25寄生虫基本检验方法操作规程

合集下载

体内外寄生虫检查方法大全

体内外寄生虫检查方法大全

体内外寄生虫检查方法大全展开全文粪便检查是诊疗过程中最常见的实验室检查之一。

制备和阅读检查结果所需的技术都是很简单的,也是每个医师都要会的。

尽管简单,但这些检查结果及随后的治疗往往决定动物康复的情况。

01采集、处理、储存与运输采集(1)样品尽可能新鲜,因为排出体外后虫卵会快速孵化。

(2)饲主应该目睹动物排便,确保新鲜并观察有无任何染色、新鲜血液或其他问题。

(3)新鲜样品如果2h内不检查应冷藏保存,且不能超过24h。

(4)提供的检测量相当于成年男性的拇指大小,至少10g。

(5)样品应标明动物的名字、号码、采集时间以及是否冷藏过。

常规处理(1)样品应认真处理,以免造成人为污染。

(2)保持清洁的实验室检查环境。

(3)保存清晰的操作记录。

储存(1)可使用无菌取样袋、小塑料夹层袋、塑料容器或实验室一次性手套(把里面翻出来)贮存粪便。

(2)样品可以无限期地储存在10%的福尔马林中(1份粪便+9份福尔马林),局限性较小。

(3)样品不能冷冻储存,不能用70%酒精或100%甲醇储存。

运输(1)样品应在冰箱中放置到4℃,然后包裹在冰上或冰袋上24~48h。

(2)将重要样品装入单独的塑料袋中,以免样品液体泄漏。

02内寄生虫检查方法大体检查用途黏稠度颜色血液、黏膜或寄生虫成虫技术直接用肉眼检查粪便或呕吐物备注肉眼检查不到(如潜血)要使用其他检查方法直接涂片:湿法制片用途原虫(如贾第鞭毛虫)寄生虫荷量(隐孢子虫)细菌(如螺旋体、弯曲杆菌)技术1、在载玻片上滴1滴盐水或水后,加上等量的粪便。

