细胞培养液
各种培养液的配方
各种培养液的配方培养液是一种专门设计用于细胞培养的营养基质，它提供了细胞所需的营养物质和生长因子，以支持细胞的生长和增殖。
不同类型的细胞和细胞培养的特定目的可能需要不同的培养液配方。
以下是几种常见的细胞培养液配方：1. DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）：配方：- Glucose: 4.5g/L- L-Glutamine: 4mM- Sodium Bicarbonate: 3.7g/L- Sodium Pyruvate: 110mg/L- Phenol Red: 0.1%备注：DMEM是一种基础培养液，广泛用于多种哺乳动物细胞的培养，提供了细胞所需的基本营养物质，如糖、氨基酸和盐类。
2. RPMI 1640（Roswell Park Memorial Institute Medium）：配方：- Glucose: 2g/L- L-Glutamine: 2mM- Sodium Bicarbonate: 2g/L-HEPES:10mM- Phenol Red: 0.1%备注：RPMI 1640是一种适用于多种动物和人类细胞培养的基础培养液，具有类似DMEM的配方，但Glucose和L-Glutamine的浓度较低，适合一些特定的细胞类型。
3. MEM（Minimum Essential Medium）：配方：- Glucose: 1g/L- L-Glutamine: 2mM- Sodium Bicarbonate: 2.2g/L-HEPES:15mM- Phenol Red: 0.1%备注：MEM也是一种通用基础培养液，适用于多种细胞类型的培养，其配方与DMEM相似，但含有更低浓度的糖。
4. F-12（Ham's F-12 Nutrient Mixture）：配方：- Glucose: 3.15g/L- L-Glutamine: 2mM- Sodium Bicarbonate: 1.17g/L- Phenol Red: 0.03%备注：F-12是一种含有丰富营养物质的培养液，特别适用于培养多种优质的细胞系。
细胞培养常用液体配置
【精华】细胞培养常用液体配置细胞冻存！/bbs/post/view?bid=66&id=1075571&sty=1&tpg=1&age=0求助：1%的胰蛋白酶如何配置成0。
25%的？急！/bbs/post/view?bid=66&id=1601091&sty=1&tpg=1&age=0求助海马神经元的培养基配方/bbs/post/view?bid=66&id=1876036&sty=1&tpg=1&age=0【求助】活性碳-葡聚糖苷处理过的胎牛血清问题/bbs/post/view?bid=66&id=1566352&sty=1&tpg=1&age=0谁知道加了小牛血清的1640还能过滤吗？/bbs/post/view?bid=66&id=1936251&sty=1&tpg=1&age=0求助！/bbs/post/view?bid=66&id=1730359&sty=1&tpg=1&age=0小急！乳鼠心肌细胞培养时配胰蛋白酶没调PH值/bbs/post/view?bid=66&id=1949765&sty=1&tpg=1&age=0配ＤＭＥＭ时直接添加粉剂ＮＡＨＣＯ３可以吗？/bbs/post/view?bid=66&id=1949670&sty=1&tpg=1&age=0冻存液怎么配置？/bbs/post/view?bid=66&id=1633674&sty=1&tpg=1&age=0求助乳鼠心肌细胞培养的D-HANKS液配方DMEM液和DMEM/F12液/bbs/post/view?bid=66&id=1888172&sty=1&tpg=1&age=0请教心肌细胞的消化！