外植体采集时期与冷藏处理对马尾松愈伤组织诱导的影响

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马尾松幼胚培养及幼茎愈伤组织诱导研究

马尾松幼胚培养及幼茎愈伤组织诱导研究

马尾松幼胚培养及幼茎愈伤组织诱导研究马尾松(Pinus massoniana Lamb.)是重要的乡土速生针叶树种,有较高的综合利用价值,探索该树种的离体繁殖技术,建立快速繁殖体系,对该树种的遗传改良研究和开展基因工程研究工作奠定良好的理论和技术基础。

本文以马尾松幼胚、实生苗的幼嫩茎段为外植体,进行器官发生和愈伤组织培养研究,探讨了不同因素对器官发生或愈伤组织产生的影响。

主要研究结果如下:1.本研究分别采用了马尾松幼胚和幼嫩茎段作为外植体,在灭菌过程中,我们分别对它们进行了不同的处理,并比较分析了它们各自的灭菌效果,结果表明:在两种外植体的不同处理中,酒精在灭菌过程中作用比较显著,灭菌时间过短,灭菌不彻底,外植体容易受到感染;灭菌时间过长,虽然灭菌效果好,但由于外植体比较幼嫩容易受到损伤,导致外植体死亡。

在对马尾松幼胚的灭菌过程中,最佳的消毒方法为:75%酒精表面灭菌30s,之后再用0.1%升汞浸泡8min,最后用无菌水冲洗5~6次;对马尾松幼苗灭菌最好的方法是采用75%的酒精浸泡20s,0.1%的升汞浸泡8min,最后用无菌水冲洗5~6次,其污染率和死亡率均最低,仅为3.71%。

2.在马尾松的直接器官发生的培养中,防治褐化的有效途径是在培养基中添加0.15g/LVc,且两天转接一次,以缩短外植体在原来培养基上的停留时间,减少褐化的几率。

同时通过大量的比较分析,得出:在起始培养阶段,WPM培养基中的萌发率高于培养基GD和DCR,且其生长状况较好。

BA、KT和NAA最适合的浓度水平分别为1mg/L、0.5mgm和0.15mg/L,NAA浓度过高使愈伤化程度加大。

具体的来说,比较适合马尾松丛芽诱导的培养基组合为WPM+lmg/L BA+0.5mg/L KT+0.15mg/L NAA+0.15g/L Vc;在丛生芽的增殖和伸长培养中,最适宜的培养基组合是WPM+0.15mg/L NAA+0.15g/L Vc+0.5g/L Ac;生根培养中,效果最好的培养基组合为WPM+2mg/L IBA+0.15mg/L NAA+0.5g/L Ac,且生根培养基中添加蔗糖的浓度以20g/L为宜。

外生菌根真菌提高马尾松幼苗的抗旱性研究进展

外生菌根真菌提高马尾松幼苗的抗旱性研究进展

外生菌根真菌提高马尾松幼苗的抗旱性研究进展【摘要】外生菌根真菌是一种重要的共生微生物,对植物的生长发育和环境适应能力起着重要作用。

本文主要探讨外生菌根真菌对马尾松幼苗抗旱性的研究进展。

从外生菌根真菌对马尾松幼苗抗旱性的影响、提高水分利用效率的机制、与植物激素的互作关系、抗氧化能力的研究以及在改善土壤环境中的作用等方面进行了综述。

研究结果表明,外生菌根真菌能显著提高马尾松幼苗的抗旱性,通过调节植物的生长发育和代谢过程,增强植物的抗氧化能力,提高水分利用效率等方式来帮助植物应对干旱胁迫。

未来的研究应进一步深入探讨外生菌根真菌在马尾松幼苗抗旱性中的应用潜力,为改善植物干旱适应能力提供理论和实验支持。

【关键词】外生菌根真菌、马尾松幼苗、抗旱性、水分利用效率、植物激素、抗氧化能力、土壤环境、应用潜力1. 引言1.1 研究背景马尾松(Pinus massoniana)是我国南方常见的树种,具有较强的生态适应性和经济价值。

