第3章 药物的杂质检查
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药学]第三章 药物杂质检查
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质 的
的杂质)。
种 非特定杂质
类
——在质量标准中未单独列出，而仅采用一
个通用的限度进行控制的一系列杂质，其在药
品中出现的种类与概率并不固定。
23
第一节 药物的杂质与限量
第三章
杂质的种类
一般杂质和特殊杂质
按来源分类 工艺杂质、降解杂质、反应 物和试剂中混入的杂质
按毒性分类 毒性杂质和信号杂质
按理化性质 有机杂质、无机杂质、残留
试剂规格 对可溶性钡盐不做检查. 检查：氯化物、铁、灼烧失重等
药用规格 如存在可溶性钡盐则导致 医疗事故.
检查：酸溶性钡盐、重金属、砷盐等
化学试剂不能代替药品使用
9
例. 临床所用药物的纯度与化学品及试剂 纯度的主要区别是
A. 所含杂质的生理效应不同 B. 所含有效成分的量不同 C. 所含杂质的绝对量不同 D. 化学性质及化学反应速度不同 E. 所含有效成分的生理效应不同
第三章
按化学类别和特性分为3类
无机杂质
三
——Cl-、S2-、CN-、As、重金属.
杂 质
有机杂质
的 种
——中间体、副产物、分解物、异构体.
类 残留溶剂
——反应过程中的提取溶剂
22
第一节 药物的杂质与限量
第三章
有机杂质 分为2类
特定杂质
三
——指在质量标准中分别规定了明确的限度，
杂 并单独进行控制的杂质 (结构已知和结构未知
进一步脱羧转化
对氨基苯甲酸
苯胺
引起毒性反应
14
第一节 药物的杂质与限量 残留溶剂
第三章
华法林钠 异丙醇中结晶 原料药检查异丙醇 地塞米松磷酸钠 甲醇和丙酮 提取
第3章 药物的杂质检查2
加硝酸的作用：
1）避免Ag2CO3↓, Ag3PO4 ↓ , Ag2O↓等的形 成，消除这些阴离子的干扰。
2）加速AgCl↓生成，产生较好的乳浊； Cl的浓度：50~80ug/50ml为宜。相当于标准 NaCl 溶液(10ug Cl/ml) 5.0~8.0ml。
注意事项
用含硝酸的蒸馏 水洗净滤纸中 Cl 供试品不澄明——过滤 至洗液遇AgNO3不 ½ 量＋AgNO 供 产生浑浊，再过 3→过滤至澄清 ＋标准 Clˉ → 对照 滤供试液。 试 供试品有色
醋酸铅棉花的作用
Zn粒及供试品中可能含有少量硫化物,在 酸性条件下产生H2S↑，与HgBr2作用，生 成HgS↓，干扰测定，故在导气管中部， 用Pb(Ac)2棉花填充（6～8cm高度），以 消除干扰 ：
H2S↑ + Pb(Ac)2→ PbS↓沉积在棉花上。
注意事项
供试品为硫化物: 在酸性溶液中→H2S↑或SO2↑，遇HgBr2试 纸→HgS↓或Hg↓(干扰测定)， 可先加HNO3处理，使硫化物氧化成硫酸盐, 以消除干扰。例 硫代硫酸钠 供试品为铁盐： 消耗KI，SnCl2 ，并氧化AsH3， 可先加酸性SnCl2，使Fe3+→ Fe2+，再检查。
注意事项：
本法合适的酸度为pH3.0-3.5。
供试品溶液有色：在对照管中加少量稀焦 糖溶液，（也可加其他无干扰的指示剂等） 使两管色调一致。如果外消色法不能消除 干扰，可采用内消色法。
供试品含有微量Fe3+ ：会氧化H2S析出S↓， 可加VitC 0.5-1.0g，使Fe3+ → Fe2+，同时 在对照管中加等量的VitC，再依法测定。
第一法 硫代乙酰胺法
1）避免Ag2CO3↓, Ag3PO4 ↓ , Ag2O↓等的形 成，消除这些阴离子的干扰。
2）加速AgCl↓生成，产生较好的乳浊； Cl的浓度：50~80ug/50ml为宜。相当于标准 NaCl 溶液(10ug Cl/ml) 5.0~8.0ml。
注意事项
用含硝酸的蒸馏 水洗净滤纸中 Cl 供试品不澄明——过滤 至洗液遇AgNO3不 ½ 量＋AgNO 供 产生浑浊，再过 3→过滤至澄清 ＋标准 Clˉ → 对照 滤供试液。 试 供试品有色
醋酸铅棉花的作用
Zn粒及供试品中可能含有少量硫化物,在 酸性条件下产生H2S↑，与HgBr2作用，生 成HgS↓，干扰测定，故在导气管中部， 用Pb(Ac)2棉花填充（6～8cm高度），以 消除干扰 ：
H2S↑ + Pb(Ac)2→ PbS↓沉积在棉花上。
注意事项
供试品为硫化物: 在酸性溶液中→H2S↑或SO2↑，遇HgBr2试 纸→HgS↓或Hg↓(干扰测定)， 可先加HNO3处理，使硫化物氧化成硫酸盐, 以消除干扰。例 硫代硫酸钠 供试品为铁盐： 消耗KI，SnCl2 ，并氧化AsH3， 可先加酸性SnCl2，使Fe3+→ Fe2+，再检查。
注意事项：
本法合适的酸度为pH3.0-3.5。
供试品溶液有色：在对照管中加少量稀焦 糖溶液，（也可加其他无干扰的指示剂等） 使两管色调一致。如果外消色法不能消除 干扰，可采用内消色法。
供试品含有微量Fe3+ ：会氧化H2S析出S↓， 可加VitC 0.5-1.0g，使Fe3+ → Fe2+，同时 在对照管中加等量的VitC，再依法测定。
