胸腺素注射液活力实验的探讨
注射用胸腺素致变态反应3例

注射用胸腺素致变态反应3例
陆卫英;覃鲁财
【期刊名称】《医药导报》
【年(卷),期】2009(28)8
【摘要】1病例简介患者1,男,17岁,因咳嗽、咯血3个月,纳差2个月余,乏力3d入院。
自诉于2008年5月初无明显诱因出现阵发性咳嗽,每次约持续数秒钟,可自行缓解,无咯痰,咯出几口鲜血,无头晕、胸闷、气促,无午后低热、盗汗、乏力。
当地医院诊断为肺结核,给予HRZE抗结核及止血治疗,咯血消失,经治疗2周后,出现纳差及食欲减退,经查肝功能提示谷氨酸氨基转移酶(ALT)增高,为进一步诊治,遂于2008年8月2日住院治疗。
【总页数】1页(P1096-1096)
【作者】陆卫英;覃鲁财
【作者单位】广西壮族自治区龙潭医院药剂科,柳州,545005;广西壮族自治区龙潭
医院药剂科,柳州,545005
【正文语种】中文
【中图分类】R979.5;R969.3
【相关文献】
1.注射用红花黄色素致严重变态反应1例 [J], 龚青霞;范润平;巩文花;王宇;王芳
2.注射用红花黄色素致严重变态反应1例 [J], 李冰;赵传旭;李宪超;康长清;张莉
3.胸腺素肠溶片致变态反应2例 [J], 胥丹;王江军;吕晓红
4.注射用胸腺素致变态反应1例 [J], 蒋龙福;郑海滨
5.注射用氨曲南致变态反应2例 [J], 邵焕芬
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
重组人胸腺素_4基因的克隆_表达_纯化_鉴定及活性检测

研究原著 文章编号:1000-2790(2008)16-1451-04重组人胸腺素 4基因的克隆、表达、纯化、鉴定及活性检测张 珍,游颜杰,李维娜,薛晓畅,赵 宁,包春杰,韩 苇,张英起(第四军医大学药学系生物技术中心,陕西西安710033)收稿日期:2008-04-21; 接受日期:2008-05-21通讯作者:张英起.Te:l (029)84774773 Em ai:l z h angyqh@f m .cn作者简介:张 珍.硕士生(导师张英起).Te:l (029)84774774Ext .422 Em a i :l zhenzhen3008@163.co mC l oni ng ,expressi on ,purification ,i den -tifi cation and bi ol ogical acti vity of re -co mbi nant hu m an thy mosi n beta 4Z H AN G Zhen ,YOU Yan-J ie ,LI W ei -N a ,X UE X i ao-Chang,Z H AO N ing,BAO Chun -J ie ,HAN W ei ,Z H AN G Y i ng-Q i B i o techno l ogy C enter ,Schoo l o f Phar m acy ,Fourt h M ilitary M ed-i ca lU n i versity ,X i an 710033,Ch i naAbstract A I M:T o express reco m bi nant hu m an thy m osi n beta 4(T 4)in E.coli and to pur if y and i dentify it .M ETHODS :W e syn t hesized T 4g ene us i ng E.coli preferred codon and cloned t he tande m repeat gene (T 4 )into expressi on vector pET-22b (+),t hen transfor m ed reco m b i nant plas m id to E.coli BL21(DE3)and i nduced its expressi on w ith IPTG.T he expressed recomb i nant prote i n w as pur ifi ed by sa lti ng -ou t ,hydrophob i cchrom atography and ion exchange chrom atography and i den tified by W estern B l o t and M ALD I -TO F -M S .RE SULT S :A purified recomb i nant T 4was obta i ned w ith bio l og ica l ac ti v ity .CONCLUS I ON :The successfu l construc ti on ,purificati on and expressi on of reco m binant T 4 establi shes a f oundati on for itsfuncti on research .K ey word s thy m osi n 4;tande m repeat sequences ;clon i ng,m o lecu l ar ;g ene expression摘 要 目的:利用基因工程的方法原核表达重组人胸腺素 4(T 4)并对其进行纯化和鉴定.方法:使用大肠杆菌偏爱密码子合成人T 4全长基因,构建了T 4的二串联体基因(T 4 ),将其克隆入表达载体p ET -22b(+)中,重组质粒转化大肠杆菌BL 21(DE3)感受态,IPTG 诱导表达后,经盐析、疏水层析和离子交换层析纯化重组蛋白,采用免疫印迹和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对重组蛋白进行鉴定.