巴氏染色法
精子形态学染色液(巴氏法)
精子形态学染色液(巴氏法)简介：细胞学常规染色普遍使用巴氏(Papanicolaou)法，Papanicolaou Stain 最初仅用于检测阴道上皮雌激素水平以及生殖道念珠菌、滴虫等病原体。
橘黄G6与EA36或EA50联合使用，可将胞浆染成颜色鲜明的绿色、蓝色和粉色。
目前大多数实验室采用成品染液，所以每种染液应注意其改良后的最佳条件。
最终胞浆染色应透明可见，核染色质应很容易辨别出来。
目前改良的巴氏染色液含有多种离子，具有多色性染色效能。
染色后胞质鲜艳、透明性好以及核膜、核仁、染色质结构清晰。
Leagene 精子形态学染色液(巴氏法) 因精子及细胞内不同等电点的蛋白质在相同的酸度下带不同的电荷，能选择性地结合相应的染料而着色。
胞核由酸性物质组成，它与碱性染料的亲和力较强；而胞浆则相反，它含有碱性物质和酸性染料的亲和力较大细胞质染色特别采用针对于精子染色的改良EA50染色液，细胞核染色采用Leagene 自主研发的无毒改良型苏木素染色液，特别适用于精子的染色，亦可用于胸水、腹水、痰液等细胞样本的染色。
组成：自备材料：1、 固定液(如95%乙醇-乙醚固定液)2、 系列乙醇3、 0.5%盐酸乙醇分化液操作步骤(仅供参考)：1、 细胞涂片用等量95%乙醇-冰乙酸固定液固。
2、 80%的乙醇浸泡1min 。
3、 70%的乙醇浸泡1min 。
4、 50%的乙醇浸泡1min 。
编号 名称DA0191 4×20ml DA0191 4×100ml Storage 试剂(A): Lea 苏木素染色液 20ml 100ml RT 避光 试剂(B): 蓝化液20ml 100ml RT 试剂(C): 橘黄G6染色液 20ml100ml RT 避光使用说明书1份5、 蒸馏水或自来水浸泡或冲洗。
6、Lea 苏木素染色液染色。
7、自来水冲洗。
8、盐酸乙醇分化液分化或盐酸水溶液分化。
9、自来水冲洗。
10、蓝化液中蓝化4min 。
巴氏染色技术要点
巴氏染色巴氏（Papanicolaou）染色法是脱落细胞染色中最好的染色方法。
其适用于上皮细胞及间皮组织的标本。
是阴道脱落细胞检查中最常用的染色方法。
该染色法不但具有显示细胞核结构清晰，分色明显，透明度好，胞浆受色鲜艳等特点，而且所染标本不易脱色，可长久保存。
对如何染好巴氏染色，笔者有以下几点体会，报告如下。
1 EA 36染液pH值的测试EA 36染液的酸碱度对巴氏染色的成功起着关键性作用，EA 36染液由伊红、亮绿、桔黄及俾麦棕等染料配成。
伊红、亮绿、桔黄及俾麦棕等属于酸性染料。
在溶媒中其发色团是负离子部分。
发色团可与蛋白质中带正电的氨基结合，从而使胞浆显蓝色、绿色、桔黄色或红色。
但蛋白质所带正负电荷的多少是随溶液的pH值而改变的。
在偏碱环境中，蛋白质的羧基游离增多（带负电）。
在偏酸环境中蛋白质氨基游离增多（带正电）。
所以必须把染液pH值调至5.2为宜［1］。
EA 36染液pH的调节，可用石蕊试纸法，也可用酸度计测试。
当然用酸度计法最为准确。
但以上方法均比较麻烦，同时还要受到仪器设备的限制，不方便。
本文采用一种简单方便的方法。
即用10%磷钨酸及饱和碳酸锂溶液直接测试。
具体做法是，拿一张滤纸先滴少量染液于纸上，若滴染液处呈紫色，说明染液偏碱，则滴加少量10%磷钨酸。
若显绿色，说明染液偏酸，则滴加少量饱和碳酸锂。
并充分混匀。
直至染液滴在纸上既显绿色又有红色，颜色鲜艳为宜。
用此法测试染液pH同用石蕊试纸法测试一样，同样可获得满意的染色效果。
磷钨酸在染色过程中，不但作为媒染剂可增加染料的着色力。
同时磷钨酸与碳酸锂还是一对弱酸弱碱，实际上是一对缓冲剂。
可中和分色及蓝化时可能留下的少量酸或碱。
