研究–酶联免疫吸附技术可以用于研究抗原与抗体的相互作用，进而研究疾病的发生机制。
–可以检测细胞因子、生长因子、蛋白质等生物分子的含量和表达水平。
2.临床诊断–酶联免疫吸附技术在临床诊断中常用于检测病原微生物、肿瘤标志物等。
–可以用于快速、准确地诊断疾病，对临床诊断起到重要作用。
3.药物开发–酶联免疫吸附技术在药物开发中可以用于筛选药物候选化合物的特异性和亲和性。
–可以评估药物的药效和毒性，加快药物研发的进程。
总结酶联免疫吸附技术是一种重要的实验方法，其原理简单、灵敏度高，广泛应用于生物医学研究、临床诊断和药物开发等领域。
随着科学技术的不断进步，酶联免疫吸附技术将继续发挥重要作用，为人类的健康和医学进步做出贡献。
酶联免疫吸附测定法ELISA在抗生素残留检测中的应用
加强国际合作与交流
加强与其他国家和地区的合作与交流，共同推进ELISA技术在抗生素 残留检测领域的发展和应用。
07 参考文献
参考文献
1 2
参考文献1
介绍了ELISA的基本原理和在抗生素残留检测中 的应用，强调了其高灵敏度和特异性。
抗生素残留的来源
畜牧业和农业中广泛使用抗生素，导致动物产品如肉类、蛋类和奶制品中存在 抗生素残留。
ELISA技术简介
01
酶联免疫吸附测定法（ELISA）
是一种基于抗原-抗体反应的检测方法，通过酶标记技术将免疫反应与
化学信号放大相结合，实现对目标物质的灵敏检测。
02
ELISA技术的优点
高灵敏度、特异性、操作简便、适合批量检测等。
03 ELISA在抗生素残留检测 中的应用
抗生素残留检测的重要性
保障食品安全
抗生素残留超标可能对人体健康造成危害， 如产生过敏反应、耐药性等，因此对抗生素 残留进行检测是保障食品安全的重要环节。
国际贸易标准
随着国际贸易的发展，各国对抗生素残留 的检测标准日益严格，符合国际标准的检 测方法对于出口农产品的企业至关重要。
酶联免疫吸附测定法（ELISA）在 抗生素残留检测中的应用
目录
• 引言 • ELISA技术原理 • ELISA在抗生素残留检测中的应用 • ELISA技术的实验流程 • 实验结果和数据分析 • 结论 • 参考文献
01 引言
抗生素残留问题
抗生素残留对人类健康的潜在威胁
长期摄入含有抗生素残留的食物可能增加人体内耐药菌株的形成，降低抗生素 在治疗疾病时的有效性。
03
ELISA技术的基本原理
酶联免疫吸附的原理和应用
酶联免疫吸附的原理和应用引言酶联免疫吸附（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA）是一种常用的实验技术，被广泛应用于生物医学研究、临床诊断和药物研发领域。
本文将介绍酶联免疫吸附的原理和应用。
原理酶联免疫吸附的原理基于酶标记抗体的特性以及抗原-抗体相互作用的特点。
其基本步骤如下：1.抗体的固定：将抗体固定在固相载体上，例如微孔板表面。
这可以通过物理吸附、共价结合或磁珠结合等方式实现。
2.抗原的结合：待测物中的抗原与固相上固定的抗体结合，形成抗原-抗体复合物。
这个步骤通常需要一定的时间和温度条件。
3.酶标记抗体的结合：将酶标记的二抗或二抗与固相上的抗原结合。
4.底物的添加：加入合适的底物，例如底物是酶底物，它在酶的作用下会发生可观测的染色反应。
染色反应的强度与待测物中抗原的浓度成正比。
5.信号检测：使用合适的装置（如酶标仪）测量染色反应的强度。
根据反应的强度来定量或定性待测物中的抗原。
应用酶联免疫吸附在生物医学研究、临床诊断和药物研发领域具有广泛的应用，包括以下几个方面：生物医学研究•蛋白质定量：酶联免疫吸附用于测定蛋白质的浓度，比如检测新药的剂量效应。
