药物分析笔记：分光光度法
药学专业知识一_药物分析 第五章 分光光度法_2012年版
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中大网校 “十佳网络教育机构”、 “十佳职业培训机构” 网址： 1、某药物的百分吸收系数很大，表示
A:光通过该物质溶液的光程长
B:该物质对某波长的光吸收能力很强
C:该物质溶液的浓度很大
D:测定该物质的灵敏度低
E:该物质对某波长的光透光率很高
答案:B
2、荧光分析法定量测定时，采用低浓度的供试品，并须采用对照品法测定和做空白对照测定是因为
A:荧光分析法测定的药品生物活性强，灵敏度高
B:不易测定荧光的绝对强度，样品浓度高时发射光强度下降，灵敏度干扰大
C:对照品不易得，价格高
D:采用对照品测定，作溶剂空白是为了优化测定结果
E:由于仪器性能的要求
答案:B
3、用于官能团鉴别
A:紫外-可见分光光度法
B:红外分光光度法
C:直接电位法
D:X-衍射光谱
E:荧光分析
答案:B。
分光光度法 定量限
分光光度法定量限分光光度法是化学分析中常用的一种定量分析方法，利用物质对特定波长的光的吸收特性进行定量测定。
该方法具有高灵敏度、高选择性、无干扰等优点，被广泛应用于药物分析、环境监测、农残检测等领域。
在分光光度法中，测量的主要原理是比较样品和标准溶液对特定波长的光的吸收情况。
光源通过单色仪选择出特定波长的光，光通过被测物质的溶液，被测物质吸收特定波长的光后，透射到光电探测器上，通过探测器测量光的透射率或吸光度，从而确定样品中的物质浓度。
在分光光度法的实验操作中，通常需要准备标准溶液和样品溶液。
标准溶液是已知浓度的溶液，用于校准光谱仪的读数和建立浓度与吸光度的关系。
样品溶液则是待测物质的溶液，需要在测量之前适当稀释以在测量范围内。
在测量过程中，还需要选择合适的波长、调节光谱仪的光谱分辨率，并进行基线校正，以排除背景的干扰。
在分光光度法中，用于定量分析的参考内容主要包括：1. 吸光度测量原理：介绍分光光度法的基本原理和测量过程，包括选择适当波长、建立标准曲线、计算样品浓度等内容。
2. 分光光度计的选择和使用：介绍不同类型的分光光度计的特点和适用范围，以及操作细节和注意事项，如如何正确校准仪器、选择合适的检测模式等。
3. 校准方法和标准溶液的制备：介绍校准的原理和方法，如如何制备标准溶液、准确称量、溶解和稀释等。
4. 方法验证和精密度评价：介绍如何验证分光光度法的准确性和可靠性，如确定方法的线性范围、精密度和准确度等指标。
5. 具体应用案例：以药物分析、环境监测、农残检测等领域为例，展示分光光度法在实际分析中的应用，如利用该法定量测定药物的含量、水中重金属离子的浓度等。
总之，分光光度法作为一种常用的定量分析方法，具有许多优点和广泛的应用领域。
掌握分光光度法的原理和操作要点，熟悉分光光度计的使用方法，具备制备标准溶液和验证方法的能力，将有助于准确和可靠地进行定量分析工作。
紫外-可见分光光度法在药物分析中的应用研究
紫外-可见分光光度法在药物分析中的应用研究摘要：本文概述了国内外紫外—可见分光光度法在药物分析中的应用现状。
对药物分析中常用的紫外—可见分光光度法进行归类，并分析总结其优缺点。
展望了紫外—可见分光光度法在药物分析中的发展前景。
关键词：紫外—可见分光光度分析法；药物分析；概述紫外可见分光光度法（UV-Vis 法）具有设备简单、适用性广、准确度和精密度高等特点。
在有机化学、生物化学、食品检验、医疗卫生、环境保护、肿瘤诊断、生命科学等各个领域和科研生产工作中都已得到了广泛的应用。