由于气候变化等因素的影响,马尾松幼苗常常面临干旱压力,导致幼苗生长受限及林木大量死亡。

寻找提高马尾松幼苗抗旱性的有效途径成为当前研究的热点之一。

外生菌根真菌是一种与植物共生的微生物,能够通过与植物根系形成共生结构,提供水分和养分供给,进而增强植物对干旱的抵抗能力。

已有研究表明,外生菌根真菌可以有效改善植物的生长状况,提高抗旱能力。

关于外生菌根真菌对马尾松幼苗抗旱性的影响及机制仍有待深入研究。

为了深入了解外生菌根真菌在提高马尾松幼苗抗旱性中的作用机制,本研究将系统探讨外生菌根真菌与马尾松幼苗之间的互动关系,以期为解决马尾松苗木生长受限问题提供科学依据和技术支持。

1.2 研究目的本研究旨在探讨外生菌根真菌对马尾松幼苗抗旱性的影响机制,为改善马尾松幼苗的抗旱能力提供有效途径。

具体目的包括:1. 研究外生菌根真菌对马尾松幼苗抗旱性的影响:通过实验观察外生菌根真菌接种对马尾松幼苗生长情况、生理指标和抗旱性能的影响,揭示外生菌根真菌在提高马尾松幼苗抗旱性方面的作用机制。

激素和外植体类型对新疆雪莲愈伤组织诱导的影响

激素和外植体类型对新疆雪莲愈伤组织诱导的影响

杨林 等 L、 雪梅 等 _建 立 了新 疆 雪 莲组 织 培 养 体 行 变量分析 ( oa , 7胡 ] 8 ] Av v)在确定 F值 下 , 00 1 平 以 .0 水
收 稿 日期 :0 90 —5 修 回 日期 :0 91—2 2 0 —50 ; 2 0 —10
* 国家 自然科 学 基 金 ( 0 6 0 2 0 6 0 4 、 3 9 0 9 ,3 9 0 4 ) 科技 部援 疆 计 划 项 目 ( 0 8 0 0—9 、 疆 维 吾 尔 自治 区 高 校 科 研计 划 重 点项 目 2 0 4 1 23 ) 新 ( J DU2 0 S 7 、 XE 0 7 2 ) 新疆维吾尔 自治区重点实验室开放课题 ( YS 2 320 —1 、 XJ 0 0 —0 80 ) 新疆师 范大学研究生创新基金资助 **通讯作者. - i in ig i@tm.o E ma :j bn qn o cr l a n 庞红霞 , ,9 3年生 , 女 18 硕士研究生.研究方 向: 植物分 子生物学.Ema :10 5 5 9 q cr - i 5 0 9 9 @q.o l n
无 节制地 毁灭性 盗 采 和非 法 收购 , 成 野 生新 疆 雪 0 1 的 Hg 1消 毒 1 n 再 用 无 菌 蒸 馏 水 冲洗 造 . C。 0mi,
~5 接种 到铺 有 3层 滤 纸 的 培 养 皿 中, 皿 加 每 莲 生长速度 远远 低 于采 挖 速 度 , 这 一 珍 贵物 种 资 3 次 , 使 源遭 受严重 破坏 , 原生 地资源 日益枯 竭 , 区域性 资源 无菌蒸 馏水 7mL, (5 )o 发 , 将 萌发 在 2 ±2 C萌 7d后 / o 枯萎 , 难以满足市场 的需求。随着组织培养技术 的 后 的种子接 种到 12MS培 养基 上生 长 。新 疆 雪莲 不断 成熟 , 为新疆 雪莲 快 速 繁 殖 和种 质 资 源 的保 存 成苗后 , 取无菌苗 叶片 , 和根 , 叶柄 剪成 0 3 . m2 . ~O 4c 提供 了行之有 效 的途径 。因此 , 展 新疆 雪 莲 组 织 大小的外植体 , 到 MS附加 不 同激素 的诱导 培养 开 接种 (5 )C暗培养 ,8d 1 左右统计诱导 率 。 培养 技术 的研 究 , 索 适 合 新疆 雪 莲 植株 再 生 的 培 基 上 ,2±2 o 探 诱导率( )= 产生愈伤组织的外植体块数/ =( = 总 养条件 , 对实 现新疆 雪 莲 合 理开 发 利 用具 有 重 要 的

