实验七 蔬菜中硝酸盐含量的测定(紫外分光光度法)
农大市场蔬菜硝酸盐含量测定(生物化学)
农大菜市场6种蔬菜硝酸盐含量测定二师兄云南农业大学烟草学院摘要：硝酸盐在一定条件下可转化为亚硝酸盐，而亚硝酸盐对人体有极大的害处。
蔬菜是一类易富集硝酸盐的作物，人体摄入的硝酸盐有81．2％来自蔬菜，不同的蔬菜中硝酸盐含量一般是不相同的，在不同的环境条件下所生长的同一种蔬菜的硝酸盐含量也不同，因此，研究蔬菜中硝酸盐的含量对我们的身体健康非常重要。
本文针对不同蔬菜、同种蔬菜的不同部位进行分析，得出了相关硝酸盐含量的浓度。
Abstract:Under certain conditions,nitrate can be converted to nitrite,and nitrite great harm on the human body.Vegetables are a class of easy to crop nitrate concentration,the human intake of nitrate from vegetables are81.2%,the nitrate content in different vegetables is generally not the same,in different environmental conditions,growth under the same the nitrate content of vegetables is different,therefore,the nitrate content of vegetables for our health is very important.In this paper, different vegetables,different parts of the same kinds of vegetables,analyze, draw the relevant nitrate concentrations。
蔬菜中硝酸盐及亚硝酸盐含量的测定
WORD格式可编辑蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐含量的测定摘要：蔬菜中的硝酸盐和亚硝酸盐是一种对人体有害的化学物质,其含量比其它植物都高,人体摄入它会引起多种疾病.本实验采用分光光度发分别对拜城县恰玛古，柯坪县恰玛古，伊宁市恰玛古，大白菜，黄萝卜，黄瓜中亚硝酸盐及硝酸盐含量进行测定。
结果表明：（1）亚硝酸盐：六种蔬菜中亚硝酸盐含量有明显的差异，测定结果是：大白菜0.7919mg/g，黄萝卜0.6930mg/g，黄瓜0.5763mg/g，拜城恰玛古0.5528mg/g，伊宁恰玛古1.1294 mg/g，柯坪恰玛古0.5174mg/g。
（2）硝酸盐：大白菜1.6098mg/g，黄萝卜0.0598mg/g，黄瓜0.7421mg/g，拜城恰玛古0.2608mg/g，伊宁恰玛古2.5308mg/g，柯坪恰玛古0.0317mg/g，蔬菜中亚硝酸盐含量的回收率88.80%。
关键词：硝酸盐；亚硝酸盐；蔬菜；测定方法；前言：蔬菜尤其是叶菜类蔬菜,是一种易于富集硝酸盐的植物。
人体摄入的硝酸盐81.2％来自蔬菜[1]。
硝酸盐本身毒性不大,对人畜无直接的危害,但含量过高对人体可能造成危害,因为在微生物的作用下极易还原为亚硝酸盐。
亚硝酸盐是一种有毒物质,可直接使动物中毒!造成亚铁血红蛋白症,严重可致死亡[2]。
亚硝酸盐，一类无机化合物的总称。
主要指亚硝酸钠.亚硝酸钠为白色至淡黄色粉末或颗粒状，味微咸，易溶于水。
外观及滋味都与食盐相似，并在工业、建筑业中广为使用，肉类制品中也允许作为发色剂限量使用。
由亚硝酸盐引起食物中毒的机率较高。
食入0.3～0.5克的亚硝酸盐即可引起中毒甚至死亡[3]。
硝酸盐,亚硝酸盐广泛存在于人类环境中,其对人类健康和生态环境的危害,日益受到人们的普遍关注。
硝酸盐在细菌的作用下可还原成亚硝酸盐,使血液的载氧能力下降,从而导致高铁血红蛋白症。
