酶联免疫技术检测
酶联免疫检测方法
酶联免疫检测方法
酶联免疫检测是一种常用的生物技术方法，它结合了酶标记和免疫反
应的原理，可用于检测生物样品中特定分子的含量，如蛋白质、抗体、激
素等。
具体步骤如下：
1.准备样品：从生物样品中提取目标分子，例如血液、尿液、细胞等。
2.免疫反应：将一定浓度的目标分子加入到反应孔中，并加入与目标
分子特异性的抗体，使两者发生免疫反应。
3.洗涤：对反应孔进行洗涤，以去除未与抗体结合的杂质以及剩余的
抗体。
4.添加荧光标记的二抗：向反应孔中加入荧光标记的二抗，使其与已
结合的抗体形成复合物。
5.洗涤：对反应孔进行再次洗涤，以去除未结合的荧光标记的二抗。
6.酶标记：向反应孔中加入用酶标记的物质（如酶标记的抗体），使
其与已结合的荧光标记的二抗形成复合物。
7.洗涤：对反应孔进行最后一次洗涤，以去除未结合的酶标记化合物。
8.反应染色：向反应孔中加入染色物质，使其与酶标记化合物发生颜
色反应，形成分析结果。
最终，检测结果可以通过测量反应孔中染色物质的光密度或荧光强度
来评估样品中目标分子的浓度。
酶联免疫检测方法具有高灵敏度、高特异
性和高通量等优点，广泛应用于医学、生物工程、食品安全等领域。
酶联免疫检测法
酶联免疫检测法一、概述酶联免疫检测法是一种常见的生物分子检测方法，它利用酶作为标记物来检测目标分子，具有高灵敏度、高特异性、易操作等优点，广泛应用于医学、生物学、化学等领域。
二、原理酶联免疫检测法基于抗原-抗体反应原理，包括直接酶联免疫吸附试验（ELISA）、间接ELISA、竞争ELISA和间接竞争ELISA等多种类型。
其中，最常见的是直接和间接ELISA。
1. 直接ELISA直接ELISA是将已知抗体固定在微孔板上，并加入待检样本中含有目标抗原的溶液，经过一定条件下的反应后，再加入与目标抗原结合的酶标记二抗，在适当条件下进行染色反应并测定吸光度值。
其优点是操作简单快捷，但缺点是灵敏度略低。
2. 间接ELISA间接ELISA是将已知抗体固定在微孔板上，并加入待检样本中含有目标抗原的溶液，在适当条件下进行反应后加入与目标抗原结合的一抗，再加入与一抗结合的酶标记二抗，在适当条件下进行染色反应并测定吸光度值。
其优点是灵敏度高，但操作稍复杂。
三、步骤酶联免疫检测法的基本步骤如下：1. 预处理样本：根据不同的样本类型和检测要求，可以进行不同的处理方法，如离心、洗涤、稀释等。
2. 固定抗原或抗体：将已知抗体或抗原固定在微孔板上。
3. 加入待检样本：加入含有目标分子的待检样本。
4. 洗涤：将未结合的物质洗去。
5. 加入酶标记二抗或一抗：根据实验设计需要选择适当的酶标记二抗或一抗，并加入微孔板中与目标分子结合。
6. 洗涤：将未结合的物质洗去。
7. 加入底物：加入适当底物后，在适当条件下进行染色反应。
8. 停止反应并测定吸光度值：在反应停止后，使用光谱仪等设备测定吸光度值，并根据标准曲线计算待检样本中目标分子的浓度。
四、应用酶联免疫检测法在医学、生物学、化学等领域有广泛的应用，常见的应用包括：1. 临床诊断：如肝炎病毒、艾滋病毒等感染的诊断。
2. 药物检测：如抗生素、激素等药物残留的检测。
3. 食品安全：如农药残留、食品添加剂等的检测。
酶联免疫吸附试验结果
酶联免疫吸附试验结果酶联免疫吸附试验（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA），是一种广泛应用于生命科学中的试验技术，主要用于检测生物体内特定蛋白质和抗体的存在和数量。
本文将根据不同类别，介绍ELISA试验结果的分析。
一、直接ELISA试验结果分析直接ELISA试验是指将已知抗原沉淀于微孔板上，再加入待检测物，之后加入特定抗体进行检测的试验方法。
当待检测物含有对应的抗原，则抗原和特定抗体结合，形成固定的复合物。
此时，待检测物在微孔板中残留，被进一步检测。
如果待检测物中含有特定抗体，则会与预先添加的抗原结合。
根据特定抗体标记的物质进行检测。
直接ELISA试验结果为同轴柱，并且呈现梯度性图谱。
二、间接ELISA试验结果分析间接ELISA试验是指使用抗原沉淀于微孔板上，加入待检测物，并再次加入特定抗体进行检测的试验方法。
