小白菜高效子叶离体植株再生体系的建立

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小白菜无性快繁体系的建立

小白菜无性快繁体系的建立
第 53 卷第 2 期 圆园14 年 1 月
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小白菜无性快繁体系的建立
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关键词院小白菜渊月则葬泽泽蚤糟葬 糟澡蚤灶藻灶泽蚤泽 蕴援冤曰灭菌方法曰无性快繁体系
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文章编号院0439原愿114渊圆园14冤02原0444-03
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小白菜线粒体DNA提取体系的建立

小白菜线粒体DNA提取体系的建立
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[ 键 词 ] 白菜 ( rsi mp s i spc ies ) 线 粒 体 ; D 关 小 B as ac c a et s s hn ni ; r s mt NA [ 图分 类 号 ] 5 3 ¥ 3 . 中 Q 2;643 [ 献 标识 码] 文 A [ 章 编 号 3 6 3 4 9 2 0 )2 0 4 3 文 17 —1 0 (0 70 一S 5 —0
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小 白菜 线粒 体 DN 提 取体 系的 建 立 A
吴 秋 云 , 永 平 , 庆 放 ( 省农 李 温 福建 业科学院作物 研究所, 福州 301) 福建 50 3
[ 要 ] 了建 立 小 白菜 线 粒 体 D 摘 为 NA ( D mt NA) 取 体 系 。 提 以小 白菜 黄 化 苗 为 材 料 , 究 了不 同提 取 方 法 、 研 材 料 选 择 等 因素 对 线 粒 体 D NA 提 取 的影 响。 结 果 表 明 。 冰 浴 研磨 小 白菜 黄 化 苗 , 过 简 易 的 密度 梯 度 离 心 经 通 技 术 快 速 抽 提 大 量 高 纯 度 的线 粒 体 , 白酶 K 裂 解 线 粒 体 及 有 机 溶 剂 抽 提 去 除 蛋 白质 。 获 得 纯 度 较 高 的 蛋 可
养 7 1 。 ~ 0d

小白菜花药培养胚诱导和植株再生

小白菜花药培养胚诱导和植株再生

小白菜花药培养胚诱导和植株再生摘要:以10个小白菜杂交种为试材,采用花药培养方法,研究胚状体发生及其再生植株的诱导方法。

结果表明,不同基因型的小孢子胚状体发生频率有明显差异,有10个基因型诱导得到胚状体,最高的出胚率达到18.31%;适宜浓度的活性炭可以促进胚状体的诱导,培养基中添加谷胺酰氨可以提高胚状体的诱导率;1.0%的琼脂浓度为胚状体继代培养最适宜的浓度,MS+1.0%琼脂为小白菜小孢子植株再生最适宜的培养基。

不同透性的封口膜对小白菜生根有很大的影响。

关键词:小白菜;花药培养;胚状体;植株再生Anther Culture and Plantlet Formation in Chinese CabbageAbstrat:Major factors that influence the formation of embryoid and plantlet formation in Chinese cabbage during anther culture were been probed to improve the culture system and create excellent DH populations. The effects of genotypes,activated carbon,L-Glutamine and L-Serine,on embryoid induction were studied in ten F1 hybrids of Chinese cabbage (Brassica campestris ssp. pekinensis) by anther culture method. It was found that the rate of embryogenesis was related to the donor plants. Ten varieties were induced to form embryoids and the highest yield was 18.31%,L-Glutamine and activated carbon could remarkably promote the formation of embryoid. MS added with 1.0% agar was the suitable culture medium.Key words:chinese cabbage;anther culture;embryoid;plantlet小白菜(Brassica campestris L. ssp. chinensis L.)又称白菜、青菜,是我国普遍栽培的一种蔬菜作物,属于十字花科,芸薹属,芸薹种,白菜亚种。

结球白菜高效离体子叶不定芽再生的研究

结球白菜高效离体子叶不定芽再生的研究

结球白菜高效离体子叶不定芽再生的研究(实用版3篇)篇1 目录1.引言2.实验材料和方法3.结果与分析4.结论篇1正文结球白菜高效离体子叶不定芽再生的研究1.引言结球白菜是我国北方地区的一种重要蔬菜,具有高产、抗病、品质好等特点。