充分混匀粪便和水,在载玻片上涂抹制成一层薄膜。

2、移除任何大块粪便,盖上盖玻片以待检查。

3、先在10倍镜下检查寄生虫卵,40倍镜下检查原虫,100倍镜下检查细菌。

可以从盖玻片一侧滴加染色剂,以便更清楚地鉴定。

备注1、没有虫卵变形。

2、没有一种浓缩技术(小样本)会导致低数目。

3、活力可以成为一个有用的辅助诊断。

直接涂片:干法制片用途原虫(如贾第鞭毛虫)寄生虫荷量(隐孢子虫)细菌(如螺旋体、弯曲杆菌)技术1、在玻片上放小量的粪便,使用涂药棒将其薄薄散开。

检验科常见寄生虫感染检测方法

检验科常见寄生虫感染检测方法

检验科常见寄生虫感染检测方法寄生虫感染是一种常见而严重的健康问题,尤其是在发展中国家。

检验科的主要职责之一就是确保及时准确地检测出寄生虫感染,以便进行有效的治疗和控制。

本文将介绍一些常见的寄生虫感染检测方法,以帮助读者更好地了解这个领域的知识。

一、粪便检测法粪便检测法是检验科中最常用的一种检测方法,在寄生虫感染的早期诊断中发挥重要作用。

该方法通过检测患者的粪便样本中是否存在寄生虫卵或囊泡,来确定是否感染了寄生虫。

常见的粪便检测方法有直接涂片法、福尔马林浓度法、酸胆染色法等。

这些方法具有操作简便、成本低廉的特点,但需要训练有素的技术人员进行操作,以确保结果的准确性。

二、血液检测法血液检测法是另一种常见的寄生虫感染检测方法,适用于一些通过血液传播的寄生虫疾病的诊断。

该方法通过血液样本中的抗体或寄生虫特异性抗原的检测,来确定是否感染了寄生虫。

常见的血液检测方法有酶联免疫吸附试验(ELISA)、血原虫显微镜检查等。

血液检测法相对于粪便检测法来说,具有操作简便、便于大规模筛查的优势,但也需要专业设备和技术支持。

三、组织检测法组织检测法适用于一些疑难病例或特殊情况下的寄生虫感染检测。

该方法通过对患者的组织样本进行显微镜检查或基因分析,来确定是否存在寄生虫感染。

常见的组织检测方法有组织切片检查、PCR检测等。

组织检测法具有高度的准确性和可靠性,但需要手术取样或侵入性操作,适用范围较窄。

四、免疫学检测法免疫学检测法是一种新兴的寄生虫感染检测方法,通过测定人体的免疫反应来确定是否感染了寄生虫。

常见的免疫学检测方法有免疫荧光检测、免疫电镜检测等。

免疫学检测法具有敏感性高、特异性强的特点,能够检测出低浓度的寄生虫感染,但需要专业的实验室设备和操作技术。

五、分子生物学检测法分子生物学检测法是一种基于DNA或RNA的寄生虫感染检测方法,具有高度的准确性和特异性。

常见的分子生物学检测方法有实时荧光定量PCR、核酸杂交检测等。

临床寄生虫检验实验指导

临床寄生虫检验实验指导

第二节寄生虫感染的实验室诊断一、临床诊断临床诊断可以说作为一门科学或作为一种技能, 是临床医师知识、能力和素质的综合体现, 也是其获得执业资格的必备条件。

临床诊断学在临床医学教育中占有十分重要的地位。

无论病情是多么简单或者复杂, 完整的病史采集和详细的体检(查体)都是临床上作出正确诊断的第一步, 是构建临床诊断的要素。

(一)询问(采集)病史询问(采集)病史作为诊断疾病的第一步, 在临床上至关重要。

临床医生将其问诊所得到的资料进行归纳、整理和总结, 从而得到所需要的临床病史。

主诉是患者感觉最明显、最不舒服的症状或体征;询问(采集)病史主要是围绕主诉进行, 通常注意询问五项内容: ①起病情况及病因与诱因;②主要症状和特点;③伴随症状;④诊治经过;⑤一般情况。

对于寄生虫感染和寄生虫病的诊断, 除了注意询问上述五个方面问题外, 临床医师还应重注意询问与疾病有关的内容, 如患者居住地、生活方式、饮食习惯、感染过程等方面相关病史材料, 并对这些材料进行详细系统的分析, 最后得出初步的临床诊断。

我国地域辽阔, 不同地区寄生虫感染和寄生虫病表现有着明显的地方性, 季节性和自然疫源性。

我国肝吸虫感染(病)主要以广东珠江三角洲居民最为严重, 在这一地区当患者出现寒战、高热、肝大、上腹饱胀和腹泻等症状时, 应注意询问患者是否有生食或半生食淡水鱼虾的病史, 可以考虑患者有感染肝吸虫的可能;我国血吸虫病曾流行长江流域及以南的14个省、市和直辖市, 在这些地区如果有患者出现畏寒、发热、多汗、恶心、呕吐、腹痛、腹泻、黏液便或脓血便, 同时, 伴有淋巴结、肝、脾肿大和肝区压痛等体征时, 应注意询问患者近期是否有明显的疫水接触病史, 并依据相应的症状和体征考虑其感染有血吸虫病的可能;孕妇如与猫有密切的接触病史应警惕感染弓形虫病的可能。

近年来, 我国的寄生虫病病谱发生了很大的变化, 食源性、性源性及机会致病性等各种寄生虫病的发病率呈现上升趋势, 以及新发/再燃寄生虫病的出现与流行, 作为临床医生在对相关疾病作出临床诊断之前, 应仔细询问病史, 并根据患者临床症状和体征, 作出相应的临床诊断。