第一法 硫代乙酰胺法
第3章药物的杂质检查
• 正确取样及称量范围 • 正确的比色、比浊方法
一、氯化物检查法（掌握） （一）原理 对照法
药物：Cl AgNO3 AgCl白色浑浊
HNO3
对照：NaCl（c, V） AgNO3 HNO3 AgCl白色浑浊
（二）检查方法
问题：如何进行比浊观察？ 同置于黑色背景上，自上向下观察。
肼中的游离肼。（特殊杂质检查方法收
载在中国药典 正文各药品的质量标准 中）
第二节
一、杂质限量
药物的杂质检查法
杂质量 ≤ 杂质限量 ＜ 杂质量
药物中所含杂质的最大允许量 百分之几（%） 百万分之几 10-6
药品合格
药品不合格
二、药物的杂质检查法
1. 对照法 （重点） 供试品与一定量待测杂质的对照品经
适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物。
2. 测定条件
（1）硝酸铅配制标准铅贮备液（加 硝酸防止Pb2+水解） （2）本法用2ml pH3.5的醋酸盐缓 冲液控制溶液pH值为3～3.5。 （3）显色剂：硫代乙酰胺做显色剂
（4）供试品如有色，需经处理后方可
检查。
A. 外消色法：在对照管中加稀焦糖
溶液或其他无干扰的有色溶液。 B. 内消色法
宜的条件是
（C）
A. 用硫代乙酰胺为标准对照液
B. 用10ml稀硝酸/50ml酸化 C. 在pH3.5醋酸盐缓冲溶液中
D. 用硫化钠为试液 E. 结果需在黑色背景下观察
例3. 现有一药物为苯巴比妥，欲进行 重金属检查，应采用哪种方法 （C） A. 一法 B. 二法 C. 三法
D. 四法
E. 以上都不对
过相同处理后，比较反应结果（比色
或比浊） 特点：不需知道杂质的准确含量
一、氯化物检查法（掌握） （一）原理 对照法
药物：Cl AgNO3 AgCl白色浑浊
HNO3
对照：NaCl（c, V） AgNO3 HNO3 AgCl白色浑浊
（二）检查方法
问题：如何进行比浊观察？ 同置于黑色背景上，自上向下观察。
肼中的游离肼。（特殊杂质检查方法收
载在中国药典 正文各药品的质量标准 中）
第二节
一、杂质限量
药物的杂质检查法
杂质量 ≤ 杂质限量 ＜ 杂质量
药物中所含杂质的最大允许量 百分之几（%） 百万分之几 10-6
药品合格
药品不合格
二、药物的杂质检查法
1. 对照法 （重点） 供试品与一定量待测杂质的对照品经
适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物。
2. 测定条件
（1）硝酸铅配制标准铅贮备液（加 硝酸防止Pb2+水解） （2）本法用2ml pH3.5的醋酸盐缓 冲液控制溶液pH值为3～3.5。 （3）显色剂：硫代乙酰胺做显色剂
（4）供试品如有色，需经处理后方可
检查。
A. 外消色法：在对照管中加稀焦糖
溶液或其他无干扰的有色溶液。 B. 内消色法
宜的条件是
（C）
A. 用硫代乙酰胺为标准对照液
B. 用10ml稀硝酸/50ml酸化 C. 在pH3.5醋酸盐缓冲溶液中
D. 用硫化钠为试液 E. 结果需在黑色背景下观察
例3. 现有一药物为苯巴比妥，欲进行 重金属检查，应采用哪种方法 （C） A. 一法 B. 二法 C. 三法
D. 四法
E. 以上都不对
过相同处理后，比较反应结果（比色
或比浊） 特点：不需知道杂质的准确含量
03第三章 药物的杂质检查
酸碱度检查法 物理性状检查法
16
杂质限量的计算：
取一定量（C· V）与被检杂质相同的纯品或对照品，配成对
照品溶液，与一定量（S）药物供试溶液在相同条件下处理后，
比较反应结果，以确定杂质含量是否超过规定（杂质限量L）。
杂质限量= 杂质最大允许量 供试品量
杂质对照液浓度 其体积 供试品量
O
CH=NNHCOCH2CN
NH2NHCOCH2CN
CH(OCH3)2
10
杂质的种类
来 源
一般杂质：在多种药物中普遍存在的杂质。 (Cl- ，SO42-，Pb，As，Fe) 特殊杂质：个别药物的生产及贮藏中引入的杂质。
毒 性
理 化 性 质
毒性杂质（Pb， As）： 信号杂质（Cl-， SO42-）：一般无毒，考察生产工艺， 反映药物的纯度水平 有机杂质 无机杂质 残留溶剂
第三章 药物的杂质检查
Impurity testing
1
第三章 药物的杂质检查
概 述 一般杂质检查方法 特殊杂质检查方法
2
第一节 概 述
药物纯度 指药物的纯净程度。药物中杂质是影响
药物纯度的主要因素。
纯度评价 外观性状、理化常数、杂质检查、含量测定
临床用药纯度和化学试剂纯度不同，药物纯度主要从用
22
三、铁盐检查法： 微量铁盐可能加速药物的氧化和降解
（一）硫氰酸盐法（Ch.P和USP）
1．原理： 红色
配制标准铁溶液：FeNH4(SO4) . 12H2O加硫酸 2．条件： [Fe3+] ：0.01mg～0.05mg/50ml，即相当于标准铁 溶液1～5ml。 酸 度： 稀盐酸4ml/50ml。