近年来,随着人们对健康饮食的追求,对蔬菜的品质、产量和抗病性等提出了更高的要求。

植物组织培养技术作为一种高效、快速繁殖优良品种的方法,在蔬菜育种中发挥着重要作用。

本研究旨在探讨结球白菜子叶高效离体不定芽再生的条件,为高效繁殖结球白菜优良品种提供技术支持。

2.实验材料和方法2.1 实验材料实验材料主要包括结球白菜种子、MS 培养基、激素(包括细胞分裂素和生长素)、无菌设备和培养箱等。

2.2 实验方法将结球白菜种子在无菌条件下消毒,然后接种在 MS 培养基上,添加适当浓度的细胞分裂素和生长素。

将培养基放入培养箱中,保持温度为20-25℃,光照时间为 12 小时/天。

每隔 7 天观察子叶再生情况,统计每个培养皿中再生芽的数量。

3.结果与分析通过实验发现,结球白菜子叶在适当的激素浓度和培养条件下,可以高效地再生不定芽。

在不同激素浓度下,子叶再生芽的数量有所不同。

当细胞分裂素与生长素的比值为 1:1 时,子叶再生芽的数量最多。

在继续培养的过程中,再生芽逐渐分化成完整的植株。

4.结论本研究结果表明,在适当的激素浓度和培养条件下,结球白菜子叶可以高效地再生不定芽。

为实现结球白菜优良品种的高效繁殖,需要进一步优化培养条件和激素浓度,提高再生芽的数量和质量。

篇2 目录1.引言2.实验材料和方法3.结果与分析4.结论篇2正文结球白菜(学名:Brassica rapa L.var.capitata L.)是一种重要的蔬菜作物,具有较高的营养价值和良好的保健功能。

为了提高结球白菜的繁殖效率,本研究以结球白菜子叶为外植体,探讨了高效离体子叶不定芽再生的方法。

1.实验材料和方法1.1 实验材料:新鲜的结球白菜子叶、无菌培养基、植物激素、移液器、培养箱等。

‘洛阳包头’大白菜叶柄高效植株再生体系的建立

‘洛阳包头’大白菜叶柄高效植株再生体系的建立
菌 苗 顶 芽基 增 殖 率 最 高 , 达8 6 . 7 ; 配 方 MS +B A 2 . 5 mg / I +I B A 0 . 3 mg / L对 大 白 菜 叶柄 不 定
芽的诱 导效 果 较好 , 诱 导率 为 7 6 . 7 ; 配 方 MS +I B A 1 . 0 mg / L诱 导 再 生植 株 生根 率最 高,
该研究选取 品质 、 抗 性和商 品性优 良的大 白菜 品种
‘ 洛 阳包头 ’ 为试 材 , 首先建立其 快繁体 系 , 以此为基础 , 选取无菌苗叶柄为外植体 , 进行不 同激 素组合诱 导不定
每个处理至少接种 3 0个外 植体 , 4周后统 计增 殖 率 , 以 确 定不 同浓度 B A和 I B A组合对 大 白菜 无菌苗 顶芽增 殖 的影 响 , 选 出最 佳增 殖配 方 。增殖 率 =( 诱 导 出增 殖 的外植体 总数/ 接种外植体 总数 ) ×1 0 0 。由大 白菜 顶芽从不 同组合 的增殖培养基诱 导 出的增殖 苗, 切 割分
平头型 。一 起在不 同生态 型结球 大 白菜抗寒性 的评 价 中
发现 , 大白菜 基本 生态 型 中平 头 型 和 卵圆 型耐 寒 性较
1 . 2 . 1 培养基及培养 条件
大 白菜无菌苗 的培养 , 快繁
差『 2 j 。秋冬大 白菜 和早春 大 白菜分 别在 结球 末期 和 生 长初期常遭 受冻害 , 给生产造成损 失 , 为 了确保其高产 、
菜, 南方俗称 黄芽 菜 。大 白菜原 产于 我 国, 栽 培历 史悠
久, 因其味道鲜美 , 营养丰 富 , 四季有售 , 故素有 “ 菜 中之 王” 的美誉 ] 。‘ 洛 阳包 头 ’ 大 白菜是 中原地 区普遍栽 培 的典型代表品种 , 其大陆性气候 生态型 的基本类型 属于

