常用荧光染料的激发和发射波长

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流式细胞术中应用的荧光染料介绍

流式细胞术中应用的荧光染料介绍

流式细胞术中应用的荧光染料介绍流式细胞术(Flow Cytometry)是一种用于分析和计数细胞的技术。

在流式细胞术中,荧光染料起着至关重要的作用,可以标记细胞的不同成分,使其能够通过流式细胞仪进行检测和分析。

荧光染料通过特定的荧光光谱来发出荧光信号,这些信号被流式细胞仪采集和分析,从而提供有关细胞类型、数量和功能的信息。

以下是几种常见的流式细胞术中应用的荧光染料的介绍。

1. FITC(Fluorescein Isothiocyanate):FITC是最常用的荧光染料之一,通过与免疫球蛋白G(IgG)结合,可用于免疫细胞表面分子的检测。

FITC在波长为488 nm的激光下激发,发射的荧光信号在525 nm 左右。

它可以与其他荧光染料(如PE或APC)结合使用,以实现多参数流式细胞分析。

2. PE(Phycoerythrin):PE是一种从红藻中提取的荧光染料,其发射的荧光信号在575 nm左右。

PE通常用于检测细胞表面的抗原或细胞内的蛋白质,如细胞因子。

PE也可以与其他染料结合使用,以实现多参数分析。

3. APC(Allophycocyanin):APC是一种类似于PE的荧光染料,通过独特的发射波长(约于660 nm附近)和长的荧光寿命来区分。

APC适用于检测多种细胞表面分子和蛋白质,在深色的区域提供了可靠的信号。

5. PE-Cy7:PE-Cy7是PE染料与Cyanine 7(Cy7)结合形成的荧光染料。

它适用于多参数流式细胞术,利用其较长的荧光寿命和波长(激发于488 nm,发射于780 nm左右),可以与其他染料一起使用,以实现更多的细胞表面和内部分子的检测。