第三法: 硫化钠法，适用于溶于碱的药物或在稀酸产生沉淀的药物。
药物的杂质检查
例：肝素钠中杂质
0.005 0.004 0.003
AU
多硫酸软骨素
0.002 0.001 0.000 2 4 6 8 10 Minutes 12 14 16 18
仪器：P/ACEMDQ毛细管电泳仪（Beckman公司，美国） 非涂渍石英毛细管60cm*50mm（i.d.） 条件：检测波长200nm；分离电压-30kV；压力进样 0.7psi，10sec；分离温度25℃； 运行电解液：磷酸二氢钠缓冲液（pH3.5） 样品浓度：15mg/mL纯水溶液
二、杂质检查常用方法 （一）化学法
利用药物与杂质的化学性质的差异，选择
合适的试剂，与杂质发生化学反应，产生颜色、
沉淀、气体等，检查杂质的限量
（二）色谱分析法
1、薄层色谱法（TLC）
（1) 杂质对照品法
适用范围：已知杂质并能制备杂质对照品
方法：取一定浓度的已知杂质对照Байду номын сангаас溶液和供试品 溶液，分别点加在同一薄层板上，展开、定位、 检查，供试品中所含杂质的斑点，不能超过相应 的杂质对照品斑点。 缺点：需要杂质的对照品
方法一：按内标法或外标法测定杂质含量，再扣
除加入的对照品溶液量，即得杂质含量
方法二：分别测定加对照品和未加对照品溶液 浓度
加入对照品 CX+Δ CX
峰面积
Ais
未加对照品
CX
Ax
Ais C x C x Ax Cx
C x Cx Ais 1 A x
（三） 光谱分析法
第三章 药物的杂质检查
第一节 药物的杂质与限量
一、药物的纯度和杂质检查的意义 药物的纯度：指药物纯净程度，反映了药物质 量的优劣，含有杂质是影响药物纯度的主要因 素 例：左旋氧氟沙星具有抗感染功能，右旋氧氟 沙星为无效体， 在药物的使用过程中积累了对药物纯度的认识， 同时随着分离检测技术的进步检测方法有所改 进 例：盐酸罂粟碱中杂质检查：目视比色法 TLC HPLC
第03章药物的杂质检查
（四）气相色谱法
药物中挥发性杂质及有机溶剂残留量的检查
（1）仪器的配对性 如纳氏比色 管应配对，刻度线高低相差不超 过2mm，砷盐检查时导气管长度 及孔的大小要一致
（2）对照品与供试品的同步操作
2. 正确的取样及供试品的称量范围 1g不超过±2%，＞1g不超过±1%
3. 正确的比色、比浊方法
4. 检查结果不符合规定或在限度边 缘时应对供试管和对照管各复查二 份
2、颜色的差异
无色药物中有色杂质的检查，检查 供试品的颜色，来控制有色杂质的 量。
3、溶解行为的差异
利用药物溶于某种溶剂而杂质不溶， 或者反之。
二、化学法 1、酸碱性的差异 利用药物中杂质的酸性或碱性，来进 行检查。 2、氧化还原性的差异 3、杂质与一定试剂产生沉淀
4、杂质与一定试剂产生颜色 A、不得产生颜色 B、目视比色 C、 分光光度法 5、杂质与一定试剂产生气体 氰化物杂质的检查 （1）改进普鲁士蓝法：5μg （2）气体扩散三硝基苯酚锂法:0.5μg
铁铵中氯化物的检查。
（2）外消色法：如高锰酸钾中氯化 物的检查，可先加乙醇适量，使其还原 褪色后再依法检查。
2. 当有其它干扰物质存在时，必需 在检查前除去
（1）碘中氯化物的检查 （2）碘化物中氯化物的检查 （3）溴化物中氯化物的检查
3. 不溶于水的有机药物 （1）加水振摇，过滤，取滤液进行 检查。 （2）加热，放冷，过滤，取滤液进 行检查。
特殊杂质：指某一个或某一类药物的生 产或贮藏过程中引入的杂质，如阿司匹 林中的游离水杨酸、异烟肼中的游离肼、 甾体激素中的其他甾体。特殊杂质检查 方法收载在中国药典正文各药品的质量 标准中。
一、物理法 1、嗅味及挥发性的差异： 根据杂质的特殊嗅味来判断该杂质的 存在。 挥发性药物中检查不挥发性杂质。
药物分析 第三章 药物杂质检查
第三章 药物的杂质检查
药物分析教研室
1
第一节 药物的杂质与限量 第二节 杂质的检查方法 第三节 药物中一般杂质的检查 第四节 特殊杂质的检查与鉴定方法
2
第一节 药物的杂质与限量
▪ 药物的杂质与纯度 ▪ 药物杂质的来源 ▪ 药物杂质的分类 ▪ 杂质的限量
3
一、药物的杂质与纯度
▪ 药物的纯度 指药物纯净程度，反映了药物质 量的优劣。
16
特殊杂质 指在某一个或某一类药物的生产或贮存过程中， 根据药物的性质、生产方法和工艺条件，有可能引 入的杂质
如阿司匹林中的游离水杨酸、异烟肼中的游离肼、 甾体激素中的其他甾体。
特殊杂质检查方法收载在中国药典正文各药品的质量标准中。
17
2.按结构可分为：无机杂质和有机杂质 无机杂质 ——Cl-、S2-、SO42- 、CN-、As、重金属 有机杂质 ——如有机药物中引入的原料，中间体、副产物、 分解物、异构体、残留溶剂。 有机杂质可分为特定杂质和非特定杂质。
差异 药物纯度又称为药用规 是从杂质可能引起的化学变
格，主要从用药安全、 化对使用的影响以及试剂的
有效和对药物稳定性等 方面考虑杂质的生理作 用及毒副作用。
