常用细胞系所用培养液参考
各种培养液的配方

各种培养液的配方培养液是一种专门设计用于细胞培养的营养基质,它提供了细胞所需的营养物质和生长因子,以支持细胞的生长和增殖。
不同类型的细胞和细胞培养的特定目的可能需要不同的培养液配方。
以下是几种常见的细胞培养液配方:1. DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium):配方:- Glucose: 4.5g/L- L-Glutamine: 4mM- Sodium Bicarbonate: 3.7g/L- Sodium Pyruvate: 110mg/L- Phenol Red: 0.1%备注:DMEM是一种基础培养液,广泛用于多种哺乳动物细胞的培养,提供了细胞所需的基本营养物质,如糖、氨基酸和盐类。
2. RPMI 1640(Roswell Park Memorial Institute Medium):配方:- Glucose: 2g/L- L-Glutamine: 2mM- Sodium Bicarbonate: 2g/L-HEPES:10mM- Phenol Red: 0.1%备注:RPMI 1640是一种适用于多种动物和人类细胞培养的基础培养液,具有类似DMEM的配方,但Glucose和L-Glutamine的浓度较低,适合一些特定的细胞类型。
3. MEM(Minimum Essential Medium):配方:- Glucose: 1g/L- L-Glutamine: 2mM- Sodium Bicarbonate: 2.2g/L-HEPES:15mM- Phenol Red: 0.1%备注:MEM也是一种通用基础培养液,适用于多种细胞类型的培养,其配方与DMEM相似,但含有更低浓度的糖。
4. F-12(Ham's F-12 Nutrient Mixture):配方:- Glucose: 3.15g/L- L-Glutamine: 2mM- Sodium Bicarbonate: 1.17g/L- Phenol Red: 0.03%备注:F-12是一种含有丰富营养物质的培养液,特别适用于培养多种优质的细胞系。
常见细胞系使用的培养基

常见细胞系使用的培养基细胞系培养基是在细胞体外培养时提供营养、调节生理功能和维持细胞生长所必需的基础培养液。
常见的细胞系培养基包括以下几种:1.基本培养基:(a) Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM):DMEM是最常用的细胞培养基之一,可以满足大多数哺乳动物细胞的生长需求。
它包含丰富的氨基酸、维生素和硒等营养物质,pH 为7.4,细胞因子和血清可以根据需要添加。
(b)RPMI1640:RPMI1640是一种适用于淋巴细胞等肿瘤和免疫细胞的培养基。
它还包含可溶性蛋白、胎牛血清、植物血清和病毒适配因子等。
(c) Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM):EMEM是一种全面的培养基,适用于广泛的细胞系,并可添加血清、血清替代物或血清补充物来满足特定细胞系的需求。
(d) Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM):IMDM是用于骨髓细胞和其他白细胞的培养基,也适用于一些其他特定的细胞系。
2.补充因子:(a)L-谷氨酸:可以通过促进蛋白质合成以及为细胞提供能量,促进细胞生长。
(b)胱氨酸:可以作为抗氧化剂,保护细胞免受氧化损伤。
3.血清和血清替代品:(a)胎牛血清(FBS):FBS是最常用的培养基补充物之一,因为它含有多种生长因子、蛋白质和营养物质,可以促进细胞生长和增殖。
(b)马血清:适合一些特定的细胞系,可以替代FBS。
(c)血清替代品:血清替代品通常是人类血浆衍生物,不含动物血清,可以减少细胞系受到的外源性感染风险。
4.碳源和氮源:(a)葡萄糖:葡萄糖是最常用的碳源,可以提供细胞的能量需求。
(b)氨基酸:提供细胞各种生物合成的原料。
(c)谷氨酸/谷氨酰胺:作为氨基酸的前体,是合成蛋白质和核酸的重要物质。
5.生长因子和维生素:(a)血液集落刺激因子(CSFs):CSFs可以促进造血系统细胞系的增殖和分化。
常用培养基配方范文

常用培养基配方范文培养基(Culture medium)是一种用于细菌、真菌、植物细胞、动物细胞和其他微生物的繁殖和生长的营养物质。