《寄生虫实验技术》课件

《寄生虫实验技术》课件
现代阶段
现代寄生虫实验技术已经形成了较为完善的体系,涵盖了从基础研究到 应用研究的多个领域,为人类健康和生态环境的保护提供了重要的技术 支持。
02
寄生虫实验技术的基本原理
寄生虫的生活史与繁殖
寄生虫的生活史
寄生虫的生命周期从其卵、幼虫、成 虫等阶段开始,每个阶段都有其特定 的特征和功能。了解寄生虫的生活史 是制定防治策略的关键。
02
诊断方法的便捷性
03
诊断方法的普及性
简化诊断流程,缩短诊断时间, 方便医生快速准确地为患者提供 治疗方案。
推广先进的实验技术,提高基层 医疗机构的诊断能力,使更多患 者受益。
寄生虫病治疗方法的探索
药物治疗
研究新的药物治疗方法,寻找更有效、更安全的 抗寄生虫药物。
非药物治疗
探索非药物治疗手段,如物理治疗、免疫治疗等 ,为患者提供更多治疗选择。
实验材料与方法选择
实验材料
寄生虫标本、显微镜、染色剂、培养基等。
实验方法
选择适合的寄生虫标本,采用显微观察、染色、培养等方法进行实验。
实验操作流程与注意事项
01
实验操作流程
02
准备实验材料和器具;
对寄生虫标本进行处理和制备;
03
实验操作流程与注意事项
进行显微观察、染色和培养等实验操作; 记录实验数据并进行分析。
寄生虫的繁殖
寄生虫通过无性繁殖或性繁殖进行繁 衍,了解其繁殖方式有助于研究控制 寄生虫传播的方法。
寄生虫的感染途径与致病机制
感染途径
寄生虫通过特定的方式侵入宿主,如经口摄入、接触感染等 。了解感染途径有助于预防和控制寄生虫病的传播。
致病机制
寄生虫在宿主体内引发一系列病理生理变化,导致宿主出现 症状甚至死亡。了解致病机制有助于制定有效的治疗方案。