在该试验中，患者血清或其他样品中含有抗体，抗体与固定的抗原结合，形成复合物。
之后添加特定抗体，间接ELISA试验的结果为同轴柱，并且呈现梯度性的图谱。
三、竞争ELISA试验结果分析竞争ELISA试验是对样品中的特定物质进行检测的试验方法。
在试管中，抗体与已知抗原结合后，特定抗体标记的物质被加入竞争ELISA反应体系中。
如果合适的特定抗体分子与抗原分子竞争结合，则可抑制特定抗体分子与标记物结合，标记物的含量随之减少。
竞争ELISA试验结果为逆向梯度性的图谱，表示抑制率和特定物质的含量呈反比。
四、间接竞争ELISA试验结果分析间接竞争ELISA试验是对患者中特定物质的抗体进行检测的试验方法。
在该试验中，已知抗原沉淀于微孔板上，加入患者样品，之后加入特定抗体。
如果患者样品中含有特定抗体，将与特定抗体竞争结合，导致标记物与它竞争结合量的减少。
间接竞争ELISA试验结果为逆向梯度性的图谱，表示抑制率和特定物质的含量呈反比。
总之，酶联免疫吸附试验（ELISA）是一种基于特异性分子识别原理的分析方法，具有操作简单、稳定可靠、敏感度高等特点。
酶联免疫标记技术
酶联免疫标记技术酶联免疫标记技术（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA）是一种常用于检测生物样本中特定蛋白质、抗体、荷尔蒙、抗原等的定量和定性方法。
该技术利用酶与抗原-抗体复合物相互作用的原理，通过酶的催化作用将底物转化为可检测的产物，从而实现对目标分子的检测和测量。
ELISA技术通常分为直接ELISA、间接ELISA、竞争ELISA和夹心ELISA等不同类型，但它们的基本原理相似。
以下是酶联免疫标记技术的基本步骤：1．包被阶段（Coating）：将要检测的抗原或抗体吸附在固体表面上，如微孔板的底部或壁上。
2．阻断阶段（Blocking）：用非特异性蛋白质（如牛血清蛋白、鱼胶等）阻断未被包被的表面，以减少非特异性结合。
3．结合阶段（Binding）：将待测样本加入到包被的微孔板中，目标分子与包被的抗体或抗原发生特异性结合。
4．洗涤阶段（Washing）：使用缓冲液洗去未结合的样本成分，以减少背景干扰。
5．检测阶段（Detection）：加入与目标分子特异性结合的检测抗体，形成抗原-抗体复合物。
6．洗涤阶段（Washing）：再次使用缓冲液洗去未结合的检测抗体。
7．酶标记阶段（Enzyme Labeling）：加入与检测抗体特异性结合的酶，如辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AP）等。
8．底物加入阶段（Substrate Addition）：加入底物，酶催化底物产生可检测的产物。
9．测量阶段（Measurement）：使用光度计或荧光测量仪器测量产物的光学密度或荧光强度，从而定量目标分子的浓度。
ELISA技术具有灵敏度高、特异性强、操作简便、成本较低等优点，因此在医学诊断、生物医学研究、药物开发等领域被广泛应用。
酶联免疫方法检测细胞因子步骤
酶联免疫方法检测细胞因子步骤酶联免疫方法是一种常用的实验技术，用于检测细胞因子的含量和活性。
这种方法结合了酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫印迹（Western blot）的优点，可以准确、快速地检测细胞因子的表达和分泌水平。
下面我们将详细介绍酶联免疫方法检测细胞因子的步骤。
第一步：收集样本在进行酶联免疫方法检测细胞因子之前，首先需要收集样本。
样本可以是细胞培养上清液、血清、血浆、组织匀浆等。
在收集样本的过程中，需要注意避免污染和降解，以保证后续实验的准确性和可靠性。
第二步：制备样品收集到样本后，需要进行样品的制备工作。
对于细胞因子的检测，通常需要进行细胞裂解或离心等步骤，以获得纯净的样品。
此外，还需要对样品进行稀释或浓缩处理，以确保在检测过程中细胞因子的浓度在可检测范围内。
第三步：选择合适的试剂盒在进行酶联免疫方法检测细胞因子之前，需要选择合适的试剂盒。
试剂盒的选择要根据要检测的细胞因子种类和检测方法来确定。