马尾松幼胚胚性愈伤组织诱导的研究

马尾松幼胚胚性愈伤组织诱导的研究
( . h lo 1 Sc oo fFor s r Ce r lSou h U n v  ̄ iy o e ty, nta t i e’ t fFor s r n c olgy, a s s e t y a d Te hn o Ch ng ha
41 04, un n, 00 H a Chi na;2. p r m e tofPlnt Soi a De a t n a , l nd Env r nm e tSce e , n v r iy o io n inc s U i e st f

要 : 利 用 马 尾 松 未 成 熟 胚 为 外植 体 , 预 备 实 验 的基 础 上 . 过 对 不 同 时 期 不 同 家 系 马 尾 松 幼 胚 的采 集 、 任 通 接
种 , 导 产 生 胚 性 愈 伤 组 织 , 算 实 验 数 据 , 用 S S 1 行 数 据 分 析 。结 果 表 明 : L 诱 计 利 P S 3进 以 P为 基 本 培 养 基 , 易 诱 最
21 0 0年 4月
马尾 松 幼 胚 胚 性 愈 伤 组 织 诱 导 的 研 究
靳 小 翠 , 志 辉 杨 模 华 张 冬 林 。 丁 贵 杰 李 , 。 ,
( . 中 南林 业 科技 大 学 林 学 院 ,湖 南 长 沙 4 0 0 ; .美 国缅 因 大 学 植 物 、 1 10 4 2 土壤 和 环 境 科 学 系 Man , A,澳 元 露 4 6 ;3 ie US 4 9 .贵 州 大 学 林 学 院 ,贵 州 贵 阳 5 0 2 ) 5 0 5
Ab t a t Ba e n t elm i r xp r m e s w e c lct h m m at r m br s ofPi usm asoni a r sr c : s d o he pr i na y e e i nt , ol e ed t e i ue e yo n s an fom 3 s e r esa f e e e i e d te tdif r ntp rods t en i oc l t d t em n b c sa c di o t if r n eso ee r e nd c — ,h n uae h i athe c or ng t he d f e e c fs d t e sa ol lctd— rod he LP e i c l u a e a d nays d t n c i iis of e br on c c lu wih SPS s t e e pe i son t m d a; a c l t d n a l e he i du tv te m y i a l s t S1 3 of - war Th e uls s w t tThe m os s ia e tm e o i duc t e. e r s t ho ha t u t bl i t n e he em br oni a ls y c c lu wa r s f om m i Aprlt l e d— i o at M a i hi ero he dif r nc s e w e n f m ii a n y,n t s p i d t f e e e b t e a l esw s onsgniia . i fc nt The i u i tesw e e d ln ng s e y nd ctvii r eci i t p b

不同处理方式对红松愈伤组织诱导及增殖的影响

不同处理方式对红松愈伤组织诱导及增殖的影响

பைடு நூலகம்NO . 021 V2
Vo. 4 N . 12 o 6
不 同处理方式对红松愈伤组织诱导及增殖的影响
曹 焱 戴伟男 戴凤海
(. 2 黑龙江林业科学研 究所 , 哈尔滨 10 8 ;. 5 0 22 黑龙江省林木种苗管理总站 , 哈尔滨 10 9 ) 5 00