联合国世界卫生组织和粮农组织[4]早在1973 年就制定了食品中硝酸盐的限量标准,以ADI值为基础,提出蔬菜可食部分中硝酸盐含量的卫生标准为432mg/kg (鲜样),亚硝酸盐成人每人每日容许量为7.8mg。
蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐的测定及含量分析
蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐的测定及含量分析
硝酸盐和亚硝酸盐在一些地区的日常食物中存在，如蔬菜和肉类。
它们也被添
加到食品中，如香肠和酱油，以改善口感和保鲜时间，可以减少有害微生物的生长。
硝酸盐和亚硝酸盐在高浓度下有毒，所以监管机构和食品安全官员必须密切监测它们在食品中的含量，以确保食物安全。
为了确定蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐的含量，原理是用水解和酸解的方法，然后
用标准的分光光度法进行测定分析。
首先解冻样品，采用乙醇或其他适当的溶剂消化；消化液可以用酸浓度调节器进行调节，如HCl或NaOH；然后将消化液向容易
对比度测量物体中添加适量氧化铌，水解时加热蒸发；最后添加分光光度滴定液，如凯氏滴定液，测量出总硝酸盐摩尔浓度，并建立比例。
以上是硝酸盐和亚硝酸盐在蔬菜样品中的分析测定方法。
硝酸盐和亚硝酸盐的含量可以通过上述方法利用标准的分光光度法确定。
这一
测定方法简单容易，重点是精确度较高，可以准确检测出不同样品中硝酸盐和亚硝酸盐的含量，从而提高食物的安全性。
蔬菜中硝酸盐含量的测定(精)
蔬菜中硝酸盐含量的测定摘要 :基于硝酸根在 219 nm处有强烈吸收 , 且干扰少 , 测定提取液的吸光度,从标准曲线上查得相应浓度。
提取液用 pH=9.6-9.7的氨缓冲液,从待测样品中提取硝酸根离子。
此法测定的结果表明回收率在 95.1%-100.9%之间 , 相对标准偏差为1.55%-4.14%。
操作方法简便 , 适用于蔬菜中的硝酸盐含量的测定。
关键词:蔬菜 ; 硝酸盐 ; 紫外分光光度法前言:蔬菜 ( 尤其叶菜类是一种容易累积硝酸盐的作物,硝酸盐含量超标已成为影响蔬菜品质的重要因素之一。
由于当前我国蔬菜在种植过程中化肥过量施用 , 而且有些蔬菜生产者采用工业废水和生活污水浇地 , 造成许多蔬菜中硝酸盐含量过高 , 已证明 , 硝酸盐在人体内经微生物作用可被还原为有毒的亚硝酸盐 , 它可与人体血红蛋白作用 , 使之失去载氧功能 , 造成高铁血红蛋白症 , 长期摄入硝酸盐会造成智力迟钝等危害 [ 1]。
因此 , 蔬菜中硝酸盐的含量可作为衡量亚硝酸盐对人体潜在危害的一个指标 [ 2]。
蔬菜硝酸盐含量的测定方法很多,如镉柱还原分光光度法、离子色谱法。
其中镉柱还原分光光度法为检测蔬菜中硝酸盐含量的国家标准方法 , 但由于干扰因素多, 操作步骤过于繁琐, 很难满足批量常规分析之需要,而其它几种方法则需要精密仪器, 测定条件较为严格,不适宜作常规监测分析 [3]。
本实验采用操作简单、准确度高的紫外分光光度法测定蔬菜中硝酸盐含量。
1 实验仪器与材料1.1 主要仪器与试剂1.1.1仪器紫外分光光度计 ; 容量瓶;乳钵1 .1.2试剂①氨缓冲液(pH=9.6~9.7:2ml 浓盐酸加入 50ml 蒸馏水中,混合后再加入 5ml 浓氨水, 最后用蒸馏水稀释至 100ml 。
②粉末状活性炭(除去待测样品中的色素。
③蛋白质沉淀剂Ⅰ,蛋白质沉淀剂Ⅱ (除去蛋白质及混浊物。
④溶液Ⅰ:15克铁氰化钾 (K3Fe(CN6 溶于 50ml 蒸馏水中, 定容于 100ml 。
蔬菜中硝酸盐及亚硝酸盐含量的测定
WORD格式可编辑蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐含量的测定摘要：蔬菜中的硝酸盐和亚硝酸盐是一种对人体有害的化学物质,其含量比其它植物都高,人体摄入它会引起多种疾病.本实验采用分光光度发分别对拜城县恰玛古，柯坪县恰玛古，伊宁市恰玛古，大白菜，黄萝卜，黄瓜中亚硝酸盐及硝酸盐含量进行测定。