药物分析对于药物质量的检验与控制、生物体液中有关药物含量的测定以及药代动力学的研究均起着重要的作用。
由于许多药物结构中具有吸收紫外或可见光的基团，或这些基团能与某此试剂、离子等发生颜色反应，从而很容易被检测，因此分光光度法在药物分析中得到了普遍应用[1]。
与其它方法相比，这种方法操作简便、灵敏度高、选择性好、干扰少或干扰易于消除。
特别是近几年来，由于一些新技术新方法的应用，使得分光光度法在药物分析中得到了更广泛应用，拓宽了该法的应用范围。
1 紫外可见分光光度法在药物分析方面的应用和进展1.1 直接的紫外可见分光光度法一些药物分子本身带有吸收紫外或可见光的基团，在选择合适的溶剂之后做吸收光谱，在吸收峰λmax处溶剂及其它干扰组分的吸收很小，这时则可直接利用λmax 进行测定该药物。
例如：布洛芬的测定，可在乙醇溶液中，于291nm处直接进行测定[2]。
安乃近在无水乙醇中于 266nm 处有强的吸收，可用于其制剂的测定；烟酸在 NaOH中于 262.5nm处有强的吸收，可用于其降脂口服液的测定；紫草中羟基萘醌类成分本身具有颜色，在可见区有较强吸收，可直接予以测定；复方水杨酸的主要成分为水杨酸、苯酚、碘酊，选用304nm 处为水杨酸的测定波长，辅料干扰很小，在（5~25）μρ.mL-1 范围内，成功地用于复方水杨酸中水杨酸的测定[3]。
紫外_可见分光光度法在药物分析中的应用
第18卷第2期 分析科学学报2002年4月V ol.18 N o.2 JO U RN A L OF AN A L Y T ICA L SCI EN CE Apr. 2002文章编号:1006-6144(2002)02-0158-06紫外-可见分光光度法在药物分析中的应用郑 健 陈焕文 刘宏伟 李宝华 张寒琦 于爱民 金钦汉(长春分析仪器研究和技术开发中心,吉林大学化学系分析教研室,长春,130023)摘 要:本文着重评述了1998年以来国内紫外-可见分光光度法在药物分析中的应用,展望了其在该领域的发展趋势。
关键词:紫外-可见分光光度分析法;药物分析;综述中图分类号:O657.32;R917 文献标识码:A以分子吸收光谱为基础的紫外-可见区分光光度分析法具有设备简单、适用性广、准确度和精密度较好等特点,已在地质[1]、环境[2]、能源[3]、材料[4]、食品[5]等科学中发挥着重要作用,尤其是随着多元络合物、胶束增敏光度法、有机试剂等的发展,它已经成为应用最广泛的分析手段之一[6]。
分光光度法的早期应用集中在无机分析化学领域,即对为数众多的无机离子和化合物进行定性分析或定量测定[7]。
有机物的光度分析较无机物的开展晚,但发展十分迅速,已经从定性、半定量分析发展到定量分析,方法的灵敏度和选择性也有了很大的提高,能够用光度法进行分析测定的物质种类也在不断增多[8-10]。
近几年来,随着生命科学的发展,有机物光度分析的研究和应用热点主要集中在生物[11]、临床、药物[12]等方面。
光度法在药物分析中的应用历来受到大家的广泛关注和重视,世界各国都进行这一领域的相关研究[13,14]。
据统计,在药物分析中,分光光度法占29.1%,色谱法占25.5%,荧光、化学发光法占2.4%,与光度法有关的方法共计占31.5%,由此可见,光度法是药物分析最常用的方法之一[12]。
研究结果表明,光度法在药物分析中的可靠性可以和色谱法相蓖美[15],但其设备简单、操作方便、价格低廉、易于普及等特点是色谱法难于做到的。
紫外可见分光光度法测定药物含量的计算实例.