要: 以红松成 熟合 子胚 为外植体 , 用不同的处理 方式进行愈 伤组 织的诱导及增殖研 究 , 出以下结论 : 得 经过
关键词 : 红松 ; 有效愈 伤组 织; 增殖 中图分 类号 :7 227 ¥9 .4 文献标 志码 : A 文章编号 :6 4— 3 1 2 2 )6— 0 5— 3 17 6 4 (0 1 0 00 0 伤组织增殖 的影 响。 12 3 添加 A A、E 甘露醇 处理 .. B P G、
则成为针 叶 树 体 细胞 胚 胎 发 生 的 一个 关 键 环 节 _ 。根据 1 J Am so g r t n 标准将得到 的愈伤组 织分为 3类 : 型 , r I 结构 致密 、 复杂多样 、 生长缓慢 , 通过器官发生途 径分化 芽和根 , 产生胚 状 体较少 , 不易长 期继 代 ; Ⅱ型 , 构松 散 、 结 易碎 、 呈颗粒 状 、
有胚 性感 受态 的细胞组织 , 因此有 效愈伤 组织 的增 殖与更新
在红松愈 伤组 织增 殖培养 阶段 , 究 A A、E O 0和 研 B P G6 O 甘露醇对 愈伤 组织及 有效 愈伤 组织 增殖 的影响。分别添 加
2 3 5、 0、 5 、 、 2 2 g・L~ AB 2 2 2 4 、 0 g ・L~ P 0 0; A; 0、 5、 0、 0 7 EG 6 0
溶液 ( 0 2 、O 5 、0 L ) P G 6 0 ( 0 7 、0 、0 、 1 、0 3 、0 7 g・ 、 E 0 0 5 、0 20 2 0

贮藏温度和时间对马尾松花粉保护酶活性及萌发率的影响

贮藏温度和时间对马尾松花粉保护酶活性及萌发率的影响

2 C r s e tv l . Du i g t r g p ro O o e p ciey rn s o a e e i d t e e mi a i n r p ri n f o l n e r a e s g i c n l wh n h h g r n t p o o o o p l d c e s d i n f a ty o t e i e t e
Ta i n u n Ja h i
( u n x oe r c n eA a e y N n ig 5 0 0 ) G a g i rs yS i c c d m a nn 3 0 2 F t e
Ab ta t I hsp p r n et ae mp cso o rs rg e eaue ( o m tmp rtr , C ,一1 ℃ a d sr c : n ti a e ,Iiv s g td i a t ffu t a etmp rtrs ro e eaue 4 o i o 0 n
a tv t s o OD , c i ii f S e POD n a d CAT. Re u t h we h t P. ma s n a a p le o l e i i h g r n t n p o o to s ls s o d t a so i n o l n c u d r ma n a h g e mi a i r p ri n o a d sr n e it n e t x d t n f r 7 d y t t e r o t mp r t r 2 6 a s a C n 8 a s a —l C r n to g r s sa c o o i a i o 2 a s a h o m e o e a u e. 1 d y t 4 o a d 2 6 d y t O o o

不同外植体和激素对银杏愈伤组织诱导和生长的影响

不同外植体和激素对银杏愈伤组织诱导和生长的影响

Ma .0o r2 8
第2 3卷
第 1 期
V0 . 3 N0. 12 1
不 同外 植 体 和 激 素 对 银 杏 愈伤 组 织诱 导 和 生长 的影 响 *
杜希华 一 孙秀玲 郝 岗平 侯福林 )
(1山东师范大学生命科学学 院, 0 1, ) 2 04 济南 ; 2泰 山医学院生物技术教研室 , 1 0 山东泰安∥第一作者 4 岁 , , 5 ) 2 0 , 7 0 2 男 副教授 )
统研究 了外 植体类 型、 性别 、 生理状 态 、 培养基激素配比及培养条件等 因素对银杏愈伤组织诱 导和生长 的影响 , 为探讨愈伤组 织生长与银杏黄酮和内酯类合成之间的相互关 系打下 了基础 , 并可 为进一步 的工业化生产 提供实验依据 .
1 材 料与方 法
11 材 料 银杏种 子购 自山东省郯城县银杏生产基地 . . 银杏茎段和叶片采 自山东师大校园内的成树 ( 树龄约 5 年 , 5 按雌 雄树定株采集 ) . 12 外植体消毒、 . 接种和培养 12 1 胚不 同区段 .. 剥去种子的骨质中种皮 , 7 %乙醇中浸泡 1 , 在 5 5s再用 0 1 g1灭菌 8mn 无菌水冲洗 4— .%H C2 i, 5次 , 于无 菌条件下剥离胚 , 接种 于不含激素的 MS 培养基上使其萌发 , 后切取萌发胚的不 同区段 , 5d 分别 将子叶 、 芽、 胚 胚轴 、 胚根 接种 于诱导培养基上 , 培养 . 122 茎段和 叶片 从雌 、 .. 雄株上剪取生长旺盛 的当年生枝条 , 将幼嫩枝梢 和叶片分开 , 流水冲洗后 , 灭菌( 方法 同上 ) 在超 , 净工作 台上将茎段切成 08 . c . ~10 m的小段 ( 不带腋芽) 叶片切成 0 5c , . m×10c . m的小块 , 分别接种于诱导培养基 中. 13 愈伤组织的继 代培 养 培养 3 . 0d左右, 将诱导形 成的愈伤组织转入适宜的继代培养基中, 进行 扩大培养 . 14 培养条件 .