结果表明：（1）亚硝酸盐：六种蔬菜中亚硝酸盐含量有明显的差异，测定结果是：大白菜0.7919mg/g，黄萝卜0.6930mg/g，黄瓜0.5763mg/g，拜城恰玛古0.5528mg/g，伊宁恰玛古1.1294 mg/g，柯坪恰玛古0.5174mg/g。
（2）硝酸盐：大白菜1.6098mg/g，黄萝卜0.0598mg/g，黄瓜0.7421mg/g，拜城恰玛古0.2608mg/g，伊宁恰玛古2.5308mg/g，柯坪恰玛古0.0317mg/g，蔬菜中亚硝酸盐含量的回收率88.80%。
关键词：硝酸盐；亚硝酸盐；蔬菜；测定方法；前言：蔬菜尤其是叶菜类蔬菜,是一种易于富集硝酸盐的植物。
人体摄入的硝酸盐81.2％来自蔬菜[1]。
硝酸盐本身毒性不大,对人畜无直接的危害,但含量过高对人体可能造成危害,因为在微生物的作用下极易还原为亚硝酸盐。
亚硝酸盐是一种有毒物质,可直接使动物中毒!造成亚铁血红蛋白症,严重可致死亡[2]。
亚硝酸盐，一类无机化合物的总称。
主要指亚硝酸钠.亚硝酸钠为白色至淡黄色粉末或颗粒状，味微咸，易溶于水。
外观及滋味都与食盐相似，并在工业、建筑业中广为使用，肉类制品中也允许作为发色剂限量使用。
由亚硝酸盐引起食物中毒的机率较高。
食入0.3～0.5克的亚硝酸盐即可引起中毒甚至死亡[3]。
硝酸盐,亚硝酸盐广泛存在于人类环境中,其对人类健康和生态环境的危害,日益受到人们的普遍关注。
硝酸盐在细菌的作用下可还原成亚硝酸盐,使血液的载氧能力下降,从而导致高铁血红蛋白症。
联合国世界卫生组织和粮农组织[4]早在1973 年就制定了食品中硝酸盐的限量标准,以ADI值为基础,提出蔬菜可食部分中硝酸盐含量的卫生标准为432mg/kg (鲜样),亚硝酸盐成人每人每日容许量为7.8mg。
紫外可见分光光度计测定腌制菜中亚硝酸盐含量
紫外可见分光光度计测定腌制菜中亚硝酸盐含量作者：赵立明来源：《农家科技下旬刊》2015年第07期摘要：本文通过选取白菜、萝卜为试验样本，采用紫外分光光度法测定亚硝酸盐。
该实验的线性范围为0 mg/L～0.3 mg/L，线性相关系数r=0.999 x，检出限为0.14 mg/kg，回收率为94.61%～104%的亚硝酸钠含量。
分别测出白菜、萝卜在常规条件下的亚硝酸盐含量，分别对这两种蔬菜在不同浸泡时间下的亚硝酸盐含量进行检测。
不难发现减少亚硝酸盐的摄入，科学的蔬菜处理法是要浸泡至少20min，煮蔬菜时尽量减少煮沸的时间。
关键词：白菜；萝卜；亚硝酸盐；紫外分光光度法随着人们生活水平的不断提高，食品安全问题越来越受到人们的重视，我国亚硝酸盐中毒事件频发，食品中的亚硝酸盐是否符合国家标准已成为研究的热点。
蔬菜在人们日常膳食中必不可缺。
在北方腌制的白菜，萝卜是东北地区的传统风味食品。
近年来，人们在注重其营养的同事更注重其安全性。
目前，测定亚硝酸盐含量的方法有很多，本实验采用操作简单、准确度高的紫外分光光度法测定腌制过程中的白菜、萝卜含量变化动态研究。
一、实验部分1.主要仪器及设备紫外分光光度计，电子分析天平，高速食品粉碎机，电热恒温水浴锅。
2.材料试剂白菜、萝卜、硼砂饱和溶液、亚铁氰化钾、乙酸锌。
3.实验方法（1）提取从蔬菜黄瓜称取5g（精确到0.001g）制成匀浆的试样，置于50ml烧杯中，加12.5ml硼砂饱和液，搅拌均匀，以70℃左右的水约300ml讲试样洗入500ml容量瓶中，于沸水浴中加热15min，取出置冷水浴中冷却，并放置至室温。
（2）提取液净化在上述提取液中，一边转动，一边加入5ml亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5ml乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。
加水至刻度，摇匀，放置0.5h，除去上层脂肪，清液用滤纸过滤，弃去初滤液备用。
（3）亚硝酸盐的测定吸取40.0ml上述滤液于50ml戴塞闭塞管中，另吸取0.00ml、0.20ml、0.40ml、0.60ml、0.80ml、1.00ml亚硝酸钠标准使用液，分别置于50ml带塞比色管中。
蔬菜中硝酸盐含量的测定