除了上述染料外,还有很多其他的荧光染料可以用于流式细胞术。

例如,Alexa Fluor系列、eFluor系列、Brilliant Violet系列等。

这些染料具有不同的光谱特性和荧光强度,可以根据实验需要选择合适的染料。

需要注意的是,在选择荧光染料时,需考虑染料的互相干扰问题和流式仪的激发和检测系统。

cy系列染料激发发射波长

cy系列染料激发发射波长

cy系列染料激发发射波长现代生物学和生物医学研究中经常会使用荧光染料来标记和观察细胞和分子。

其中,CY系列染料是一类常用的荧光染料,具有广泛的应用范围。

本文将介绍CY系列染料的基本原理、激发发射波长及其在生物学研究中的应用。

CY系列染料是一类由屡次修饰的硫氰酸衍生物构成的化合物。

在CY系列染料中,CY2、CY3、CY5和CY7是最为常见的四种荧光标记。

它们具有不同的激发和发射波长,可用于不同范围的荧光检测。

CY2是一种比较新的荧光染料,其激发波长为488纳米,发射波长为510纳米。

由于其光谱特性与FITC类似,可以作为其替代品使用,用于观察融合蛋白、蛋白表达和细胞追踪。

CY3是一种常用的红色荧光染料,其激发波长为550纳米,发射波长为570纳米。

CY3被广泛应用于细胞和分子研究中,可用于免疫组织化学、原位杂交、蛋白质定位和荧光原位PCR等。

CY5也是一种红色荧光染料,其激发波长为649纳米,发射波长为670纳米。

CY5具有较长的发射波长,可用于多色荧光共聚焦显微镜分析、分子探针和高灵敏度测定等领域。

CY7是CY系列中最红的荧光染料,激发波长为743纳米,发射波长为767纳米。

CY7的特点是具有极高的光稳定性和明亮的荧光强度,常应用于近红外区域的光学成像、分子探针和荧光定量等实验中。

CY系列染料的应用非常广泛。

它们可用于细胞和分子标记、免疫组织化学、蛋白质检测和定位、荧光原位PCR、流式细胞术、荧光定量等实验中。

此外,由于CY系列染料的光稳定性和亮度较高,也逐渐被用于活体动物的近红外区域光学成像研究。

虽然CY系列染料在生物学研究中起到了重要的作用,但也存在一些缺点。

首先,CY系列染料的荧光强度受到化学结构和环境的影响,这可能导致不同实验中的荧光信号差异。

其次,CY系列染料由于分子结构以及与生物样品的相互作用,容易受到光灭和荧光淬灭等现象的影响,损失荧光信号。

总的来说,CY系列染料是一类常用的荧光染料,具有多种激发和发射波长可供选择,适应不同的实验需求。

rbitc激发波长和发射波长

rbitc激发波长和发射波长

rbitc激发波长和发射波长
rbitc是一种荧光染料,常用于生物学和医学领域中的荧光显微镜和流式细胞仪等实验中。

在这些实验中,rbitc的激发波长和发射波长是非常重要的参数,因为它们直接影响到实验结果的准确性和可靠性。

rbitc的激发波长通常为550纳米左右,而发射波长则为590纳米左右。

这意味着当rbitc受到550纳米左右的激发波长时,它会发出590纳米左右的荧光信号。

这个过程被称为荧光共振能量转移(FRET),它是一种非常重要的生物学现象,可以用来研究蛋白质相互作用、细胞信号传导等生物学过程。

在实验中,选择合适的激发波长和发射波长非常重要。

如果激发波长太低或太高,可能会导致rbitc无法被激发或者荧光信号过弱。

同样,如果发射波长太低或太高,可能会导致荧光信号被其他物质吸收或者干扰。

因此,选择合适的波长可以最大限度地提高实验的准确性和可靠性。

除了激发波长和发射波长之外,rbitc的荧光强度也是一个重要的参数。

荧光强度越高,说明rbitc的荧光信号越强,可以更容易地被检测到。

因此,在实验中,通常会选择荧光强度较高的rbitc染料,以提高实验的灵敏度和准确性。

rbitc的激发波长和发射波长是非常重要的参数,可以直接影响到实验结果的准确性和可靠性。

在实验中,选择合适的波长和荧光强度可以最大限度地提高实验的灵敏度和准确性,从而得到更加可靠的实验结果。

常见细胞核荧光染料

常见细胞核荧光染料

细胞核常用荧光染料有:吖啶橙(Acridine Orange,AO)、溴化乙锭(Ethidium Bromide,EB)和碘化丙啶(Propidium Iodide,PI),DAPI、Hoechst染料、EthD III、7-AAD、RedDot1、2 等等。

透膜的染料如下:AO:具有膜通透性,能透过细胞膜,将核DNA和RNA分别染成绿色和红色,因此使细胞核呈绿色或黄绿色荧光。

EB:一种高度灵敏的荧光染色剂,在标准302nm处激发出橙红色信号。

DAPI:蓝色一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,其与DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光,而与单链DNA结合无荧光的增强。

DAPI对双链DNA 的染色灵敏度要高于EB和PI,荧光强度比Hoechst低,但光稳定性高于Hoechst。

Hoechst染料:蓝色一类在显微观察中标记DNA的荧光染料,最常见的两种是Hoechst33342和Hoechst33258。

这两种染料都在紫外350nm处被激发,在461nm 处最大发射光附近发射青/蓝色荧光。

与DAPI相比,Hoechst33342加有乙基,具有更强的亲脂性,因此能更好的透过完整的细胞膜,并且细胞毒性更小。

RedDot 1染料:红色,超强的细胞核选择性,其光谱相似于Draq?5 和 Draq?7。

RedDot?染料可被几种常见的激光激发并可在远红外区激发荧光。

RedDot? 的红色近红外荧光有效的与其他常用荧光探针区分开来。

不透膜的染料,如下:PI:不同通过活细胞膜,但却能穿过破损的细胞膜而对核染色。

PI作为红色荧光复染剂首选,PI经常与Calcein-AM或者FDA等荧光探针合用,区分死/活细胞。

EthD III、7-AAD、RedDot 2:不能透过细胞膜,但能将坏死细胞区分开来;更适合凋亡坏死实验的检测;细胞核荧光染料(PI DAPI Hoechst33342)细胞核荧光染料PI碘化丙啶(简称PI)是一种常用的细胞核荧光染色剂。

常用荧光染料的激发和发射波长

常用荧光染料的激发和发射波长

常用荧光染料的激发和发射波长

Fluorescent Dye (荧光染料) Excitation (激发波长, nm ) Emission (发射波长, nm ) Cy2 489 506 GFP(Red Shifted) 488 507 YO-PRO -1 491 509 YOYO -1 491 509 Calcein 494 517 FITC 494 518 FluorX 494 519 Alexa 488 490 520 Rhodamine 110 496 520 ABI,5-FAM 494 522 Oregon Green ?500 503 522 Oregon Green ? 488 496 524 RlboGreen ? 500 525 Rhodamine Green 502 527 Rhodamine123 507 529 Magnesium Green 506 531 Calcium Green 506 533 TO-PRO ?-1 514 533 TOTO-1 514 533 ABI,JOE 520 548 BODIPY? 530/550 530 550 Dil 549 565 BODIPY?R 542 568 BODIPY?558/568 558 568 BODIPY?564/570 564 570 Cy3 ? 550 570 Alexa ? 546 555 570 TRITC 547 572 Magnesium Orange ? 550 575 Phycoerythrin,R & B 565 575 Rhodamine Phalloidin 550 575 Calcium Orange ? 549 576 Pyronin Y 555 580 Rhodamine B 罗丹明 555 580 ABI,TAMRA 560 582 Rhodamine Red ? 570 590 Cy3.5 ? 581 596 ABI,ROX 588 608 Calcium Crimson ? 590 615 Alexa ? 594 590 615 Texas Red 595 615 Nile Red 549 628 YO-PRO ? -3 612 631 YOYO ? -3 612 631 R-Phycocyanin 618 642 C-Phycocyanin 620 648 TO-PRO ? -3 642 660 TOTO-3 642 660 DiD DilC'(5) 644 665 Cy5 ? 649 670 Thiadicarbocyanine 651 671 Cy5.5 675 694 Rose Bengal 548 567