使用范围和使用目的加以规 定，它不考虑杂质对生物体 的生理作用及毒副作用。
分类 合格品和不合格品
基准试剂、优级纯、分析纯、 化学纯、色谱纯、光谱纯
46
(4) 对照药物法：无合适的杂质对照品，或杂质 斑点颜色与主药成分斑点颜色有差异，可用所 含待检杂质符合限量要求的该药品作为对照品 进行比较。
▪ 供试品与其相同药物对照品 分别点样于同一薄层板上，展开显色， 供试品杂质斑点≯对照药物中杂质斑点数，颜色不得 更深。
▪ 对照品与供试品相同，克服 2 法中对照品与杂质斑点 有时的不可比性。
药物分析教研室
1
第一节 药物的杂质与限量 第二节 杂质的检查方法 第三节 药物中一般杂质的检查 第四节 特殊杂质的检查与鉴定方法
2
第一节 药物的杂质与限量
▪ 药物的杂质与纯度 ▪ 药物杂质的来源 ▪ 药物杂质的分类 ▪ 杂质的限量
3
一、药物的杂质与纯度
▪ 药物的纯度 指药物纯净程度，反映了药物质 量的优劣。
16
特殊杂质 指在某一个或某一类药物的生产或贮存过程中， 根据药物的性质、生产方法和工艺条件，有可能引 入的杂质
如阿司匹林中的游离水杨酸、异烟肼中的游离肼、 甾体激素中的其他甾体。
特殊杂质检查方法收载在中国药典正文各药品的质量标准中。
17
2.按结构可分为：无机杂质和有机杂质 无机杂质 ——Cl-、S2-、SO42- 、CN-、As、重金属 有机杂质 ——如有机药物中引入的原料，中间体、副产物、 分解物、异构体、残留溶剂。 有机杂质可分为特定杂质和非特定杂质。
差异 药物纯度又称为药用规 是从杂质可能引起的化学变
格，主要从用药安全、 化对使用的影响以及试剂的
有效和对药物稳定性等 方面考虑杂质的生理作 用及毒副作用。
使用范围和使用目的加以规 定，它不考虑杂质对生物体 的生理作用及毒副作用。
分类 合格品和不合格品
基准试剂、优级纯、分析纯、 化学纯、色谱纯、光谱纯
46
(4) 对照药物法：无合适的杂质对照品，或杂质 斑点颜色与主药成分斑点颜色有差异，可用所 含待检杂质符合限量要求的该药品作为对照品 进行比较。
▪ 供试品与其相同药物对照品 分别点样于同一薄层板上，展开显色， 供试品杂质斑点≯对照药物中杂质斑点数，颜色不得 更深。
▪ 对照品与供试品相同，克服 2 法中对照品与杂质斑点 有时的不可比性。
第三章 药物的杂质检查 (2)
λ432nm
关物质检查的首选方法。
1、薄层色谱法（TLC）
在特殊杂质检查中应用很多，具有简便、快速、不需特殊 设备、灵敏度较高的优点。 原点至斑点中心的距离
Rf = 原点至溶剂前沿的距离 比移值
薄层涂布：无粘合剂 含粘合剂：常加入10~15% 煅石膏 (CaSO4· 2O,180℃烘 2H
4h)或0.5~0.7%羧甲基纤维素钠水溶液
第三章 药物的杂质检查
Test for purity
一 二 三 四 药物的杂质与限量 杂质的检查方法
药物中一般杂质检查
特殊杂质的检查与鉴定方法
一
药物的杂质与限量
药典中检查项下包括：
有效性： 药物生物利用度
均一性 ：含量均匀度、溶出度、重量差异
纯度检查： 药物中杂质的控制
安全性： 异常毒性、热源、无菌
杂质限量 杂质最大允许量 = 供试品量 × 100%
标准溶液浓度×标准溶液体积
=
供试品量 L----杂质限量
× 100%
即：
C ×V L = S ×100%
S-----供试品量 C、V-----标准液浓度、体积
计算时应注意：单位换算、供试液或标准液的稀释倍数。
示例一 茶苯海明中氯化物检查 取本品0.30g 臵200 ml量瓶中，加水50ml、氨试液3ml和 10%硝酸铵溶液6ml，臵水浴上加热5min，加硝酸银试液25ml， 摇匀，再臵水浴上加热15min，并时时振摇，放冷，加水稀释至 刻度，摇匀，放臵15min，滤过，取续滤液25ml臵纳氏比色管中， 加稀硝酸10ml，加水稀释至50ml，摇匀，在暗处放臵5min，与标 准氯化钠溶液(10μg Cl-/ml)1.5 ml制成的对照液比较，求氯化物 的限量。（0.04%）
关物质检查的首选方法。
1、薄层色谱法（TLC）
在特殊杂质检查中应用很多，具有简便、快速、不需特殊 设备、灵敏度较高的优点。 原点至斑点中心的距离
Rf = 原点至溶剂前沿的距离 比移值
薄层涂布：无粘合剂 含粘合剂：常加入10~15% 煅石膏 (CaSO4· 2O,180℃烘 2H
4h)或0.5~0.7%羧甲基纤维素钠水溶液
第三章 药物的杂质检查
Test for purity
一 二 三 四 药物的杂质与限量 杂质的检查方法
药物中一般杂质检查
特殊杂质的检查与鉴定方法
一
药物的杂质与限量
药典中检查项下包括：
有效性： 药物生物利用度
均一性 ：含量均匀度、溶出度、重量差异
纯度检查： 药物中杂质的控制
安全性： 异常毒性、热源、无菌
杂质限量 杂质最大允许量 = 供试品量 × 100%
标准溶液浓度×标准溶液体积
=
供试品量 L----杂质限量
× 100%
即：
C ×V L = S ×100%
S-----供试品量 C、V-----标准液浓度、体积