/bbs/post/view?bid=66&id=1913926&sty=1&tpg=1&age=0求助：急需知道/bbs/post/view?bid=66&id=1941147&sty=1&tpg=1&age=0胞内钙测定/bbs/post/view?bid=66&id=1130119&sty=1&tpg=1&age=0<共享>双抗的配置方法/bbs/post/view?bid=66&id=1933663&sty=1&tpg=1&age=0请教0.1%透明质酸酶的配制/bbs/post/view?bid=66&id=1927260&sty=1&tpg=1&age=0请教高人：关于PBS配方及浓度的问题/bbs/post/view?bid=66&id=1655901&sty=1&tpg=1&age=0【请教】培养基、血清长时间放在37度水浴箱内，还能用吗？/bbs/post/view?bid=66&id=1922789&sty=1&tpg=1&age=0关于1640液的配置/bbs/post/view?bid=66&id=1096940&sty=1&tpg=1&age=0 弱弱地问：EDTA《资源》说明书上关于1640的配置/bbs/post/view?bid=66&id=1906137&sty=1&tpg=1&age=0细胞培养常用液体配制/bbs/post/view?bid=66&id=400040&sty=1&tpg=1&age=0细胞培养用的PBS应该如何处理。
细胞培养液制备SOP
1. 目的规范细胞培养液配制的操作。
2. 范围细胞生长液和细胞维持液的配制。
3.职责3.1.质量管理部：负责本规程的起草。
3.2. 质量管理部QC：负责本规程的操作。
3.3. 总经理：负责本规程的审批。
4. 定义无5. 引用标准无。
6. 材料6.1. 试剂6.1.1 配制好的MEM溶液，见《MEM培养基制备程序》6.1.2 配制好的谷氨酰胺溶液见《谷氨酰胺配制程序》6.1.3 配制好的双抗溶液见《双抗配制程序》6.1.37.5％碳酸氢钠见《双抗配制程序》6.2. 器械、用具6.2.1 移液管6.2.2 配液瓶6.2.3 75％洒精棉6.3 仪器设备6.3.1 高压灭菌器6.3.2 超净工作台7. 流程图无8. 内容8.1.细胞营养液的配制8.1.1. 配制前的准备8.1.2 消毒手部：将手用清水及肥皂洗净，用75%酒精棉球擦拭手的各个部位。
8.1.3. 超净台的启动：接通超净台开关，风机进入标准状态，开启紫外灯，运行20分钟。
8.1.4 将配液所需各种溶液及器具放入超净台。
8.2 配制过程8.2.1 穿好工作衣，带好帽子、口罩。
胳膊放入超净台内带好套袖和手套。
8.2.2. 用75%酒精棉球消毒手臂，解去HL/MEM瓶线，用酒精棉球消毒各种溶液瓶口，每擦一瓶换一块棉球，一瓶擦拭两遍。
8.2.3 轻轻拿下纸帽及棉塞，拔下溶液瓶塞，在酒精灯外焰处，将瓶口灭菌。
顺次加入所需各种营养液。
8.3 加液顺序8.3.1 MEM或DMEM8.3.2 血清 8～10％（或根据需要配制成2～5%，细胞维持液）8.3.3. 双抗 1%8.3.4 L-谷氨酰胺 0.45%。
1.0～2.0%8.3.5. 7.5%NaHCO38.3.6. pH 6.8～7.28.3.7. 盖好胶塞，备用。
9. 注意事项9.1 注意无菌操作9.2 配制好的细胞营养液一周内用完。
10. 附录及派生记录培养基配制记录F-SOP-ZL023-0111. 相关文件无12. 修订记录。
细胞培养液
细胞培养液简介细胞培养液是一种用于培养、增殖和维持细胞生长的液体培养环境。
它提供了细胞所需的营养物质，并维持了细胞所需的适宜PH值、温度和气体气压等环境条件。
细胞培养液广泛应用于医学研究、生命科学实验和药物开发等领域。
细胞培养液的组成细胞培养液主要由以下几个组分构成：1.水：作为溶剂和质量调节剂，确保细胞培养液的稳定性和适宜的渗透压。
2.碳水化合物：提供能量和碳源。
常用的碳水化合物有葡萄糖、乳糖等。
3.氨基酸：提供细胞合成蛋白质所需的氨基酸。
4.维生素和微量元素：提供细胞所需的维生素和微量元素。
5.生长因子和激素：促进细胞增殖和功能的调节。
6.脂质和胆固醇：构建细胞膜结构所需的成分。
7.pH缓冲剂：维持细胞培养液的适宜pH值。
