植物组织培养快繁技术_图文.ppt

植物组织培养第六章植物离体快繁

第六章植物离体快繁殖
一、植物离体快繁的意义二、离体快繁的方法三、离体快繁中存在问题四、几种植物的离体快繁技术
一、植物离体快繁的意义
1.植物繁殖类型
植物繁殖
有性繁殖
无性繁殖
扦插
嫁接
常规无性繁殖
压条分株
埋条
非试管快繁
在计算机控制环境条件下的快繁技术（如扦插）
离体快繁植物组织培养
一、植物离体快繁的意义
• 强度：光照弱，易产生玻璃化现象。
三、离体快繁中存在问题
• 4）琼脂浓度低：
• 培养基中琼脂浓度低时玻璃化苗比例增加，
水浸状严重，苗向上长。随着琼脂浓度的增加，玻璃化苗比例减少。 • 但过硬的培养基影响了养分的吸收，试管苗生长减慢，分蘖亦减少。因此，琼脂的浓度一定要适当。
三、离体快繁中存在问题
三、离体快繁中存在问题
•2.褐化：外植体接种到培养基中后，外植体或与培养基接触部位出现变褐色的现象。
•褐化后果：不加以控制，外植体会死亡。 •引起原因：切割后，使液泡中的多酚物质与细胞质中多酚氧化酶接触发生反应，产生有毒的醌类物质。 •在自然界中，褐化（多酚物质与多酚氧化酶反应）是主动防御机制，防止病原菌感染的自卫措施。
• 2.茎芽增殖途径：在培养过程中使其产生大量无根试管苗。
•
侧芽增殖途径
• 途径有：不定芽增殖途径
•
体细胞胚增殖途径
• （增加 P105图8-1）
二、离体快繁的方法
• 2.茎芽增殖途径：在培养过程中使其产生大量无根试管苗。
•
侧芽增殖途径
• 途径有：不定芽增殖途径
•
体细胞胚增殖途径
• （增加 P105图8-1）

植物离体快繁

园艺植物生物技术课件
植物离体快繁技术
第三节离体无性繁殖的商业化生产的范围和应用
园艺植物生物技术课件
五四三二一、、、、、用濒及雌用用于危基雄于于种植因异脱稀质物工株毒缺的的程植苗或试拯植物的急管救株、快需保的三速良存快倍繁种及速体殖植交繁、物换殖单的
园艺植物生物技术课件
植物离体快繁技术
• 7. 原球茎是兰花的种子发芽过程中特有的一种形态学结构。（判断正误）
• 8.玻璃化苗与正常苗相比生长速度下降，甚至最后死亡（判断正误）
• 9.不定芽可直接从植物器官、组织发生也可先形成愈伤组织；然后形成不定芽。（判断正误）
• 10.利用体细胞胚状体来进行无性系的大量繁殖其特点是：A繁殖系数高、B成苗快、C结构完整、D 不存在嵌合现象（选择）
园艺植物生物技术课件
植物离体快繁技术
一般, 植物离体培养的温度低于15 ℃或高于35℃，对分化和生长都不利。大多数植物最适的培养温度在23-32 ℃之间，一般控制在(25±2) ℃条件下培养，热带园艺植物培养温度稍高。
园艺植物生物技术课件
植物离体快繁技术
离体培养中环境的湿度主要指培养容器内的湿度，相对湿度常达100％，但液体培养与固体培养时湿度可能有变化，固体培养时琼脂的用量与质量对培养环境的湿度有影响。
园艺植物生物技术课件
植物离体快繁技术
②外植体的生理状态对茎芽的反应能力有明显的影响选取相对较为幼嫩、生长能力较强的部位的材料生长季节 > 休眠季节幼嫩部分 > 成熟组织
园艺植物生物技术课件
植物离体快繁技术
根据外植体的特点选择适宜的消毒剂种类、浓度和消毒时间进行外植体的表面消毒。参考第一章外植