计算时应注意：单位换算、供试液或标准液的稀释倍数。
示例一 茶苯海明中氯化物检查 取本品0.30g 臵200 ml量瓶中，加水50ml、氨试液3ml和 10%硝酸铵溶液6ml，臵水浴上加热5min，加硝酸银试液25ml， 摇匀，再臵水浴上加热15min，并时时振摇，放冷，加水稀释至 刻度，摇匀，放臵15min，滤过，取续滤液25ml臵纳氏比色管中， 加稀硝酸10ml，加水稀释至50ml，摇匀，在暗处放臵5min，与标 准氯化钠溶液(10μg Cl-/ml)1.5 ml制成的对照液比较，求氯化物 的限量。（0.04%）
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COOH
水杨酸(杂质)
COOH
+
OH + (CH3CO)2O
H2SO4
70~75oC +
OCOCH3
+
CH3COOH
辽宁师范大学
Pharmaceutical analysis 药物分析
例：盐酸普鲁卡因注射液的制备
∙
制备过程中加热灭菌
盐酸普鲁卡因注射液 对氨基苯甲酸
进一步脱羧转化
苯胺
引起毒性反应
辽宁师范大学
（ChP）
灵敏度法 比较法
杂质定量测定法
辽宁师范大学
Pharmaceutical analysis 药物分析
对照法：取限度量的待检杂质对照品配成的对照溶 液，与一定量供试品配成的供试品溶液，在相同条 件下处理，比较反应结果，以确定杂质含量是否超 过限量。
例:
平行试验比较两 比色管的颜色或浊 度，判断杂质含量 是否符合规定。
辽宁师范大学
Pharmaceutical analysis 药物分析
第三章
药物的杂质检查
第一节 药物的杂质与限量 第二节 杂质的检查方法 第三节 药物中一般杂质的检查
第四节 特殊杂质的鉴定方法
辽宁师范大学
Pharmaceutical analysis 药物分析
§3-1 药物的杂质与限量
一、药物的杂质与纯度
滴定法
如：硫酸亚铁片剂中高铁盐的检查
2Fe3+ + 2KI
I2 + 2Na2S2O3 2Fe2+ + I2 + 2K+
2NaI + Na2S4O6
与药典规定限量进行比较
辽宁师范大学
Pharmaceutical analysis 药物分析
（二）色谱方法
难以采用化学法、光谱法对杂质进行检查时，多
采用色谱法。
辽宁师范大学
Pharmaceutical analysis 药物分析
例1.对乙酰氨基酚中氯化钠的检查
供试品溶液：
水 样品2.0g 100ml过滤 25ml 依法检查Cl ,溶解
对照溶液：标准NaCl溶液（10gCl-/ml），
取5.0ml同法操作比较，浊度不得更大。
计算：氯化物限量是多少（%）？
物稳定性的影响等方面来限定。只有合格品 和不合格品两个等级。
化学试剂纯度：从杂质可能引起的化学变化
对使用的影响方面来限定，不考虑杂质对生 物体的生理作用及毒副作用。纯度等级包括 色谱纯、光谱纯、优级纯、分析纯、化学纯 等。
辽宁师范大学
Pharmaceutical analysis 药物分析
二、药物杂质的来源
辽宁师范大学
Pharmaceutical analysis 药物分析
（二）杂质检查项目的确定
根据起始原料、生产工艺及稳定性情况确定。 药物在质量研究中和稳定性考察中检出的，并在批量 生产中出现的杂质和降解产物 单一对映体药物：检查其它对映体 消旋体药物：旋光度检查
（三）杂质限量的确定
在确保用药安全有效的前提下，应考虑到生产的可行
1% E1cm A / cl
c酮体 A / E
1% 1cm
0.05 = 1.15 10-4 g/ 100ml ） （ l 435 1
= 1.15 10 （g/ ml ）
-6
0.20 c样品 = 2.0 10-3 g/ml） （ 100 c酮体 1.15 106 L 100% = 0.06% 3 c样品 2.0 10
残留溶剂
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Pharmaceutical analysis 药物分析
无效或低效杂质
（1）具有光学异构体的药物，生物活性有很大差异；
如：肾上腺素为左旋体，其升压作用是右旋体的12倍。
（2）顺式体与反式体药物，生物活性也不相同；
如：VA以全反式的生物活性为最高。 （3）多晶型药物，晶型不同生物活性也有差异； 如：驱虫药甲苯咪唑，有A、B、C三种晶型。
色谱法是检查药物中有关物质的首选方法。 1. 薄层色谱法 2. 高效液相色谱法
3. 气相色谱法
4. 毛细管电泳法
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1.薄层色谱法
（1）杂质对照品法：适用于杂质已知并有杂质对照 品的情况。 方法：根据杂质限量，取供试品溶液和一定浓度的 杂质对照品溶液，分别点于同一薄层板上展开，定 位后进行检查。 供试品溶液除主斑点外的其它斑点与 相应杂质对照品溶液的主斑点比较。