保证染色达到理想效果。
2 分色分色或酸化，对染色效果也很重要。
分色目的是去掉胞浆中染上的多余的苏木素，使胞核着色显示特异性。
因此，经分色后的胞浆在镜下观察应无色为佳。
若胞浆中还残留有苏木素染料，会影响EA 36染液的着色。
巴氏染色快速方法
95％乙醇固定（15min）→80%，50%酒精中各30秒—清水冲洗多次→苏木素染液
（3-5min）→清水冲洗三次→盐酸酒精分化数秒—碳酸锂蓝化30秒→水洗1-2分钟—50%，80%酒精中各30秒—95％乙醇漂洗2分钟→橙黄染液（1-3分钟）→95％乙醇漂洗2次，各10-20秒→EA36（2-5分钟）→95％乙醇漂洗2-5秒→95％乙醇漂洗2-5秒→无水乙醇漂洗→无水乙醇（2min）→二甲苯（2min时间浸泡）→中性树胶封片
1、取自然干燥涂片。
或涂片未干时放入95％
酒精固定（湿固定）涂片。
2、加A液4-6滴，染6-10分钟（夏天6分钟、冬天10分钟），用75%酒精冲洗。
（如浸染：先用水冲去多余染料，在放入75%酒精中1-2分钟取出，滴去多余酒精
后放入B液）
3、加B液4-6滴，染2-4分钟（夏天2分
钟、冬天4分钟），水洗，镜检。
巴氏染色原理
巴氏染色原理
巴氏染色原理是一种用于细胞核的染色方法，由德国科学家巴氏于1882年首次提出。
该方法通过染色剂与细胞核中的染色质结合，使其显现出不同的颜色，从而帮助科研人员观察和研究细胞核的结构和功能。
巴氏染色原理在生物学、医学和生物技术领域具有重要的应用价值。
巴氏染色原理的基本步骤包括固定、染色和洗涤。
首先是固定，即利用甲醛等化学物质使细胞固定在载玻片上，保持其形态和结构不变。
接着是染色，通过染色剂如甲苯胺蓝、伊红等与细胞核中的染色质结合，使其显现出特定的颜色。
最后是洗涤，将载玻片在适当的溶液中洗涤，去除多余的染色剂，使细胞核清晰可见。
巴氏染色原理的应用范围非常广泛。
在医学领域，巴氏染色原理被用于研究疾病的发病机制和病理变化，如癌症细胞的形态学特征和染色体异常。
在生物技术领域，巴氏染色原理被应用于基因工程和细胞工程中，帮助科研人员观察和分析基因的表达和调控。
在生物学领域，巴氏染色原理被用于研究细胞核的结构和功能，如染色体的形态和数量。
巴氏染色原理的优点在于操作简便、成本低廉、结果清晰可见。
然而，也存在着一些局限性，如染色效果受到固定和染色条件的影响，染色质与其他细胞结构的区分度不高等。
总的来说，巴氏染色原理作为一种重要的细胞核染色方法，在生物学、医学和生物技术领域具有重要的应用价值。
随着科学技术的不断进步，相信巴氏染色原理将会在更多领域得到广泛应用，为人类健康和科学研究做出更大的贡献。
宫颈液基细胞学涂片巴氏染色评分标准
宫颈液基细胞学涂片巴氏染色评分标准
宫颈刮片是指子宫颈刮片，子宫颈刮片巴氏的分级可以分为巴氏I级、巴氏II级、巴氏III级、巴氏IV级、巴氏V级五级，是子宫颈癌筛查的重要方法。
1、巴氏I级：属于正常范围，为正常的子宫颈细胞涂片。
2、巴氏II级：提示有炎症，细胞核增大，核染色质较粗，但染色质分布尚均匀，一般属良性改变或炎症。
临床分为IIA及IIB，IIB是指个别细胞核异质明显，但又不支持恶性，其余为IIA。
3、巴氏III级：可能存在可疑病变，主要是核异质，表现为核大深染，核形不规则或双核。
对不典型细胞，性质尚难肯定。
4、巴氏IV级：为高度可疑癌，细胞有恶性特征，但在涂片中恶性细胞较少。
5、巴氏V级：通常可以确诊为癌症，具有典型的多量癌细胞。
巴氏分级法的缺点是以级别来表示细胞学改变的程度，易造成假象，巴氏分级法已逐步被TBS分类法所取代。
巴氏染色原理
巴氏染色原理
巴氏染色原理是一种常用的细胞染色技术，用来对细胞或组织进行染色。