橙色大白菜离体再生体系的建立及原生质体分离的开题报告

橙色大白菜离体再生体系的建立及原生质体分离的开题报告

橙色大白菜离体再生体系的建立及原生质体分离的开题报告橙色大白菜是一种具有较高营养价值和药用价值的蔬菜,但其种植难度较大且病虫害易感。

基于此,建立橙色大白菜的离体再生体系具有重要的研究和应用价值。

本文旨在通过对橙色大白菜的离体再生体系建立及原生质体分离进行开题报告,为后续的研究工作奠定基础。

1.研究背景离体再生体系建立是细胞和分子生物学研究中的一个重要方面,对于探究植物生命现象、利用转基因技术进行农业和环境改良等有着广泛的应用。

橙色大白菜作为一种富含抗氧化物质和维生素的蔬菜,具有很高的营养和药用价值,但其繁殖难度较大,病虫害易感。

基于此,建立橙色大白菜的离体再生体系对于其育种和繁殖具有重要的研究和应用价值。

2.研究目的本文旨在通过建立橙色大白菜的离体再生体系,实现其组织培养、植株再生和原生质体分离,为后续的基因工程和育种研究提供技术支持。

3.研究内容3.1 离体再生体系建立选取健康的橙色大白菜为试验材料,通过培养基组成、培养条件的优化和组织切割等步骤,建立橙色大白菜的离体再生体系。

具体操作如下:(1)制备培养基:选取适宜的培养基进行组合,以去离子水稀释成适宜的浓度。

(2)组织培养:将橙色大白菜的叶片切割成小块,并在培养基上培养,调整培养条件,如温度、光照强度等。

(3)植株再生:在适宜的培养条件下,观察植株再生情况。

3.2 原生质体分离将橙色大白菜的叶片切碎,经过一系列的化学处理和机械分离,获得大量的原生质体。

具体操作如下:(1)叶片切碎:将叶片切成小块,放置在脆弱的细胞壁中。

(2)化学处理:加入适量的酶和盐类等,促进细胞壁的裂解。

(3)机械分离:用质壁分离器将细胞壁和质膜隔离,获取较纯的原生质体。

4.研究意义建立橙色大白菜的离体再生体系和分离原生质体技术,能够为橙色大白菜的遗传育种、繁殖选择等领域提供技术支持,同时也为其保护和资源利用提供了新途径。

此外,该研究还能为相关研究提供方法参考和借鉴。

一种植株倍性鉴定方法及应用[发明专利]

一种植株倍性鉴定方法及应用[发明专利]

(10)申请公布号 CN 102277435 A(43)申请公布日 2011.12.14C N 102277435 A*CN102277435A*(21)申请号 201110233577.3(22)申请日 2011.08.16C12Q 1/68(2006.01)C12Q 1/06(2006.01)(71)申请人金陵科技学院地址211169 江苏省南京市江宁区泓景大道99号(72)发明人崔群香 郝振萍 王倩(74)专利代理机构南京知识律师事务所 32207代理人胡锡瑜(54)发明名称一种植株倍性鉴定方法及应用(57)摘要本发明属于生物技术领域,具体涉及一种计数叶片下表皮气孔保卫细胞叶绿体数目的新方法及其应用于小白菜等十字花科作物的植株倍性鉴定,本发明是利用叶绿体在紫外激发光下不需经过染色等处理即发出红色荧光的特性对叶绿体数目进行计数,根据已知倍性植株的叶绿体数目确定小白菜叶绿体数倍性分界,并以此判断不同来源植株的倍性。

试验证明,该方法它具有取材不受植株发育阶段限制、快速准确、成本低的优点,解决了现有技术存在的取材限制、技术复杂和成本高的缺点。

(51)Int.Cl.(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书 1 页 说明书 2 页 附图 1 页1.一种植株倍性鉴定方法,其特征是由以下两个步骤构成:(1)叶片保卫细胞中叶绿体数目观察和计数:采取倍性未知的植株第5节及以上的叶片,撕取下表皮并在载玻片上的蒸馏水中展开,盖上盖玻片,在荧光显微镜下计数气孔保卫细胞中叶绿体数目,每叶片计数10-20个气孔,求其叶绿体数平均值;(2)根据叶绿体平均数以及叶绿体数倍性分界值确定待测植株的倍性:小白菜叶片下表皮气孔保卫细胞中叶绿体数目的分界值分别为:叶绿体数少于10个的为单倍体,大于等于10而少于16个的为二倍体,大于等于16个的为四倍体等多倍体,将叶绿体数平均值与上述分界值比对确定待测植株的倍性。