纯度：药物的纯净程度。 需要从药物的外观性状、理化常数、杂质检查和含 量测定等方面进行综合评定。 杂质：ChP规定任何影响药品纯度的物质，是影响 药物纯度的主要因素 。 药物的纯度检查也可称为杂质检查。
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Pharmaceutical analysis 药物分析
药物纯度与化学试剂纯度：
药物纯度：从杂质对用药安全、有效和对药
10 106 5.0 C V L 100% 100% 0.01% 25 S 2.0 100
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例2.肾上腺素中酮体的检查
取本品0.20g，置100ml量瓶中，加盐酸溶液(9→2000)溶解并 稀释至刻度，摇匀，在310nm处测定吸光度不得超过0.05， 已知酮体的百分吸收系数为435，求酮体的限量。
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二、杂质的常用检查方法
（一）化学方法
显色反应检查法 沉淀反应检查法 生成气体的检查法 滴定法
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显色反应检查法
如：氯硝柳胺中2-氯-4-硝基苯胺的检查
Cl
NHCH2CH2NH2
其中C晶型的驱虫率为90%，B晶型的驱虫率为40~60%， A晶型的驱虫率小于20%。
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四、杂质的限量
杂质限量：药物中所含杂质的最大允许量。 限量表示方法：百分之几（%） 百万分之几（ppm） 对照法 控杂 制质 方限 法量 限量检查法
（4）对照药物法：适用于无合适的杂质对照品，或 杂质斑点颜色与主成分斑点颜色有差异而难以判断限
量的情况。
方法： 选用与供试品相同的药物 作为对照。对照药物中所含待检 杂质应符合限量要求，稳定性好。
供 对
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2.高效液相色谱法
使用高效液相色谱法测定含量的药物，可采用 同一色谱条件进行杂质检查。 采用此法检查杂质时，ChP规定应进行色谱系 统适用性试验，以保证仪器系统达到杂质检查 要求。
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限量计算公式
杂质最大允许量 杂质限量 100% 供试品量
对照溶液的浓度 对照溶液的体积 100% 供试品量
写成：
C V C V L 100% 或 L(ppm) 106 S S
注意: ①单位是否统一 ②供试品是否有稀释 ③表示方法%或ppm
性、批与批之间的正常波动、药品本身的稳定性。
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（四）杂质检查方法的选择与验证
杂质检查方法包括化学法、光谱法、色谱法等。 有机杂质多采用色谱法，特别是HPLC。
检查方法要求专属、灵敏，应验证方法的专属性。
分析方法的检测限应符合质量标准中对杂质限度的 要求。
（一）生产过程中引入
（1）所用原料不纯； （2）合成工艺中未反应完全的原料、反应中间体、
副产物等；
（3）药物在制成制剂的过程中产生的新杂质； （4）合成工艺中使用的试剂、溶剂等； （5）合成工艺中使用的设备、器皿可能引入重金属。
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例：阿斯匹林由水杨酸乙酰化制得 乙酰化不完全
CO NH NO2
OH
Cl
+
O2N Cl
NH2 + NaNO2 + 2HCl
O2N Cl
N2Cl + NaCl + 2H2O
+
-
杂质：2-氯-4-硝基苯胺
O2N Cl N N NHCH2CH2NH2
显色（比色法检查）
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沉淀反应检查法
样品管 对照管
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灵敏度法：在供试品溶液中加入一定量的试剂， 在规定条件下反应，不得出现正反应。即以检测 条件下的反应灵敏度来控制杂质限量。
例：乳酸中枸橼酸的检查
供试品(0.5g)
水 氨试液调微碱性
5mL溶液
1ml氯化钙试液
水浴△ 5min
如：盐酸肼屈嗪中游离肼的检查
盐酸肼屈嗪 盐酸肼屈嗪 CHO H2NNH2· 2O H CN HCl N N ． HCl
NHNH2 CHO H2NNH2 + 杂质：游离肼 杂质：游离肼 OH HC NNH2 OH + H 2O
比浊法或重量法检查
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按来源分为：
