高中生物实验微生物培养步骤
第1章 第2节 第1课时 微生物的基本培养技术 讲义【新教材】人教版(2019)高中生物选择性必修3
第2节微生物的培养技术及应用第1课时微生物的基本培养技术课标内容要求核心素养对接1.阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的前提。
2．阐明无菌技术是在操作过程中，保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术。
3．概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室进行微生物分离和纯化的常用方法。
1.科学思维：根据微生物的代谢类型分析培养基的组成。
2．科学探究：讨论并掌握无菌技术的实验操作方法；讨论并掌握微生物的纯培养的方法。
一、培养基的配制1．培养基人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
2．培养基的种类3．培养基的营养组成各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质，此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。
二、无菌技术1．获得纯净的微生物培养物的关键：防止杂菌污染。
2．消毒和灭菌(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。
(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。
(3)为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
(4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。
三、微生物的纯培养1．纯培养：在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为培养物。
由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，获得纯培养物的过程就是纯培养。
2．微生物纯培养的步骤：微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。
3．酵母菌的纯培养(1)菌落：分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体。
(2)获得单菌落的方法：平板划线法和稀释涂布平板法。
判断对错(正确的打“√”，错误的打“×”)1．液体培养基含有水，而固体培养基不含水。
(×)提示：液体培养基和固体培养基都含有水，它们的区别为是否含有凝固剂。
2．获得纯净微生物培养物的关键是防止杂菌污染。
微生物的分离与培养
微生物的分离与培养一．考纲要求：班级姓名1.微生物的分离和培养（A级）二．知识梳理考点一培养基1．培养基的营养构成(1)各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、、和无机盐。
(2)不同培养基要满足不同微生物对pH、特殊营养物质及氧气的需求。
易错警示①自养微生物所需的碳源、氮源来自含碳、含氮的无机物，而异养微生物需要的碳源、氮源来自含碳、含氮的有机物，因此可根据培养基中营养物质判断微生物的代谢类型。
②对异养微生物来说，含C、H、O、N的有机化合物既是碳源，又是氮源、能源。
③有些培养基不需要添加特殊营养物质，生物自己能合成，如大肠杆菌能合成某些维生素，作为特殊营养物质。
3.制备固体培养基的流程计算→称量→溶化→→倒平板操作的注意事项：①倒平板的适宜温度是℃左右，温度过高会烫手，过低培养基又会凝固。
②培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，不要完全打开；整个操作过程要在旁进行，避免杂菌的污染。
③平板冷凝后需，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
④若倒平板时，培养基溅在皿盖和皿底之间的部位，这个平板应该。
考点二微生物培养的无菌操作和接种方法1、进行无菌操作主要是为了防止外来杂菌的入侵，重点是消毒和灭菌。
3、纯化大肠杆菌的方法（1）原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。
例1．下列无菌操作中，错误的是 ( )A．无菌操作的目的是防止杂菌污染 B．用酒精擦拭双手的方法对操作者进行消毒C．实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行D．玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭例2．如右图是微生物平板划线示意图。
划线的顺序为1、2、3、4、5。
下列操作方法正确的是( )A．操作前要将接种环放在火焰旁灭菌 B．划线操作须在火焰上进行C．在5区域中才可以得到所需菌落D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌例3．（2015江苏）做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是A．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上例4(1)培养基的类型有很多，但培养基中一般都含有水、碳源、和无机盐。
高中生物第1章发酵工程第2节微生物的培养技术及应用第1课时微生物的基本培养技术新人教版选择性必修3
主题二 无菌技术
【情境探究】
获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。无菌技术应围绕着如 何避免杂菌的污染展开,主要包括消毒和灭菌。阅读教材中消毒和灭菌的 相关内容,结合下列情境,回答相关问题。 1.消毒和灭菌的原理有哪些?试举例说明。 提示 使菌体蛋白凝固变性,如高压蒸汽灭菌法;抑制细菌代谢和生长,或破 坏细菌细胞膜的结构,改变其通透性,使细胞破裂、溶解,如某些化学消毒 法;损伤细菌DNA等,如紫外线消毒法。 2.消毒和灭菌都能杀死所有的微生物吗? 提示 灭菌可杀死物体内外的全部微生物,包括芽孢和孢子,而消毒仅杀死 部分微生物。