一般来说，试剂盒中包含了抗体、标记物、基质和洗涤缓冲液等试剂，可以满足细胞因子的检测需求。
第四步：进行酶标记接下来需要进行酶标记的过程。
酶标记是酶联免疫方法的关键步骤，通过在抗体或抗原上标记酶，可以实现细胞因子的特异性检测。
常用的酶包括辣根过氧化物酶（HRP）和碱性磷酸酶（AP）。
在酶标记过程中，需要严格控制反应条件和时间，以确保标记的稳定性和活性。
第五步：进行反应在准备好标记的抗体或抗原后，就可以进行酶联免疫反应了。
首先将标记的抗体或抗原加入到微孔板或膜上，然后加入待测样品，进行孵育反应。
在孵育反应过程中，细胞因子将与其特异性抗体结合，形成抗原-抗体复合物。
然后进行洗涤，以去除非特异性结合的物质。
第六步：显色反应经过洗涤后，就可以进行显色反应了。
显色反应是检测细胞因子含量的关键步骤，通过在酶作用下的底物转化，可以产生可检测的颜色或荧光信号。
根据试剂盒中所提供的底物种类和反应条件，可以确定最适合的显色方案。
酶联免疫法和化学发光法
酶联免疫法和化学发光法
酶联免疫法（ELISA）和化学发光法（CLIA）是两种常用的免疫分析技术，用于检测和定量生物分子，如蛋白质、抗体、激素等。
它们在实验室和临床诊断中广泛应用。
酶联免疫法是一种基于酶催化反应的免疫分析方法。
其基本原理是将待测物（抗原或抗体）与固相载体（如微孔板）上的抗体或抗原结合，然后加入酶标记的抗体或抗原，形成三明治复合物。
当加入底物时，酶会催化底物发生反应，产生可检测的信号，通常是颜色变化或荧光强度。
通过测量这些信号，可以定量待测物的浓度。
酶联免疫法具有灵敏度高、特异性好、操作简便等优点，适用于大规模样本的检测。
它可以用于检测多种生物分子，如蛋白质、激素、药物、病原体等。
常见的酶联免疫法包括间接法、夹心法和竞争法等。
化学发光法是一种基于化学发光反应的免疫分析方法。
其基本原理是将待测物与固相载体上的抗体或抗原结合，然后加入标记有发光物质的抗体或抗原，形成三明治复合物。
当加入触发剂时，发光物质会被激发并产生光信号。
通过测量光信号的强度，可以定量待测物的浓度。
化学发光法具有灵敏度高、线性范围宽、快速等优点，适用于微量和痕量分析。
它可以用于检测多种生物分子，如蛋白质、激素、药物、病原体等。
常见的化学发光法包括间接法、夹心法和竞争法等。
总的来说，酶联免疫法和化学发光法都是常用的免疫分析技术，它们各有优缺点，适用于不同的应用场景。
选择哪种方法取决于待测物的特性、检测要求以及实验室的设备和技术水平。
酶联免疫方法检测细胞因子步骤
酶联免疫方法检测细胞因子步骤酶联免疫方法（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）是一种广泛应用于生物医学研究领域的检测技术，它能够快速、准确地检测细胞因子等生物大分子的含量。
细胞因子是一类在调节和介导细胞间相互作用中发挥重要作用的细胞因子，它们在免疫反应、炎症反应和细胞信号传导等生理过程中具有重要的调节作用。
本文将对酶联免疫方法检测细胞因子的步骤进行详细介绍，让读者对该技术有一个全面的了解。
第一步：样品处理在进行酶联免疫法检测细胞因子之前，首先需要对样品进行处理。
样品处理的目的是提取细胞因子，并将其置于适宜的条件下以便后续的检测。
对于细胞因子的提取可采用离心、超声波破碎等方法，以获取高纯度的样品。
同时，对于血清、血浆等液体样品，还需通过凝胶过滤、醋酸纤维素柱层析等步骤进行净化处理，以去除样品中可能存在的干扰物质。
第二步：酶标记抗体的制备酶联免疫法的关键之一是酶标记抗体的制备。
酶标记抗体一般是通过将抗体与酶（如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶等）进行共价结合而得到的。
在制备酶标记抗体时，需要考虑到抗体与酶的比例、结合条件等因素，并通过一系列的实验来优化制备条件，以确保酶标记抗体的稳定性和活性。
第三步：微板上样品的包被完成样品的处理和酶标记抗体的制备之后，下一步是将样品包被到微板上。
微板是一种通常由聚苯乙烯、聚碳酸酯等材料制成的微量反应容器，其表面具有一定的亲和性，可以吸附蛋白质等生物分子。