•蛋白质相互作用研究：通过将一种蛋白质固定在微孔板上，用来检测其他蛋白质与其之间的相互作用。
•病原体检测：酶联免疫吸附可以用来检测病原体，如细菌、病毒等。
•细胞因子测定：测定细胞因子的浓度，用于研究细胞内的信号传导等生理过程。
临床诊断•疾病标志物检测：酶联免疫吸附广泛应用于检测疾病标志物，例如癌症标志物、心肌损伤标志物等。
•传染病检测：用于检测传染性疾病的诊断，如艾滋病、流感等。
•自身免疫性疾病诊断：酶联免疫吸附可用于自身免疫性疾病的早期诊断，如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等。
药物研发•药物代谢酶研究：酶联免疫吸附可用于药物代谢酶的研究，如肝脏中的细胞色素P450等酶。
•药物浓度测定：通过酶联免疫吸附可测定药物在体内的浓度，用于药物吸收、分布、代谢和排泄等研究。
酶联免疫吸附技术在饲料及食品安全检测中的应用
经验交流空酶联免疫吸附技术在饲料及食品安全检测中的应用史艳艳(天津市农业生态环境监测与农产品质量检测中心300402)摘要：酶联免疫吸附技术是一种应用于饲料和食品安全检测的快速检测技术，可对农兽药残留、违禁药物使用、有害微生物、生物毒素和转基因食品安全等进行定量和定性检测，由于酶联免疫吸附技术既可以检测样本中的抗原，也可以检测抗体，因此，选择性高，检测结果的特异性和灵敏度也较高，其在饲料和食品安全检测应用前景广阔。
本文从技术原理、试验类型和技术优缺点对酶联免疫吸附技术进行系统概述，介绍酶联免疫吸附技术在饲料和食品安全检测中的应用，以期更好地普及和推广酶联免疫吸附技术应用。
关键词：ELISA；饲料安全；食品安全；应用酶联免疫吸附技术(Enzyme Linked Immunosorbent Assay, ELISA)是基于抗原抗体反应的一种新型、快速的免疫测定技术。
由于ELISA检测技术的灵敏度高、特异性强、选择性好、实用性强，且不需要大型仪器设备，对工作人员的专业技能要求不高，被广泛应用于分析化学、生物药学、临床医学和食品安全等领域的检测。
ELISA检测技术不仅可以对饲料和食品中的药物残留、有害微生物和生物毒素等物质进行定性和定量分析，还能应用于转基因食品的安全检查，为饲料及食品安全提供参考依据。
1酶联免疫吸附技术概述1.1技术原理ELISA是基于抗原-抗体的特异性结合反应建立起来的一种快速检测技术，即首先通过固相状态的载体吸附已知的抗原或抗体，待测样本中对应的抗体或抗原与之结合形成特异性的抗原抗体复合物，通过洗涤的方法区分固相载体上的抗原抗体复合物和其他物质，再加入酶标记的抗原或抗体，也会岀现抗原和抗体特异性结合反应结合在固相载体上，加入酶反应的底物后，底物由酶催化为带颜色的产物(颜色变化为定性检测)，通过吸光度值计算待测样本的抗原(或抗体)量。
由于产物的量与标本中受检物质的量直接相关，ELISA还可以进行定量分析。
酶联免疫吸附测定法在食品微生物快速检测中的应用
酶联免疫吸附测定法在食品微生物快速检测中的应用摘要对酶联免疫吸附测定法( ELISA) 在食品微生物检测中的应用进行了分类论述，主要包括双抗体夹心法、间接法测抗体和竞争法在食品微生物检测中的应用，对其应用前景作出了展望。
关键字微生物；快速检测；ELISA食品的安全性是食品必需具备的基本要素，然而在食品科技高度发展的今天，在世界各地仍不断发生各种各样的食品安全事故，食品安全问题再度成为人们关注的热点。