提示 将接种菌种的液体培养基的锥形瓶放置在摇床上培养,通过摇床的晃 动为菌种的增殖提供氧气。摇床转速不同,培养液中O2含量不同。培养酵 母菌的平板属于固体培养基,不宜利用摇床培养。
结论语句辨一辨 1.由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。( √ ) 2.配制好的培养基可用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。( √ ) 3.培养基冷却凝固后应将培养皿倒置。( √ ) 4.接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌。( √ )
旁栏边角想一想 什么是生物消毒法?请举例说明其原理。 提示 生物消毒法是指利用生物或其代谢物除去环境中的部分微生物的方 法。例如,有的微生物能够寄生于多种细菌体内,使细菌裂解,因此可以用 它们来净化污水、污泥。
结论语句辨一辨 1.灭菌相比消毒对微生物的杀灭更彻底。( √ ) 2.无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可 采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。( × ) 3.培养基最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。( √ ) 4.选择消毒或灭菌要根据无菌操作的对象及目的而定。( √ )
营养物质 含义
作用
主要来源
酵母菌的纯培养(课件)人教版 高中生物选择性必修3
平板划线法
问题4：在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？
以免接种环温度太高，杀死菌种。
问题5：在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线 的末端开始划线？
划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线 的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终 能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
2.接种和分离酵母菌 通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀 释分散到培养基的表面。经过数次划线后培养，可以分离得到单菌落。平板
划线的具体操作目见录下面的流程图。
CONTENTS
2.接种和分离酵母菌 通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀 释分散到培养基的表面。经过数次划线后培养，可以分离得到单菌落。平板
问题6：为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？ 在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗？为什么？
平板划线法
1划线前
接种前， 杀死接种 环上的微 生物，避 免污染培 养基
2划线时
杀死残留 菌种，确 保每次划 线菌种来 自上次划 线的末端
3划线后
划线结束 后，杀死 残留菌种， 避免环境 污染和感 染操作者
酵母菌培养液、马铃薯、葡萄糖（或蔗糖）、琼脂、蒸馏水、天平、小刀、 纱布、烧杯、锥形瓶、棉塞、牛皮纸（或报纸）、皮筋、培养皿、接种环、酒 精灯、超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、干热灭菌箱和恒温培养箱等。
1.制备培养基
配制培养基 称
取去皮的马铃薯 目录
200g，切成小块，
加沸至水马10铃00薯mLC软,加O烂热N，煮用TENTS
1
2
3
接种环三个不同时期灼烧的目的
生物-微生物的基本培养技术
微生物的基本培养技术[高中生物] 1.概述培养基的成分和配制方法。
2.区分消毒和灭菌，掌握不同物品的灭菌方法。
3.概述微生物纯培养的基本操作要求。
一、培养基的配制1．培养基的概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
2．作用：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
3．培养基种类Error!特别提醒 (1)固体培养基中的琼脂仅作为凝固剂，不能为微生物生长提供能量和碳源。
(2)病毒为非细胞结构生物，只能在活细胞中营寄生生活，目前不能利用人工培养基来培养。
4．培养基的营养构成(1)主要营养物质：水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐。
(2)某种常见的细菌培养基——牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成组分含量提供的主要营养牛肉膏 5 g碳源、磷酸盐和维生素等蛋白胨10 g氮源和维生素等NaCl 5 g无机盐H2O定容至1 000 mL水(3)还需满足微生物对pH、特殊营养物质以及O2的需求。
例如：在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素；在培养霉菌时，一般需要将培养基调至酸性；在培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性；在培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件。
判断正误(1)用于发酵的微生物主要指细菌和真菌( )(2)培养基中加入琼脂的目的是提供碳源( )(3)所有微生物在培养时，培养基中都需加入氮源( )(4)培养不同微生物的培养基成分完全一样( )答案 (1)√ (2)× (3)× (4)×探讨点 概述培养基的种类和营养构成资料一：配制培养酵母菌的培养基：称取去皮的马铃薯200 g，切成小块，加水1 000 mL，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。
向滤液中加入20 g葡萄糖(也可用蔗糖代替)、15～20 g琼脂，用蒸馏水定容至1 000 mL。
资料二：100 g马铃薯中含有80 g水、2 g蛋白质、16 g碳水化合物，还有维生素、无机盐等。