常用的培养基可分为发酵培养基、微生物培养基和细胞培养基。
下面列举了一些常用的培养基配方。
1. LB培养基(Luria-Bertani medium)成分:-牛肉提取物:10克-酵母提取物:5克-热可溶性淀粉:10克-氯化钠:10克-水:1升2. NB培养基(Nutrient broth)成分:-牛肉提取物或肉蔻精:8克-酵母提取物:4克-葡萄糖:4克-水:1升3. MacConkey培养基成分:-水解动物蛋白:17克-中和胆盐:1.5克-中性红:0.03克-水:1升4. TSB培养基(Tryptic soy broth)成分:-大豆胨:17克-酵母提取物:3克-水:1升5. BHIA培养基(Brain Heart Infusion Agar)成分:-脑心汤固体:37克-水:1升6.R2A培养基成分:-水解酵母提取物:0.5克-蛋白胨:0.5克-葡萄糖:0.5克-脱脂乳粉:0.5克-黄豆粉:0.5克-高氯酸钠:0.3克-多聚体1466:0.05克-水:1000毫升7.比尔斯氏培养基(BHI培养基)成分:-大豆胨:37克-脑心汤固体:2克-水:1升8. 培养基199(Medium 199)成分:-高锰酸钾:0.015克-硫酸:1.55克-磷酸一氢钠:0.184克-高氯酸钠:8.0克-溴酚蓝:0.4克-d-葡萄糖:5.55克-l-谷氨酸:40.525克-苏打粉:0.84克-水:1升9. DMEM培养基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)成分:-苔藓胶原酸:1克-乳糖:1克- 谷氨酸:584mg- 水:1000ml这只是一小部分常见的培养基配方,实际上有很多种不同的培养基,它们根据不同的生物特性和培养需求来设计。
不同的培养基可以提供细菌、真菌、细胞等微生物生长需要的各种营养物质。
常用培养基及基本特性

常用培养基及基本特性1、RPMI-1640MediumRPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞,杂交瘤细胞的培养,是目前应用十分广泛的培养基。
主要用于悬浮细胞培养。
其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用2、Minimum Essential Medium(MEM)也称最低必需培养基,它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。
成分简单,可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培养。
MEM-Alpha一般用于培养一些难培养细胞类型,而其它没有特殊之处的细胞株则几乎均可采用MEM来培养。
3、DMEM-高糖(标准型)是一种应用十分广泛的培养基,可用于许多哺乳动物细胞培养,更适合高密度悬浮细胞培养。
适用于附着性较差,但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养,也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。
4、DMEM-低糖(标准型)是一种应用十分广泛的培养基,可用于许多哺乳动物细胞培养。
低糖适于依赖性贴壁细胞培养,特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。
5、DMEM/F12DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养。
F12培养基成分复杂,含有多种微量元素,和DMEM 以1:1结合,称为DMEM/F12培养基(DME/F12medium),作为开发无血清配方的基础,以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。
该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。
为了增强该培养基的缓冲能力,改良之一是在DMEM/F12(1:1)中加入15mMHEPES缓冲液。
16、McCoy’s5A9McCoy’s5A Medium主要为肉瘤细胞的培养所设计,可支持多种(如骨髓、皮肤、肺和脾脏等)的原代移植物的生长,除适于一般的原代细胞培养外,主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。
