邻二氮菲分光光度法测定水中微量铁
邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告
实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验目的和要求1．掌握紫外可见分光光度计的基本操作；2．掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的原理和方法；3．掌握吸收曲线绘制及最大吸收波长选择；4．掌握标准曲线绘制及应用。
实验原理邻二氮菲（1,10—邻二氮杂菲）是一种有机配位剂，可与Fe2+形成红色配位离子：Fe2++3NNNN3Fe2+在pH=3～9范围内，该反应能够迅速完成，生成的红色配位离子在510nm波长附近有一吸收峰，摩尔吸收系数为1.1×10-4，反应十分灵敏，Fe2+ 浓度与吸光度符合光吸收定律，适合于微量铁的测定。
实验中，老师我们又见面了采用pH=4.5～5的缓冲溶液保持标准系列溶液及样品溶液的酸度；采用盐酸羟胺还原标准储备液及样品溶液中的Fe3+并防止测定过程中Fe2+被空气氧化。
实验仪器与试剂1．752S型分光光度计2．标准铁储备溶液（1.00×10-3mol/L）3．邻二氮菲溶液（0.15%，新鲜配制）4．盐酸羟胺溶液（10%，新鲜配制）5．NaAC缓冲溶液6．50ml容量瓶7个7．1cm玻璃比色皿2个8．铁样品溶液实验步骤1．标准系列溶液及样品溶液配制，按照下表配制铁标准系列溶液及样品溶液。
2．吸收曲线绘制用1cm比色皿，以1号溶液作为参比溶液，测定4号溶液在各个波长处的吸光度，绘制吸收曲线，并找出最大吸收波长。
3．标准曲线制作在选定最大吸收波长处，用1cm 比色皿，以1号溶液作为参比溶液，分别测定2至7号溶液的吸光度，平行测定3次，计算吸光度平均值，绘制标准曲线。
实验数据处理1、 样品中铁的计算2.5050.00C C X ⨯=读取值 Cx=4.65×10-5×50.00/2.50=9.30×10-4mol/L2、 摩尔吸光系数计算在标准曲线的直线部分选择量两点，读取对应的坐标值，计算邻二氮菲配位物在最大吸收波长出的摩尔吸光系数：1212c -c A A ε-=ε=(0.460-0.233)/(0.00006-0.00004)=2.00×10-57 样品溶液4.65×10-5 mol/ml实验注意事项1、测定系列标准溶液和样品溶液时，必须使用同一只比色皿。
邻二氮菲分光光度法测微量铁加入缓冲液的作用
邻二氮菲分光光度法测微量铁加入缓冲液的作用邻二氮菲是一种常用的配体，常用于测定金属离子中的铁离子。
邻二氮菲与铁离子形成比例为1:1的络合物，其络合物具有强吸收的特性，可以通过紫外-可见吸收光谱进行定量分析。
在分光光度法测定微量铁的过程中，邻二氮菲通常会与缓冲液配合使用，主要有以下几个作用：
1.调节 pH 值：邻二氮菲与铁离子的络合反应对 pH 值相对敏感。
为了保证络合反应的发生和测定的准确性，需要将 pH 值控制在适当的范围内。
缓冲液可以帮助调节和维持溶液的 pH 值，确保反应在较理想的 pH 条件下进行。
2.抑制干扰物质：在样品溶液中，可能存在一些干扰物质，如其他金属离子或有机物，它们可能对铁离子的测定产生干扰。
缓冲液中的某些成分可以与这些干扰物质发生反应，形成沉淀或其他化学物质，从而减少或消除它们对测定结果的影响。
3.稳定络合物：邻二氮菲与铁离子形成的络合物相对不稳定，容易受到光、氧和其他成分的影响而分解。
缓冲液中的部分成分可以提高邻二氮菲与铁离子形成络合物的稳定性，延长络合物的寿命，从而提高测定的精确度和可靠性。
加入缓冲液可以使邻二氮菲与铁离子的络合反应在合适的 pH 条件下进行，同时可以抑制干扰物质的影响，并提高络合物的稳定性，从而实现准确测定微量铁的目的。
邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁常用文档
四、实验步骤
1．邻菲罗啉-亚铁吸收曲线的绘制
准确吸取铁标准溶液（含铁 10μg/mL，用含铁 100μg/mL 配 制）4mL于50mL容量瓶中，依次加入5mL HAc-NaAc缓冲液、 2mL盐酸羟胺溶液、5mL邻菲罗啉溶液，用水稀释至刻度，摇匀， 放置10分钟。以水作参比溶液，用1cm比色皿和722型分光光度计 在=440-600nm分别测定吸光度A。
为使测定稳定，将电源开关打开，使仪器预热
六、思考题
1．参比溶液的作用是什么？
2．溶液酸度对测定有何影响？ 3．制作标准曲线和进行其他条件实验时，加入试剂的
顺序能否任意改变？为什么？
七、注意事项
1．为了防止光电管疲劳。不测定时必须将比色皿暗箱盖打开，使
光路切断，以延长光电管使用寿命。
2．比色皿使用注意事项：
如果铁以Fe3+的形式存在，应预先加入盐酸羟胺将 Fe3+还原成Fe2+。
三、主要仪器与试剂
1．仪器 722型分光光度计、 10mL吸量管，50mL容量瓶。