不结球白菜子叶离体培养与植株再生的研究

不结球白菜子叶离体培养与植株再生的研究

不结球白菜子叶离体培养与植株再生的研究卞莹莹;颜彬;崔丽洁;潘静娴;开国银【摘要】以不结球白菜(Brassica campestris ssp.chinensis Makino)“矮萁苏州青”子叶为外植体,研究了激素浓度和AgNO3浓度组合对不结球白菜离体培养的影响.结果表明:诱导不定芽形成的最佳培养基为MS+ 0.3 mg/L NAA+5 mg/L 6-BA;在此基础上添加5 mg/L AgNO3可显著提高不定芽的诱导频率,芽诱导频率高达31.3%;生根最佳培养基为含有0.3 mg/L NAA的1/2MS培养基.该研究初步建立了“矮萁苏州青”的植株再生体系,为用基因工程手段开展不结球白菜分子育种奠定了基础.【期刊名称】《上海师范大学学报(自然科学版)》【年(卷),期】2015(044)006【总页数】6页(P579-584)【关键词】不结球白菜;植株再生;组织培养【作者】卞莹莹;颜彬;崔丽洁;潘静娴;开国银【作者单位】上海师范大学生命与环境科学学院植物种质资源开发协同创新中心,上海200234;上海师范大学生命与环境科学学院植物种质资源开发协同创新中心,上海200234;上海师范大学生命与环境科学学院植物种质资源开发协同创新中心,上海200234;上海师范大学生命与环境科学学院植物种质资源开发协同创新中心,上海200234;上海师范大学生命与环境科学学院植物种质资源开发协同创新中心,上海200234【正文语种】中文【中图分类】S5-33不结球白菜属于十字花科(Cruciferae)芸薹属(Brassica),又名小白菜、青菜,原产于我国[1],南北均有分布,特别是南方栽培十分普遍[2].不结球白菜是一、二年生草本植物,常作一年生栽培,茎叶均可食.叶色淡绿至墨绿,叶片倒卵形或椭圆形,叶片光滑或褶缩,少数有绒毛.小白菜是一种常见的四季时令蔬菜,是我国南方重要的叶类蔬菜.据测定,小白菜是矿物质和维生素含量最丰富的蔬菜之一[3-4],在蔬菜中占据重要的地位,深受大众的青睐[5-7].小白菜不耐高温,连续高温会使其出现生长缓慢甚至死苗的症状,从而导致小白菜品质降低及产量下降.因此,培育耐热的小白菜品种显得尤为迫切.与传统育种相比,利用基因工程技术培育小白菜新种质或新品种可能更具有快速和针对性强等优点[8];而建立高效稳定的植株再生体系是开展小白菜遗传转化的前提.与芸薹属其他作物相比,小白菜植株再生较难,严重地制约了转基因技术在小白菜品种改良中的应用.近年来国、内外学者在小白菜离体再生方面进行了一些探索,但高频率的再生体系报道极少[9],不同遗传型对激素种类、浓度和AgNO3要求上存在较大差异.生产上推广应用的“矮萁苏州青”等的再生频率低,从而影响基因转化工作的开展.本研究以不结球白菜“矮萁苏州青”子叶为外植体,通过优化培养基中激素6-BA(6-benzylaminopurine,6-苄氨基嘌呤)与NAA(α-naphthaleneacetic acid,萘乙酸)的浓度组合和AgNO3浓度,考察其对小白菜子叶离体培养再生芽的影响,以及生根培养基中激素NAA浓度对不定芽生根的影响,建立一个较高效率的小白菜离体再生体系,为小白菜的基因转化提供了一个理想的转化受体体系,该方法一定程度上有效地解决了小白菜植株再生频率低等问题.1.1 供试材料以不结球白菜品种“矮萁苏州青”为材料,购自上海长征蔬菜种子公司.1.2 “矮萁苏州青”无菌苗和外植体的获得挑选籽粒饱满的成熟“矮萁苏州青”种子,使用种子常规灭菌方法消毒灭菌,即先用75%的乙醇溶液表面杀菌约0.5 min,然后用无菌水反复冲洗2~3次,再用0.1%的HgCl2溶液灭菌10 min,最后用无菌水反复冲洗4~5次.将灭菌后的种子播种于添加3%蔗糖、0.7%琼脂粉的常规1/2 MS(Murashige and Skoog medium)基本培养基表面,在25℃条件下暗培养2 d,再移至光照条件下生长3 d(光照时间16 h/d,光照强度2000 lx).选取苗龄为5 d的无菌苗子叶,用手术刀切下带2~3 mm子叶柄的子叶,但不保留生长点,作为外植体.1.3 子叶愈伤组织的诱导将切好的子叶外植体接种到MS基本培养基,放入25℃培养箱暗处理2 d,然后将子叶外植体接种到含有0~6.0 mg/L 6-BA和0~0.5 mg/L NAA的MS培养基(添加1%的琼脂、3%的蔗糖)上诱导愈伤组织,灭菌前调节pH值为5.5,121℃灭菌25 min.培养条件均为温度25℃,光照时间16 h/d,光照强度为2000 lx.15 d后观察愈伤组织的诱导情况,并统计相关数据.1.4 不定芽的诱导将生长状态良好的愈伤组织转至含不同激素配比的MS分化培养基中,培养基添加3%蔗糖、0.7%琼脂粉,在25℃条件下暗培养2 d,再移至光照条件下生长3 d(光照时间16 h/d,光照强度2000 lx).15 d后更换新鲜培养基,25 d后统计相关数据,观察不同激素浓度下外植体的芽诱导率,并观察在培养基中添加AgNO3对芽诱导率的影响.1.5 不定芽的生根培养当不定芽生长至2~3cm,将不定芽剪下来,插入到含有不同浓度NAA的1/2MS生根培养基中,灭菌前调节pH值为5.5,121℃灭菌25 min.培养条件均为温度25℃,光照时间16 h/d,光照强度2000 lx.15 d后统计不同培养基对不定芽生根的影响情况.1.6 植株的移栽待不定芽基部形成大量的根,炼苗3 d后,取出小植株,洗净根部培养基,移栽到珍珠岩基质中,塑料薄膜保湿5 d,逐渐揭膜,8 d后即可入土栽培.1.7 计算方法根据以下公式计算芽诱导频率,并对结果进行分析:芽诱导频率=(诱导不定芽的愈伤组织块数/接种愈伤组织块数)×100%,愈伤诱导频率=(愈伤组织块数/接种外植体数)×100%.2.1 激素浓度配比对不定芽分化的影响将生长状态良好并未经过继代的愈伤组织转至含不同激素浓度配比的MS培养基(M0~M15)中,25 d后统计数据,观察不同激素浓度下外植体的不定芽发生情况(表1).不同激素浓度配比对愈伤组织诱导的影响不同,芽诱导频率介于0~25%.由表1可知,当MS培养基中不添加6-BA和NAA时,不结球白菜“矮萁苏州青”的子叶外植体不能形成再生芽,形成的愈伤组织也很少,但能形成细长的气生根(图1-0),而当加入6-BA和NAA时,2周后就形成愈伤组织.2周后继代培养基,放置1周后,愈伤组织处出现绿色的芽点.