2024年高中生物新教材同步选择性必修第三册第1章 发酵工程第2节 微生物的培养技术基本培养技术
2024年高中生物新教材同步选择性必修第三册第1章发酵工程第2节微生物的培养技术及应用第2节微生物的培养技术及应用第1课时微生物的基本培养技术课程内容标准核心素养对接1.概述培养基的配制方法和微生物纯培养的基本操作要求。
2.掌握无菌技术的操作。
3.掌握酵母菌纯培养的方法及步骤。
1.科学思维——根据微生物的代谢类型分析培养基营养物质的组成。
2.科学探究——设计制备马铃薯固体培养基的实验步骤，并尝试运用平板划线法进行纯化酵母菌。
知识点1培养基的配制1.培养基的概念、用途和类型2.培养基的配方(1)主要营养物质：水、碳源、氮源、无机盐。
(2)其他条件：pH、特殊营养物质和氧气。
如下表：微生物乳酸杆菌霉菌细菌厌氧微生物特殊需求添加维生素pH调至酸性pH调至中性或弱碱性无氧知识点2无菌技术1.获得纯净的微生物培养物的关键：防止杂菌污染。
2.消毒和灭菌3.注意事项(1)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。
(2)为了避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行。
知识点3微生物的纯培养1.纯培养的概念2.纯培养的过程(以酵母菌为例)包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。
(1)制备培养基(2)平板划线法接种和分离酵母菌(3)培养酵母菌将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28 ℃左右的恒温培养箱中培养24～48 h。
(1)培养基中的碳源物质有可能同时是氮源(√)(2)只要培养基中的物质含有氮元素，就可作为氮源(×)(3)微生物在液体培养基中生长可形成菌落(×)(4)灭菌相比消毒对微生物的杀灭更彻底(√)(5)只要是没有生物活性的材料均可进行高压蒸汽灭菌(×)(6)培养基分装到培养皿后再进行湿热灭菌(×)(7)为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落(×)教材P11“资料卡”拓展1.将无菌技术类型、常用方法和适用对象用线连起来。
高中生物选择性必修三 第1章 第2节 一 微生物的基本培养技术
成分 含量
NaNO3 3g
K2HPO4
MgSO4· 葡萄糖 7H2O
1g
0.5 g 30 g
)
蒸馏水 青霉素 定容至 0.1万 1 000 mL 单位
A.根据物理性质划分,该培养基属于液体培养基 B.微生物无法在该培养基表面形成肉眼可见的菌落 C.根据培养基的配方可知,该培养基培养的微生物的同化作用类型 是异养型 D.固体培养基中加入少量水即可形成液体培养基
探究点一
探究点二
探究点三
表二 培养基B(牛肉膏蛋白胨固体培养基)
成分
牛肉膏
蛋白胨
NaCl
含量/g
5.0
10.0
5.0
将上述物质溶解后,添加蒸馏水,定容至1 000 mL,调pH为7.0~7.2,并
加入15~20 g琼脂
1.表一中的碳源是
,氮源是
。表二中的氮源
是
,琼脂
(填“提供”或“不提供”)营养成
按物理 性质分
3.营养组成:各种培养基一般都含有水、碳源(提供碳元素的物质)、 氮源(提供氮元素的物质)和无机盐,此外还需要满足微生物生长对 pH、特殊营养物质(如维生素、氨基酸和碱基等)以及O2的要求。
预习反馈
1.判断正误。 (1)所有的微生物在培养时都必须添加氮源。( × ) (2)CO2可作为异养微生物的碳源。( × ) (3)不同培养基的具体配方不同,但一般都含水、碳源、氮源和无机 盐。( √ ) (4)液体培养基含有水,而固体培养基不含水。( × )
4.微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、倒平板、接种和分离、 培养等步骤。 (1)制备培养基 ①配制培养基 称取去皮的马铃薯200 g,切成小块,加水1 000 mL,加热煮沸至马铃 薯软烂,用纱布过滤。向滤液中加入 20 g葡萄糖(也可用蔗糖代替)、 15~20 g琼脂,用蒸馏水定容至1 000 mL。 ②灭菌 将配制好的培养基转移到锥形瓶中,加棉塞,包上牛皮纸,并用皮筋 勒紧,再放入高压蒸汽灭菌锅中,在压力为100 kPa、温度为121 ℃ 的条件下,灭菌15~30 min。将5~8套培养皿包成一包,用几层牛皮纸 包紧,放入干热灭菌箱内,在160~170 ℃灭菌2 h。
高中生物人教版微生物的培养技术与应用探究教案
接种与培养方法
01
02
03
接种方法
将微生物接种到培养基上 的过程，常用的接种方法 包括划线接种、涂布接种 和倾注接种等。
培养条件
根据微生物的种类和培养 目的，设置适宜的温度、 湿度、光照和气体环境等 培养条件。
培养方法
包括好氧培养、厌氧培养 和微需氧培养等，以满足 不同微生物的生长需求。
微生物的分离与纯化技术
了解微生物在农业领域的 应用，如生物肥料和生物 农药的研制与使用等。
06
课程总结与回顾
回顾本次课程重点内容
微生物的基本概念与分类
01
包括细菌、真菌、病毒等微生物的特点和分类方法。
微生物的培养技术
02
详细介绍了无菌操作技术、培养基的制备与灭菌、接种与培养
等微生物培养的关键步骤。
微生物在各个领域的应用
02
微生物的培养技术
培养基的制备与灭菌
01 培养基的成分
通常包括碳源、氮源、无机盐、生长因子和水等 ，为微生物提供必要的营养和生长条件。
02 培养基的制备
按照一定比例将各种成分混合均匀，加热溶解后 进行分装和灭菌处理。
03 灭菌方法
常用的灭菌方法包括高压蒸汽灭菌、干热灭菌和 过滤除菌等，以确保培养基无菌无杂。
04
实验操作与安全注意事项
实验器材的准备与消毒处理
准备实验所需器材
包括培养皿、移液管、接种环、酒精 灯、试管等，确保器材的完整性和洁 净度。
注意事项
消毒过程中要注意安全，避免烫伤或 火灾等意外事故的发生。
进行消毒处理
使用高压蒸汽灭菌器或干热灭菌器对 实验器材进行彻底消毒，避免微生物 污染。
实验操作步骤及注意事项
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高中生物实验微生物培养步骤
微生物的培养培养的微生物通常是微生物、细菌、放线菌、真菌等。
，属于一种生物培养。
微生物培养步骤：
1.配置不同浓度的营养液稀释液:取营养液1ml溶于9ml无菌水中,振荡 5min配成10%的溶液.