近几年，中国疾病预防控制中心营养与食品安全所对全国部分省市的生肉、熟肉、乳和乳制品、水产品、蔬菜中的致病菌污染状况进行了连续的动态监测，结果表明，微生物源性食物中毒占居首位，高达39.62%[1]。
随着食品工业的发展以及对食品安全的重视，传统分析方法已经远不能满足食品检测的需要，迫切需要灵敏度更高、特异性更强、简便快捷的食品安全检测技术和方法。
因此，近年来世界各国的许多机构和学者都致力于快速检测技术和方法的研究，改进和开发了一些快速的检测技术和方法。
快速检测及其自动化则是通过综合引用微生物学、化学、生物化学、生物物理学、免疫学以及血清学试验技术对微生物进行分离、检测、鉴定和计数。
近年来，常用的微生物快速检测技术主要有6大类：一、载体法：包括快速测试片法、螺旋板系统法和滤膜法；二、代谢学技术：包括电阻抗法、微热量计技术和放射量技术；三、免疫学技术：包括免疫荧光技术( IFT)、酶联免疫吸附技术( EL ISA)和酶联荧光免疫吸附技术(V IDAS)；四、LAMP方法；五、分子生物检测方法：包括分子杂交、PCR和基因芯片；六、分析化学技术：包括高效液相色谱(HPLC) 、气相色谱( GC) 、气相色谱-质谱联用( GC-MS) 、液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS) 等。
其中酶联免疫吸附测定(ELISA)以其简便、快速、灵敏、成本低、检测谱广等特点在食源性致病菌检测方面的应用也越来越受到人们的青睐。
1．酶联免疫吸附测定法的原理和特点酶联免疫吸附测定法(Enzyme- linked Immunosorbent Assay，简称ELISA)是将抗原、抗体的免疫反应和酶的高效催化反应有机结合起来的一种综合性技术。
酶联免疫法
酶联免疫法酶联免疫法是一种灵敏度非常高的检测技术，它可以用来检测微量物质，广泛应用于各种生物学研究中。
酶联免疫法的这种特殊特性，使它在医学检验、环境污染监测、食品安全检测以及其他科学研究中得到了广泛的应用。
一、酶联免疫法简介酶联免疫法，又称酶连接免疫吸附测定（ELISA），是一种常见的生物分子检测技术，可以检测出极低的抗原浓度。
它是一种免疫学技术，它通过特异性抗体和酶的特殊反应，以达到非常灵敏的检测效果。
酶联免疫法的基本原理是：首先，将要检测的样品（抗原或抗体）和特异性抗体在反应板上发生反应，然后，将一种酶修饰的抗原特异性抗体溶解液加入，反应结束后，再加入酶的底物溶液，底物溶液中的特异性酶会与反应板上的抗原特异性抗体结合，形成抗原-酶复合物，最后用测定仪测定抗原-酶复合物的光谱，从而得到检测结果。
二、酶联免疫法的应用1、医学检验酶联免疫法在医学检验方面，可以用于检测各种病毒、细菌及其抗原，如肝炎、梅毒、登革热等；也可以用于检测抗体，如抗体检测、免疫球蛋白检测等；还可以用于检测放射性标记的抗原或抗体，用于免疫学研究与临床诊断。
2、食品安全检测酶联免疫法可以用于检测各种污染物，如残留农药、重金属、疾病菌等，以确保食品安全。
3、环境污染监测酶联免疫法可以用于环境污染监测，可以检测出游离态的污染物，如氨、氯、硫酸盐等，以及致病菌、抗药性菌等，为控制环境污染提供重要的参考数据。
4、其他科学研究除了上述应用外，酶联免疫法还可以用于其他科学研究，如生物化学、分子生物学、遗传学、细胞生物学等，可以用来研究蛋白质、核酸、糖蛋白等生物物质。
三、酶联免疫法的优缺点1、优点a) 酶联免疫法的灵敏度很高，可以检测出极低的抗原浓度；b) 反应快速，结果准确；c) 操作简单，容易稳定；d) 可以同时检测多个抗原或抗体，效率高；e) 反应条件可以调整，可以根据不同的样品进行调整。