2．试剂 (1) 铁标准溶液（含铁 100μg/mL）； (2) 0.1%邻菲罗啉溶液 ； (3) 5%盐酸羟胺溶液 ； (4) HAc-NaAc缓冲液（pH=4.6）。
1．吸收曲线绘制和测量波长选择
由吸收曲线可得，λmax=
nm。
2．标准曲线的绘制和铁含量的测定
若由标准曲线上查出对应的铁含量为cxห้องสมุดไป่ตู้，
以所得吸光度A为纵坐标，相应波长λ为横坐标，在坐标纸上绘制A与λ的吸收曲线。
则原试样中铁含量的浓度c 计算： 以显色后的50mL溶液中的含铁量(µg)为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制测定铁的标准曲线。
以所得吸光度A为纵坐标，相应波长λ为横坐标，在坐标纸上 绘制A与λ的吸收曲线。从吸收曲线上选择测定铁的适宜波长，一 般选用最大吸收波长λmax为测定波长。
实验八-邻二氮菲分光光度法测定微量铁
实验八-邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验七邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的：（1）掌握研究显色反应的一般方法。
（2）掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理和方法。
（3）熟悉绘制吸收曲线的方法，正确选择测定波长。
（4）学会制作标准曲线的方法。
（5）通过邻二氮菲分光光度法测定微量铁在未知式样中的含量，掌握721型，723型分光光度计的正确使用方法，并了解此仪器的主要构造。
二、原理：可见分光光度法测定无机离子，通常要经过两个过程，一是显色过程，二是测量过程。
为了使测定结果有较高灵敏度和准确度，必须选择合适的显色条件和测量条件，这些条件主要包括入射波长，显色剂用量，有色溶液稳定性，溶液酸度干扰的排除。
（1）入射光波长：一般情况下，应选择被测物质的最大吸收波长的光为入射光。
（2）显色剂用量：显色剂的合适用量可通过实验确定。
（3）溶液酸度：选择适合的酸度，可以在不同PH缓冲溶液中加入等量的被测离子和显色剂，测其吸光度，作DA-PH曲线，由曲线上选择合适的PH范围。
（4）有色配合物的稳定性：有色配合物的颜色应当稳定足够的时间。
（5）干扰的排除：当被测试液中有其他干扰组分共存时，必须争取一定的措施排除干扰。
邻二氮菲与Fe2+在PH2.0-9.0溶液中形成稳定橙红色配合物。
配合无的ε =1.1 ×104 L· mol ·cm-1。
配合物配合比为3：1，PH在2-9（一般维持在PH5-6）之间。
在还原剂存在下，颜色可保持几个月不变。
Fe3+与邻二氮菲作用形成淡蓝色配合物稳定性教差，因此在实际应用中加入还原剂使Fe 3+还原为Fe2+与显色剂邻二菲作用，在加入显色剂之前，用的还原剂是盐酸羟胺。
此方法选择性高Br3+、Ca2+、Hg 2+、Zn2+及Ag+等离子与邻二氮菲作用生成沉淀，干扰测定，相当于铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、Sio32-，20倍的Cr3+、Mn2+、VPO3-45倍的Co2+、Ni2+、Cu2+等离子不干扰测定。
实验二十 水中微量铁的测定—邻菲啰啉分光光度法
实验二十水中微量铁的测定—邻菲啰啉分光光度法一、实验目的1.学习如何选择吸光光度分析的实验条件；2.掌握用吸光光度法测定铁的原理及方法；3.掌握分光光度计和吸量管的使用方法。
二、实验原理铁的吸光光度法所用的显色剂较多，有邻二氮菲（又称邻菲啰啉，菲绕林）及其衍生物、磺基水杨酸、硫氰酸盐、5－Br－PADAP等。
其中邻二氮菲分光光度法的灵敏度高，稳定性好，干扰容易消除，因而是目前普遍采用的一种方法。
在pH为2～9的溶液中，Fe2＋与邻二氮菲（Phen）生成稳定的橘红色络合物Fe（Phen）32＋：其中lgβ3＝21.3，摩尔吸光系数ε508＝1.1×104 L·mol-1·cm-1。
当铁为＋3价时，可用盐酸羟胺还原：Cu2＋、Co2＋、Ni2＋、Cd2＋、Hg2＋、Mn2＋、Zn2+等离子也能与Phen 生成稳定络合物，在少量情况下，不影响Fe2＋的测定，量大时可用EDTA隐蔽或预先分离。
吸光光度法的实验条件，如测量波长，溶液酸度、显色剂用量、显色时间、温度、溶剂以及共存离子干扰及其消除等，都是通过实验来确定的。
本实验在测定试样中铁含量之前，先做部分条件试验，以便初学者掌握确定实验条件的方法。
条件试验的简单方法是：变动某实验条件，固定其余条件，测得一系列吸光度值，绘制吸光度－某实验条件的曲线，根据曲线确定某实验条件的适宜值或适宜范围。
三、仪器与药品1.分光光度计，pH计，50mL容量瓶8个（或比色管8支）2.100 μg·mL-1铁标准溶液：准确称取0.8634 g 分析纯 NH4Fe（SO4）2·12H2O于200mL烧杯中，加入20mL 6mol·L-1 HCl溶液和少量水，溶解后转移至1L容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。