cho细胞培养参数

cho细胞培养参数
CHO细胞(Chinese Hamster Ovary Cell)是一种常用的哺乳动物细胞系,常用于重组蛋白的生产。
细胞培养参数主要包括以下几个方面:
1. 培养基:常用的CHO细胞培养基有DMEM/F12、RPMI 1640等,其中含有必需的氨基酸、维生素、葡萄糖以及其他生长因子和辅助物质。
2. 温度:CHO细胞的最适生长温度一般为37°C。
3. CO2浓度:为了维持细胞培养环境的酸碱平衡,一般在细胞培养箱中提供5% CO2气氛。
4. pH值:细胞培养液的pH值通常在7.2-7.4之间。
5. 细胞密度:细胞密度的种植密度根据所需的细胞产量,一般可根据细胞生长曲线和培养容器的尺寸来确定。
6. 培养时间:CHO细胞的培养时间一般为2-7天,具体根据细胞类型和实验目的而定。
7. 摇床速度:细胞培养时的摇床速度一般为80-120rpm,旋转摇床的旋转半径也会影响细胞的生长。
8. 营养物质浓度:选择适当的营养物质浓度,如葡萄糖、氨基酸、维生素等,对细胞的生长和产量有重要影响。
9. 培养容器:常用的培养容器有细胞培养板、细胞培养瓶、细胞培养滚筒等,选择合适的培养容器也会影响细胞的生长和产量。
以上为一般常用的CHO细胞培养参数,实际情况可能根据实
验目的和细胞特性的不同而有所调整。
在进行细胞培养实验时,需根据实际情况进行优化调整。
细胞培养相关常用液体配制标准SOP操作规程样本

细胞培养相关常用液体配制标准SOP操作规程样本(一)胰酶的配制:(浓度为1‰,1L)1、认真清洗配制容器,自来水20遍,去离子水5遍,超纯水润洗3遍。
2、称取牛胰蛋白酶1.0g;EDTA 2 g;3、用超纯水溶解;4、磁力搅拌器搅拌至胰酶完全溶解,溶液变得澄清;5、超纯水定容至1L;6、不锈钢滤器加0.22um滤纸两张高温灭菌后,在超净工作台过滤;7、在血清瓶中加入少量滤好的胰酶,置于细胞培养箱中检测是否染菌,其余置于4℃待用;8、过滤后洗净滤器再次灭菌,避免残留的胰酶降解蛋白。
(二)DMEM配制:1、所需试剂及材料:试剂:DMEM干粉(GIBCO 10L)、超纯水(Milli-Q)、Na2CO3 (Sigma)材料:10L玻璃瓶、500ml盐水瓶(灭菌)、0.22um滤膜、滤器(事先放好两层滤膜并高压灭菌)、磁力搅拌器大号搅拌子蠕动泵胶塞2、操作步骤:(1)10L玻璃瓶洗涤,自来水20遍,去离子水5遍,超纯水润洗3遍。
(2)在10L玻璃瓶中加入超纯水9.5L,将DMEM干粉倒入,在磁力搅拌器上搅拌溶解。
(3)按照3.7g/L 加入Na2CO3 。
(4)调节pH值至7.2~7.4。
(5)过滤分装,并注明名称及配制日期。
此过程注意无菌操作!(6)最后用血清瓶取10ml左右置于细胞培养箱中检测是否染菌。
(7)清洗滤器,10L玻璃瓶,软管,将所有实验器具归位。
(三)1640、MEM培养基的配制同上,Na2CO3的用量见包装说明(四)细胞间100×双抗(青霉素、链霉素)的配制青霉素及链霉素配制的终浓度为1万单位/毫升。
配制的步骤以400ml为例:1.认真清洗配制容器,自来水20遍,去离子水5遍,超纯水润洗3遍。
2.准备5瓶青霉素(80万单位/瓶)、4瓶链霉素(100万单位/瓶)。
3.加入1-2ml细胞间专用PBS进入青霉素、链霉素的瓶子内,浸泡后吹吸数次至全部溶解,溶解后的液体吸入配制容器内。
常用细胞培养基配方及缓冲液

常用细胞培养基配方及缓冲液细胞培养基是为了在体外维持细胞生长和增殖所设计的一种营养液。
细胞培养基的配方要求提供细胞所需的基本营养物质,如氨基酸、糖类、维生素和激素,并提供适当的pH和离子平衡。
同时,缓冲液也是细胞培养过程中不可或缺的一部分,用于稳定细胞培养基的pH,维持细胞正常的生长环境。
下面列举几种常用的细胞培养基配方及缓冲液:1. DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium)-细胞培养基配方:-DMEM培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)-缓冲液:无2. RPMI 1640 Medium (Roswell Park Memorial Institute Medium) -细胞培养基配方:-RPMI1640培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)-缓冲液:HEPES(4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙烷磺酸)溶液,浓度为25mM,用于稳定pH。