研究结果表明:在同时添加6-BA和NAA时,子叶能形成愈伤组织且具有分化不定芽的能力;6-BA浓度越高,芽的分化能力就越强;但当6-BA的浓度达到6.0 mg/L时,芽的分化能力开始降低;3种不同浓度的NAA对于愈伤组织的形成和芽的诱导没有明显的规律(图1).在本实验中,最佳培养基编号为11,即含有0.3 mg/L NAA和5 mg/L 6-BA的MS培养基,最高芽诱导频率为23.0%.2.2 NAA对不定芽生根的影响将不定芽生成的再生苗转入含不同浓度NAA的1/2MS培养基上进行生根培养.15 d后统计不同培养基对不定芽生根的影响情况.结果显示:不定芽在15 d后都可以生根,在不添加NAA的1/2 MS培养基时,不定芽也能生根,生根率都达到100%,而添加了NAA的培养基会改变根的形态(表2),当NAA浓度为0.3mg/L时,主根多而壮,须根少,健康茁壮的根对苗的移栽是至关重要的,因此添加0.3 mg/L NAA的1/2 MS培养基最适合不定芽的生根,有利于移栽.2.3 AgNO3浓度对芽诱导的影响通过不同浓度配比的激素对子叶外植体进行芽诱导能力的对比,在选择最适激素浓度配比的基础上,在激素培养基中加入不同浓度(1、3、5、7 mg/L)的AgNO3[10-12],接种48个子叶外植体,观察记录芽的诱导频率变化.结果表明:在选择最适激素浓度配比的基础上,再添加5 mg/L AgNO3可使芽诱导频率高达31.3%,即诱导不定芽形成的最适培养基为MS+0.3 mg/L NAA+5mg/L 6-BA+5 mg/L AgNO3(表3).在AgNO3浓度达到7 mg/L时,对芽的诱导反而起到了抑制作用.不结球白菜与其他芸薹属作物相比再生频率较低[12-13].本文作者初步研究了以不结球白菜“矮萁苏州青”子叶为外植体的不定芽诱导和植株再生的培养方法,为进一步的遗传操作奠定了基础.激素是植物组织培养的关键因素,调节激素水平和配比已成为提高组织分化频率的有效手段[14-15].通过将“矮萁苏州青”子叶接种到附加不同激素组合的诱导培养基上,经诱导形成愈伤再分化不定芽,待不定芽生长到一定程度再将其转入到生根培养基中,生根后移栽.结果表明:诱导不定芽形成的最佳培养基为MS +0.3 mg/L NAA+5 mg/L 6-BA;在此基础上添加5 mg/L AgNO3可显著提高不定芽的诱导频率,该培养基可使“矮萁苏州青”的芽诱导频率高达31.3%;生根最佳培养基为含有0.3 mg/L NAA的1/2 MS培养基.植物的子叶、子叶柄、下胚轴、茎段等经常被用于植株再生[16],其中子叶是小白菜离体再生中使用最多的外植体[17].带柄子叶与单纯子叶块、子叶柄或真叶相比又具有较高的植株再生能力[18-19],本研究采用带柄子叶作为外植体,获得了较高的植株再生频率[20],表明了带柄子叶是小白菜离体培养的适合外植体.前人报道,AgNO3能促进植株再生[10,21-22],本实验的研究结果也与该结论一致,但当AgNO3浓度达到7 mg/L时,反而抑制了不定芽的诱导.张金文等[24]在辣椒离体培养中也有类似报道,这可能是由于Ag+是重金属离子,浓度太高反而会对植物产生有害作用.【相关文献】[1]HAN J M,HOU X L,XU H M,et al.Genetic differentiation of non-heading Chinese cabbage(Brassica campestris ssp.chinensis Makino)germplasm based on SRAP markers [J].Acta Agronomica Sinica,2007,33(11):1862-1868.[2]WANG T,LI W L,GONG F E,et al.Effects of LED light qualities on growth and physiological characteristics of non-heading Chinese cabbage[J].Journal of Gansu Agricultural University,2011,8(4):69-73.[3]HOU L T,JIAO N Y,HAN B.Effects of different covering methods on soil water distribution[J].Journal of Irrigation and Drainage,2007,26(1):47-50.[4]HUANG J,GUO S R,WU Z,et al.Photosynthetic characteristics of six Brassica campeatris ssp.chinensis varieties[J].Acta Bot Boreal-Occident Sin,2006,26(6):1183-1189.[5]HOU X L,CAO S C.In vitroplant regeneration from cotyledon culture of non-heading Chinese cabbage[J].Journal of Nanjing Agricultural University,1994,17(3):60-94.[6]HOU X L,SHI Y H.In vitroplantlet regeneration of cotyledon in Suzhouqing non-heading Chinese cabbage[J].Journal of Nanjing Agricultural University,2002,25(3):113-115.[7]CHEN M M,HOU X L.Optimization of regenerationin vitroof non-heading Chinese cabbage[J].Journal of Nanjing Agricultural University,2008,31(1):27-30.[8]GAO H L,LI Y,SONG Y P,et al.In vitro culture and regeneration system of non-heading Chinese cabbage(Brassicacampestrisssp.chinensisMakino)[J].Acta Bot Boreal-Occident Sin,2008,28(5):0963-0968.