结果:获得了纯化的重组T 4 蛋白,并具有生物学活性.结论:成功构建、表达和纯化了T 4 ,为其功能研究奠定基础.关键词 胸腺素 4;串联重复序列;克隆,分子;基因表达中图号 Q782 文献标识码 A0 引言胸腺素 4(thy m osi n beta 4,T 4)广泛分布于各组织、器官和细胞中,与免疫功能、神经发育和肌动蛋白功能密切,还可抗炎,促进血管生成[1]、创伤愈合[2]、毛囊发育[3],修复受损的心肌[4].虽然T 4有着广泛的应用前景,但由于其分子太小,难于直接在大肠杆菌中表达.目前用于实验室及临床试验的T 4主要为化学合成品,价格昂贵,使其应用受到限制.我们利用基因合成与PCR 技术,构建了T 4的二串联体基因(T 4 )表达载体,在大肠杆菌中成功地表达和纯化了该串联体,为进一步的研究奠定了基础.1 材料和方法1.1 材料 质粒pET -22b (+),大肠杆菌DH 5 及BL21(DE3)由本中心保存;人T 4全长基因、测序(北京奥科生物技术有限责任公司);引物(上海英峻生物公司);限制性内切酶N de ,B am H ,Sal ,T4DNA 连接酶以及DNA M arker DL2000(Ta K a Ra);Taq PCR M ix(天根生化科技有限公司);B 型质粒小量提取试剂盒,小分子量DNA 片段高效快速回收试剂盒(北京博大泰克生物基因技术有限责任公司);蛋白分子质量标准(Fer m entas);兔抗人T 4多克隆抗体(Abca m,ab14334);H RP -山羊抗兔Ig G,DAB 显色液(北京中杉金桥生物技术有限公司);I PTG,琼脂,琼脂糖,MTT (北京鼎国生物技术有限责任公司);Pheny l Sepharose 6Fast F l o w (h i g h sub ),Q Sephar ose FastF l o w, KTA Purifier(Phar m acia);ConA (华美生物工程公司),小鼠淋巴细胞分离液(天津灏洋生物制品科技有限责任公司),胎牛血清(杭州四季青生物工程材料有限公司),RP M I1640(G ibco ),T 4化学合成品(ProSpec -Tany),其他试剂均为国产分析纯;B ALB /c 小鼠,雄性,6~8周龄(第四军医大学实验动物中心).1.2 方法1.2.1 重组T 4 基因的克隆 按照大肠杆菌惯用密码子及人胸腺素 4氨基酸序列设计并合成了编码T 4的全基因片段,5 和3 末端分别带有N de 和Bam H 酶切位点,将其克隆入pET-22b(+)中,Nde 和Bam H 双酶切鉴定后,将其命名为pET-22b (+)-T 4 ;合成两条引物,上游引入Bam H 酶切位点,下游引入Sal 酶切位点及终止密码子TAG,以pET-22b(+)-T 4 为模板进行PC R扩增,PCR 产物经Bam H 和Sal 双酶切后克隆入pET-22b (+)-T 4 中,Bam H 和Sal 双酶切鉴定并测序,命名为pET-22b(+)-T 4 .1.2.2 重组T 4 的表达 重组质粒pET-22b(+)-T 4 转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,挑取阳性克隆接种于含氨苄青霉素100m g/L的LB培养液中,37 震荡培养过夜,(a)以1 100分别转接入六个试管中,继续培养2h(A600n m=0.5)后,其中一管作为诱导的阴性对照,另五管分别加入终浓度为0.01, 0.05,0.1,0.5,1mm ol/L I PTG,继续培养4h,离心收集菌体行SDS-P AGE;(b)以1 100分别转接入两个试管中,继续培养2h(A600n m=0.5)后,其中一管作为诱导的阴性对照,另一管加入终浓度为0.01 mmo l/L I PTG,每隔1h收集菌体进行SDS-PAGE. 1.2.3 重组T 4 的W ester n B lot鉴定 I PTG诱导及未诱导的BL21/pET-22b(+)-T 4 行SDS-PAGE,随后将其转移到NC膜上,用兔抗人T 4多克隆抗体作为一抗,H RP-山羊抗兔Ig G作为二抗,进行W estern B lot鉴定.1.2.4 重组T 4 的纯化 终浓度为0.01mm ol/L 的I PTG,诱导BL21/pET-22b(+)-T 4 4h后收集菌体,超声裂菌后的上清经硫酸铵盐析、Pheny l Seph-arose6Fast Flo w(h i g h sub)疏水柱和Q Sepharose FastF l o w阴离子交换柱纯化后,Lo w r y s法测定蛋白含量.1.2.5 MALD I-TOF-M S和H PLC 将纯化后的重组T 4 透析在水中,0.22 m滤膜过滤除菌后,委托军事医学科学院仪器测试分析中心对其进行分子量测定.另取20 L样品进行H PLC分析.1.2.6 重组T 4 的生物学活性检测 从小鼠单个脾细胞悬液中分离淋巴细胞,用含100mL/L胎牛血清的RP M I1640调整细胞浓度,加入Con A使其终浓度为2.5m g/L,按每孔4 105细胞加入96孔细胞培养板中,37 孵箱培养6h后,加入重组T 4 和T 4化学合成品,终浓度分别为2,4,8 m o l/L,继续培养72h,MTT法测定淋巴细胞的增殖和分化.2 结果2.1 PCR及酶切和序列鉴定 人T 4基因的PCR 产物经0.2g/L琼脂糖凝胶电泳检测,在约135bp处可见特异性条带(图1),该片段大小与预测结果一致.