不同外植体及冷藏处理对华中枸骨组织培养的影响

不同外植体及冷藏处理对华中枸骨组织培养的影响

不同外植体及冷藏处理对华中枸骨组织培养的影响作者:范淑芳来源:《安徽农业科学》2014年第07期摘要[目的]研究不同外植体及冷藏处理对华中枸骨组织培养的影响。

[方法]以华中枸骨带芽新梢茎段为外植体,考察外植体的取材时间、部位以及4 ℃冷藏处理对其初代培养的影响。

[结果]华中枸骨以带芽的新梢茎段作为外植体进行组织培养时,以春季采取植株中上部枝条为宜,其中春季萌条的芽增殖倍数可达到4,中上部萌条的芽萌动率可达到45%。

适当的冷藏处理对外植体的消毒以及芽的萌动有利,4 ℃冷藏处理14 h后的消毒成功率最高,可达到92%;冷藏处理22 h的芽萌动率最高,可达到18%。

[结论]华中枸骨组织培养中外植体最好于春季选取植株中上部萌发的新梢顶芽;华中枸骨芽的萌动率随冷藏时间的增加呈线性增长,可能与低温打破休眠有关。

关键词华中枸骨(Ilex centrochinensis);组织培养;外植体;冷藏处理中图分类号S188文献标识码A文章编号0517-6611(2014)07-02000-02(Ilex)植物,又称针齿冬青、小果冬青,因其形态特征及其功用又被形象地称为苦荆茶[1]。

该植物枝叶繁茂,碧绿常青,黄花红果,是一种优良的园林绿化植物;同时,该植物富含多种营养元素,可以药茶两用,具有较高的保健功能。

该植物资源稀少,种子繁殖困难,扦插繁殖也难生根,关于其组培快繁的研究鲜有报道。

笔者主要针对带芽新梢茎段的取材季节、部位以及外植体冷藏处理展开系统地试验,以期找到最佳的取材方法和处理技术,提高初代培养的成功率,为其组培快繁服务。

1材料与方法1.1材料1.1.1 研究对象。

华中枸骨,经鉴定为为冬青科(Aquifoliaceae)冬青属(Ilex)植物华中枸骨(Ilex centrochinensis)。

1.1.2 主要试剂。

所用试剂均为国产分析纯,市售。

1.2方法1.2.1 不同时间外植体的采集[2]。

华中枸骨每年春季和秋季均会萌发新梢,分别于4月初和9月末采取植株中上部长约5~10 cm、未木质化的新梢作为外植体,采取相同的消毒方法和培养方法,在继代培养中分春季萌条和秋季萌条进行后期生长对比,每处理10瓶,每瓶3芽,重复3次。

