吸收光检测原理及应用
红外吸收光谱的原理及应用
红外吸收光谱的原理及应用一、红外吸收光谱的原理红外吸收光谱（Infrared Absorption Spectroscopy）是一种常见的光谱分析技术，它利用物质分子对红外辐射的吸收特性进行分析和研究。
红外光谱的原理基于分子的振动和转动引起的能量变化。
在红外辐射的作用下，分子会吸收特定波长或频率的光，从而发生能级跃迁并产生吸收峰。
根据不同的吸收峰位置和强度，可以推断物质的结构、组成和化学环境等信息。
红外吸收光谱的原理主要包括以下几个方面： 1. 分子的振动和转动：分子在吸收红外辐射时，会发生振动和转动。
振动包括拉伸、弯曲和扭转等不同形式，每个分子都有特定的振动模式和频率，使其能够吸收不同波长的红外辐射。
2. 分子吸收特定波长的光：分子在特定波长范围内吸收红外辐射，产生吸收峰。
根据吸收峰的位置和强度，可以确定分子的化学键、官能团和分子结构等信息。
3. 光谱图的解读：通过测量物质对红外辐射的吸收情况，可以得到红外光谱图。
光谱图通常以波数为横轴，吸收峰强度为纵轴，常用峰位和峰形进行分析和判断。
二、红外吸收光谱的应用红外吸收光谱具有广泛的应用领域，主要包括以下几个方面：1. 化学分析红外光谱在化学分析中起着重要作用，可以用于鉴定和分析各种有机和无机化合物。
通过测量样品的红外光谱，可以获得化学键和官能团的信息，从而判断物质的结构和组成。
红外光谱被广泛应用于有机化学、药物分析、环境监测等领域。
2. 药物研发红外光谱在药物研发中具有重要的应用价值。
通过红外光谱分析药物的结构和成分，可以判断药物的稳定性、纯度和相态等性质。
红外光谱还可以用于药物的质量控制和检验，确保药物的安全有效。
3. 材料科学在材料科学领域，红外光谱可以用于材料的表征和分析。
不同材料的红外光谱具有独特的特征，可以用于识别和鉴别材料，评估材料的结构、质量和性能。
红外光谱被广泛应用于聚合物材料、无机材料、涂层材料等领域。
4. 生物医学研究红外光谱在生物医学研究中有着重要的应用。
吸光度测定的原理与应用
吸光度测定的原理与应用吸光度测定，是化学、生物学等领域中常用的一种分析技术。
它利用物质吸收特定波长的光而进行定量分析，具有操作简单、结果稳定等优点，被广泛应用于生化、医药、环保等领域。
本文将会介绍吸光度测定的原理与应用。
一、吸光度测定原理吸光度测定原理是基于实验样品对特定波长的电磁辐射（即光）吸收的现象进行的。
在吸光度测定中，首先需要制备样品溶液，并选择适当的波长，利用石英或玻璃的透明度进行测量。
一般来说，吸光度的数值越高，表示分析物的浓度越大。
吸光度是指在可见光或紫外线照射下，物质吸收光线的程度。
通常使用分光光度计进行测定，其主要原理是利用样品对光的吸收特性进行分析。
在早期的分光光度计中，需要人工对比试样和标准溶液，然后确定吸光度的数值。
现在最新的分光光度计则通过计算机对比底片的吸光度与试样的吸光度，从而进行自动分析。
二、吸光度测定的应用1. 生物学应用在生物学领域，吸光度测定可用于定量测定DNA、RNA和小分子蛋白等。
DNA和RNA在260nm处的吸光度非常强，常常被用作测量其浓度的方法之一。
在蛋白质的吸光度测定中，350–400nm波段存在一些特定的吸收峰，可用于蛋白质浓度的估算。
2. 医学应用在医学领域，吸光度测定主要用于保存血样和血型鉴定等。
血样吸光度测定不仅可以监测血液中各种成分的含量，还可用于对酸碱平衡失调、电解质紊乱以及肝功能异常等疾病的诊断。
3. 环保应用在环保领域，吸光度测定可用于监测污水中有机物、水中溶解氧和二氧化碳的含量等。
在大气环境检测中，吸光度测定可用于检测大气中臭氧、二氧化硫和氮氧化物等化学物质。
三、总结吸光度测定是一种常见的分析技术，其在生物学、医学和环保等领域中均有广泛应用。
尤其在DNA、RNA等大分子分析中，吸光度测定已经成为检测方法中的重要组成部分。
随着科技的进步，相关的技术仪器也在不断升级，吸光度测定也有望提高其灵敏度、舒适性、准确性等方面的水平。
紫外可见吸收光谱法原理_概述解释说明
紫外可见吸收光谱法原理概述解释说明1. 引言1.1 概述紫外可见吸收光谱法是一种广泛应用于化学分析、生物医药和材料科学等领域的分析技术。