[9]YU X L,YE W Z,CAO J S,et al.Establishment of an efficient regeneration system for Chinese cabbage cultured in vitro and histological observation of shoot development [J].Acta Biologiae Experimentalis Sinica,2004,37(2):151-155.[10]ZHANG S,WEI Y T,WEN F J,et al.Establishment of efficient plant regeneration system of Chinese cabbage using medium containing ethylene inhibitor AgNO3[J].Acta Horticulturae Sinica,1997,24(1):94-96.[11]ZHANG F L,TAKAHATA Y,XU B J.Medium and genotype factors influencing shoot regeneration from cotyledonary explants of Chinese cabbage(BrassicacampestrisL.ssp.pekinensis)[J].Plant Cell Reports,1998,17:780-786.[12]GEK L C,PUA E C,GOH C J.Role of ethylene onde novoshoot regeneration from cotylendonary explants ofBrasssica campestrisssp.pekinensis(Lour.)Olssonin vitro[J].Plant Physiol,1991,96:178-183.[13]LI S J,MENG Z,LI D B,et al.Effect of genomes on the mesophyⅡprotoplas t culture and plant regeneration of Brassica[J].Acta Genetics Sinca,1994,21(3):222-226.[14]CHEN M H,LI T F,CHEN X J.Effects of different medium and plant hormones on regeneration plant of tobacco protoplast[J].Seed,2005,24(9):76-79.[15]SHARP W R.The Physiology of vitro asexual embryogenesis[J].Horticultural Reviews(USA),1980,2:268-310.[16]JUN SI,KWON S Y,PAEK K Y.Agrobacterium-mediated transformation and regeneration of fertile transgenic plants of Chinese cabbage(Brassica campestrisssp.pekinensiscv.'spring flavor')[J].Plant Cell Rep,1995,14:620-625. [17]FAN Z Q,CUI H R,WANG Z H,et al.Advances in genetic transformation of Brassica campestris L.Aia by agrobacteriummediated methods[J].Jinhua College of Profession and Technology,2002,21(3):10-13.[18]WANG L J,NI D A,WANG G Y,et al.Preliminary studies on tissue culture and agrobacterium-medicated transformation of Brassica campest is ssp.chinensis[J].Acta Biologiae Experimentalis Sinica,1999,32(1):93-95.[19]SU J,DUAN R Q,HU C Q,et al.Regeneration and agrobecterium-mediated transformation for Chinesis cabbage[J].FujianJournal of Agricultural Sciences,2002,17(4):24-243.[20]HUANG J Y,ZHANG J L,LI Y P,et al.Effects of chitosan oligosaccharide on non-heading Chinese cabbage cotyledon regeneration[J].Plant Physiology Journal,2014,50(3):263-268.[21]ZHANG P,LING D H.Enhancement of plant regeneration rate ofBrassica parachinensis in vitro[J].Acta Botanica Sinica,1995,37(11):902-908.[22]CAO J S,YU X L,HUANG A J,et al.Enhancement of plant regeneration frequency ofin vitrocultured Chinese cabbage[J].Acta Horticulturae Sinica,2000,27(6):452-454. [23]ZHANG J W,FAN X Z,WANG Y,et al.In vitroculture and regeneration system of peppercapsicum annuum[J].Acta Bot Boreal-Occident Sin,2006,26(9):1893-1899.。