寄生虫检测标准

寄生虫检测标准

寄生虫检测标准一、样品采集1、采样前准备:准备好采样工具和防护用品,如手套、口罩、工作服等。

2、采样地点:选择具有代表性的生产环节和环境,如养殖场、屠宰场、加工车间等。

3、采样数量:根据生产规模和检测需求确定采样数量,每个采样点至少采集5个样品。

4、采样方法:采用随机采样法,确保所采集的样品具有代表性。

二、样品处理1、样品标识:对采集的样品进行唯一标识,并记录采样时间、地点、样品类型等信息。

2、样品处理方法:将样品进行分类,根据不同样品类型采用不同的处理方法,如研磨、离心、过滤等。

3、样品处理记录:详细记录样品处理过程,包括使用的试剂、处理时间、处理温度等信息。

三、检测方法1、检测原理:根据所检测寄生虫的不同类型,选择相应的检测原理,如DNA检测、抗原检测、抗体检测等。

2、检测试剂:根据检测原理选择合适的检测试剂,如PCR引物、抗体检测试剂盒等。

3、检测仪器:选择适合的检测仪器,如PCR仪、酶标仪等。

4、检测步骤:按照试剂盒说明书或相关标准操作规程进行检测,确保每一步操作准确无误。

5、检测数据分析:根据试剂盒说明书或相关标准操作规程对检测数据进行解读和分析。

四、结果判定1、判定标准:根据相关标准和法规制定判定标准,如被检测样品中是否存在寄生虫、寄生虫数量是否超过规定阈值等。

2、结果报告:将检测结果以书面形式报告给相关人员,如生产厂家、监管部门等。

同时,将结果录入数据库,以便后续分析和查询。

3、结果解释:对检测结果进行解释,提供相应的建议和措施,以帮助生产厂家改进生产工艺和加强质量控制。

4、结果验证:定期对检测结果进行验证,以确保检测结果的准确性和可靠性。

如有需要,可委托第三方机构进行验证。

5、结果存档:将检测结果和相关记录存档保存,以便后续查阅和分析。

存档期限应不少于两年。

五、质量控制1、人员培训:定期对检测人员进行培训,提高其技能水平和操作规范意识。

培训内容应包括寄生虫检测的基本知识、操作技能、数据处理等方面。

寄生虫实验诊断方法

寄生虫实验诊断方法

寄生虫感染的诊断1临床诊断:A病史、症状、体征 B物理诊断:X线、B超、CT、MRI 2实验室检查:A病原学方法:粪便检查;血液检查;排泄物分泌物检查;其他器官组织检查B免疫学方法 C分子生物学方法(一)粪便检查:直接涂片法;厚涂片法;浓集法;毛蚴孵化法;肛门拭子检查法;钩蚴培养法;虫卵计数法;定量透明法;带绦虫孕节检查法。

粪便检查是诊断寄生虫病常用的方法。

要取得准确的结果1)粪便必须新鲜,送检时间一般不宜超过24小时; 2)盛粪便的容器要干净,并防止污染与干燥; 3)粪便不可混杂尿液等,以免影响检查结果; 4)取材部位:尽可能取病变部位。