2、缺点a) 需要一定的抗体，而抗体的生产时间较长；b) 对抗原的特异性较弱；c) 稀释抗体可能会引起误差；d) 检测时，可能会受到干扰物的影响。
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酶联免疫检测技术的应用真菌毒素的检测：黄曲霉毒素 B 1 、M 1 以及T-2 毒素，脱氧雪腐镰刀菌烯醇(呕吐毒素DON )，二乙酰草镰刀菌烯醇(DAS )，玉米赤霉烯酮，赫曲霉毒素A ( OA )。
农药的检测：主要有除草剂与杀虫剂两大类，例如杀暝松( FN )、甲氟磷酸异已酶( SOMAN )、草不绿( Alachor)、西维因( Carbaryl )、多菌灵及克菌丹( Captan )等。
其他类的检测：盐酸克伦特罗，河豚毒素，植物毒素如罌粟硷、吗啡、藻类毒素，苯并( a)芘，抗生素，激素类以及一些营养物质和食品添加剂如麸蛋白( Gliaclin )，酱油蛋白( Soy protein )，花生蛋白(Peanut protein )，牛乳清蛋白( Borine Whey Protein )等。
随着食品工业的发展，对分析检测的要求越来越高，从而也使ELISA 方法将更趋完善。
一方面为提高ELISA方法的灵敏度和特异性，制备单克隆抗体的技术的发展，将和ELISA 法互相结合，从而使食品卫生分析达到DNA分子结构水平，促使食品工业的健康发展。
1 放射免疫分析(RIA)放射免疫法(Radioimmunoassay,RIA)优点是特异性强、灵敏度高、精确、简便易行。
它包括以标记抗原(Antigen,Ag)为特点的放射免疫分析(Radioimmunoassay,RIA)和以标记抗体(Antibody,Ab)为特点的免疫放射分析(Immunoradiometric assay,IRMA)。
前者以液相竞争结合法居多，既测大分子抗原又测小分子抗原；后者以固相法测大分子抗原为主。
最早建立的农药免疫法中，RIA占了很大比重，建立了狄氏剂、艾氏剂、2,4-D 和2,4，5-T、对硫磷和百草枯等农药的放射免疫法。
但由于进行RIA需使用昂贵的计数器，存在放射性防护和废物处理等问题，其应用受到较大限制。
1982年后发表的农药免疫分析文章，主要是酶免疫分析法。
2 酶免疫法(EIA)酶免疫法(Enzyme Immunoassay,EIA)是将抗原、抗体的特异性免疫反应和酶的高效催化作用有机结合起来的一种免疫分析方法。
酶免疫法的检测原理与放射免疫法类似，通过测定结合于固相的酶的活力来测定被测定物的量。
用作标记物的酶有辣根过氧化物酶(HorseradishPeroxidase,HRP)和碱性磷酸酶(AlkalinePhosphatase)。
酶标试剂制备容易、稳定、价廉。
酶免疫分析的灵敏度接近放射免疫技术，而可借助于简单的仪器作定量测定，是目前农药监测中应用最广泛的免疫分析技术。
EIA法包括酶联免疫吸附分析法(Enzyme-Linked ImmunosorbentAssay,ELISA)、酶免疫试验法(Enzyme-monitored Immunotest ,EMIT)、竞争结合酶免疫分析法(Competitive Binding Enzyme Immunosorbent Assay,EIA)和免疫酶分析法(Immunoenzymometric Assay,IEMA)。
其中基于竞争吸附的ELISA已成为农药监测中的首选方法。
3 荧光免疫分析(FIA)本世纪40年代，Coons采用荧光素标记抗体检测可溶性肺炎球菌多糖抗原，首次创建了荧光抗体检测技术。