一般杂质：在多种药物的生产和贮藏中容易引入 的杂质。 检查方法收载在ChP的附录中。 特殊杂质： 在特定药物的生产和贮藏中引入的杂质。 检查方法收载在ChP正文各品种的质量标准中。
水杨酸(杂质)
COOH
+
OH + (CH3CO)2O
H2SO4
70~75oC +
OCOCH3
+
CH3COOH
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例：盐酸普鲁卡因注射液的制备
∙
制备过程中加热灭菌
盐酸普鲁卡因注射液 对氨基苯甲酸
进一步脱羧转化
苯胺
引起毒性反应
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（ChP）
灵敏度法 比较法
杂质定量测定法
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对照法：取限度量的待检杂质对照品配成的对照溶 液，与一定量供试品配成的供试品溶液，在相同条 件下处理，比较反应结果，以确定杂质含量是否超 过限量。
例:
平行试验比较两 比色管的颜色或浊 度，判断杂质含量 是否符合规定。
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第三章
药物的杂质检查
第一节 药物的杂质与限量 第二节 杂质的检查方法 第三节 药物中一般杂质的检查
第四节 特殊杂质的鉴定方法
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§3-1 药物的杂质与限量
一、药物的杂质与纯度
滴定法
如：硫酸亚铁片剂中高铁盐的检查
2Fe3+ + 2KI
I2 + 2Na2S2O3 2Fe2+ + I2 + 2K+
2NaI + Na2S4O6
与药典规定限量进行比较
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（二）色谱方法
难以采用化学法、光谱法对杂质进行检查时，多
采用色谱法。
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例1.对乙酰氨基酚中氯化钠的检查
供试品溶液：
水 样品2.0g 100ml过滤 25ml 依法检查Cl ,溶解
对照溶液：标准NaCl溶液（10gCl-/ml），
取5.0ml同法操作比较，浊度不得更大。
计算：氯化物限量是多少（%）？
物稳定性的影响等方面来限定。只有合格品 和不合格品两个等级。
化学试剂纯度：从杂质可能引起的化学变化
对使用的影响方面来限定，不考虑杂质对生 物体的生理作用及毒副作用。纯度等级包括 色谱纯、光谱纯、优级纯、分析纯、化学纯 等。
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二、药物杂质的来源
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（二）杂质检查项目的确定
根据起始原料、生产工艺及稳定性情况确定。 药物在质量研究中和稳定性考察中检出的，并在批量 生产中出现的杂质和降解产物 单一对映体药物：检查其它对映体 消旋体药物：旋光度检查
（三）杂质限量的确定
在确保用药安全有效的前提下，应考虑到生产的可行
1% E1cm A / cl
c酮体 A / E
1% 1cm
0.05 = 1.15 10-4 g/ 100ml ） （ l 435 1
= 1.15 10 （g/ ml ）
-6
0.20 c样品 = 2.0 10-3 g/ml） （ 100 c酮体 1.15 106 L 100% = 0.06% 3 c样品 2.0 10
残留溶剂
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无效或低效杂质
（1）具有光学异构体的药物，生物活性有很大差异；
如：肾上腺素为左旋体，其升压作用是右旋体的12倍。
（2）顺式体与反式体药物，生物活性也不相同；
如：VA以全反式的生物活性为最高。 （3）多晶型药物，晶型不同生物活性也有差异； 如：驱虫药甲苯咪唑，有A、B、C三种晶型。
色谱法是检查药物中有关物质的首选方法。 1. 薄层色谱法 2. 高效液相色谱法
3. 气相色谱法
4. 毛细管电泳法
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1.薄层色谱法
（1）杂质对照品法：适用于杂质已知并有杂质对照 品的情况。 方法：根据杂质限量，取供试品溶液和一定浓度的 杂质对照品溶液，分别点于同一薄层板上展开，定 位后进行检查。 供试品溶液除主斑点外的其它斑点与 相应杂质对照品溶液的主斑点比较。
纯度：药物的纯净程度。 需要从药物的外观性状、理化常数、杂质检查和含 量测定等方面进行综合评定。 杂质：ChP规定任何影响药品纯度的物质，是影响 药物纯度的主要因素 。 药物的纯度检查也可称为杂质检查。