NO3- 的最大吸收波长为 200nm±3nm, NO2-最大吸收波长为 210nm，实验选择条件 219nm 处，NP3-、NO2-具有等吸收特征。 测定结果为 NO3-和 NO2-之和，鉴于新鲜蔬菜中 NO2-，从而从总 和中扣除。由于仪器波长差异，测定前可先用标准 NO3-和 NO2找出等吸收波长，再进行测定。
关键词：蔬菜; 硝酸盐; 紫外分光光度法 前言：蔬菜( 尤其叶菜类) 是一种容易累积硝酸盐的作物，硝酸 盐含量超标已成为影响蔬菜品质的重要因素之一。由于当前我国蔬 菜在种植过程中化肥过量施用,而且有些蔬菜生产者采用工业废水和 生活污水浇地,造成许多蔬菜中硝酸盐含量过高,已证明,硝酸盐在人 体内经微生物作用可被还原为有毒的亚硝酸盐,它可与人体血红蛋白 作用, 使之失去载氧功能,造成高铁血红蛋白症, 长期摄入硝酸盐会 造成智力迟钝等危害[ 1]。因此,蔬菜中硝酸盐的含量可作为衡量亚 硝酸盐对人体潜在危害的一个指标[ 2]。 蔬菜硝酸盐含量的测定方法很多，如镉柱还原分光光度法、 离 子色谱法。其中镉柱还原分光光度法为检测蔬菜中硝酸盐含量的国 家标准方法, 但由于干扰因素多，操作步骤过于繁琐，很难满足批量 常规分析之需要，而其它几种方法则需要精密仪器， 测定条件较为 严格，不适宜作常规监测分析[3]。本实验采用操作简单、准确度高 的紫外分光光度法测定蔬菜中硝酸盐含量。
0.2664
0.8943
0.5871
1.9639
小瓜
0.3476
0.4843 1.1653
1.6211 354.91
0.5182
1.7342
0.2270
0.7631
土豆
0.1497
0.1495 0.5052
0.6546 68.43
蔬菜的硝酸盐亚硝酸盐分光光度法测定
蔬菜硝酸盐亚硝酸盐分光光度计测定法仪器：分光光度计、组织粉碎机（或研钵小）、水浴锅、电子天平、冷藏冰箱、烘箱器材：烧杯500mL、容量瓶1000mL（至少2个）、250mL(多个)、100mL(至少8个)、50mL （至少2）。
5mL移液枪（或小于50mL量筒）、漏斗、铁架台、滤纸药品：硝酸钾、硼砂、亚铁氰化钾、乙酸锌、冰醋酸、活性碳粉（分析纯）去离子水。
试剂：饱和硼砂溶液（50g溶于1000mL热去离子水、下同）0.25mol/L亚铁氰化钾溶液（106g定容于1000ml容量瓶）1mol/L乙酸锌溶液（220g溶于30mL乙酸水混合物，定容至1000mL）100mg/L硝酸钾标准液（110摄氏度下烘至恒重的样品取0.1631g定容至1000mL）标准曲线的绘制吸取硝酸根标准贮备液0、2、4、6、8、10、12、14mL分别于8个100mL容量瓶中去离子水定容至刻度混匀配置成：0、2、4、6、8、10、12、14mg/L在风光光度计上220nm???处比色绘标准曲线。
实验步骤：1.取待测样品洗净吸干水分称取3g磨成匀浆（5分钟以内）2.将匀浆入用约80mL热水（70~80℃，不超过100mL）洗入250mL烧杯，加5mL饱和硼砂溶液，沸水浴15min并不时搅拌。
3.冷却洗入250mL容量瓶，加入10mL亚铁氰化钾溶液和10mL乙酸锌溶液沉淀蛋白，1g 活性炭吸附有机物（每加一种均需摇匀）定容至刻度，摇匀过滤的透明待测液。
（取100mL去离子岁做空白对照3个）4.分吸取2mL待测液与对照分别220nm（石英比色杯）处比色于标准曲线上读取浓度亚硝酸盐测定取叶片约5克磨成匀浆（五分钟内）称取匀浆3克于100mL烧杯中，用量筒量取4%的乙酸锌30mL倒入搅拌均匀，用2mol/L的NaOH调节pH至7.2-7.5，加入粉状活性炭0.5克，于70度恒温水浴锅加热30min并不时搅拌，后冷却到室温，用布氏漏斗初次抽滤，（用清洗玻璃棒的烧杯的液体洗涤滤渣3-5次），将滤液倒入100mL容量瓶后用约30mL的蒸馏水分多次清洗抽滤瓶洗液倒入容量瓶定容到刻度，用注射器和0.45um滤膜再次抽滤，吸取滤液10mL入25mL比色管加入2.5mL对氨基苯磺酸，摇匀震荡，5min后加入2.5mL的N-1-萘乙基乙二胺震荡摇匀，用4%的盐酸调节pH至1.1-1.3定容到刻度，取此溶液在540nm处比色。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