2.将容器口靠近(注意不是对着)酒精灯灯焰用吸管从此溶液中吸取1ml加入到装有9ml无菌水的试管中.以此类推制成
1%,0.1%,0.01%等不同浓度的稀释液.
3.将试管口靠近(注意不是对着)酒精灯灯焰,左手拿试管,右手托培养皿(仅露一条小缝,且靠近灯焰).将溶液倒入培养皿中,在各培养皿上标上浓度.
4.将有细菌生长的样品容器口靠近(注意不是对着)酒精灯灯焰,用接种环挑取菌落上的少量菌体加入10%的营养液中.把接种
环放在酒精灯上灼烧灭菌,再次取样加入盛1%的营养液的培养皿(仅露一条小缝,且靠近灯焰)中.重复这个操作,将各浓度的营养液接上种.
5.轻轻摇匀接上种的培养皿,置于恒温箱内37摄氏度保存,3
天后就有菌落出现.
微生物培养的基本条件：
1、影响微生物生长的因素
微生物的生长不仅由自身的遗传特性决定，还受到许多外界因素的影响。
影响微生物生长的因素很多，简单介绍如下。
1）营养物浓度
细菌的生长率与营养物的浓度有关:μ=μmax*C/(K+C) ，营养物浓度与生长率的关系曲线是典型的双曲线。
K值是细菌生长的很基本的特性常数。
它的数值很小，表明细菌所需要的营养浓度非常之低，所以在自然界中，它们到处生长。
然而营养太低时，细菌生长就会遇到困难，甚至还会死亡。
这是因为除了生长需要能量以外，细菌还需要能量来维持它的生存。
这种能量称为维持能。
另一方面，随着营养物浓度的增加，生长率愈接近最大值。
2）温度
在一定的温度范围内，每种微生物都有自己的三个基本点的生长温度:最低生长温度、最适生长温度和最高生长温度。
在生长温度的三个基本点内，微生物都可以生长，只是生长速度不同。
只有当微生物处于最适生长温度时，生长速度最快，世代时间最短。
超过最低生长温度，微生物就不会生长，温度过低，甚至会死亡。
超过最大生长温度，微生物就会停止生长，温度过高。
也会死。
通常，每种微生物的生长温度恒定三个基点。
但是它经常受到其他环境条件的影响。
根据微生物最适生长温度的不同，可将它们分为三个类型：
a.嗜冷微生物：其是适生长温度多数在-10℃－20℃之间
b.中温微生物：其最适生长温度一般在20℃－45℃之间
c.嗜热微生物：生长温度在45℃以上。
3）水分
水是微生物生长的必要条件。
孢子和孢子的萌发首先需要水。
没有水，微生物就不能生存。
但是微生物只能在水溶液中
生长，不能在纯水中生存。
各种微生物在水分活动范围内都有狭窄而适宜的水分活动区域，不能生长发育。
4）氧气
根据微生物对氧气的要求，可分为以下五种。
a.需氧微生物：这类微生物需要氧气供呼吸之用。
没有氧气，便不能生长，但是高浓度的氧气对需氧微生物也是有毒的。
很多需氧微生物不能在氧气浓度大于大气中氧气浓度的条件下生长。
绝大多数微生物都属于这个类型。
本篇文章转自生化试剂。