分别用限制性内切酶Nde 和Sal ,Nde 和Bam H ,Bam H 和Sal 双酶切pET-22b(+)-T 4 ,在270bp处可见重组T 4 基因及135bp处的T 4基因片段(图2).测序结果为序列正确的重组T 4 基因,含起始密码子、终止密码子及酶切位点.图2 人T4重组克隆的酶切电泳图2.2 重组T 4 的表达 SDS-PAGE结果表明,各浓度I PTG诱导BL21/pET-22b(+)-T 4 4h后,均有明显的新生条带出现,其量无明显差别(图3);终浓度为0.01mm o l/L的I PTG诱导BL21/pET-22b(+)-T 4 不同时间后,同样有明显的新生条带出现,诱导4h后其量明显增加(图4).M:m arker;1:未诱导BL21/pET-22b(+)-T 4 ;2~6:0.01,0.05, 0.1,0.5和1mm ol/L IP TG诱导BL21/pET-22b(+)-T 4 4h.图3 IPTG浓度对重组T4表达的影响M :m arker ;1:未诱导BL21/pET-22b(+)-T 4 ;2~7:0.01mm ol/L I PTG 诱导BL21/pET-22b(+)-T 4 1~6h.图4 诱导时间对重组T 4 表达的影响2.3 重组T 4 的W estern B lot 鉴定 DAB 显色后在相应位置有条带显现,表明重组T 4 蛋白可与兔抗人T 4多克隆抗体特异性结合(图5).1:0.01mm ol/L IPTG 诱导BL21/pET -22b(+)-T 4 4h ;2:未诱导BL21/pET -22b (+)-T 4;M :m arker .图5 重组T 4 的免疫印迹鉴定2.4 重组T 4 的纯化 超声裂菌可知重组T 4 蛋白以可溶性形式存在,经硫酸铵盐析、疏水层析和阴离子交换层析可得较高纯度重组T 4 蛋白(图6),平均每克菌约可得到7.5m g T 4 蛋白纯品.M :m arker ;1:未诱导BL21/pET -22b (+)-T 4;2:0.01mm ol/L IP TG 诱导BL21/pET -22b (+)-T 44h;3:超声裂菌沉淀;4:超声裂菌上清;5:硫酸铵盐析沉淀;6:硫酸铵盐析上清;7:疏水作用纯化目的蛋白;8:离子交换作用纯化目的蛋白.图6 重组T 4 的纯化2.5 MALD I -TOF -M S 和HPLC 质谱分析测得重组T 4 的M r 为10020.5,与理论分子量相近(图7A );H PLC 测定其纯度大于95%(图7B).2.6 重组T 4 的生物学活性检测 与对照相比,重组T 4 与商品化的T 4均可有效地刺激淋巴细胞的增殖和分化(表1),这一发现证实我们获得了与商品化T 4活性相当的重组T 4 .图7 重组T 4 的M ALD I -TOF-M S(A )和HPLC(B)表1 重组T 4 生物学活性检测浓度( m ol/L)A 570nmT 4 T 40(对照)0.096 0.0120.096 0.01220.135 0.013a 0.127 0.010a 40.158 0.016a 0.147 0.015a 80.173 0.020a0.166 0.017aaP <0.05vs 对照.3 讨论虽然SDS -PAGE 是测定蛋白质分子量的一种简便易行的方法,但有些蛋白质用这种方法测出的分子量是不可靠的.这些蛋白质有:电荷异常或构象异常的蛋白质(组蛋白F 1本身带有大量正电荷,尽管结合了正常比例的SDS ,仍不能完全掩盖其原有正电荷的影响);带有较大辅基的蛋白质(如某些糖蛋白)以及一些结构蛋白(如胶原蛋白)和含二硫键较多的蛋白质(有些受体)[5].T 4 的理论分子量为10000,但电泳结果显示其M r 约为18000,随后采用质谱分析对其分子量进行测定,结果与理论分子量接近.T 4 电泳分子量与理论分子量的偏差可能是由于其构象异常引起的,因为T 4 不带有辅基,并非结构蛋白,不含有二硫键,并且可排除电荷异常(单体T 4电泳分子量与理论分子量相符).因此,在分析SDS -PAGE 所得的结果时,应该用至少两种方法来测定未知样品的分子量.T 4在胸腺素 家族中丰度最高,它是肌动蛋白分离剂,参与很多重要的生理和病理活动.目前,关于T 4的临床试验包括压迫性溃疡、大疱性表皮松解症、静脉淤积性溃疡、糖尿病的玻璃体切割术和急性心肌梗死,其中前四项已进入 期临床试验.此外,T 4的异常表达与肿瘤转移关系密切[6],对T 4进一步深入研究有助于找到治疗高转移肿瘤的有效疗法.虽然T 4有广泛的临床应用前景,但目前所用的化学合成品价格昂贵,同时T 4是小分子多肽,难于直接在大肠杆菌中表达,所以其大规模生产受到限制.关于T 4的融合表达已有报道:在T 4的N 端融合5个氨基酸(HKCD I),可以使T 4在大肠杆菌得到高效表达,纯化后的蛋白可提高E -玫瑰花环结花率,并可促进T 细胞的增殖和分化[7];T 4融合蛋白在大肠杆菌表达后经亲和层析和DTT 水解,可得到C 端融合5个氨基酸(LEGSS)的重组T 4,不仅可以促进淋巴细胞的增殖和分化,而且可以促进伤口愈合[8];此外,H is 6-T 4可在大肠杆菌中高效表达并具有促血管生成的生物活性[9].我们利用串联重复技术在大肠杆菌中成功表达了重组T 4 ,经过硫酸铵盐析、疏水作用和离子交换作用层析,得到高纯度的重组蛋白,不仅具有生物学活性,也为下一步功能研究奠定了基础. 参考文献[1]Sm artN,Rossdeutsch A,R il ey P .Thy m os i n bet a 4and angi ogen e -s i s :M odes of action and t h erapeu tic poten tial[J].Angi ogen es i s ,2007,10:229-241.