直接涂片法:用以检查蠕虫卵、原虫的包囊和滋养体。

方法简便,适用范围广,但检出率相对较低。

一般要求连续作3次涂片,可提高检出率。

⑴蠕虫卵检查:方法:一般在低倍镜下检查,如用高倍镜观察,需加盖片。

应注意虫卵与粪便中异物的鉴别。

虫卵都具有一定形状和大小;卵壳表面光滑整齐,具固有色泽;卵内含卵细胞或幼虫。

⑵原虫检查:1)活滋养体检查:方法同查蠕虫卵。

注意事项。

2)包囊的碘液染色检查:方法同上,以一滴碘液代替生理盐水。

若同时需检查活滋养体,可在用生理盐水涂匀的粪滴附近滴一滴碘液,再盖上盖片。

涂片染色的一半查包囊;末染色的一半查活滋养体。

3)隐孢子虫卵囊染色检查:目前较佳的方法为金胺酚改良抗酸染色法。

对于新鲜粪便或经10%福尔马林固定保存的含卵囊粪便都可用此法染色。

染色过程是先用金胺-酚染色,再用改良抗酸染色法复染。

厚涂片透明法(改良加藤法)取约5mg粪便,置于载玻片上,覆以浸透甘油-孔雀绿溶液的玻璃纸片,轻压,使粪便铺开(20×25mm)。

待粪膜稍干,即可镜检。

玻璃纸准备:将玻璃纸浸于甘油-孔雀绿溶液中,至少浸泡24小时,至玻璃纸呈现绿色。

使用此法需掌握粪膜的合适厚度和透明的时间。

如粪膜厚,透明时间短,虫卵难以发现;如透明时间过长,则虫卵变形,也不易辨认。

沉淀法:原虫包囊和蠕虫卵的比重大可沉集于水底,有助于提高检出率。

检验科寄生虫学常见检测与分析方法

检验科寄生虫学常见检测与分析方法

检验科寄生虫学常见检测与分析方法大标题:检验科寄生虫学常见检测与分析方法引言:寄生虫病是一类由寄生虫引起的传染病,严重危害着人类和动物的健康。

在检验科寄生虫学领域,准确、快速地检测和分析寄生虫是至关重要的。

本文将介绍常见的检测与分析方法,旨在提供一些有用的参考。

一、细菌学常见检测与分析方法1. 直接涂片法直接涂片法常用于分析寄生虫卵或幼虫,通过显微镜观察来确定寄生虫种类和数量。

该方法简单、快速,但需要熟练技术操作。

2. 钩虫培养法钩虫培养法适用于检测钩虫卵的孵化及幼虫发育情况。

通过培养基中的条件,如温度、湿度等,观察寄生虫的生长情况并进一步分析其特性。

3. 血液检测法血液检测法常用于检测寄生虫在血液中的存在,如疟原虫。

这种方法通过血液细胞计数器或显微镜来观察血涂片中的寄生虫,进而进行分析和诊断。

二、分子生物学常见检测与分析方法1. PCR技术PCR(聚合酶链式反应)技术是一种灵敏且特异的检测方法,可用于定性和定量检测寄生虫DNA。

该方法准确度高,且可以同时检测多个寄生虫种类。

2. 实时荧光定量PCR技术实时荧光定量PCR技术结合了PCR技术和荧光探针技术,能够准确测量PCR体系中的DNA含量,并实时监测PCR反应的进程。

该方法操作简便,结果可靠。

3. 微阵列技术微阵列技术可同时检测多种寄生虫,并定性和定量其存在。

通过该技术,可以快速获得大量寄生虫检测结果,并进一步进行生物信息学分析。

三、免疫学常见检测与分析方法1. 酶联免疫吸附试验(ELISA)ELISA是一种常见的免疫学检测方法,可用于检测寄生虫特异抗原或抗体。

该方法操作简单、敏感,广泛应用于临床和实验室诊断。

2. 免疫荧光法免疫荧光法通过对标本中寄生虫特异抗原或抗体与荧光标记物的结合情况观察,来判断是否存在寄生虫。

该方法具有高灵敏度和特异性。

3. 红细胞凝集试验红细胞凝集试验适用于检测与红细胞寄生虫相关的抗体。

该试验通过观察抗原与抗体间的聚集情况来确定寄生虫感染的存在与程度。

028-寄生虫(虫卵检查)检测原始记录

028-寄生虫(虫卵检查)检测原始记录
永修县疾病预防控制中心YXCDC(原)-028-01
寄生虫(虫卵检查)检测原始记录
共页第页
样品编号
收样日期:20年月日
采样单位
检验日期:20年月日
样品类别
□粪便□
检测检测依据
《全国临床检验操作规程》(卫生部第二版)
检测方法
□直接涂片法□饱和盐水漂浮法
仪器名称
操作流程:
□直接涂片法:滴加生理盐水1-2滴于载玻片上------挑取一小块粪便在盐水中涂抹成直径1cm的粪便薄膜-----镜检。
检验编号
采样编号
结果
检验者:复核者:检毕日期:20年月日
□肛门拭纸检查法:1.5cm×1.5cm透明胶纸---在肛门四周皮肤用力擦拭4-5次---取下胶纸,粘面向下平贴于载上,镜检。
□饱和盐水漂浮法:取蚕豆大小粪便于青霉素瓶中----加入少量饱和盐水,将粪便充分混合----再加饱和盐水至瓶口----用载玻片覆盖瓶口----静置30~40分钟,平执载玻片向上提,翻转后镜检。
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

寄生虫基本检验方法操作规程第1版第1次修订实施日期:2011年5月1日1、目的依据《寄生虫病检测检验技术》-2005建立寄生虫基本检验技术检验方法操作规程,保证测定结果的准确性。

2、适用范围本法适用于常见寄生虫检验测定。

3、责任使操作者熟悉本规程,并在具体样品检验中,严格遵照操作,确保检测结果准确。

4、内容1一般检查法1.1粪便的检查粪便检查是确定肠道寄生虫病诊断的最主要的方法,也是属于临床化验室常规检查的方法之一。

1.1.1直接涂片法此法用于检查虫卵、滋养体和包囊。

为了避免遗漏,一般需连续检查三张涂片。

此法的优点是操作简便,迅速。

缺点是阳性率较低,视野中杂质较多,虫卵或原虫少时不易查到。

1.1.1.1生理盐水涂片法:操作方法(1)取洁净的载玻片一张,于中央滴1~2滴生理盐水。

(2)用便签挑取约火柴头大小的一块粪便(约0.1g),置盐水中涂抹均匀,成半透明的混悬液,其厚薄以透过书上的铅字为宜,如果太厚阻碍光线的透过,太薄则影响检查效果(必要时加盖玻片)。