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2 .D e p a r t m e n t o f H o r t i c u l t u r e ,U n i v e r s i t y o f G e o r g i a , A t h e n s .G A 3 0 6 0 2 ,U S A)
Ab s t r a c t :P i n u s m a s s o n i a n a(ma s s o n p i n e)i s h e a r d t o b e p r o p a g a t e d v e g e t a t i v e l y a n d s o m a t i c e m b r y —
并去 除鳞 片和针 叶 ,能有效 降低外植 体污 染率 ;外植 体经 流水 冲洗 2~3 h 、去 除鳞片 和针 叶后切成 长约 0 . 2~ 0 . 5 c m的薄片后接种 ,能大大降低培养过程 中外植 体的褐化率。
关键 词 :马尾松 ;组织 培养 ;愈 伤组织 ;冷藏处 理 ;采 集时期
Ex p l a n t s we r e i n o c u l a t e d o n t o i mp r o v e d GD me di um wh i c h c o n t a i ne d v a  ̄o u s h o r mo ne s,t h e n c u hu r e d i n t he d a r k c o n d i t i o n a t 2 4 ~2 5 o C.Th e in f d i n g s we r e t h a t :S t o r a g e d u r a t i o n h a d no s i g n i ic f a n t i n f l u e n c e o n
摘 要 :马尾松 ( P i n u s m a s s o n i a n a)无性繁殖 困难 ,研究常采用体细胞胚胎 发生和器官发 生的方式繁殖 ,外植
体采集时期是实验成功 的关键 。本实 验采 用 2 0 1 1 年 1 O月 至 2 0 1 2年 1 0月期间 ( 每周或每两周 采集 1 次 )采集的 马尾松枝梢顶端分生组织为外植体 ,并将外植体 置于 4 ℃ 冰箱冷藏做不 同冷 藏时间处理 ( 4~I 1 4天 ) 。处 理后的 外植体接种在添加不 同激素浓度 的改 良 G D培养基 中,2 4— 2 5 ℃条件 下暗培养。实验结果 表明 :冷 藏时间对马尾 松愈伤组织诱导没有显 著影 响 ;2 0 1 2年 3月 中旬至 4月底采集 的马尾松外植体 ,愈伤组织诱导率最高达 8 9 . 8 %, 其平均诱导率达 到 8 0 % 以上 ;外植体经流水 冲洗 2~ 3 h 、7 5 %的酒精处理 2 0— 3 0 S 、0 . 1 % 的升汞处理 9—1 0 m i n
外 植 体 采集 时期 与 冷 藏处 理对 马尾 松 愈 伤 组 织 诱 导 的影 响
伊 书亮 ,张冬林 ,杨模华 ,李志辉 ,王 茜 ,史 昆
( 1 .中南林 业科技 大学林 学 院 ,湖 南 长 沙 4 1 0 0 0 4; 2 .乔 治亚 大学 园艺 系,美 国 乔 治亚 州 雅 典 市 3 0 6 0 2 )
(1 .C o l l e g e o f F o r e s t y, r C e n t r a l S o u t h U n i v e r s i t y o f F o r e s t y r a n d T e c h n o l o g y ,C h a n g s h a 4 1 0 0 0 4, C h i n a ;
第4 2卷 第 1 期 2 0 1 3年 3月
文 章 编 号 :1 0 0 6—1 1 2 6— 2 0 1 3( 1 ) 一 0 0 0 8— 0 6
广 西




Vo 1 . 4ห้องสมุดไป่ตู้ No .1 Ma r . 2 O1 3
G u a n g x i F o r e s t r y S c i e n c e
Pi n u s ma s s o n i a n a wa s c o l l e c t e d mo n t h l y,b i — we e k l y ,o r w e e k l y a n d r e f ig r e r a t e d a t 4 ℃ f o r 4 t o 1 1 4 d a y s .
中 图 分 类 号 :¥ 7 9 1 . 2 4 8 文 献 标 识 码 :A
Ef fe c t s o f Ex p l a n t Co l l e c t i n g Ti me a n d S t o r a g e Dur a t i o n o n
o g e n e s i s a n d o r g a n o g e n e s i s a r e u s u a l l y a p pl i e d b y r e s e a r c he r s .Ho we v e r ,wh e n t o c o l l e c t e x pl a n t s i s t h e ke y t o s uc c e s s f u l l y mi c r o - p r o pa g a t e d i t . Du ing r Oc t o b e r 2 01 1 t o Oc t o b e r 2 01 2, s h o o t a p i c a l me r i s t e m o f
Ca l l u s I n d u c t i O n O f Pi n u s ma s s o n i a n a
YI S h u . 1 i a n g ,Z HANG Do n g . 1 i n t ,rANG Mo — h u a ‘

L I Z h i . h u i ,WA N G Q i a n , S H I K u n
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