3. MEM (Minimum Essential Medium)-细胞培养基配方:-MEM培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)- 缓冲液:盐酸/NaOH缓冲体系,通常用NaHCO3/N-2-羟乙基piperazine-N'-2-乙磺酸(HEPES)缓冲。
4. Hank's Balanced Salt Solution (HBSS)-细胞培养基配方:-HBSS培养基粉末-对应体积的无菌水-缓冲液:无5. L-15 Medium (Leibovitz's L-15 Medium)-细胞培养基配方:-L-15培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-缓冲液:HEPES溶液,浓度为25mM。
6. DMEM/F12 Medium (Dulbecco's Modified Eagle Medium and Ham's F-12 Medium)-细胞培养基配方:-DMEM/F12培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)-缓冲液:HEPES溶液,浓度为25mM。
微生物实验室常见20种培养基配方大全

微生物实验室常见20种培养基配方大全1.肉汤培养基成分:牛肉膏或牛肉汤500克,葡萄糖10克,胰蛋白胨10克,NaCl5克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于各种需有机氮源的细菌的培养。
2.十倍腌盐水成分:NaCl300克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于耐盐真菌和嗜盐细菌的培养。
3.果胶培养基成分:果胶5克,葡萄糖5克,NaNO32克,K2HPO40.2克,MgSO4·7H2O0.1克,CaCO30.02克,FeSO4·7H2O0.01克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于果胶酶产生菌的培养。
4.大肠杆菌选择性培养基成分:土豆提取物4克,蛋白胨2克,乳糖10克,NaCl10克,胆盐0.75克,碱性蓝2克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于分离大肠杆菌的选择性培养。
5.卡波培养基成分:石蜡300克,肉浸膏100克,大豆酪蛋白胨20克,NaCl5克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于致病真菌的培养。
6. Nutrient Broth培养基成分:肉膏1克,酵母提取物2克,葡萄糖2克,NaCl5克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于细菌和真菌的常规培养。
7. Luria-Bertani(LB)培养基成分:酵母提取物5克,酪蛋白胨10克,NaCl10克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于E. coli等细菌的培养。
8. Sabouraud葡萄糖琼脂培养基成分:葡萄糖40克,醇20克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于真菌的培养。
9. MacConkey琼脂培养基成分:鱼精膏20克,胆盐胆红素15克,玛琪琼脂25克,NaCl5克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于肠道杆菌的培养、分离。
10.马加提琼脂培养基成分:马加提琼脂50克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于细菌、酵母和霉菌的常规培养。
11.酵母醇葡萄糖琼脂培养基成分:葡萄糖20克,醇30克,琼脂20克,蒸馏水1000毫升。