该原理是基于酚醛固定的原理，通过将细胞或组织固定在玻片上，然后处理它们使得它们能够与染料发生反应。
巴氏染色的步骤如下：
1. 固定：将细胞或组织浸泡在酚醛液中，使其固定在玻片上。
酚醛能够保持细胞或组织的形状和某些结构的完整性。
2. 脱水：通过将样本逐渐浸泡在濃度递增的酒精溶液中，使其逐渐失去水分。
这样做是为了减少细胞或组织内的水分，以便尽可能地提高染料对细胞或组织的亲和力。
3. 渗透：将细胞或组织浸泡在骨胶液中，使其充分浸润。
骨胶液能够渗透到细胞或组织的内部，使得染料更容易地与它们发生反应。
4. 染色：将染料溶液滴在样本上，使其与细胞或组织结合。
染料能够结合到不同的细胞或组织结构中，从而显示出不同的颜色或形态。
5. 清洗：将多余的染料以及其他杂质通过浸泡在去离子水中进行清洗。
这样可以让染色的结果更加清晰。
6. 封片：在玻片上涂上封片剂，以保护样本并固定染料。
这样可以使染色的结果保持较长时间。
通过巴氏染色原理，我们可以对细胞或组织进行染色，并观察它们的结构，从而得到更多关于它们的信息。
这种染色方法在细胞学和组织学研究中广泛应用，为我们研究生物体内部的结构和功能提供了重要的工具。
巴氏染色原理
巴氏染色原理
巴氏染色液的染色原理：
核酸等电点为PH1.5-2.0,当PH＞2.0时，能结合带正电荷的苏木素。
染料中的伊红、亮绿、橙黄等为酸性染料，俾士麦棕为盐基性染料，能与细胞浆中相反电荷的蛋白质结合，从而染出鲜艳的结构。
细胞学常规染色普遍使用巴氏（Papanicolaou）法，橘黄G与EA36或EA50联合使用可将胞浆染成颜色鲜明的绿色、蓝色和粉色，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料的亲和力较强；而细胞浆则相反，它含有碱性物质和酸性染料的亲和力较大。
巴氏染色液正是利用这一特性对细胞进行多色性染色，细胞经染色后能清晰地显示细胞的结构，胞质透亮鲜丽，各种颗粒分明，细胞核染色质非常清楚，从而较容易发现异常细胞。
HE染色和巴氏染色两种不同方法在宫颈液基细胞检查中应用价值
HE染色和巴氏染色两种不同方法在宫颈液基细胞检查中应用价值1. 引言1.1 背景介绍宫颈液基细胞检查是一种常见的癌症筛查方法，通过对宫颈细胞进行染色和观察，可以及早发现潜在异常细胞的存在，从而帮助医生及时进行治疗和干预。
而在宫颈液基细胞检查中，HE染色和巴氏染色是两种常用的染色方法。
HE染色是指用苏木精红染色液对细胞组织进行染色，然后通过镜检查细胞结构和形态的变化，从而判断细胞是否正常。
HE染色在宫颈液基细胞检查中具有较高的分辨率和清晰度，可以清晰显示细胞的核质比和细胞核的形态，有利于医生进行细胞学分析和诊断。
巴氏染色是一种特殊的染色方法，可以通过染色剂对细胞核进行染色，使异常细胞核在显微镜下呈现出特殊的形态和颜色。
巴氏染色在宫颈液基细胞检查中常用于检测细胞的DNA含量和核型，可以帮助医生判断细胞的恶性程度和预后。
HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中发挥着重要的作用，它们可以相互补充，提高检测的准确性和灵敏度，为患者提供更准确的诊断和治疗方案。
1.2 研究目的研究目的是通过比较分析HE染色和巴氏染色两种不同方法在宫颈液基细胞检查中的应用价值，探讨它们在临床实践中的优劣势和适用范围。
具体来说，我们的研究目的包括以下几个方面：1. 比较HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中的染色效果和细胞形态学分析的准确性，评估它们对细胞结构和形态的显现能力。
2. 探讨HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中的操作流程和技术难易度，比较它们的操作成本和时间消耗。