它通过检测样品吸收紫外或可见光的能力，可以确定样品中存在的化合物或物质的浓度。
紫外可见吸收光谱法基于原子、离子或分子在特定波长范围内对电磁辐射的选择性吸收现象，利用这种吸收现象可以获得样品所具有的信息。
本文将对紫外可见吸收光谱法的原理进行详细介绍，并探讨其在化学分析、生物医药和材料科学中的应用。
1.2 文章结构本文共分为五个部分：引言、紫外可见吸收光谱法原理、紫外可见吸收光谱应用领域、实验方法与操作步骤以及结论和展望。
1.3 目的本文旨在向读者介绍紫外可见吸收光谱法的基本原理以及其在不同领域中的应用。
通过阐述紫外可见吸收光谱法的操作方法和实验步骤，希望能为初学者提供一份清晰的指南，使其能够准确、有效地应用该技术进行分析。
同时，我们将对紫外可见吸收光谱法的局限性进行讨论，并展望其未来在科学研究和实际应用中的发展方向。
2. 紫外可见吸收光谱法原理:2.1 光谱的基本概念:光谱是指将某物质在不同波长范围内对电磁辐射的吸收、发射或散射进行分析和测量的方法。
根据电磁辐射的能量不同，可将光谱分为紫外光谱、可见光谱和红外光谱等。
其中，紫外可见吸收光谱法利用物质对紫外及可见光区域（200-800 nm）的吸收特性进行定量和定性分析。
2.2 紫外可见吸收光谱的原理:紫外可见吸收光谱法是通过物质吸收特定波长范围内电磁辐射而产生的能级跃迁来进行分析。
当样品受到入射光线照射后，样品中的某些化学成分会吸收特定波长范围内的能量，并转为高能态。
这些化学成分在高能态时可能会跃迁至更高能级或离子化状态，从而使入射光线中特定波长的能量被吸收，形成明显的吸收峰。
根据琴斯定律（Lambert-Beer定律），光的吸收与样品中物质浓度成正比。
因此，通过测量入射光和透射光之间的吸收差异，可以推算出样品中特定化合物的浓度。
吸收光谱测量基本原理
吸收光谱测量基本原理吸收光谱测量是一种通过测量物质对光的吸收而获取样品组成和浓度信息的分析方法。
其基本原理是光通过样品时，被样品中的分子、原子或离子吸收所产生的吸收现象，会导致光的强度降低或光谱产生变化，并可用于定量、定性分析。
首先，光的吸收主要由两个过程引起：光的吸收和光的散射。
而在吸收过程中，分子、原子或离子通过吸收光子的能量，使其处于激发状态，从而导致光的吸收。
这些被吸收的光子会激发分子、原子或离子中的电子到更高的能级，形成激发态。
随后，这些激发态的分子、原子或离子有多种可能的释放方式，如自发辐射、非辐射跃迁（即振动和转动跃迁）以及碰撞和化学反应。
在实际测量中，常用的测量设备是分光光度计（Spectrophotometer）。
当光通过样品时，分光光度计会将入射光和通过样品后的光进行比较，通过测量样品中光的吸收量来得到样品的吸收光谱。
吸收光谱由一系列波长组成，这些波长是光通过样品时被吸收的波长。
根据比尔-朗伯定律（Beer-Lambert Law），光的吸收与经过吸光度比或光强度的差异成正比，即A = εcl，其中A为吸光度，ε为摩尔吸光系数（Molar Absorptivity），c为被测物质的浓度，l为光程（光通过样品的路径长度）。
波长是光谱测量的重要参数之一、不同物质对各种波长的光都有不同程度的吸收能力，因此通过测量样品在不同波长下的吸光度，可以得到吸收光谱。
吸收光谱可以用来确定物质的特征波长，即物质对其中一波长的光谱吸收最大。
这种特征波长的选择是根据被测样品中物质的性质和测量目的来确定的。
比如，在生物化学研究中，常用280nm波长的紫外吸收来测量蛋白质的浓度，因为蛋白质在此波长具有较高的吸光度。
吸收光谱测量的应用非常广泛。
在环境监测中，可以用来检测水中的污染物质浓度，比如重金属离子、有机污染物等；在药物分析中，可以测量药物的浓度和纯度；在生物学研究中，可以测量细胞中的DNA、RNA、蛋白质等的浓度；还可以用于色素、染料、食品、化妆品等行业的质量控制和监测等。
原子吸收光谱仪的原理
原子吸收光谱仪的原理
原子吸收光谱仪是一种非常重要、应用广泛的分析仪器。
其主要用于分析金属元素、非金属元素等物质的化学成分，具有分析速度快、准确度高等特点，被广泛应用于环保检测、食品安全、医药检验等领域。
原子吸收光谱仪的主要原理是：测量样品中特定元素的原子在吸收特定波长的光谱线时所发生的吸收现象。