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常用细胞系所用培养液参考,其它详细参见ATCC细胞库()
细胞系名称细胞类型物种来源组织培养液与血清
293成纤维细胞 人 胚胎肾 MEM, 10% 马血清
3T6成纤维细胞 小鼠 胚胎 DMEM, 10% FBS
A549上皮样 人 肺癌 F-12K, 10% FBS
A9成纤维细胞 小鼠 结缔组织 DMEM, 10% FBS
AtT-20上皮样 小鼠 垂体肿瘤 F-10, 15%马血清+ 2.5% FBS BALB/3T3成纤维细胞 小鼠 胚胎 DMEM, 10% FBS
BHK-21成纤维细胞 仓鼠 肾 DMEM, 10% FBS or MEM, 10% FBS
and NEAA
BHL-100上皮样 人 乳腺 McCoy'5A, 10% FBS
BT成纤维细胞 牛 鼻甲细胞 MEM, 10% FBS and NEAA
Caco-2上皮样 人 结肠腺瘤 MEM, 20% FBS and NEAA
Chang上皮样 人 肝 BME, 10% 牛血清
CHO-K1上皮样 仓鼠 卵巢 F-12, 10% FBS
Clone 9上皮样 大鼠 肝 F-12K, 10% FBS
Clone M-3上皮样 小鼠 黑色素瘤 F-10, 15%马血清+ 2.5% FBS
COS-1成纤维细胞 猴 肾 DMEM, 10% FBS
COS-3成纤维细胞 猴 肾 DMEM, 10% FBS
COS-7成纤维细胞 猴 肾 DMEM, 10% FBS
CRFK上皮样 猫 肾 MEM, 10% FBS and NEAA
CV-1成纤维细胞 猴 肾 MEM, 10% FBS
D-17上皮样 犬 骨肉瘤 MEM, 10% FBS and NEAA
Daudi淋巴样 人 淋巴瘤患者外周血 RPMI-1640, 10% FBS
GH1上皮样 大鼠 垂体瘤 F-10, 15%马血清+2.5% FBS
GH3上皮样 大鼠 垂体瘤 F-10, 15%马血清+ 2.5% FBS
H9淋巴样 人 T-细胞淋巴瘤 RPMI-1640, 20% FBS
HaK上皮样 人 肾 BME, 10% 牛血清
HCT-15上皮样 人 结肠腺癌 RPMI-1640, 10% FBS
HeLa上皮样 人 宫颈癌 MEM, 10% FBS and NEAA (in
suspension, S-MEM)
HEp-2上皮样 人 喉癌 MEM, 10% FBS
HL-60淋巴样 人 早幼粒细胞白血病 RPMI-1640, 20% FBS
HT-1080上皮样 人 纤维肉瘤 MEM, 10% HI FBS and NEAA
HT-29上皮样 人 结肠腺癌 McCoy's 5A, 10% FBS
HUVEC上皮样 人 脐带 F-12K, 10% FBS 肝素100 ug ml
I-10上皮样 小鼠 睾丸肿瘤 F-10, 15%马血清+2.5% FBS
IM-9淋巴样 人 骨髓瘤患者骨髓 RPMI-1640, 10% FBS
JEG-2上皮样 人 绒毛膜癌 MEM, 10% FBS
Jensen成纤维细胞 大鼠 肉瘤 McCoy's 5A, 5% FBS
Jurkat淋巴样 人 淋巴瘤 RPMI-1640, 10% FBS
K-562淋巴样 人 髓系白血病 RPMI-1640, 10% FBS
KB上皮样 人 口腔癌 MEM, 10% FBS and NEAA
KG-1髓样细胞 人 红白血病患者骨髓 IMDM, 20% FBS
L2上皮样 大鼠 肺 F-12K, 10%FBS
L6大鼠 骨骼肌成肌细胞 DMEM, 10% FBS
LLC-WRC
上皮样 大鼠 癌 Medium 199, 5%马血清
256
McCoy成纤维细胞 小鼠 未知 MEM, 10% FBS
MCF7上皮样 人 乳腺癌 MEM, 10% FBS NEAA, 10ug/ml 胰
岛素
WEHI-3b巨噬细胞样 小鼠 粒单细胞白血病 DMEM, 10% FBS
WI-38上皮样 人 胚胎肺 BME, 10% FBS
WISH上皮样 人 羊膜 BME, 10% FBS
WS1人 胚胎皮肤 MEM, 10% FBS and NEAA
XC上皮样 大鼠 肉瘤 MEM, 10% FBS and NEAA
Y-1上皮样 小鼠 肾上腺肿瘤 F-10, 15%马血清+ 2.5% FBS
生
物
秀
1。