在将样品包被到微板上时，需注意包被的时间、温度等因素，以使样品能够均匀地吸附到微板上，并且保持其天然的构象和生物活性。
第四步：酶标记抗体的添加将样品包被到微板上之后，接下来就是添加酶标记抗体。
酶标记抗体作为二抗，可以与包被在微板上的靶分子结合，形成特异性的抗原-抗体复合物。
为了确保酶标记抗体的特异性和灵敏度，通常需要对酶标记抗体进行适当的稀释，并加入到微板上进行孵育。
第五步：底物的加入与反应在酶标记抗体添加完毕后，需要加入底物并进行反应。
酶联免疫吸附法标准
酶联免疫吸附法标准
酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）是一种常用的免疫分析技术，用于检测和定量分析特定蛋白质或其它
分子的存在。
这种分析方法是基于抗原与抗体的高度特异性结合原理。
以下是酶联免疫吸附法的一般标准步骤：
1. 准备微孔板：将酶标板的孔洞涂覆有抗原或抗体，使其吸附
在微孔板上。
2. 样本处理：将待检样本经过必要的预处理，如稀释、清洗等。
3. 加入样本：将处理好的样本加入到微孔板中，使抗原或抗体
与样本中的目标物质结合。
4. 免洗步骤：根据实验需要，可能需要进行一些免洗步骤来清
除非特异性结合物质。
5. 加入检测抗体：加入检测抗体，用于与目标物质结合。
6. 再次免洗步骤：如有需要，进行免洗步骤来清除非特异性结
合物质。
7. 加入酶标记抗体：加入酶标记抗体，它与检测抗体结合形成
复合物。
8. 加入底物：加入底物，使酶作用并产生可测量的信号。
9. 反应停止：加入反应终止剂停止酶反应，停止信号产生。
10. 信号检测：使用酶标仪或其他测量设备测量底物反应产生的
信号强度。
11. 数据分析：根据标准曲线或其他定量方法，计算样品中目标
物质的浓度。
需要注意的是，ELISA的具体步骤可能会因实验目的、样品类型
等因素有所差异，以上所述仅为一般标准步骤。
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结果
原理
类型
试剂 准备 对照 标本
1） 将特异性抗体与固相载体联结，形成固相 抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。 2） 加受检标本，保温反应。标本中的抗原与 固相抗体结合，形成固相抗原抗体复合物。洗 涤除去其他未结合物质。 3） 加酶标抗体，保温反应。固相免疫复合物 上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的 酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本 中受检抗原的量相关。 4） 加底物显色。固相上的酶催化底物成为有 色产物。通过比色，测知标本中抗原的量。
类型
试剂 准备 对照 标本
结果
原理
结合物用的抗原和抗体
类型
制备结合物时所用纯度较高的IgG，以免在与酶联结时其
试剂 准备 对照 标本
他杂蛋白的干扰。最好用层析纯化的抗体，这样全部酶结 合物均具有特异的免疫活性，可以在高稀释度进行反应， 实验结果本底浅淡。在ELISA中用酶标抗原的模式不多，总 的要求是抗原必须是高纯度的。
结果
封闭
原理
封闭(blocking)是继包被之后用高浓度的无关蛋白质
类型
试剂 准备 对照 标本
溶液再包被的过程。封闭就是让大量不相关的蛋白质充填
这些空隙，从而排斥ELISA后的步骤中干扰物质的再吸附
。
常用封闭剂：0.05%-0.5%的BSA; 10%的小牛血清或1% 明胶;脱脂奶粉,比较价廉，可以高浓度使用（5%）。 所有的ELISA固相均需封闭？
2.2.4 竞争法测抗体
原理
类型
试剂 准备 对照 标本
当抗原材料中的干扰物质不易除去，或不易得到足够的纯化 抗原时，可用此法检测特异性抗体。
结果
原理
类型
试剂 准备 对照 标本
竞争法可用于测定抗原，也可用于测定抗体。 以测定抗原为例，受检抗原和酶标抗原竞争与固相 抗体结合，因此结合于固相的酶标抗原量与受检抗 原的量呈反比
结果
原理
2.2.5
竞争法测抗原
类型
试剂 准备 对照 标本