7.3植物组培快繁和脱毒技术

鉴定方法
1、直观测定法 2、指示植物法
利用病毒在其他植物上出现症状的特征，作为鉴别病毒种类的标准，这种专门用以生产症状的寄主植物即为指示植物，又称鉴别寄主。
3、抗血清鉴定法
4、酶联免疫吸附法（ELISA） 5、电子显微镜检查法
6、免疫吸附电镜法
• 另一种是起源于苗基部切口处愈伤组织的上部，直接起源于中柱鞘细胞，由于发生与茎的中柱相连，故利于移栽成活。
胚状体形成
• 概念：离体培养下起源于非合子细胞，经历了胚胎发生和胚胎发育过程所形成的类胚结构。
原球茎形成
3、试管苗的增殖与继代培养
• 1）、试管繁殖速率及计算
• 理论计算：
接种一个芽或一块增殖的培养物，经一段时间的培养后看能得到多少个芽或苗，从而推算理论上一年能繁殖出多少苗。
第一节植物的离体快繁
植物离体快繁（Micropropagation）又叫微型繁殖或试管繁殖，它是把植物材料放在试管内，给予人工培养基和合适培养条件，达到高速增殖，属离体无性繁殖。
其特点是快速，每年能以千百万倍
一 .离体快繁的应用
良种快繁脱毒良种苗快繁和无病毒苗大量快繁；特殊育种材料快繁；制种材料快速繁殖；自然和人工诱变有用突变体的快繁；基因工程植株的快繁；
四、离体快繁中的有关问题
• 培养物的增殖方式 • 外源生长调节物质对品种典型性的影响 • 继代次数与变异

第二节术
• 怎样脱毒？
植物的组培脱毒技
• 为什么要脱毒？
• 怎样鉴定无病毒植株？
病毒不仅使人患病，同样也侵害植物，使植物出现皱叶、黄叶、落叶，以致品质变劣、花色变淡、花数减少、产量降低。多数农作物，特别是无性繁殖作物，都易受到一种或多种病原菌的周身浸染。病原菌的浸染不一定都会造成植物的死亡，很多病毒甚至可能不表现任何可见症状。但在植物中病毒的存在会减少作物的产量和降低作物的品质。