(二）分光光度法
对乙酰氨基酚原料药含量测定
A 1 V D
含量%
E 1% 1cm
100
100 %
m
0.582 1 250 100
715 100
5 100% 99.05%
0.0411
(二）分光光度法
甲氧苄啶注射液（规格2 ml：0.1g）含量测定
精密量取本品1ml，置25ml量瓶中，用稀醋酸稀释至刻度 ，摇匀，精密量取1ml置100ml量瓶中，用稀醋酸稀释至刻度， 摇匀。照紫外-可见分光光度法，在271nm波长处测定吸光度为 0.420。另取甲氧苄啶对照品适量0.05134g，置25ml量瓶中，用 稀醋酸稀释至刻度，精密量取1ml置100ml量瓶中，用稀醋酸稀 释至刻度，摇匀。在271nm波长处测定吸光度为0.416，计算甲 氧苄啶标示量百分含量。
Байду номын сангаас
(二）分光光度法
甲氧苄啶注射液（规格2 ml：0.1g）含量测定
标示量%
cR
Ax AR
D
每支容量
100%
S
0.05134 0.420 25 100 2 25100 0.416 1 1 100% 103.7%
0.1
药物分析/药物的含量测定
紫外可见分光光度 法测定药物含量的 计算实例
制作人：谭韬
(二）分光光度法
对乙酰氨基酚原料药含量测定
精密称取对乙酰氨基酚0.04110g，置250ml量瓶中，加 0.4%氢氧化钠溶液50ml，加水至刻度，摇匀，精密量取5ml， 置100ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度，摇 匀。依照分光光度法，在257nm波长处测得吸收度为0.582。 按C8H9NO2的百分吸收系数为715计算对乙酰氨基酚的百分含 量
紫外可见分光光度法测定药物含量的计算实例(精)
(二）分光光度法
甲氧苄啶注射液（规格2 ml：0.1g）含量测定
标示量%
cR
Ax AR
D
每支容量
100%
S
0.05134 0.420 25 100 2 25100 0.416 1 1 100% 103.7%
0.1
(二）分光光度法
对乙酰氨基酚原料药含量测定
A 1 V D
含量%
E 1% 1cm
100
100 %
m
ห้องสมุดไป่ตู้
0.582 1 250 100
715 100
5 100% 99.05%
0.0411
(二）分光光度法
甲氧苄啶注射液（规格2 ml：0.1g）含量测定
精密量取本品1ml，置25ml量瓶中，用稀醋酸稀释至刻度 ，摇匀，精密量取1ml置100ml量瓶中，用稀醋酸稀释至刻度， 摇匀。照紫外-可见分光光度法，在271nm波长处测定吸光度为 0.420。另取甲氧苄啶对照品适量0.05134g，置25ml量瓶中，用 稀醋酸稀释至刻度，精密量取1ml置100ml量瓶中，用稀醋酸稀 释至刻度，摇匀。在271nm波长处测定吸光度为0.416，计算甲 氧苄啶标示量百分含量。
药物分析/药物的含量测定
紫外可见分光光度 法测定药物含量的 计算实例
制作人：谭韬
(二）分光光度法
对乙酰氨基酚原料药含量测定
精密称取对乙酰氨基酚0.04110g，置250ml量瓶中，加 0.4%氢氧化钠溶液50ml，加水至刻度，摇匀，精密量取5ml， 置100ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度，摇 匀。依照分光光度法，在257nm波长处测得吸收度为0.582。 按C8H9NO2的百分吸收系数为715计算对乙酰氨基酚的百分含 量
分光光度法的概念
分光光度法是一种常用的化学分析方法，它利用物质对光的吸收、反射、散射等特性，通过测量光强度的变化来测定物质的浓度。
这种方法具有灵敏度高、操作简便、适用范围广等优点，因此在化学分析、生物分析、环境监测等领域得到了广泛应用。
分光光度法的原理是，当一束平行光通过某一均匀的溶液时，光线会被溶液中的物质吸收，导致光强减弱。
不同物质对光的吸收能力不同，因此可以通过测量光强度的变化来推算出物质的浓度。
这种方法被称为比色法或吸光光度法。
在分光光度法中，常用的仪器是分光光度计。
分光光度计由光源、单色器、样品池和检测器等部分组成。
光源发出的光线经过单色器后，被分解成不同波长的单色光。
样品池中的溶液会吸收这些单色光，导致光强减弱。
检测器将检测到的光信号转化为电信号，再经过放大和处理后，输出测量结果。
分光光度法的应用非常广泛。
在化学分析中，可以用于测定各种无机和有机化合物的浓度。
在生物分析中，可以用于测定蛋白质、核酸、酶等生物大分子的浓度和活性。
在环境监测中，可以用于测定水体中的重金属离子、有机物、营养物等污染物的浓度。
虽然分光光度法具有许多优点，但也存在一些局限性。
例如，对于某些物质，其吸收光谱可能与其他物质重叠，导致测量结果不准确。
此外，分光光度法只能测定溶液中的物质浓度，而不能直接测定固体样品中的物质含量。