8.盐类和矿物质：维持细胞内外渗透平衡和细胞骨架结构的稳定性。
9.抗生素和抗真菌剂：抑制细菌和真菌的生长。
10.血清或血清替代物：提供细胞所需的生长因子、支持细胞黏附和增殖。
以上是常见的细胞培养液组分，不同类型的细胞培养液会根据具体的细胞类型和实验需求进行特殊配方。
细胞培养液的分类根据不同的需求和具体细胞类型，细胞培养液可以分为以下几类：1.基础培养液：提供细胞培养所需的基本营养物质。
常见的基础培养液有DMEM（Dulbecco’s modified Eagle’smedium）、RPMI 1640（Roswell Park Memorial Institute 1640 medium）等。
2.血清培养液：添加了胎牛血清或其他动物血清作为补充。
血清中含有丰富的生长因子、细胞黏附物质和免疫调节因子，可以提供细胞生长所需的合适环境。
3.无血清培养液：使用血清替代物或单一生长因子替代传统的血清，避免血清中未知成分的干扰和批次差异。
4.特殊培养液：为特定类型的细胞提供了专门的培养液。
例如，神经细胞培养液、肝细胞培养液等。
细胞培养液的使用方法在使用细胞培养液前，需要先将细胞培养液适当预热，并进行无菌处理。
各种培养液的配方
各种培养液的配方不同的细胞类型和培养目的需要使用不同的培养液。
下面列举一些常见的细胞培养液配方及其用途。
1.DMEM培养液：DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）是一种最常用的细胞培养基，适用于多种哺乳动物细胞的培养。
以下是DMEM培养液的配方：-1×DMEM：将DMEM粉末加入去离子水中，调整pH至7.2-7.4，用0.22μm过滤器过滤灭菌。
-10%胎牛血清（FBS）：将FBS加入1×DMEM中，使最终浓度为10%。
-1%抗生素/抗菌素：将1%抗生素/抗菌素（如青霉素/链霉素）加入1×DMEM中，使最终浓度为1%。
2.RPMI1640培养液：RPMI1640是一种适用于淋巴细胞和白血病细胞的培养基。
以下是RPMI1640培养液的配方：-1×RPMI1640：将RPMI1640粉末加入去离子水中，调整pH至7.2-7.4，用0.22μm过滤器过滤灭菌。
-10%FBS：将FBS加入1×RPMI1640中，使最终浓度为10%。
-1%抗生素/抗菌素：将1%抗生素/抗菌素加入1×RPMI1640中，使最终浓度为1%。
- 2-mercaptoethanol：将2-mercaptoethanol加入1×RPMI 1640中，使最终浓度为0.05mM。
3.MEM培养液：MEM（Minimum Essential Medium）是一种用于哺乳动物细胞培养的基础培养液。
以下是MEM培养液的配方：-1×MEM：将MEM粉末加入去离子水中，调整pH至7.2-7.4，用0.22μm过滤器过滤灭菌。
-10%FBS：将FBS加入1×MEM中，使最终浓度为10%。
-1%抗生素/抗菌素：将1%抗生素/抗菌素加入1×MEM中，使最终浓度为1%。
-1×非必需氨基酸：将非必需氨基酸（如谷氨酰胺、苏氨酸等）加入1×MEM中。
细胞培养相关常用液体配制标准SOP操作规程样本
细胞培养相关常用液体配制标准SOP操作规程样本（一）胰酶的配制：（浓度为1‰，1L）1、认真清洗配制容器，自来水20遍，去离子水5遍，超纯水润洗3遍。
2、称取牛胰蛋白酶1.0g；EDTA 2 g；3、用超纯水溶解；4、磁力搅拌器搅拌至胰酶完全溶解，溶液变得澄清；5、超纯水定容至1L；6、不锈钢滤器加0.22um滤纸两张高温灭菌后，在超净工作台过滤；7、在血清瓶中加入少量滤好的胰酶，置于细胞培养箱中检测是否染菌，其余置于4℃待用；8、过滤后洗净滤器再次灭菌，避免残留的胰酶降解蛋白。
（二）DMEM配制：1、所需试剂及材料：试剂：DMEM干粉（GIBCO 10L）、超纯水（Milli-Q）、Na2CO3 （Sigma）材料：10L玻璃瓶、500ml盐水瓶（灭菌）、0.22um滤膜、滤器（事先放好两层滤膜并高压灭菌）、磁力搅拌器大号搅拌子蠕动泵胶塞2、操作步骤：(1)10L玻璃瓶洗涤，自来水20遍，去离子水5遍，超纯水润洗3遍。