[2]M ali ndaKM,S i dhu GS ,M an iH,et a.l Thymos i n beta 4accel eratesw ound h eali ng[J].J Invest Der m ato,l 1999,113(3):364-368.[3]Ph il p D ,Nguyen M,S chere m et a B,et a.l Thy m os i n bet a 4i ncrea -ses hair grow th by acti vati on of h ai r follicl e ste m cell s [J].FASEB J ,2004,18(2):385-387.[4]B ock-M arquette I ,Saxena A,W h iteM D ,et a.l Thymos i n 4act-ivates i ntegri n-li nked k i nase and pro m otes card i ac cellm i grati on ,s u r -vi val and card i ac repair[J].Nature ,2004,432(7016):466-472.[5]郭尧君.蛋白质电泳实验技术[M ].2版.北京:科学出版社,2005:111.[6]W angW S ,Ch en P M,H siao HL,et a.l Overexpression of the t hy -mos i n beta 4gene is associat ed w i th i n creased i nvasi on of S W 480co -l on carci no m a cell s and the d ist ant m etastasis of hum an col orectal carcino m a[J].On cogene ,2004,23(39):6666-6671.[7]陈妍柯,杨 辉,路 凡,等.人胸腺肽 4基因的克隆表达及活性检测[J].生物化学与生物物理学报,2002,34(4):502-505.[8]L i X ,Zheng L,Peng F,et a.l R eco m b i nan t thy m osi n b eta 4canpro m ote f u l-l t h ickn ess cutaneous wound heali ng [J].Protei n E xpr Puri,f 2007,56(2):229-236.[9]贾 琪,华子春.人胸腺肽 4基因在大肠杆菌中的克隆、表达、纯化及促血管生成生物活性研究[J].东南大学学报:医学版,2007,26(4):298-301.编辑 袁天峰经验交流 文章编号:1000-2790(2008)16-1454-01受血者输血前4项传染病血清标志物检测杨逊怀 (黄河三门峡医院输血科,河南三门峡472000)收稿日期:2008-04-22; 接受日期:2008-05-07作者简介:杨逊怀.学士,主管检验师.Te:l (0398)2889100关键词 H Bs A g ;抗-HCV;抗-H I V;梅毒抗体 中图号 R 392.33 文献标识码 B1 临床资料 2004/2006年我院输血患者1934(男1504,女430)例,年龄25d~87岁.其中门诊患者102例,余为分布于我院14个临床科室的住院患者.输血前H Bs A g ,抗-HCV,抗-H I V,梅毒抗体4项检测均用EL IS A 法,所用试剂均经批检合格在有效期内使用.HBs A g ,抗-HCV 试剂购自郑州安图绿科生物工程有限公司,抗-H I V,梅毒抗体购自北京万泰生物药业有限公司,严格按照说明书进行操作.仪器为芬兰产L ab -syste m s A scent 全自动酶标仪.每年河南省技术监督局对仪器进行校准.输血前4项检测结果为:H Bs A g 阳性221例,阳性率为11.4%;抗-HCV 阳性27例,阳性率为1.4%;抗-H I V 阳性2例,阳性率为0.1%;梅毒抗体阳性33例,阳性率为1.7%.总阳性率为14.6%.2 讨论 目前已知通过输血传播的疾病有十几种之多,在我国当前主要的是艾滋病、病毒性乙型肝炎、病毒性丙性肝炎和梅毒[1].为了确保临床输血安全和预防与控制输血后传染性疾病,各采供血机构按照国家规定对血液成分的质量进行了严格的检测,但是由于检测的误差、试剂的敏感度以及疾病的窗口期等问题,时常有漏检的发生.另一方面,对受血者进行输血前4项检测也非常重要,通过我院2004/2006年输血前检测说明,各种感染疾病发病率都较高,因此,通过检测可以推断出感染性疾病与输血的因果关系,对预防因输血引起的医疗纠纷,有十分重要的意义.本调查中可以看出,HB s Ag,抗-H CV,抗-H I V,梅毒抗体阳性率部分高于正常人群[2-3],应引起广大义务工作者的高度重视,尤其抗-HCV,梅毒抗体阳性率分别为1.4%和1.7%,提示我们医务工作在预防血液传播性疾病职业感染的危险性不容忽略. 参考文献[1]季 阳.保障我国输血安全的策略和措施[J].中国输血杂志,2007,20(5):359.[2]季 阳.输血与输血技术[M ].北京:人民卫生出版社,2003:215-222.[3]武建国.老年性抗梅毒螺旋体抗体测定假阳性率偏高[J].临床检验杂志,2006,24(4):241.编辑 黄良田。
对血清胸腺因子(FTS)提高NK细胞活性的实验研究.