当特定元素的原子处于基态时，其外层电子处于最低能量状态，这个状态被称为基能级。
当被加热或载入电子高能级时，原子中的某些电子会跃迁到更高的能级，这个跃迁产生的能量就会以光的形式释放出来，即发射光。
而当被另外一种波长的光线照射时，这个过程就反过来了：原子中的某些电子被激发跳回基态，同时吸收掉了外界光束中相应波长的光线，这就是原子吸收光谱。
通过测量样品中特定元素的吸收光谱，我们就可以确定样品中的这种元素的含量。
在原子吸收光谱仪中，光源发出一束特定波长的光线，并通过被分光镜分离出单色光束。
这束光束通过样品后，被接收器接收。
如果样品中存在特定元素的原子，这些原子就会吸收掉特定波长的光线。
衰减后的光束就会被接收器接收，其信号被转换为数字信号，并显示在数字屏幕上。
原子吸收光谱仪利用这种原理进行分析，可以实现快速、准确、高灵敏度的分析结果。
在使用原子吸收光谱仪进行分析时，需要经过一定的样品预处理、使用标准品校准等步骤。
样品预处理主要是将样品清洁除杂、消解等步骤，以便更好地进行分析；而使用标准品校准，则是为了保证测得的结果的准确性和可靠性。
总之，原子吸收光谱仪在现代科学研究、工业生产和环境检测等领域中具有重要的应用价值。
了解其原理，并规范使用方法和步骤，有助于保证分析结果的准确性和可靠性。
吸光光度法的工作原理
吸光光度法是一种常用的分析测量方法，用于测量溶液中化学物质的浓度。
它基于光在物质中的吸收现象，通过测量光的吸收程度来推断样品中化学物质的含量。
以下是吸光光度法的基本工作原理：
Lambert-Beer定律：吸光光度法基于Lambert-Beer定律，该定律描述了光通过透明介质时的吸收现象。
根据该定律，溶液中溶质的浓度与吸光度成正比。
光源与检测器：吸光光度法使用可见光或紫外光源作为光源，发出特定波长的光。
检测器（如光电池或光电二极管）用于测量光通过溶液后的吸光度。
标准曲线：为了建立浓度与吸光度之间的关系，首先制备一系列已知浓度的标准溶液，并使用吸光光度法测量每个标准溶液的吸光度。
通过绘制标准曲线，可以确定浓度和吸光度之间的线性关系。
样品测量：将待测样品溶液放入光度计的样品池中，光通过样品溶液后，检测器测量吸光度。
根据标准曲线，可以通过测量的吸光度确定样品的浓度。
路径长度和吸收波长：吸光光度法中，路径长度是光通过溶液的距离，通常为1厘米。
选择适当的吸收波长是确保测量准确性的重要因素，因为不同化学物质对不同波长的光有不同的吸光度。
通过利用Lambert-Beer定律，建立标准曲线，选择适当的光源和检测器，并控制路径长度和吸收波长，吸光光度法能够定量测量样品中溶质的浓度。
这种分析方法广泛应用于化学、生物化学、环境科学等领域的定量分析中。
原子吸收光谱仪的原理、构成、操作及应用领域详解
原子吸收光谱仪的原理、构成、操作及应用领域详解一、原子吸收光谱仪原理原子吸收光谱仪的原理是根据物质基态原子蒸汽对特征辐射吸收的作用来进行金属元素分析。
1、原子吸收光谱的产生任何元素的原子都是由原子核和核外电子组成。
原子核是原子的中心体，核正电，电子荷负电，总的负电荷与原子核的正电荷数相等。
电子沿核外的圆形或椭圆形轨道围绕着原子核运动，同时又有自旋运动。
电子的运动状态由波函数0描述。
求解描述电子运动状态的薛定愕方程，可以得到表征原子内电子运动状态的量子数n、L、m，分别称为主量子数、角量子数和磁量子数。
原子核外的电子按其能量的高低分层分布而形成不同的能级，因此一个原子核可以具有多种能级状态。
能量最低的能级状态称为基态能级(Eo)，其余能级称为激发态能级，而能量最低的激发态则称为第一激发态。
一般情况下，原子处于基态，核外电子在各自能量最低的轨道上运动。
如果将一定外界能量如光能提供给该基态原子，当外界光能量恰好等于该基态原子中基态和某一较高能级之间的能级差△E时，该原子将吸收这一特征波长的光，外层电子由基态跃迁到相应的激发态而产生原子吸收光谱。
2、原子吸收光谱仪基本原理仪器从光源辐射出具有待测元素特征谱线的光，通过试样蒸气时被蒸气中待测元素基态原子所吸收，由辐射特征谱线光被减弱的程度来测定试样中待测元素的含量。