(2)在10L玻璃瓶中加入超纯水9.5L，将DMEM干粉倒入，在磁力搅拌器上搅拌溶解。
(3)按照3.7g/L 加入Na2CO3 。
(4)调节pH值至7.2~7.4。
(5)过滤分装，并注明名称及配制日期。
此过程注意无菌操作！(6)最后用血清瓶取10ml左右置于细胞培养箱中检测是否染菌。
(7)清洗滤器，10L玻璃瓶，软管，将所有实验器具归位。
（三）1640、MEM培养基的配制同上，Na2CO3的用量见包装说明（四）细胞间100×双抗（青霉素、链霉素）的配制青霉素及链霉素配制的终浓度为1万单位/毫升。
配制的步骤以400ml为例：1.认真清洗配制容器，自来水20遍，去离子水5遍，超纯水润洗3遍。
2.准备5瓶青霉素（80万单位/瓶）、4瓶链霉素（100万单位/瓶）。
3.加入1-2ml细胞间专用PBS进入青霉素、链霉素的瓶子内，浸泡后吹吸数次至全部溶解，溶解后的液体吸入配制容器内。
细胞培养液配方
胎牛血清 (20ml)
双抗 （2ml）
溶液各组分终浓度为90%RPMI-1640培养基 +10%胎牛血清+1%双抗（200mM L-谷氨酰胺、10mg/ml链霉素和10000U青霉素）
三 细胞冻存液配方：(20ml)
RPMI-1640培养基 (14ml)胎牛血清 Nhomakorabea(4ml)
细胞培养常用溶液配方
一PBS配方：
方法一 1×PBS(Phosphate-Buffered Sallines)
Na2HPO4、Na2HPO4•7H2O、Na2HPO4•12H2O中任选其一。
方法二 母液的配制：
0.2M Na2HPO4：称取71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于1000ml水
0.2M NaH2PO4：称取31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml水
0.01MPBS（PH=7.4）：取50ml 0.2M PB，加水稀释至1000ml即可。
0.02MPBS（PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至1000ml即可。
若需要NaCl的话，加入NaCl至0.9%（g/100ml）即可。
细胞培养常用溶液配方
二 细胞培养液配方：（200ml）
DMSO （2ml）
双抗(0.2ml)
各种浓度PBS(pH=7.4)的配制：
先配0.2M PBS(pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4，81ml 0.2mol/L的Na2HPO4,即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可，如：
0.1MPBS（PH=7.4）：取500ml 0.2M PB，加水稀释至1000ml即可。
细胞培养液收集方法
细胞培养液收集方法
细胞培养液的收集主要包括以下步骤：
1. 取细胞培养液约2mL，低速离心，将细胞沉淀分离。
2. 取1mL（建议量，最少500μL）以上上清液，-80℃储存样本，足量干冰寄送样本。
需要注意的是，由于培养液上清的样品属性，其代谢物含量较低，且含盐含糖量较高，分析难度较大，对实验仪器和实验方法均有较高要求。
在收集过程中，需要严格避免高速离心、剧烈晃动、过高或过低温度导致培养基中的细胞破碎。
收集后避免反复融冻，全程低温储运，长距离运输使用干冰，直至分析。
以上步骤仅供参考，具体操作需根据实际情况调整。
如果需要更多信息，建议咨询生物领域专业人士。
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常用细胞系所用培养液参考，其它详细参见ATCC细胞库()
细胞系名称细胞类型物种来源组织培养液与血清
293成纤维细胞 人 胚胎肾 MEM, 10% 马血清
3T6成纤维细胞 小鼠 胚胎 DMEM, 10% FBS
A549上皮样 人 肺癌 F-12K, 10% FBS