对血清胸腺因子(FTS)提高NK细胞活性的实验研究作者:乐嘉静,张林可,徐康森【摘要】目的观察 FTS提高正常动物、荷瘤动物及免疫缺陷型动物自然杀伤性细胞(NK)活性的作用。
方法用正常动物、荷瘤动物及免疫缺陷型动物模型皮下注射不同剂量的FTS后,取其脾NK细胞测定其对靶细胞(L929)的杀伤能力。
结果 FTS 2.5mg/kg、1.25mg/kg能够显著地增加正常小鼠及免疫力低下模型小鼠的NK细胞对靶细胞的杀伤能力(P<0.01)。
结论 FTS能够提高NK细胞的活性,具有抗肿瘤及免疫增强的作用。
【关键词】血清胸腺因子;NK;L929;抗肿瘤【Abstract】 Objective Observation the FTS to enhance the normal animal, the Dutch lump animal and the immunodeficiency animal nature killing germ cell (NK) active function.Methods After the normal animal, the Dutch lump animal and immunodeficiency animal model hypodermic injection different dosage of FTS, take its the spleen NK cell to determine it to the target cell (L929) kill capability.Results FTS 2.5mg/kg,1.25mg/kg can obviously increase the normal mouse and the immunity low model mouse’s NK cell to the target cell kill capability (p< 0.01).Conclusion FTS can enhance the NK cell activeness, has function which the anti-tumor and the immunity strengthen.【Key words】 FTS;NK;L929;anti-tumor血清胸腺因子(thymulin,FTS)是胸腺组织中由9个氨基酸残基组成的小分子肽,是一类具有增强机体免疫功能的多肽[1],自然杀伤细胞(NK)具有抗肿瘤、抗感染和免疫调节功能[2],是抗肿瘤的免疫监视作用中的第一道防线[3],因此,NK活性的提高对于机体的抗肿瘤能力的提高是有很积极作用的,本文通过研究FTS对不同模型动物NK细胞活力的影响,了解FTS的免疫调节作用。
重组胸腺素β4的研究与开发(军科院)

重组胸腺素β4的研究与开发军事医学科学院生物工程研究所一、项目简介1、胸腺素β4(Tβ4)介绍胸腺素(Thymosins)是由胸腺产生的一种淋巴生长因子,由G oldstein和White于1966年首次从胎牛胸腺蛋白提取液中发现,是一组小分子多肽,含有40多种组分。
根据这些多肽在等电聚焦电泳分析图谱上的位置,可以划分为α、β、γ三个型:PI(α)<5,5<PI (β)<7,PI(γ)>7。
目前已经有20多种β胸腺肽异构体被鉴定出来,而人体内主要存在三种:Tβ4、Tβ10和Tβ15,其中Tβ4含量最高。
Tβ4是由43个氨基酸组成,结构高度保守的水溶性多肽,N 末端具有乙酰化修饰(Ac-SDKPDMAEIEKFDKSKLKKTETQEKNPL PSKETIEQEKQA GES),平均分子量为4964Da,等电点为5.1。
Tβ4被认为是主要的球形肌动蛋白(G-actin)结合肽,能与G-actin单体结合从而阻断其聚合。
研究表明Tβ4是具有抗炎、促进创伤愈合的多肽,应用于皮肤创伤愈合、眼角膜损伤修复、干眼症治疗、心肌损伤修复、神经损伤修复以及化妆品领域。
2、Tβ4促进角膜损伤愈合的机制图1 Tβ4促进角膜损伤愈合的机制炎症反应是影响角膜修复的重要因素,急性炎症反应正是由于多形核白细胞(PMN)快速浸透角膜所致,并由此引发后续的慢性炎症。
Sosne课题组研究发现,在角膜修复过程中用Tβ4处理伤口能显著降低炎症相关因子的表达水平,如IL-1β、巨噬细胞炎症蛋白MI P-1α、MIP-1β、MIP-2,单核细胞化学引诱蛋白-1(MCP-1)和角质化细胞趋化因子(KC),通过下调这些趋化因子来抑制PMN的渗透,进而达到抑制炎症的效果。
最近,Sosne又发现了Tβ4抑制炎症的一种新途径,通过抑制NFκB的激活和磷酸化阻止其进入细胞核,使NFκB丧失了调控相关炎症蛋白的表达,从而抑制炎症。
除此之外,Tβ4内化进细胞后其组氨酸残基被胞内的H2O2或氧自由基等氧化剂氧化成Tβ4氧化物,这种氧化物已经被证明是一种新的炎症抑制因子,这也是一种炎症抑制途径。