(3)先用低倍镜观察,从边缘开始来回顺序推动移动器,仔细寻找虫卵。

(4)找到虫卵后,应将虫卵移至视野中央,辨认是何虫卵(必要时可换高倍镜进一步观察)。

注意事项:(1)检查痢疾阿米巴原虫时,要挑取带有脓血的粪便。

(2)检查原虫包囊时,所取的粪便应再少一些,粪膜涂的再薄一些,否则包囊不易找到。

(3)检查原虫滋养体时,要注意保温,避免化学药品和尿的污染,影响滋养体伪足的运动。

(4)防止涂片变干,可随时滴加生理盐水。

一般不用油镜观察。

(5)某些植物细胞很像虫卵,是要加以鉴别,植物细胞的内部结构不象虫卵那样规则,外形多扁平,用嘴轻吹时,植物细胞往往易翻动或变形。

(6)要注意虫卵与人类酵母菌的区别,很易与包囊混淆,酵母菌为无色圆形或卵圆形小体,大小不一,内含一个较大的透明体,其四周有狭窄的细胞浆,浆内含有少数折光形小体和核,有时透明体偏于一边。

如用蒸馏水稀释粪便涂片,酵母菌即被裂解消失,而原虫包囊仍存在。

寄生虫基本检验方法操作规程第1版第1次修订实施日期:2011年5月1日(7)只有雄性寄生虫也无虫卵,切勿随意报告阴性结果。

(8)采集的标本要新鲜,一般不宜超过一昼夜,否则原虫或某些虫卵易变形或者死亡,引起误诊;采集标本的容器要清洁,避免与化学药物或尿混合,否则原虫滋养体很快死亡,影响检出率。