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20 0 6再生体 系的建 立
邓 智 年 , 魏源 文 , 吕维 莉 , 李 杨 瑞
( 西 作 物 遗 传 改 良生 物 技 术 重 点 开放 实 验 室 , 南 宁 5 0 0 ) 广 3 0 7
L NA A+ 75 / g 0 5 / A 培 养 基 中 , 柄 子 叶 不 定 芽 再 生 率 最 高 , 8 . 3 ; 含 有 2 0 / .mg L A NO + . mg L AB 带 为 2 5 在 .mg L
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关 键 词 : 白菜 ; 叶 ; 定 芽 ; 杆 菌 小 子 不 农
中 图分 类 号 :4 4 3 ¥ 3 .
文献标识码 : A
文 章 编 号 :0 2 8 6 ( 06 0 -O 5 — O 10 - 11 2 0 ) 4 3O 5
De e o m e f h g r qu nc l nte e e r to y t m o n v t o vlp nto i h f e e y p a l tr g ne a i n s s e f r i ir
摘 要 : 丰顺 小 白 菜 带柄 子 叶 为 外 植 体 , 以 研究 了苗 龄 、 同 激 素 配 比、 g 度 和抗 生 素 、 培 养 时 间 对 不 定 不 A NO 浓 共 芽 再 生 的影 响 。 果 显 示 , 叶 不 定 芽 再 生 的最 佳 苗龄 为 5 9 ; 过 2 结 子 ~ d经 d的 预 培养 , MS 1 0 / Z .mg 在 + . mg LTD +0 1 /
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D NG Z i i W E a — e , O e— , A Ya gr i E h— a n n, I Yu n w n L W i i I n —u l
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