《胸腺素β4对小鼠毛发生长的影响及其作用机制》范文

《胸腺素β4对小鼠毛发生长的影响及其作用机制》篇一一、引言胸腺素β4(Thymosin β4,Tβ4)是一种重要的细胞内生长因子,其涉及细胞内众多生理活动。
在近年来,研究已表明Tβ4与毛发组织的关系十分密切,尤其是其对毛发生长的重要作用。
本研究通过探究Tβ4对小鼠毛发生长的影响及其作用机制,旨在为毛发相关疾病的预防和治疗提供新的思路和理论依据。
二、材料与方法1. 实验材料本实验选用健康的小白鼠作为实验对象,Tβ4由特定实验公司提供。
2. 实验方法(1)实验分组:将小鼠随机分为对照组和实验组,实验组小鼠通过注射Tβ4进行干预。
(2)观察指标:观察并记录小鼠毛发生长情况,包括毛发生长速度、毛发密度等。
(3)检测方法:通过显微镜观察、毛发生长分析软件分析等手段,对小鼠毛发生长进行评估。
三、实验结果1. Tβ4对小鼠毛发生长的影响实验结果显示,实验组小鼠的毛发生长速度和密度均显著高于对照组。
具体表现为实验组小鼠的毛发更加浓密,生长速度更快。
2. Tβ4的作用机制(1)促进毛囊生长:Tβ4能够促进毛囊的生长和发育,从而增加毛发的数量和密度。
(2)调节毛囊细胞周期:Tβ4能够调节毛囊细胞的增殖和凋亡,维持毛囊细胞的正常功能。
(3)增强毛囊血管生成:Tβ4能够促进毛囊周围的血管生成,为毛囊提供充足的营养和氧气,从而促进毛发生长。
四、讨论本研究结果表明,Tβ4对小鼠毛发生长具有显著的促进作用。
其作用机制可能包括促进毛囊生长、调节毛囊细胞周期以及增强毛囊血管生成等方面。
这些作用机制不仅有助于解释Tβ4在毛发生长过程中的重要作用,也为治疗毛发相关疾病提供了新的思路。
然而,本研究仍存在一定局限性。
首先,实验对象仅限于小白鼠,其结果可能不适用于其他物种。
其次,关于Tβ4的具体作用途径和分子机制仍需进一步研究。
此外,关于Tβ4的安全性和副作用等问题也需进一步探讨。
五、结论本研究通过探究Tβ4对小鼠毛发生长的影响及其作用机制,发现Tβ4能够显著促进小鼠毛发生长,其作用机制可能包括促进毛囊生长、调节毛囊细胞周期以及增强毛囊血管生成等方面。
注射用胸腺肽研究成果的推广应用

注射用胸腺肽研究成果的推广应用
刘士廉;许成素;崔莲仙;杨桂珍;郑昌学;陶凯;郑德先
【期刊名称】《医学研究杂志》
【年(卷),期】1998(000)001
【摘要】60年代实验证明胸腺是机体细胞免疫的中枢器官。
我们实验室1973年开始了胸腺激素的研究,对1972年首见报道的胸腺素(ThymosinF5)的分离方法进行了验证和较大的改良,创建了脐带血E玫瑰花结检测生物活性的方法,而且通过临床协作研究,观察到它对获得性免疫功能低下症有明显的治疗效果,这些结果分别获得卫生部和北京市政府的奖励。
至1979年,鉴于几年来文献中已陆续报道
【总页数】1页(P16-16)
【作者】刘士廉;许成素;崔莲仙;杨桂珍;郑昌学;陶凯;郑德先
【作者单位】中国医学科学院、中国协和医科大学基础医学研究所;中国医学科学院、中国协和医科大学基础医学研究所北京 100005;北京 100005;北京 100005【正文语种】中文
【中图分类】R979.5
【相关文献】
1.软科学研究成果推广应用刍议 [J], 王敏
2.水稻"浅、晒、浅湿"灌溉技术试验研究成果及推广应用 [J], 刘印海;张旭;李曙光
3.注射用胸腺肽研究成果的推广应用 [J], 刘士廉;许成素;崔莲仙
4.江河堤防植物护坡技术研究成果推广应用 [J], 许晓鸿;王跃邦;刘明义;张显双;刘艳军;李秋梅;代全厚
5.冻土筑路技术研究成果通过鉴定并在G214线姜路岭至清水河段施工中推广应用[J], 陆浚涵
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
人胚胸腺素的生物活性和理化性质

果见 表
3
。
的等电 点在 6
3
旧” T 氮镶 翁 夺解 蜻 粱 ( 水 解 后含皿 . 忿 )I
2~
6
.
5
,
在
3 9 附近 的 区
.
带 色
G一
表
佃
淡
10
。
鱿 墓 故 名称 酸 限 眼 欲 酸 暇 甘 丝 苏 丙 亮 肺 苯 色 精 丙 鱿 氮 氛 氨 组 拭 拭 组 抵 氮 氛 绒 组欲 徽 醉 酸 谷 脸 级 异 蛋 酷 犊 组门 亮 红 戈 咚
,
,
一
,
定
:
) 多 肤 核糖 核 酸 己 格 含 量 测 分 别 以 半 微 量 凯 氏 定 氮法 地衣 酚法
(
2
、
、
、
、
明 存 在着 狡 基和 欣 键 结构 ( 见 图 衰
制 粼
2
1
)
。
慈 酮 比 色 法 测 得结 果
,
见表 2
。
砚 . 了 化学分 析 结 果 ( 平值 )
RN A 含量
己 糖含量
常淋 巴 细 胞 无 影 响
而 对正
了m 祥 晶 名称 H e T五
8 5 10 1 4
.
上机号
10
.