因此，在实际应用中，需要根据具体情况选择合适的方法进行测定。
总之，分光光度法是一种重要的化学分析方法，它通过测量物质对光的吸收和反射等特性来推算出物质的浓度。
这种方法具有灵敏度高、操作简便、适用范围广等优点，因此在化学分析、生物分析、环境监测等领域得到了广泛应用。
同时，也需要根据具体情况选择合适的方法进行测定，以确保结果的准确性和可靠性。
分光光度法原理
分光光度法原理分光光度法是一种常用的分析化学方法，它通过测量样品对特定波长的光的吸收或透射来确定样品中特定物质的浓度。
该方法广泛应用于药品分析、环境监测、食品安全等领域，具有操作简便、准确性高的特点。
分光光度法的原理是基于比尔定律，即溶液中溶质对单色光的吸收与其浓度成正比。
当光线通过溶液时，溶质吸收部分光线，其吸收量与浓度成正比。
通过测量吸收光强度的变化，再根据比尔定律计算出溶质的浓度。
在实际操作中，分光光度法通常使用分光光度计进行测量。
分光光度计通过选择特定波长的光源，使其通过样品溶液，然后测量出射光的光强度。
根据比尔定律，吸光度与浓度成正比，因此可以通过测量吸光度来确定溶质的浓度。
分光光度法的优点在于操作简便、测量速度快、准确度高。
同时，该方法还可以应用于多种溶液和固体样品的分析，具有较强的通用性。
因此，分光光度法在化学分析领域得到了广泛的应用。
然而，分光光度法也存在一些局限性，比如在样品中存在多种吸收物质时，会导致吸收光谱的叠加，难以准确测定各种物质的浓度。
此外，溶液的颜色、浑浊度等因素也会影响测量结果的准确性，需要进行适当的处理和校正。
总的来说，分光光度法是一种重要的分析化学方法，它通过测量溶质对特定波长光的吸收来确定其浓度，具有操作简便、准确度高的优点。
在实际应用中，我们需要充分了解该方法的原理和操作技巧，以确保测量结果的准确性和可靠性。
同时，也需要注意分光光度法的局限性，避免在实际应用中出现误差。
通过不断的学习和实践，我们可以更好地掌握分光光度法，并将其应用于化学分析实践中，为科学研究和工程实践提供有力支持。
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药物分析笔记：分光光度法
一、基本原理
紫外——可见分光光度法：是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。
操作简单、准确度高、重现性好。
波长长（频率小）的光线能量小，波长短（频率大）的光线能量大。
100nm 200nm 400nm 800nm 400um 1m
通指
X-射线紫外区可见区红外区微波区无线电波区 Beer-lambert定律： A=E l c A——吸收度 E-吸收系数 l ——液层厚度 c——溶液浓度
吸收度浓度与厚度的关系。
是吸收光度法的基本定律，重要前提是单色光。
摩尔吸收系数：指在一定波长下，溶液浓度为
1mol/L ，厚度为1cm时的吸收度，用表示。
百分吸收系数：指在一定波长下，溶液浓度为1%（W/V），厚度为1cm时的吸收度，用表示。
影响Beer定律因素：化学因素，光学因素
二、紫外——可见分光光度计：主要部件：医学教育;网
1、光源：要求光谱的光源，氢灯和钨灯（350nm）
2、单色器：进口狭缝、准直镜、色散元件（棱镜和光栅）、聚焦透镜和出口狭缝组成。
3、吸收池：用光学玻璃制成的吸收池，只能用于可见光区。
用熔融石英（氧化硅），可见紫外光区。
4、检测器：光电池：（硒光电池：用于可见光；硅光电池：紫外可见光）内阻小，易疲劳。
光电管：内阻高，电流易放大 .
5、讯号处理和显示器
三、定性与定量方法：医学教l育网
（一）、定性鉴别：是多数有机化合物具有吸收光谱特征。
一般用对比法。
1、对比吸收光谱特征数据
2、对比吸收度（或吸收系数）比值
3、对比吸收光谱的一致性
（二）、纯度检查：杂质检查与杂质限量检测
（三）、含量测定：
1、吸收系数法
2、标准曲线法
3、对照法
第二节荧光分析法
荧光分析法：利用荧光的物理特性而进行定性与定量测定的方法。
医学教育网收集整理荧光法比紫外可见灵敏。
荧光光度计：激发光源、样品池、检测器、滤光片和单色器。
第三节红外分光光度计
红外线：波长大于0.76um，小于500um的电磁波。
Hooke定律来描述分子的伸缩振动。
当分子的振动频率与入射的红外频率相同时，分子对红外产生吸收。
伸缩振动和弯曲振动。
基频峰：分子吸收一定频率的红外线，振动能级由基态（V=0）跃迁至第一激发态时产生的吸收峰。
倍频峰：振动能级由基态跃至第二、三激发态。
统称泛频峰。
吸收峰：用于鉴别官能团存在的吸收峰称特征吸收峰。
指纹区：1250-400cm （8.0-25um）的低频区称为指纹区。
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红外分光光度计主要部件：光源、吸收池、单色器（棱。