荧光免疫法具有专一性强、灵敏度高、标记物不易失活、价格低廉、无放射性污染等优点。
至今，FIA已广泛应用于微量、超微量物质分析测定。
FIA常用的荧光素有异硫氰酸酯(Fluoresceineisothiocyanate , FITC)和罗丹明(BLissamine Rhodamine B200,RB200)等。
将荧光免疫与光纤传感器结合形成的荧光免疫传感器是近年来荧光免疫法研究十分活跃的领域。
荧光免疫传感器是将抗体(抗原)固定在适当基底上，实现生化荧光信号向光电信号的转变，以对待测物质进行定量检测。
测定环境中农药残留的分子识别元件可以是AchE[10] 抗体[11] 和碱性磷酸酶等。
Rogers等[12] 将FITC标记的AchE固定在石英纤维上以检测酶的活性。
乙酰胆碱水解时产生的H +猝灭纤维表面的荧光信号，荧光强度减弱。
有机磷农药抑制AchE的活性，从而降低荧光猝灭能力，可检测溶液中10 -8 mol . L -1的AChE抑制剂，其响应时间小于1min。
Anis等将有机农药对硫磷抗体和FITC标记的Anti-IgGAb蛋白固定在石英纤维上制得荧光免疫传感器。
测定对硫磷的检测限为10 -9 mol . L -1。
Schulman利用竞争性荧光能量转移法原理，用FITC标记的多克隆氯乙异丙嗪(atrazine)抗体，用四甲基罗丹明标记农药氯乙异丙嗪，研制出光纤免疫传感器，通过增加能量转移的量改善了灵敏度。
Northrup[13] 利用光纤免疫传感器检测农药中拟除虫菊酯(pyrethroide)。
Bier等[14]以荧光和损耗波作用为基础，研究了光纤传感器对三嗪衍生物terbutryn的灵敏度和再生性，检测限0.1ng/mL，可稳定使用8周以上并可循环测定500次。
Robert等[15]应用损耗波光纤为基础的免疫传感器还可直接检测地面水中ng/mL水平的蓖麻毒素。
这类传感器有很高的特异性，然而对分子量小的有机磷农药，特别是有机磷神经性毒剂，较难诱导出高质量的抗体，加之生物材料在固定化过程中的可能失活等原因使其应用尚不及EIA普遍。
目前国内尚无此类工作报道。
荧光免疫分析中的其它发展还有时间分辨荧光多组份免疫分析法的建立及时间分辨荧光免疫分析中荧光效应的研究。
一、检测的原理借助抗原和抗体在体外特异结合后出现的各种现象，对样品中的抗原或抗体进行定性、定量、定位的检测。
1．抗原与抗体的亲和力(affinity)抗原抗体的结合就像酶与底物的结合，激素与其受体的结合一样不是化学的反应，而是非共价键的可逆的结合。
抗原决定簇和抗体分子可变区互补构型，造成两分子间有较强的亲和力。
空间构型互补程度不同，抗原和抗体分子之间结合力强弱也不同。
互补程度高，则亲和力强。
此外，反应温度、酸碱度和离子浓度对抗原和抗体分子上各基因的解离性和电荷特性也有重要的影响，抗体与抗原决定簇之间的结合力大小可用亲合力来表示。
高亲合力的抗体与抗原的结合力强，即使抗原浓度很低时也有较多的抗体结合抗原形成免疫复合物。
2．抗原或抗体外检测原理根据抗原抗体结合形成免疫复合物的性状与活性特点，对标本中的抗原或抗体进行定性、定位或定量的检测。
定性和定位检测比较简单，即用已知的抗体和待检样品混合，经过一段时间，若有免疫复合物形成的现象发生，就说明待检样品中有相应的抗原存在。
若无预期的现象发生，则说明样品中无相应的抗原存在。
同理也可用已知的抗原检测样品中是否有相应抗体。
对抗原或抗体进行定量检测时，以反应中加入抗原和抗体的浓度与形成免疫复物的浓度呈函数关系。
(1)根据免疫复合物产生的多少来推算样品中抗原(或抗体)的含量：在一定的反应条件下，加入的已知抗体(或抗原)的浓度一定，反应产生的免疫复合物多少与待检样品中含有相应抗原(或抗体)量成正比。