8 6 19 9 10
无论 正 常 的 还 是 P H A
分拼 率
3 2c
.
m
一
1
扫 描时 间 s e
2 3
.
; 3色
E m r 7 3 型红 外分 光光 度计 采 用 澳化 钾 l c ’ 压 片 法 在 4 0 ~ 4 。 。。 m 范 围 内扫描 表
人工合成胸腺素α1静脉注射或皮下注射在小鼠和大鼠体内的药动学

Pharmacokinetic Study of Synthetic Thymosin α 1 in Mice and Rats with Intravenous and Subcutaneous Administration MA Jian-xiu,GAO Ming-tang,LI Wen-guang,WU Yong-jie (Institute of Pharmacology Research,School of Basic Medical Sciences,Lanzhou University & Key Laboratory of Preclinical Study for New Drugs of Gansu Province,Lanzhou 730000,China) MA Jian-xiu (Medical College of Northwest University for Nationalities,Lanzhou 730030,China) LI Xiu-juan (Dept. of Pharmacy,Gansu Hospital of Traditional Chinese Medicine,Lanzhou 730050,China) ZANG Kai-hong(Dept. of Pharmacology,Gansu College of Traditional Chinese Medicine,Lanzhou 730030, China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To study pharmacokinetic property of synthetic thymosin α1(sTα1)in mice and rats with intravenous (i.v.)and subcutaneous(s.c.)administration. METHODS:45 mice(sTα1,1 mg ㊃ kg-1)and 3 rats(sTα1,0.5 mg ㊃ kg-1)were given relevant medicine via tail vein. Blood samples were collected from orbit vein and heart before and within 6 h after administration. Another 180 mice were randomly divided into high-dose,medium-dose and low-dose groups(sTα1,5,1,0.32 mg ㊃ kg-1) . An-1 other 9 rats were randomly divided into high-dose,medium-dose and low-dose groups(sT α 1, 2.5,0.5,0.16 mg ㊃ kg ) . Six groups were given relevant medicine subcutaneously. Blood samples of orbit vein and heart were collected before and within 10 h after administration. ELISA was used to determine blood concentration of drugs at different time points and pharmacokinetic parameters were calculated. RESULTS:The main pharmacokinetic parameters of sT α 1 in mice vs. rats after intravenous administration were as follows:t1/2β:0.68 h and AUC0~∞:554.32 μg ㊃ h ㊃ L-1;t1/2β and AUC0~∞ of sTα1 in rats after intravenous administration were(1.87± 0.50) h and (1 602.91 ± 360.41) μ g㊃h㊃L - 1. Pharmacokinetic parameters of sT α 1 in mice in sT α 1 high-dose,medium-dose and low-dose groups after subcutaneous administration were as follows:t1/2:0.76 h,0.54 h,0.268 h;AUC0~∞ :3 222.95 μ g㊃h㊃L - 1, 417.67 μg ㊃ h ㊃ L-1,366.60 μg ㊃ h ㊃ L-1,respectively. Pharmacokinetic parameters of sTα1 in rats in sTα1 high-dose,medium-dose and low-dose groups after subcutaneous administration were as follows:t1/2: (1.23±0.23)h, (1.40±0.37)h, (1.99±0.94)h;AUC0~∞ : -1 -1 -1 (22 436.74 ± 5 641.94) μ g㊃h㊃L , (1 539.63 ± 203.30) μ g㊃h㊃L , (729.60 ± 320.0) μ g㊃h㊃L ,respectively. CONCLUSION: Pharmacokinetic model of sT α 1 in rats and mice with intravenous administration is first-order two-compartment model while that of sTα1 in rats and mice with subcutaneous administration is first-order one-compartment model. KEY WORDS Synthetic thymosin α1;Pharmacokinetics;Rats;Mice;Intravenous administration;Subcutaneous administration 胸腺素 α 1 (Thymosin alpha 1, T α 1)是从胸腺中提取的带