小分子抗原或半抗原缺乏可作夹心法的两个以上的位点 ，因此不能用双抗体夹心法进行测定，可以采用竞争法模 式。其原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固
相抗体结合。标本中抗原量含量愈多，结合在固相上的酶
标抗原愈少，最后的显色也愈浅。小分子激素、药物等 ELISA测定多用此法。
①：固相支持物； ②：样品； ③：特异性IgG； ④：生物素化抗小鼠IgG （Biotin）； ⑤：辣根过氧化物酶HRP-酶标链亲和素（Avidin）； ⑥：DAB显色液； ⑦：显色；
结果
第三节
原理
ELISA测定方法
ELISA的试剂(A、B、C三部分)
ELISA中有三个必要的试剂：免疫吸附剂、结合物和
原理
1.1 抗原抗体反应
1.1.1 可逆性
类型
试剂 准备 对照 标本
抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态 平衡，其反应式为：
Ag+Ab→Ag· Ab
抗体的亲和力（affinity），可以用平衡常数K表示： K=[Ag· Ab]／[Ag][Ab] ,Ag· Ab的解离程度与K值有关。高亲 和力抗体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常 适合，两者结合牢固，不易解离。解离后的抗原或抗体均 能保持原有的结构和活性。
类型
试剂 （1）固相的抗原或抗体，即"免疫吸附剂"（immunosorbent）； 准备
（2）酶标记的抗原或抗体，称为"结合物"（conjugate）；
对照 （3）酶反应的底物。 标本
可设计出各种不同类型的检测方法。
结果
2.1 双抗体夹心法测抗原
原理
双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法
类型
试剂 准备 对照 标本
原理
包被用抗体
IgG对聚苯乙烯有强吸附力，其联结发生在Fc段上，抗体结合
类型
点暴露于外。
试剂 准备 对照 标本
取材于抗血清或含单克隆抗体的培养液.须除去杂抗体后才能 用于ELISA，以保证试验的特异性。 腹水中单抗的浓度较高，特异性亦较强，因此不需要作吸收 层析处理，直接包被。在某些情况下，用多种单抗混合包被 ，可取得更好的效果。
结果
原理
类型
试剂 准备 对照 标本
洗涤液
在板式ELISA中，常用的稀释液为含0.05%吐温20磷 酸盐缓冲液。
结果
2.ELISA的试剂准备B（结合物）
原理
结合物
即酶标记的抗体（或抗原）是ELISA中关键的试剂 1. 酶的催化活性 2.抗体（或抗原）的免疫活性 3.含有或少含有游离的抗体（或抗原） 4.结合物尚要有良好的稳定性。
类型
试剂 准备 对照 标本
结果
原理
1.2 免疫测定在临床、食品检验中的应用
类型
由于各种抗原成份，包括小分子的半抗原，均可用以制隆抗体，利用此抗体作为试剂就可 检测标本中相应的抗原，因此免疫测定的应用范围极广。
结果
第二节 ELISA的类型
原理
ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定 方法中有三个必要的试剂：
类型
试剂 聚氯乙烯：聚氯乙烯对蛋白质的吸附性能比聚苯乙烯高， 准备 但空白值也略高。 对照 标本
良好的ELISA板应该是吸附性能好，空白值低，孔底透明 度高，各板之间、同一板各孔之间、同一板各孔之间性能相 近。
结果
原理
2
包被的方式
将抗原或抗体固定在过程称为包被(coating)。 蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的，靠
结果
原理
类型
试剂 准备 对照 标本
ELISA是一种免疫测定（immunoassay，IA） 。基础:
抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。加入酶反应 的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本 中受检物质的量直接相关，由此进行定性或定量分析。
结果
基本原理
原理
类型
试剂 准备 对照 标本
结果
结果
原理
2.2.6 捕获包被法测抗体