A9成纤维细胞 小鼠 结缔组织 DMEM, 10% FBS
AtT-20上皮样 小鼠 垂体肿瘤 F-10, 15%马血清+ 2.5% FBS BALB/3T3成纤维细胞 小鼠 胚胎 DMEM, 10% FBS
BHK-21成纤维细胞 仓鼠 肾 DMEM, 10% FBS or MEM, 10% FBS
and NEAA
BHL-100上皮样 人 乳腺 McCoy'5A, 10% FBS
BT成纤维细胞 牛 鼻甲细胞 MEM, 10% FBS and NEAA
Caco-2上皮样 人 结肠腺瘤 MEM, 20% FBS and NEAA
Chang上皮样 人 肝 BME, 10% 牛血清
CHO-K1上皮样 仓鼠 卵巢 F-12, 10% FBS
Clone 9上皮样 大鼠 肝 F-12K, 10% FBS
Clone M-3上皮样 小鼠 黑色素瘤 F-10, 15%马血清+ 2.5% FBS
COS-1成纤维细胞 猴 肾 DMEM, 10% FBS
COS-3成纤维细胞 猴 肾 DMEM, 10% FBS
COS-7成纤维细胞 猴 肾 DMEM, 10% FBS
CRFK上皮样 猫 肾 MEM, 10% FBS and NEAA
CV-1成纤维细胞 猴 肾 MEM, 10% FBS
D-17上皮样 犬 骨肉瘤 MEM, 10% FBS and NEAA
Daudi淋巴样 人 淋巴瘤患者外周血 RPMI-1640, 10% FBS
GH1上皮样 大鼠 垂体瘤 F-10, 15%马血清+2.5% FBS
GH3上皮样 大鼠 垂体瘤 F-10, 15%马血清+ 2.5% FBS
H9淋巴样 人 T-细胞淋巴瘤 RPMI-1640, 20% FBS
HaK上皮样 人 肾 BME, 10% 牛血清
HCT-15上皮样 人 结肠腺癌 RPMI-1640, 10% FBS
HeLa上皮样 人 宫颈癌 MEM, 10% FBS and NEAA (in
suspension, S-MEM)
HEp-2上皮样 人 喉癌 MEM, 10% FBS
HL-60淋巴样 人 早幼粒细胞白血病 RPMI-1640, 20% FBS
HT-1080上皮样 人 纤维肉瘤 MEM, 10% HI FBS and NEAA
HT-29上皮样 人 结肠腺癌 McCoy's 5A, 10% FBS
HUVEC上皮样 人 脐带 F-12K, 10% FBS 肝素100 ug ml
I-10上皮样 小鼠 睾丸肿瘤 F-10, 15%马血清+2.5% FBS
IM-9淋巴样 人 骨髓瘤患者骨髓 RPMI-1640, 10% FBS
JEG-2上皮样 人 绒毛膜癌 MEM, 10% FBS
Jensen成纤维细胞 大鼠 肉瘤 McCoy's 5A, 5% FBS
Jurkat淋巴样 人 淋巴瘤 RPMI-1640, 10% FBS
K-562淋巴样 人 髓系白血病 RPMI-1640, 10% FBS
KB上皮样 人 口腔癌 MEM, 10% FBS and NEAA
KG-1髓样细胞 人 红白血病患者骨髓 IMDM, 20% FBS
L2上皮样 大鼠 肺 F-12K, 10%FBS
L6大鼠 骨骼肌成肌细胞 DMEM, 10% FBS
LLC-WRC
上皮样 大鼠 癌 Medium 199, 5%马血清
256
McCoy成纤维细胞 小鼠 未知 MEM, 10% FBS
MCF7上皮样 人 乳腺癌 MEM, 10% FBS NEAA, 10ug/ml 胰
岛素
WEHI-3b巨噬细胞样 小鼠 粒单细胞白血病 DMEM, 10% FBS
WI-38上皮样 人 胚胎肺 BME, 10% FBS
WISH上皮样 人 羊膜 BME, 10% FBS
WS1人 胚胎皮肤 MEM, 10% FBS and NEAA
XC上皮样 大鼠 肉瘤 MEM, 10% FBS and NEAA
Y-1上皮样 小鼠 肾上腺肿瘤 F-10, 15%马血清+ 2.5% FBS
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