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药物纯度与化学试剂纯度：
药物纯度：从杂质对用药安全、有效和对药
10 106 5.0 C V L 100% 100% 0.01% 25 S 2.0 100
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例2.肾上腺素中酮体的检查
取本品0.20g，置100ml量瓶中，加盐酸溶液(9→2000)溶解并 稀释至刻度，摇匀，在310nm处测定吸光度不得超过0.05， 已知酮体的百分吸收系数为435，求酮体的限量。
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二、杂质的常用检查方法
（一）化学方法
显色反应检查法 沉淀反应检查法 生成气体的检查法 滴定法
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显色反应检查法
如：氯硝柳胺中2-氯-4-硝基苯胺的检查
Cl
NHCH2CH2NH2
其中C晶型的驱虫率为90%，B晶型的驱虫率为40~60%， A晶型的驱虫率小于20%。
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四、杂质的限量
杂质限量：药物中所含杂质的最大允许量。 限量表示方法：百分之几（%） 百万分之几（ppm） 对照法 控杂 制质 方限 法量 限量检查法
（4）对照药物法：适用于无合适的杂质对照品，或 杂质斑点颜色与主成分斑点颜色有差异而难以判断限
量的情况。
方法： 选用与供试品相同的药物 作为对照。对照药物中所含待检 杂质应符合限量要求，稳定性好。
供 对
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2.高效液相色谱法
使用高效液相色谱法测定含量的药物，可采用 同一色谱条件进行杂质检查。 采用此法检查杂质时，ChP规定应进行色谱系 统适用性试验，以保证仪器系统达到杂质检查 要求。
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限量计算公式
杂质最大允许量 杂质限量 100% 供试品量
对照溶液的浓度 对照溶液的体积 100% 供试品量
写成：
C V C V L 100% 或 L(ppm) 106 S S
注意: ①单位是否统一 ②供试品是否有稀释 ③表示方法%或ppm
性、批与批之间的正常波动、药品本身的稳定性。
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（四）杂质检查方法的选择与验证
杂质检查方法包括化学法、光谱法、色谱法等。 有机杂质多采用色谱法，特别是HPLC。
检查方法要求专属、灵敏，应验证方法的专属性。
分析方法的检测限应符合质量标准中对杂质限度的 要求。
（一）生产过程中引入
（1）所用原料不纯； （2）合成工艺中未反应完全的原料、反应中间体、
副产物等；
（3）药物在制成制剂的过程中产生的新杂质； （4）合成工艺中使用的试剂、溶剂等； （5）合成工艺中使用的设备、器皿可能引入重金属。
辽宁师范大学
Pharmaceutical analysis 药物分析
例：阿斯匹林由水杨酸乙酰化制得 乙酰化不完全
CO NH NO2
OH
Cl
+
O2N Cl
NH2 + NaNO2 + 2HCl
O2N Cl
N2Cl + NaCl + 2H2O
+
-
杂质：2-氯-4-硝基苯胺
O2N Cl N N NHCH2CH2NH2
显色（比色法检查）
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沉淀反应检查法
样品管 对照管
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Pharmaceutical analysis 药物分析
灵敏度法：在供试品溶液中加入一定量的试剂， 在规定条件下反应，不得出现正反应。即以检测 条件下的反应灵敏度来控制杂质限量。
例：乳酸中枸橼酸的检查
供试品(0.5g)
水 氨试液调微碱性
5mL溶液
1ml氯化钙试液
水浴△ 5min
如：盐酸肼屈嗪中游离肼的检查
盐酸肼屈嗪 盐酸肼屈嗪 CHO H2NNH2· 2O H CN HCl N N ． HCl
NHNH2 CHO H2NNH2 + 杂质：游离肼 杂质：游离肼 OH HC NNH2 OH + H 2O
比浊法或重量法检查
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按来源分为：
一般杂质：在多种药物的生产和贮藏中容易引入 的杂质。 检查方法收载在ChP的附录中。 特殊杂质： 在特定药物的生产和贮藏中引入的杂质。 检查方法收载在ChP正文各品种的质量标准中。