3、原子吸收光谱仪方法原理原子吸收是指呈气态的原子对由同类原子辐射出的特征谱线所具有的吸收现象。
当辐射投射到原子蒸气上时，如果辐射波长相应的能量等于原原子吸收光谱仪子由基态跃迁到激发态所需要的能量时，则会引起原子对辐射的吸收，产生吸收光谱。
基态原子吸收了能量，最外层的电子产生跃迁，从低能态跃迁到激发态。
原子吸收光谱根据郎伯-比尔定律来确定样品中化合物的含量。
已知所需样品元素的吸收光谱和摩尔吸光度，以及每种元素都将优先吸收特定波长的光，因为每种元素需要消耗一定的能量使其从基态变成激发态。
检测过程中，基态原子吸收特征辐射，通过测定基态原子对特征辐射的吸收程度，从而测量待测元素含量。
原子吸收光谱法原理简述
原子吸收光谱法原理简述
原子吸收光谱法是一种用于分析物质中金属元素含量的方法。
它的原理简述如下：
当金属原子处于基态时，它们会吸收特定波长的光。
原子吸收光谱法利用这一特性来测量样品中金属元素的含量。
首先，样品被转化成气态原子或原子的气态化合物，然后通过光源发出的特定波长的光照射样品。
如果样品中含有被检测的金属元素，这些原子会吸收光，使得光源透过样品时的光强度减弱。
测量光源透过样品前后的光强度差异，就可以确定金属元素的含量。
原子吸收光谱法的原理基于不同金属元素吸收光的特性。
每种金属元素都有特定的吸收光谱线，这些谱线对应着特定波长的光。
因此，通过测量样品对不同波长光的吸收情况，可以确定样品中不同金属元素的含量。
此外，原子吸收光谱法还遵循比尔-朗伯定律，即吸收光强度与浓度成正比。
因此，可以通过测量吸收光强度的变化来确定金属元素的浓度。
总的来说，原子吸收光谱法利用金属原子对特定波长光的吸收特性，通过测量样品对光的吸收来确定其中金属元素的含量。
这一方法在分析化学和环境监测等领域有着广泛的应用。
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吸收光检测原理及应用1. 检测原理a) 布格-朗伯-比尔定律，是光吸收的基本定律，适用于所有的电磁辐射和所有的吸光物质，包括气体、固体、液体、分子、原子和离子。
比尔-朗伯定律是吸光光度法、比色分析法和光电比色法的定量基础。
b) 朗伯-比尔定律：OD = ε∙C ∙b光吸收值（OD）与浓度成正比c) 比尔—朗伯定律数学表达式: A=lg(1/T)=KbcA为吸光度,T为透射比,是透射光强度比上入射光强度K为摩尔吸收系数.它与吸收物质的性质及入射光的波长λ有关. c为吸光物质的浓度b为吸收层厚度d) 物理意义是当一束平行单色光垂直通过某一均匀非散射的吸光物质时,其吸光度A与吸光物质的浓度c及吸收层厚度b成正比。
2. 吸收光的应用a) 生物大分子定量：基于260nm、280吸收光检测-核酸定量i.核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。
吸收紫外光的性质是嘌呤环和嘧啶环的共轭双键系统所具有的，所以嘌呤和嘧啶以及一切含有它们的物质，不论是核苷、核苷酸或核酸都有吸收紫外光的性质。
最佳测量值的范围为0.1 至1.0。
每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同。
定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。
如：1OD 的吸光值分别相当于50μg / mL 的dsDNA，37μg / mL 的ssDNA，40μg/mL 的RNA，30μg/mL 的寡核苷酸。
ii.A280nm 是蛋白和酚类物质最高吸收峰的吸收波长，比值可进行核酸样品纯度评估：纯DNA 的A260/A280 比值为1.8，纯RNA 为2.0。
假如比值低，表示受到蛋白（芳香族）或酚类物质的污染，需要纯化样品。
iii.A230nm 是碳水化合物最高吸收峰的吸收波长，比值可进行核酸样品纯度评估：纯DNA 和RNA 的A260/A230 比值为2.5。
若比值小于2.0 表明样品被碳水化合物（糖类）、盐类或有机溶剂污染，需要纯化样品。
iv. A320nm 或A340nm 为检测溶液样品的浊度，该值应该接近0.0。
假如不是，标明溶液中有悬浮物，需要纯化样品。