3. 调查HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中的临床应用情况和效果评价，探讨它们在筛查、诊断和预后评估等方面的作用及价值。
通过深入研究HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中的不同应用价值，我们旨在为临床医生提供更具参考意义的细胞学诊断方法，促进宫颈疾病的早期发现和治疗，提高宫颈液基细胞检查的准确性和可靠性。
1.3 意义宫颈液基细胞检查是一种重要的筛查方法，可用于早期发现宫颈病变及癌变，对于提高宫颈癌的早期发现率和治疗效果具有重要意义。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
巴氏染色液说明书
【产品名称】 巴氏染色液 【包装规格】
货号：DA0082
单瓶(盒)包装规格：100ml 、250ml 、500ml 、5000ml ；
套组(盒)包装规格：4×100ml/盒、4×250ml/盒、4×500ml/盒。
【预期用途】
主要用于对脱落细胞的组织细胞学染色。
【检验原理】
细胞学常规染色普遍使用巴氏(Papanicolaou)法，橘黄G 与EA36或EA50联合使用可将胞浆染成颜色鲜明的绿色、蓝色和粉色，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料的亲和力较强；而细胞浆则相反，它含有碱性物质和酸性染料的亲和力较大。
巴氏染色液利用这一特性对细胞进行多色性染色，细胞经染色后能清晰地显示细胞的结构，胞质透亮鲜丽，各种颗粒分明，细胞核染色质非常清楚，从而较容易发现异常细胞。
通过巴氏染色可反映出细胞在炎症刺激下和癌变后的形态学变化，对早期发现和诊断一些病变和肿瘤具有较重要意义。
【主要组成成分】
试剂组成
主要成分 l 、苏木素染色液
苏木素 2、1%盐酸乙醇分化液 盐酸、乙醇 3、橘黄G 染色液
橘黄G
4、EA50染色液或EA36染色液
EA50染色液：淡绿、伊红、磷钨酸、冰乙酸； EA36染色液：淡绿、伊红、磷钨酸
【储存条件及有效期】
5℃～35℃环境保存，原包装未开封染色液的有效期为18个月，在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】
新鲜标本涂片后，应尽快用95%乙醇固定，以避免细胞变形。
【检验方法】
1、固定：将细胞涂片置于95%乙醇中固定；
2、染色，按要求进行染色。
3、二甲苯透明，中性树脂封片，镜检。
【检验结果的解释】
【检验方法的局限
性】
仅供形态学初检观察染色使用。
【注意事项】
1、冬季气温较低时，苏木素染色液不易着色，可适当延长染色时间。
细胞核
蓝紫色或黑色 非角化细胞的胞质 淡蓝色或淡绿色 角化细胞的胞质 粉红或橘黄色 红细胞 鲜红色或橙红色 粘液
淡蓝或粉红色
2、橘黄G染色液染色时间不宜过长，且在乙醇中要尽量洗净多余的染色液，否则会影响EA50染色液或EA36染色液的着色。
3、请不要将新旧批号的EA50染色液或EA36染色液混合使用。
4、该试剂盒贮存时，尽量避免高温及光亮环境以免影响品质和效果
5、本产品仅用于体外诊断，应由专业人士使用及进行结果的判读。
6、使用前应详细阅读说明书，并做好个人卫生防护，在有效期内使用，生产日期、生产批号和失效日期见包装。
7、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物。
【基本信息】
备案人/生产企业名称：安徽雷根生物技术有限公司
住所：淮北凤凰山经济开发区凤冠路三期标准化厂房三号厂房。