实验七蔬菜中硝酸盐含量的测定（紫外分光光度法）1、实验目的
掌握蔬菜中硝酸盐的测定原理，熟悉取样方法、样品的处理、测定和仪器的使用方法，了解各种试剂的配制方法。
2、实验原理
用pH9.6～9.7的氨缓冲液提取样品中硝酸根离子，同时加活性炭去除色素类，加沉淀剂去除蛋白质及其他干扰物质，利用硝酸根离子和亚硝酸根离子在紫外区219nm处具有等吸收波长的特性，测定提取液的吸光度，其测得结果为硝酸盐和亚硝酸盐吸光度的总体，鉴于新鲜蔬菜、水果中亚硝酸盐含量甚微，可忽略不计。
测定结果为硝酸盐的吸光度，可从标准曲线上查得相应的质量浓度，计算样品中硝酸盐的含量。
3、仪器与试剂
3.1 仪器
（1）紫外分光光度计
（2）分析天平：感量0.01g，0.0001g。
（3）研钵
（4）可调式往返震荡机
（5）pH计
3.2 试剂
（1）盐酸。
（2）氢氧化铵。
（3）氨缓冲溶液（pH9.6～9.7）：量取20ml盐酸，加到500nl水中，混合后加入50ml氢氧化铵，用水定容至1000ml。
用精密pH计调pH到9.6～9.7。
（4）活性炭（粉末）。
（5）正辛醇。
（6）亚铁氰化钾溶液{ω[K4Fe(CN)6.3H2O]=15%}：称取150g亚铁氰化钾溶于水，定容至1000ml。
（7）硫酸锌溶液[ω(ZnSO4)=30%]：称取300g硫酸锌溶于水，定容至1000ml。
（8）硝酸盐标准溶液：称取0.2039g经110±5℃烘干至恒重的硝酸钾（优级纯），用水溶解，定容至250ml。
此溶液硝酸根质量浓度为500mg/L，于冰箱内保存。
4、实验步骤
4.1 取样选取一定数量的生菜，先用自来水冲洗，再用蒸馏水清洗干净，用吸水纸吸干表面水分，剪碎后充分混匀，称取
5.0g于研钵中充分捣碎。
4.2 提取将匀成浆后的样品少量多次共20ml水洗净研钵，将样品全部转移到50ml容量瓶中，加1滴正辛醇消除泡沫，再加入3ml氨缓冲溶液，0.5g粉末状活性炭。
放置于可调式往返振荡机上（200次/min）振荡30min，加入亚铁氰化钾溶液和硫酸锌溶液各1ml，充分混合，加水定容至100ml，充分摇匀，放置5min，用定量滤纸过滤。
同时做空白实验。
4.3 测定根据试样中硝酸盐含量的高低，吸取上述滤液10ml于50ml容量瓶内，用水定容。
用1cm石英比色皿，于219nm处测定吸光度。
4.4工作曲线的配制分别吸取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0和1.2ml硝酸盐标准溶液于50mL容量瓶中，加水定容至刻度，摇匀，此标准系列溶液硝酸根质量浓度分别为0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0和12.0mg/L。
用1cm石英比色皿，于219nm 处测定吸光度，以标准溶液质量浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
5、结果计算
样品中硝酸盐含量以质量分数ω表示，数值以毫克每千克（mg/kg）计，按公式（1）计算：
ω=p×V1×V3/ m×V2 （1）
式中：
ω—样品中硝酸盐含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；
p—从工作曲线中查得测试液中硝酸盐质量浓度，单位为毫克每升（mg/L）；
V1—提取液定容体积，单位为毫升（ml）；
V2—吸取滤液体积，单位为毫升（ml）；
V3—待测液定容体积，单位为毫升（ml）；
m—样品质量，单位为克（g）。
计算结果保留到整数位。
6、注意事项
本标准适用于新鲜蔬菜及水果中硝酸盐含量的测定。
本方法检出限为1.2mg/kg。
本方法的线性范围为2.00mg/kg～12.00mg/kg。
在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对值不大于这两个测定值的算术平均值的5%，以大于这两个测定值的算术平均值的5%情况不超过5%为前提。