dox激发波长和发射波长

dox激发波长和发射波长

dox激发波长和发射波长
DOX是一个常用的荧光探针,其激发波长和发射波长对于荧光分析非常重要。

DOX的激发波长通常在480nm到490nm之间,这是因为DOX的激发峰位于这个波长范围内。

因此,当我们使用荧光分析仪来检测DOX 的荧光时,需要使用这个波长来激发DOX,以产生荧光信号。

DOX的发射波长通常在560nm到590nm之间,这是因为DOX的荧光峰位于这个波长范围内。

因此,当DOX被激发后,它会产生发射波长在这个范围内的荧光信号,这个信号可以被荧光分析仪测量。

在荧光分析中,我们通常会使用荧光染料来标记特定的分子或结构,然后使用荧光分析仪来检测这些标记物的荧光信号。

因此,了解荧光染料的激发波长和发射波长很重要,这有助于我们选择适当的荧光染料,并确定最佳的检测条件,以获得最佳的荧光信号。

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pe激发波长

pe激发波长

pe激发波长
PE激发波长是指荧光染料在光谱上吸收最大的波长,也是激发荧光染料所需的波长。

PE(Phycoerythrin)是一种常用的荧光染料,其激发波长为488nm,发射波长为578nm。

PE荧光染料广泛应用于流式细胞仪、免疫组化、免疫印迹等领域。

PE激发波长的确定是非常重要的,因为它直接影响到荧光信号的强度和稳定性。

如果激发波长不准确,可能会导致荧光信号过弱或过强,
影响实验结果的准确性。

因此,在使用PE荧光染料时,需要根据实验需要选择合适的激发波长,并进行严格的质量控制。

除了PE荧光染料,还有许多其他的荧光染料也需要确定其激发波长。

例如,FITC(荧光异硫氰酸荧光素)的激发波长为488nm,发射波长为530nm;Alexa Fluor 647的激发波长为633nm,发射波长为
660nm。

不同的荧光染料具有不同的激发波长和发射波长,因此在实
验中需要根据需要选择合适的荧光染料和激发波长。

在实验中,为了确定荧光染料的激发波长,可以使用荧光光谱仪进行
测量。

荧光光谱仪可以测量荧光染料在不同波长下的吸收和发射情况,从而确定其激发波长和发射波长。

在测量时,需要注意荧光染料的浓
度和pH值等因素对荧光信号的影响,以保证测量结果的准确性。

总之,PE激发波长是荧光染料在光谱上吸收最大的波长,也是激发荧光染料所需的波长。

在实验中,需要根据需要选择合适的荧光染料和激发波长,并进行严格的质量控制。

通过荧光光谱仪的测量,可以确定荧光染料的激发波长和发射波长,从而保证实验结果的准确性。

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常用荧光染料的激发和发射波长
Fluorescent Dye (荧光染料) Excitation (激发波长, nm ) Emission (发射波长,
nm )
Cy2 489 506
GFP(Red Shifted) 488 507
YO-PRO -1 491 509
YOYO -1 491 509
Calcein 494 517
FITC 494 518
FluorX 494 519
Alexa 488 490 520
Rhodamine 110 496 520
ABI,5-FAM 494 522
Oregon Green 500 503 522
Oregon Green 488 496 524
RlboGreen 500 525
Rhodamine Green 502 527
Rhodamine123 507 529
Magnesium Green 506 531
Calcium Green 506 533
TO-PRO -1 514 533
TOTO-1 514 533
ABI,JOE 520 548
BODIPY 530/550 530 550
Dil 549 565
BODIPYR 542 568
BODIPY558/568 558 568
BODIPY564/570 564 570
Cy3 550 570
Alexa 546 555 570
TRITC 547 572
Magnesium Orange 550 575
Phycoerythrin,R & B 565 575
Rhodamine Phalloidin 550 575
Calcium Orange 549 576
Pyronin Y 555 580
Rhodamine B 罗丹明 555 580
ABI,TAMRA 560 582
Rhodamine Red 570 590
581 596
ABI,ROX 588 608
Calcium Crimson 590 615
Alexa 594 590 615
Texas Red 595 615
Nile Red 549 628
YO-PRO -3 612 631
YOYO -3 612 631
R-Phycocyanin 618 642
C-Phycocyanin 620 648
TO-PRO -3 642 660
TOTO-3 642 660
DiD DilC'(5) 644 665
Cy5 649 670
Thiadicarbocyanine 651 671
675 694
Rose Bengal 548 567

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