植物组培快繁技术

植物组培快繁技术植物组培快繁是一种植物生物技术，它可以使植物的繁殖速度提高，使植物的生长和发育得到促进。

下面是一些植物组培快繁技术的方法：1.组培：组培是指在一个培养基中同时培养多种植物的方法。

组培可以使植物的繁殖速度提高，因为在同一个培养基中培养多种植物，可以使植物相互辅助生长，提高植物的存活率。

2.快繁：快繁是指使植物繁殖速度提高的方法。

快繁的方法有很多，比如诱导花发芽、促进芽萌发、促进嫁接愈合等。

3.培养基的选择：选择合适的培养基对植物的繁殖速度有很大的影响。

植物的培养基应该含有足够的养分，并且pH值要继续上文所述的植物组培快繁技术的方法：1.控制温度和湿度：控制温度和湿度是提高植物繁殖速度的重要因素。

不同的植物对温度和湿度的要求不同，所以在进行植物组培快繁时，应注意控制适当的温度和湿度。

2.光照：光照对植物的生长和繁殖起着重要的作用。

在进行植物组培快繁时，应注意保证植物能够得到足够的光照。

3.养分的补充：植物的生长和繁殖需要足够的养分。

在进行植物组培快繁时，应注意补充适继续上文所述的植物组培快繁技术的方法：1.植物激素的应用：植物激素是一类天然或人工合成的化学物质，能够促进植物的生长和发育。

在进行植物组培快繁时，可以适当使用植物激素来促进植物的生长和繁殖。

2.培养条件的优化：优化培养条件是提高植物繁殖速度的重要因素。

在进行植物组培快繁时，应注意优化植物的培养条件，包括光照、温度、湿度、氧气浓度等。

希望以上信息能够对您有所帮助。

植物组织培养与快繁技术课件

（2）成熟胚培养：成熟胚培养是指将子叶期以后的胚进行离体培养。成熟胚已储备了能满足自身萌发和生长的养分，培养技术较为容易。
①材料的消毒与接种
健壮优良的个体自交种或杂交种子，常规消毒灭菌，剥离胚。
② 培养基与培养条件
培养基大量元素和微量的无机盐为基本成分
谷氨酰胺作为氮源，可以促进胚生长植物天然浸提物（YE）促进胚生长硫氨素促进胚根的伸长生长素低浓度促进胚的发育（胚根）赤霉素促进有后熟作用的种子萌发
生长调节物质的影响传粉子房：加入生长调节剂通常可以促进子房生长。未传粉子房：必须加入生长调节剂。不同植物所要求的激素种类和配比各不相同。单倍体的来源和发育途径单倍体植株的来源和发育途径在不同的植株中各有不同。大孢子和胚囊中的卵细胞、助细胞和反足细胞通过形成胚状体或愈伤组织两种途径产生单倍体植株。
附加成分
培养条件：光照：12h／d光照温度：通常25－30℃
影响胚培养的因素
（1）胚龄胚龄越大，成功率越高；胚龄越小，成功率越低。小于0.5mm的幼胚很难进行培养。心形胚时期以前，属异养期。幼胚的培养的初期，处于异养阶段，需要提供完全的培养基。除通常需要的大量和微量无机盐外，还需要添加维生素、氨基酸和植物激素等，胚龄越小，培养基的成分就越复杂。随着胚龄的增加,离体胚对外源营养的要求渐趋简单，自养期的胚能在基本的无机盐和蔗糖培养基上生长。
（2）培养基
无机盐幼胚培养的培养基主要有MS(1962)、B5、Nitsch(1954)、Rijven(1952)、White(1963)、Rangaswang(1961)、Monnier(1978)等。成熟胚培养Tukey(1934)、Cox(1943)、 White(1963)等。碳水化合物碳源，调节培养基渗透压，防止幼胚早熟萌发。胚龄越小，要求的糖浓度越高。成熟胚：2％蔗糖幼胚培养：一般为6％－12％，可高到18％。在培养过程中，随培养时间增加，培养基的渗透压必须逐步降低。

植物组织培养技术第七章植物脱毒快繁技术

鉴定方法：
抗原的制备 →→抗血清的采收，分离→→ 把稀释的抗血清与未知的病毒植物的汁液在小试管内混合→→根据沉淀反应来鉴定病毒种类。
植物无病毒苗的培育
3. 特点：
特异性高（这种抗血清是高度专一性的试剂），测定速度快，一般几小时甚至几分钟就可以完成。所以抗血清法成为植物病毒鉴定中最有用的方法之一。
葡萄扇叶病毒
苹果花叶病毒
（二）茎尖培养脱毒
1、茎尖培养脱毒原理 2、培养基 3、茎尖培养方法 4、影响微茎尖培养的因素
①外植体大小 ②培养条件 ③外植体的生理状态
植物的去病毒技术，实质上就是采取不含病毒颗粒或病毒颗粒含量甚少的0.1～0.5mm 带1～2个叶原基的茎尖作为外植体，进行微繁殖，使其培养成完整的无病毒小植株的技术。
1、茎尖培养脱毒原理
病毒在植物体内分布不均匀，其数量随植株部位及年龄而异，越靠近茎顶端区域，病毒感染的程度越低，生长点即分生组织（约0.1-1mm）几乎不含或含病毒很少。
分生组织不带病毒，可能有4方面的原因：
1、植物体病毒的移动主要靠2条途径：一是通过维管系统，而分生组织中尚未形成维管系统；二是通过胞间连丝，但这条途径病毒移动速度非常慢，赶不上茎尖和根尖细胞不断分裂和活跃的生长速度。
活，并加快分裂和生长。
A
B
C
低温生长区
热处理区高温
寄主无损伤
病原微生物被消除寄主被杀死
2、热处理脱毒方法
(1)温汤浸渍处理 (2)热空气处理
（1）. 温汤浸渍处理适用：休眠器官、剪下的接穗或种植的
材料
方法：50℃左右的温水中浸渍10min
至数小时
特点：方法简便易行，但易使材料受伤。