1.1.1.2碘液涂片法:用碘液代替生理盐水,适用于肠道原虫的检查。

方法(1)检查原虫包囊时在干净的载玻片上滴一滴碘液,然后取少许粪便,于碘液中,涂抹均匀,便可检查。

(2)检查原虫活滋养体时,可在用生理盐水涂匀的粪膜附近滴一滴碘液,取少许粪便在碘液中涂匀,勿使两块粪膜相混合,盖上盖玻片,便可观察。

这样的涂片一半染色,检查包囊,另一半不染色,可以检查活滋养体。

试剂:1、碘液染色液:碘化钾4g碘2g蒸馏水100ml先将碘化钾溶于少量水中,然后加碘溶解后,再加水到100ml。

2、碘伊红染色液碘液:碘化钾5g溶于生理盐水100ml,加碘至饱和。

伊红液:伊红饱和于生理盐水中。

应用时将上述两液等量混合。

注意事项:(1)碘易升华,放置数日变淡、均以原液瓶底有碘片沉集,每日取少量上清液使用为宜。

(2)碘液过浓,易使标本沉集成块且使原虫染色过深,而致构造不大明显,故在使用时,注意调节碘液量。

(3)碘、伊红染色时背景较深,不如使用碘液时背景清楚。

1.1.1.3快速染色法快速染色法用于肠道原虫的快速诊断。

固定液的配制丙酮50ml冰醋酸50ml甲醛溶液10ml邵氏液890ml以1.25g酚复红与0.5g耐绿混合于上述液中即可使用。

混合液应贮存于棕色玻璃瓶中,严密封口,二个月后染液仍稳定,染色结果不变。

操作方法(1)用棉签将粪便在玻片上涂成薄层。

(2)用滴管将混合液滴在粪涂片上,并将粪膜完全盖住,使之染色并固定。

(3)将载玻片在酒精灯上慢慢加热,待蒸汽出现后,即可缓慢地在火焰上经过2~3次。

寄生虫基本检验方法操作规程第1版第1次修订实施日期:2011年5月1日(4)立即用自来水轻轻冲洗。

(5)分别依次放置于50%及70%酒精中,每次各需时30秒钟。

然后放在95%及纯酒精中,各15秒钟,最后置于二甲苯中透明1分钟。

(6)封固于香胶中,即能做镜检。

用此法染成的标本外观与苏木素染色法相同,呈蓝紫色,核的微细构造与拟染色体特别明显,所需时间仅2.5分钟,不需要特殊的技巧,而且保存液与固定液混合于染液中。

染色标本可保存两个月,染色的特征上都没有明显的改变。

1.1.1.4煌焦油蓝、伊红染色法:此种染色法是一种活体湿片快速染色法,不影响阿米巴原虫的活力,着色不明,便于检出虫体和鉴定虫种。

试剂的配制甲液:煌焦油蓝0.2g氯化钠 6.35g枸橼酸钠 1.1g饱和氯化钠溶液0.1ml蒸馏水100ml乙液水溶性金红 1.0g蒸馏水100ml用时将甲、乙两液等量混合。

操作方法:(1)在干净的载玻片上加一滴生理盐水。

(2)用便签挑取少许粪便的粘液部分,与生理盐水混合,涂成适当的粪膜。

(3)加上述混合染色液一滴,混合之,覆置盖玻片。

(4)先用低倍镜找到,然后换高倍镜鉴定。

1.1.1.5加藤氏法1.1.1.5.1检测包组成:1、复合染液1瓶20毫升/瓶2、定量板100片3、刮片100片4、尼龙网100张5、玻璃纸100张(22毫米*30毫米)6、载璃片100片1.1.1.5.2操作步骤:1、将尼龙绢片置于待检粪样上,用塑料刮片在其上轻刮,使细粪渣透过尼龙绢孔上,寄生虫基本检验方法操作规程第1版第1次修订实施日期:2011年5月1日取过滤后的粪便。

2、将定量板放在载玻片中部,然后把刮片上的细粪渣填入定量板的圆孔内,使其填满全孔并抹平、小心移走定量板,使粪样留在玻片上。

3、取1张浸泡好的亲水玻璃纸,抖掉多余的透明液,盖在粪样上,用一块较厚的载玻片轻压,使粪便均匀地展开于玻璃纸下。

4、将制备好的加藤片放于标本盒内(内垫吸水纸)。

5、编号后置室温25℃、湿度75%时约1小时或30~36℃温箱中约半小时后镜检。

1.1.1.5.3镜检及结果判断:1、镜检:将透明好的加藤片置光学显微镜的载物台上,在低倍镜(10×)下镜检。

镜检仔细检查每一个视野,并特别注意与未受精蛔虫卵的鉴定。

计数全片虫卵(计数原则:数上不数下,数左不数右)。

2、加藤片的虫卵计数:以镜检每片检出的虫卵数的24倍数(一粪一检),即为每克粪便虫卵数(EPG)。

计算3张加藤片的血吸虫卵数分别为A、B、C,每克粪便虫卵数(EPG)为:(A+B+C) ×8(一粪三检)。

1.1.1.5.4注意事项:1、每份粪样需做三张涂片(一粪三检,以提高检出率)2、裁好的玻璃纸要捻开一片片放入透明液中,切忌整叠放入,以免内部浸不透,而影响透明效果;浸泡时间不能少于24小时。

3、对薄壳虫卵,如钩虫卵等的透明时间最长不能超过2小时,避免因透明过度而漏检。

4、粪便过硬时,加少许清水或透明液浸泡片刻,再行刮取。

5、定量板一定要置于载玻片的中部,如果定量板偏于一侧,则制片后玻片边缘的粪膜不能进入镜检视野内而产生漏检。

6.制作标本时,应防止过分干燥,以免虫卵变形或破裂,以致影响虫卵鉴别。

7.粪渣透明的速度取决于温、湿度和粪膜的厚度,一般放置室温即可,冬天则需置温箱中以加快透明。

如粪膜过厚,则不易寻找虫卵1.1.2浓集法:用较多的粪便,将其中的虫卵或包囊集聚在一个小范围内,便于检出,其阳性率比直接涂片法高;缺点是较直接涂片法复杂,时间也较长些。