也就是抗体浓度一定时，免疫复合物越多则样品中的抗原量也越多。
可用实验性标准曲线推算出样品中抗原(或抗体)的含量。
如免疫单向扩散试验、免疫比浊试验和酶联免疫检测等都属于这类方法。
(2)抗原或抗体效价滴定的原理：当抗原抗体复合物形成多少不能反应抗原抗体反应强弱时，就不能以检测反应强度来对抗原或抗体进行定量。
在实际工作中，把浓度低的反应成分(抗原或抗体)的浓度固定，把浓度高的另一种反应成分作一系列稀释。
例如用人血清作抗原免疫3只家兔，比较3只家兔产生抗体的多少，即滴定3只兔血清抗体效价，可用双向琼脂扩散法来滴定，例如将抗体浓度固定，将抗原作不同的稀释度，分别将抗原或抗体滴入琼脂的相应小孔中，观察免疫兔血清与不同稀释度的抗原出现明显沉淀浅的抗原稀释度(如甲兔的抗体效价为1/2000，而丙免的是1/8000则可比较出后者比前者产生抗体的效价要高)。
也就是表示效价的稀释度越高，样品中所含待检成分越多。
因人血清(抗原)和抗体(免疫兔血清)相比，浓度高，故应稀释抗原。
二、抗原或抗体检测的实用意义1．抗体检测的意义检测抗体可用于评价人和动物免疫功能的指标。
抗体用于临床治疗或实验研究时也需做纯度分析和定量测定。
临床上检测病人的抗病原生物的抗体、抗过敏原的抗体、抗HLA抗原的抗体、血型抗体及各种自身抗体，对有关疾病的诊断有重要意义。
2．抗原检测的意义可做为抗原进行检测的物质可分为以下四类：( 1)各种微生物及其大分子产物：用于传染病诊断、微生物的分类及鉴定以及对菌苗、疫苗的研究。
(2)生物体内各种大分子物质：包括各种血清蛋白(如各类免疫球蛋白、补体的各种成分)、可溶性血型物质、多肽类激素、细胞因子及癌胚抗原等均可做为抗原进行检测。
在对这些成分的生物学作用的研究以及各种疾病的诊断有重要意义。
(3)人和动物细胞的表面分子：包括细胞表面各种分化抗原(如CD抗原)、同种异型抗原(血型抗原或MHC抗原)、病毒相关抗原和肿瘤相关性情抗原等。
检测这些抗原对各种细胞的分类、分化过程及功能研究、对各种与免疫有关的疾病的诊断及发病机制的研究，均有重要意义。
(4)各种半抗原物质：某些药物、激素和炎症介质等属于小分子的半抗原，可以分别将它们偶联到大分子的载体上，组成人工结合的完全抗原。
用其免疫动物，制备出各种半抗原的抗体，应用于各种半抗原物质的检测，例如对某些病人在服用药物后进行血中药物浓度的监测。
对运动员进行服用违禁药品的检测，都是应用半抗原检测的方法。
三、抗原或抗体检测的方法由于各种检测方法中所用的抗原性状不同，出现结果的现象也不同。
最广泛应用方法有下述几种：(一)沉淀反应可溶性抗原与抗体结合，在两者比例合适时，可形成较大的不溶性免疫复合物。
在反应体系中出现不透明的沉淀物，这种抗原抗体反应称为沉淀反应(precipitation neaction)。
1．环状沉淀试验先将含抗体的未稀释的免疫血清加到直径小于0.5cm 的小试管底部。
将稀释的含有可溶性抗原的材料重叠于上，让抗原与抗体在两液体的界面相遇，形成白色免疫复合物沉淀环，故名为环状沉淀试验(ring precipitationtest),此法简便易行，需用材料较多是其缺点。
2．单向免疫扩散试验单向免疫扩散试验(singleimmunodiffusion)是在凝胶中进行的沉淀反应。
将抗体混入加热溶解的琼脂中，倾注于玻片上，制成含有抗体的琼脂板，在适当位置打孔，将抗原材料加入琼脂板的小孔内，让抗原从小孔向四周的琼脂中扩散，与琼脂中的抗体相遇形成免疫复合物。