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
则, 因为用 强 制过 原 点并 要 达 到最小 二乘 法 要求 所 得
的 曲 线 并 非 两 个 括 准 品 分 别 过 原 点 直 线 斜 率 的 平 均 值 , 往 往 偏 向 一 方 , 两 个 标 准 品 的 权 重 应 是 相 同 而 但 的 , 【 咩 也 不 台 理 另 外 、 于 药 典 要 求 的 重 现 所 这 止 比 试 验 ( D% ) 实 验 人 员 往 在 星 进 5针 , 由 于 RS , 靶 时 间 限 制 只 进 2针 , 样 S 五 个 垃 两 个 点 共 同 米 这 1 拟 合 直 线 , 果 肯 定 是 偏 向 S 一方 ( l权 重 为 5 结 【 S ,
为 2 )
一 … 一 一
- 】, 溶 J X t N
l 2 供 试 品溶 液
1
l
l
I
[。
。
。
。
l
c 盐 酸 异 阿 嚷
a
。
I
取 本 品 5 片 , 去 糖 除
衣, 细 , 具塞试管 中 . 研 置 加
胸腺 素 注射 液系 新 鲜 健康 结 胸 朦 提 得 的蛋 白质
茭激 素 ( 子 量小 于 1 5 0 , 分 3 0 ) 主要 用 于 细胞 免 疫 缺 陷 投 细胞 免 疫功 能 失 调 所 引 起 的 疾病 。 其 活 力 测 定 原 理为 : T淋 巴细胞表 面 具 有绵 羊 红 血球 ( RB 受 体 , S c) 把分 离 的 T 淋 巴细 胞与 S B R C混 台。在 一 定 条件 下 ,
复 方 罗 布 麻 片 具 有 良好 的 降 压 效 果 , 能 有 效 地 井
能 与 S g 结 台 形 成玫瑰 花样 的花环 , 名 为 E玫 瑰 RI2 取
花 环 试 验 ( rtrc t as  ̄ a,y , eyho yeret t  ̄a ) E玫 瑰 花 环 试 验 k T ,
改善 高血 压 症 状 , 一 种 常见 的抗 高血 压药 , 广 泛 是 被 应用 于临 床 。 其 成 竹 复 杂 , 方 中有 罗 布 麻 煎 剂 干 处 粉 、 菊 花煎 剂 干 粉 、 己煎剂 干粉 , 舍 有 利眠 宁 等 野 防 并
甲 醇 1 m1振 摇 , 过 , 续 0 . 滤 取
——■———
其 实 一点 软 件 考 虑 孔 了 在 一 个 选 择 框 上 有 这
一
个 平 均 值 的 选 择 , t而 S【五 针 垃 两 针 的 权 重 象
滤 液作 为 供 试 品溶 液 ; 取 氢氯 噻嗪 8 g 利 眠 宁 、 另 a r , 盐 酸 异 丙 嗪 各 5 g, 其 塞 试 管 中 , 甲 醇 1 ml振 摇 . a r 置 加 0 , 垭 溶解 , 为对 照 品溶 液 。照 薄 层 色谱 法 ( 国药 典 作 中 20 0 0年 版 二 部 附 录 VB) 驻 , 取 上 述 二 种 溶 液 各 试 吸 2 0 , 别 点 于 同 一 硅 膛 GF 姐薄 层 板 上 , 苯 一 = 氧 0 l分 z 以
六 环 一 氨水 ( 0:5 5 的上层 液 为展 开剂 , 开 后 , 6 3 :) 展 晾 干 , 紫外 灯 下 检视 。 供试 品所 显斑 点 的颜 色 和 位 置 置
应 与 对 照 品一致 。
曲 线 而得 出一个 结 果 , 产生 的误 差并 非一 眼 就 看 的 而
出 来
通 过 上 而 的 分 析 , 解 决 … 个 问 题 的 同 时 , 认 在 我 为还 给 我们 一 个 启 示 就 是 在科 技解 放 劳 动 的 同时 我
不 同 问 题 可 以 用 以 同 一 标 准 品 所 得 的 峰 面 积 取 平 均
值 ( vrg ya a -) 办 法 把 五个 点变 成 个 平 均 ae eb {i 的 a i r xt 值点 , 同理 , 的两 个 点 也 变成 【/ 垃 卜平均 值 点 。这 种
选 择 如 果 实 验 者 对 软 件 的 使 用 及 计 算 方 法 不 熟 悉 的 话 可 能 就 不 会 注 意 了 , 们 可 以 照 样 使 用 原 米 的 校 正 他
谱 条件 进 行 薄层 鉴 别 。
1_I c 2l
通 过 实 验 , 者采 用 以下 方 法 , 较 好 地 对 复 方 笔 能
罗布麻 片中 上 述 三 种 成 分 进 行 薄 层 鉴 别 ( 果 见 附 结
图) :
这 时 有 人 会 川 线 性 过 原 点 的 计 算 模 式 , 同 ( ) 如 2 , 这种 方法 可 雌 喊 小 误 差 , 但 不 符 台 平 行 试 验 的 准
维普资讯
《 东 医 药工 业》 O 2年 第 二十 一卷 第 1期 山 20
样 品后用 氯仿 提取 样 品 中 的利 眠 宁 、 酸 异 雨 嗪 , 盐 用
薄 层 色谱 法 展 开 后再用 碘 化铋 钾试 液 显 色 ; 化 样 品 酸 后 用 己醚 提取 样 品 中的 氢氯 噻嗪 , 再用 不 同 的薄 层 色
胸腺 素 注 射 液 活 力 实验 的探 讨
山东省血 液 中心 孟 庆梅 赵殿 铭
们 还 需 多 问些 为什 幺 , 因为错 误 往往是 隐 蔽 的且误 差 不 可 预定 , 清原 理 才能 选到 准 确快 速 的 目的 弄
复方 罗 布 麻 片 质 量 标 准 鉴 别 方 法
的 改 进
山东 省 药 品检 验 所 李冰 刘 斐
7种 西 药 成 绗 。 太 部 分 省 、 冶 区 、 辖 市 药 品 质 越 自 直 标 准 收 载 的复 方罗 布 麻 片规定 对 其 中的氢 氯 噻 嗪 、 利 眠宁 、 酸 异 丙 嗪三 种成 分 进行 薄屠 鉴 别 。 盐 试 验 中 发 现 , 行 标 准 实 验 方 法 较 为 复 杂 : 化 现 碱