v. 核酸的吸光值受pH 值和缓冲液离子浓度影响。
只有在一定的pH 值和低离子浓度的条件下（如10 mM Tris-HCl pH8.0），才能得到精确的检测结果。
b) 生物大分子定量：基于260nm、280吸收光检测-蛋白定量i.蛋白质中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，所以蛋白质溶液在275～280nm具有一个吸收紫外吸收高峰。
在一定浓度范围内，蛋白质溶液在最大吸收波长处的吸光度与其浓度成正比，服从朗伯-比耳定律，因此可作定量分析。
该法测定蛋白质的浓度范围为0.1～1.0mg/mL。
ii.由于不同蛋白质中酪氨酸和色氨酸的含量不同，所处的微环境也不同，所以不同蛋白质溶液在280nm的光吸收值也不同。
据初步统计，浓度为1.0 mg/mL的1800种蛋白质及蛋白质亚基在280nm的吸光度在0.3～3.0之间，平均值为1.25±0.51。
所以此种方法测量的准确度差一点。
iii.若样品中含有嘌呤、嘧啶等核酸类吸收紫外光的物质，在280nm处来测量蛋白质含量时，会有较大的干扰。
核酸在260nm处的光吸收比280nm更强，但蛋白质却恰恰相反，因此可利用280nm及260nm的吸收差来计算蛋白质的含量。
iv.常用下列经验公式计算：蛋白质浓度（mg/mL）=1.45A280-0.74A260 ；(A280和A260分别为蛋白质溶液在280nm和260nm处测得的吸光度值)v.还可以通过下述经验公式直接计算出溶液中的蛋白质的含量：蛋白质浓度（mg/mL）=F* A280*D*1/d；其中A280为蛋白质溶液在280nm处测得的吸光度值；d为石英比色皿的厚度（cm）;D为溶液的稀释倍数；F为校正因子c) 酶联免疫吸附实验-ELISA-疾病因子，动物疫病，食品安全i.使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。
②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。
ii.在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。
用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。
加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。
由于酶的催化频率很高，故可极大地地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。
iii.如今ELISA方法已被广泛应用于多种细菌和病毒等疾病的诊断。
在动物检疫方面，ELISA在猪传染性胃肠炎、牛副结核病、牛传染性鼻气管炎、猪伪狂犬病、蓝舌病等的诊断中已为广泛采用的标准方法。
d) 细菌、细胞生长密度及生长曲线绘制：基于OD600吸光值i.单细胞微生物的发酵具有四个阶段，即Ⅰ调整期（延滞期）、Ⅱ对数期（生长旺盛期）、Ⅲ平衡期（稳定期）、Ⅳ死亡期（衰亡期）。
ii.生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的全过程的动态。
不同的微生物有不同的生长曲线，同一种微生物在不同的培养条件下，其生长曲线也不一样。
因此，测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的。
iii.测定微生物生长曲线的方法很多，有血球计数板法、平板菌落计数法、称重法和比浊法等。
本实验采用比浊法测定，由于细菌悬液的浓度与混浊度成正比，因此，可利用分光光度计测定细菌悬液的光密度来推知菌液的浓度。
将所测得的光密度值（OD600）与其对应的培养时间作图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。
注意，由于光密度表示的是培养液中的总菌数，包括活菌与死菌，因此所测定的生长曲线的衰亡期不明显。
