亚硝酸盐含量测定实训标准

亚硝酸盐含量测定实训标准

13.1任务工单

13.1.1实训目的

（1）掌握亚硝酸盐含量测定的基本原理；

（2）学习分光光度法。

13.1.2实训材料

香肠样品

13.1.3实训仪器

天平、研钵、分光光度计、电热炉、50m1烧杯1个、500ml容量瓶1个、50ml 容量瓶10个、胶头滴管、移液管、玻璃棒

13.1.4实训试剂

（1）乙酸锌溶液（220g/L）:称取11g乙酸锌,先加1.5ml冰醋酸溶解,用水稀释至50ml

（2）亚铁氰化钾溶液(106g/L):称取5.3亚铁氰化钾,用水溶解,并稀释至50ml （3）饱和硼砂溶液(50g/L):称取2.50g硼酸钠,溶于5mL热水中,冷却后备用（4）亚硝酸钠标准溶液(10g/mL‟

（5）对氨基苯磺酸溶液…1.0%‟

（6）盐酸萘乙二胺溶液…0.3%‟

13.2项目指导书

13.2.1实训原理

亚硝酸盐采用盐酸奈尔二胺法测定。

用碱性的硼砂将脂肪从样品中分离,利用乙酸锌及亚铁氰化钾使蛋白质变性分离。试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后,在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸氮化后,再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料,利用分光光度法来测定,最大吸收波长为540nm。根据朗伯比尔定律,并结合工作曲线,可以得到香肠中亚硝酸盐的含量(mg/kg)

13.2.2实训步骤

(1)试样的预处理:

1、取全部,用研钵制成匀浆备用。

2、称取5g…精确至0.1g制成匀浆的试样置于50ml烧杯中,加125mL饱和硼砂溶液,搅拌均匀,以70℃左右的水约300mL将试样洗入50ml容量瓶中,80℃加热15min取出置冷水浴中冷却,并放置至室温。

3、在振荡上述提取液时加入5mL亚铁氰化钾溶液,摇匀,再加入5mL乙酸溶液以沉淀蛋白质加水至刻度,摇匀,放置30min除去上层脂肪,上清液用滤纸过滤…用移液管吸取中间澄清的部分‟。弃去初滤液3mL滤液备用。

…2‟亚硝酸盐的测定

1、吸取40.0mL上述液于50mL容量瓶中,另吸取0.00mL0.50mL1.00 mL、1.50mL、

2.00mL、2.50mL亚硝酸标准液…相当于0.0μg、5.0μg、10ug、15.0ug、20.0μg、25,ug亚硝酸钠),分别置于50mL容量瓶中。分别标号为“样品管”、“0号管”、“1号管”、“2号管”、“3号管”、“4号管”、“5号管”。

2、于标准容量瓶与试样容量瓶中分别加入2mL对氨基苯磺酸溶液,混匀静置3min-5min后各加入2mL盐酸萘乙二胺溶液,加水至刻度,混匀,静置15min。

3、用1cm比色皿,以“0号管”调节零点,于波长540nm处测“1号管”2号管”、“3号管”、“4号管”、“5号管”吸光度,绘制标准曲线比较。同时做试剂空白。（5）结果计算

1、绘制标准曲线

2、根据样品管吸光度值，计算样品中亚硝酸盐含量

3、换算到要求单位mg/kg

4、判断结果是否符合国家标准

我国食品添加剂使用卫生标准在肉制品中，亚硝酸盐的最终残留量不得超过30mg/kg

13.2.3课后作业

（1）完成实训报告

（2）本次实训所用到的试剂有哪些？分别如何配制？

（3）列出此次实训的注意事项。

（4）将实验结果拍照上传到班级群。

13.3项目考核方案

实训考核内容及评价方法