类型
试剂 准备 对照 标本
IgM的检测常用于传染病的诊断。用抗人IgM抗体包被固相 ，以捕获血清标本中的IgM（其中包括针对抗原的特异性 IgM抗体和非特异性的IgM）。此法常用于病毒性感染的早 期诊断。
结果
原理
2.2.7 ABS-ELISA法
类型
试剂 准备 对照 标本
第二章 酶联免疫技术检测食品微生物
2014.09.05
第一节
原理
酶免疫测定类型
ELISA的基本原理
类型
试剂 准备 对照 标本
酶免疫组化 酶免疫技术 酶免疫测定 非均相酶免疫测定 固相酶免疫测定 液相酶免疫测定 均相酶免疫测定
这种固相酶免疫测定方法在1971年最初建立时称为酶联免疫 吸附剂测定（Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay），简 称ELISA。
①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其 免疫活性。 ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这 种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活 性。在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原） 和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗 原或抗体起反应。 ③用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物 与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标 本中受检物质的量成一定的比例。 ④加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物， 产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据 颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化 频率很高，故可极大地地放大反应效果，从而使测定 方法达到很高的敏感度。
结果
原理
包被的条件
pH9.6碳酸盐缓冲液
类型
试剂 准备 对照 标本
pH7.2的磷酸盐缓冲液
pH7-8的Tris-HCL缓冲液。
加入包被液后，在4-8℃冰箱中放臵过夜，37℃中保温2
小时。包被浓度随载体和包被物的性质可有很大的变化， 每批材料需通过实验与酶结合物的浓度协调选定。一般蛋 白质的包被浓度为10ng/ml-20ug/ml。
结果
2.2 双抗原夹心法测抗体
原理
类型
试剂 准备 对照 标本
用特异性抗原进行包被和制备酶结合物。此法中受检
标本不需稀释，可直接用于测定，因此其敏感度相对高于 间接法。乙肝标志物中抗HBsAg的检测常采用本法。本法关
键在于酶标抗原的制备，应根据抗原结构的不同，寻找合
适的标记方法。
结果
2.2.3 间接法测抗体
类型
试剂 的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基 准备 对照 标本
量、等电点、浓度等的影响。大分子蛋白质较小分子蛋白质
团间的作用。这种物理吸附是非特异性的，受蛋白质的分子
通常含有更多的疏水基团，故更易吸附到固相载体表面。
结果
原理
类型
试剂 准备 对照 标本
不易吸附的非蛋白质抗原可用间接包被的抗原经固相抗体的亲 和层析作用，包被在固相上的抗原纯度大大提高，因此含杂质 较多的抗原也可采用捕获包被法。 亲和素生物素 即用亲和素先包被载体，加入生物素化的DNA ，这种包被方法均匀、牢固，已扩大应用于各种抗原物质的定 量测定。 脂类物质无法与固相载体结合，可将其在有机溶剂（例如乙醇 ）中溶解后加入ELISA板孔中，开盖臵冰箱过夜或冷风吹干， 待酒精挥发后，让脂质自然干固在固相表面。 优点：试验的特异性、敏感性均由此得以改善，重复性亦 佳。抗原用量少，仅为直接包被的1/10乃至于/100。
类型