e) 细胞的毒性及增值：MTT、XTT、CCK8i.检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臢（Zā）（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。
二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲臢（Zā），用酶标仪在490nm波长处(英文说明书写的是570nm）测定其光吸收值，在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。
根据测得的吸光度值（OD值），来判断活细胞数量，OD值越大，细胞活性越强（如果是测药物毒性，则表示药物毒性越小）。
ii.XTT作为线粒体脱氢酶的作用底物，被活细胞还原成水溶性的橙黄色甲臢产物。
当XTT与电子偶合剂（例如PMS）联合应用时，其所产生的水溶性的甲臢产物的吸光度与活细胞的数量成正比。
优点：1、使用方便，省去了洗涤细胞；2、检测快速；3、灵敏度高，甚至可以测定较低细胞密度；4、重复性优于MTT。
缺点：XTT水溶液不稳定，需要低温保存或现配现用。
iii.Cell Counting Kit简称CCK试剂盒，是一种基于WST-8（化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐）的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。
WST-8属于MTT的升级产品，工作原理为：在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物（formazan）。
颜色的深浅与细胞的增殖成正比，与细胞毒性成反比。
使用酶标仪在450mM波长处测定OD值，间接反映活细胞数量。
CCK法应用非常广泛，如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。
f) 报告基因：β-半乳糖苷酶、GUS等i.报告基因(reporter gene)是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，也就是说，是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。
把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因，或与其它目的基因相融合，在调控序列控制下进行表达，从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控，筛选得到转化体。
ii.β半乳糖苷酶：β半乳糖苷酶由大肠杆菌lacZ基因编码，可催化半乳糖苷水解。
最大优势是易于用免疫组织化学法观测其原位表达，是最常用的监测转染率的报道基因之一。
以邻—硝基苯—β—D—半乳吡喃糖苷（ONPG）为底物可用标准的比色法检测酶活性，其检测动力学范围为6个数量级。
氯酚红—β—D—半乳吡喃糖苷（CPRG）是另一个可用比色法检测酶活性的底物，其灵敏度比ONPG高近10倍。
以MUG和荧光素二半乳糖苷（FDG）为底物则可用荧光法检测其活性。
此法可检测单个细胞的酶活性，并可用于流式细胞学（FACS）分析。
如以二氧杂环丁烷为底物，可用化学发光法检测酶活性，其检测动力学范围最大，灵敏度最高，与用生物发光法检测荧光素酶活性的灵敏度相似。
iii.gus基因存在于E.coli等一些细菌基因组内，编码β-葡萄糖苷酸酶。
β-葡萄糖苷酸酶是一个水解酶，以β-葡萄糖苷酸酯类物质为底物，其反应产物可用多种方法检测出来。
由于绝大多数植物没有检测到葡萄糖苷酸酶的背景活性，因此这个基因被广泛应用于基因调控的研究中。
g) 酶活性检测：一段时间内，在特定温度条件下进行的动态监测。
各种吸收光光谱范围内都有所涉及。
h) 吸收光光谱图绘制在我们检测时,利用不同波长的单色光作入射光,按波长由短到长的顺序依次通过某一溶液可测得不同波长的吸光度A.然后以入射光的波长λ为横坐标,吸光度A为纵坐标作图.所得曲线即为该溶液的吸收光谱（absorption spectrum）,又称吸收曲线（absorption curve）。