《植物组织培养与快繁技术》PPT课件第1 - 质量工程

２．奠基阶段（３０年代中至５０年代末）：这一阶段植物组织培养得到了迅速的发展，广泛运用于生物学和农业生产。
经典的工作有：
• 1934年美国的植物生理学家White培养番茄的根建立了活跃的无性系并能继代培养，在以后的 28 年间转接了 1600 代仍能生长。 1939 年他们首先发现了B族维生素对植物生长的意义 • 1955 年， Miller 等首次从鲱鱼精子中分离得到细胞分裂素，定名为激动素（Kinetin）
• 外植体：用于组织培养的离体材料称为外植体（explant）。 • 初代培养：外植体的第一次培养 • 继代培养：初代培养后的培养体转移到新鲜的培养基中，并反复的多次移植、培养，统称为继代培养。
• 愈伤组织：原指植物在受伤以后于伤
口表面长出来的一团无特定结构和功
能的细胞团，组织培养中则指在人工
二、植物组织培养的基本技术
• 洗涤技术：玻璃器皿洗涤、塑料器皿洗涤 • 灭菌技术（培养基、培养用具灭菌）：湿热灭菌、干热灭菌、过滤灭菌、化学灭菌、辐射灭菌等。
• 无菌操作技术：无菌室的消毒、材料的消毒、接种等
三、植物组织培养的步骤：
组织培养流程图
第三章植物离体快速无性繁殖
和无病毒植株的培养
一、植物离体快速无性繁殖
（一）快速繁殖的概念
植物的快速繁殖又称微繁，指
将来自优良植株的茎尖，腋芽，叶片，鳞片等器官、组织和细胞进行离体培养，在短期内获得大量的遗传性一致的个体的方法。
2. 快速繁殖的优越性：
（1）快速繁殖、短期满足大量需求 • 组织培养的最大优点在于短期内能用较少的材料繁殖大量优质种苗，具有用材少、周期短、速度快等特点。由于可人为控制培养条件，根据不同植物不同离体部位的不同要求而提供不同的培养条件，因此生长快，往往10—40天即为一生长周期。所以，虽然植物组织培养需一定的设备及能源消耗，但由于植物材料能按几何级数大量繁殖生产，故还是成本低廉，利于工厂化生产，能及时提供规格整齐一致的优质、无病菌的植物种苗。

植物快繁新技术

特点
悬浮细胞培养技术具有能够大规模生产、繁殖速度快、遗传性状稳定等特点。
应用
悬浮细胞培养技术广泛应用于药物、生物制品和工业原料植物的快速繁殖和生产。
03
植物快繁新技术的优势与局限性
植物快繁新技术的优势
01
高效
植物快繁技术可以显著提高繁殖速度和效率，短时间内可以获得大量
优质植物。
02
精准
植物快繁技术可以实现精准的遗传性状改良，提高植物的适应性和品
04
植物快繁新技术的发展前景与研究方向
植物快繁新技术的发展前景
生物经济发展
随着生物经济的快速发展，植物快繁新技术作为生物技术的重要组成部分，具有广泛的应用前景，尤其是在农业、林业、园艺等领域。
植物生产效率提高
植物快繁技术可以缩短植物的繁育周期，提高植物生产效率，进而提高农业、林业、园艺等产业的产量和效益。
质。
03
节能
植物快繁技术可以减少传统育种过程中能源和资源的消耗，更加环保
和可持续。
植物快繁新技术的局限性
1 2
高成本
植物快繁技术需要专业的设备、技术和人才，因此投入的成本较高。
技术难度大
植物快繁技术需要熟练的技术人员才能操作，技术难度较大。
3
受限于特定品种
植物快繁技术并不是适用于所有植物的，部分植物的繁殖难度较大。
定义
01
植物克隆技术是一种通过无性繁殖方式，将植物的基因组复制
到另一个植物或组织中的技术。
特点
02
植物克隆技术具有繁殖速度快、遗传性状稳定、能够保持母本
的优良性状等特点。
应用
03
植物克隆技术广泛应用于花卉、水果、蔬菜、林木等领域的快