浓集法又分为漂浮法和沉淀法。

寄生虫基本检验方法操作规程第1版第1次修订实施日期:2011年5月1日1.1.2.1漂浮法利用虫卵和包囊的比重小于液体比重的原理使线虫卵或包囊浮集于液面,以增加单位面积虫卵和包囊的含量,提高检查效果。

通常用的方法有饱和盐水漂浮法和硫酸锌离心浮聚法。

(1)饱和盐水漂浮法:试剂的配制食盐40g蒸馏水100ml加热至沸,冷后取上清液使用。

如每95ml内加5ml40%甲醇溶液,可起固定的作用,有利于吸虫卵的上浮。

操作方法○1取0.5~1g的粪便放入漂浮瓶内(一般可用链霉素瓶代替)。

○2加入少量的饱和盐水(约为容器的1/3即可),用便签搅拌成均匀的混悬液。

○3再加入饱和盐水至漂浮瓶口,使液面略高于瓶口而未溢出为止。

○4在瓶口盖一载玻片,静置10~15min后,将载玻片迅速上提翻转,立即镜检。

注意事项○1此法适用于线虫卵的检查,如果漂浮时间过长,可使虫卵及包囊变形,甚至下沉。

○2浮集于表面的杂质在放置载玻片前,要清除掉,否则影响检查结果。

(2)硫酸锌离心浮聚法操作方法○1取1份粪便与10份温水调合成混合液。

○2取两层纱布过滤于离心管内。

○3用2000~2500r/min的离心速度离心1min,弃去上层液体,再加水少许,将沉淀物调和,再离心,反复2~3次,至水清为止。

○4弃去上清液,加入硫酸锌液(比重1.180即33%的溶液)少许调匀,再加入硫酸锌溶液,随加随调匀,使液面距管口约1cm即可。

寄生虫基本检验方法操作规程第1版第1次修订实施日期:2011年5月1日○5再离心沉淀1min。

○6用白金耳取表面的液体于玻片上镜检。

1.1.2.2沉淀法利用虫卵比重大于水的原理,使其下沉在水底。

缺点是对于比重略大于1的原虫包囊效果较差,检查费时较多。

沉淀法又分自然沉淀法和离心沉淀法。

(1)自然沉淀法○1取20g左右的粪便放在烧杯内,加少许清水充分搅拌,再加入20倍的水,边加水边搅拌。

○2用二层纱布或60~80目的铜筛将其滤入500ml的三角量杯内。

再加满水,静置20~30分钟。

○3弃去上清液,重新加满清水,静置15~20分钟,如此反复数次,至上清液清晰为止。

○4弃去上清液,取沉渣镜检。

(2)离心沉淀法用离心机离心,可加速虫卵下沉,缩短检查时间。

操作方法○1取黄豆粒大小的粪便一块,加入10倍的清水,搅拌成混悬液。

○2用二层纱布或60~80目的铜筛将其滤入离心管内。

○3以1500~2000r/min速度离心1~2min,弃去上清液,加入清水,调匀后再离心沉淀,至上清液清晰为止。

○4取沉渣镜检。

注意事项○1所取粪便必须充分搅匀。

○2离心机启动要逐渐加速,停止时要逐渐减速,避免因其骤起或骤停使离心管互相撞击而破碎或扬起沉淀物。

○3弃去上清液时动作要快,避免沉淀物随上清液流出。

(3)消化法此法为目前检查肝吸虫卵常用的方法,检出率较高。

寄生虫基本检验方法操作规程第1版第1次修订实施日期:2011年5月1日○1取10%氢氧化钠溶液5ml,置试管内。

○2取粪便1g放入试管内,充分搅拌,静置1h。

○3吸取管底沉渣,滴于载玻片上镜检。

(4)醋酸—醚浓集法本法对虫卵浓集颇佳,醋酸能溶解碳酸盐类,消除粘液物质及使一部分脂肪水解,醚能溶解剩余的脂肪及渗透混悬物质,使其比重减轻而浮于液面易与虫卵分离。

相关文档
最新文档