3.邻二氮菲 1.5 g·L-1。
（新配制）；4.盐酸羟胺100 g·L-1（用时配制）。
5.NaAc 1mol·L-1。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁
一． 实验名称：邻二氮菲分光光度法测定微量铁 二． 实验目的1. 通过分光光度法测定铁的条件实验，学会选择和确定分光光度分析的适宜条件。
2. 了解光栅分光光度计的构造和使用方法。
3. 掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理和方法。
三． 实验原理邻二氮菲使铁的一种优良的显色剂，在pH2～9的溶液中，Fe 2+能与其生成1：3的橙红色配合物，3lg 21.3β= 最大吸收波长510nm 处的摩尔吸光系数为4111.110L mol cm --⨯•• 。
在一定浓度范围内，Fe 2+的浓度范围内，Fe 2+的浓度与配合物吸光系数的关系遵循朗伯-比尔定律。
有关反应如下：NNFe2+33Fe2++该显色反应选择性很高，形成的配合物较稳定，在还原剂的存在下，颜色可保持数月不变。
由于Fe 3+也可与邻二氮菲生成1：3的淡蓝色配合物，3lg 14.1β=，所以，在显色反应前，需将Fe 3+全部还原成Fe 2+。
四． 实验用品1．仪器 721或722型分光光度计。
2．试剂(1)0.1 mg ·L-1铁标准液 准确称取0.702 0 g NH 4Fe(S04)2·6H 20置于烧杯中，加少量水和20 mL 1:1H 2S04溶液，溶解后，定量转移到1L 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
(2)100 g ·L-1盐酸羟胺水溶液 用时现配。
(3)1.5 g ·L-1邻二氮菲水溶液 避光保存，溶液颜色变暗时即不能使用。
(4)1.0 mol ·L-1 乙酸钠溶液。
(5)1 mol ·L-1氢氧化钠溶液。
五． 实验步骤1.准备工作。
打开分光光度计开关，预热。
2.确定最大吸收波长。
取50 mL容量瓶（1#），用吸量管加入1 mL 100 g·L-1盐酸羟胺溶液，再各加入2 mL 1.5 g·L-1邻二氮菲溶液、5 mL 1.0 mol·L-1乙酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀（参比溶液）。
实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁的条件
实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁的条件、实验目的1、掌握分光光度计的原理、构造和使用方法。
2、学习分光光度计分析中如何确定最佳实验条件。
、实验原理在可见光区分光光度法测量中，通常是将被测物质与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测其吸光度，进而求得被测物质的含量。
显色反应的程度受显色剂用量、显色时间，显色液酸度等条件的影响，通过实验，确定合适的显色条件。
三、仪器及试剂分光光度计；1cm 吸收池；10mL移液管；25mL 容量瓶,100ml 容量瓶1．铁标准溶液100μg·mL -1（即0.01 mg·mL-1）铁标准溶液：准确称取0.3511g（NH 4）2 Fe（SO4）2·6H 2O 于烧杯中，用2 mol ·L-l盐酸15 mL 溶解，移入500 mL 容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。
用前，准确稀释10 倍成为含铁10 ug·mL -1标准溶液。
2. 1g.L -1邻二氮菲：1.0 g 邻二氮菲于小烧杯中，加入5-10ml 95%乙醇溶液溶解，再用水稀释到1000 mL 。
3. 10％盐酸羟胺水溶液：10％水溶液（现用现配，避光保存）4. 醋酸钠溶液1mol/L5. 0.8 mol/L 氢氧化钠溶液四、实验步骤1、吸收曲线的制作和测量波长的选择用移液管吸取0.0ml、2.0mL 10 ug ·mL -1标准溶液，分别注入二个25 mL 容量瓶中，加入1.0mL10% 的盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min ；再加2 mL 邻二氮菲溶液，2.5mL 醋酸钠溶液溶液，用水稀释至刻度，摇匀。
放置5min 后，用1cm 比色皿，以试剂空白为参比，在440~560nm 之间，每隔10nm 测一次吸光度，其中在500-520 nm 之间，每隔5nm 测一次吸光度。
然后以波长为横坐标，吸光度A 为纵坐标，绘制吸收曲线，找出最大吸收波长。
2、显色剂用量影响在7 只25mL容量瓶中，各加2.0 mL 10 ug·mL -1铁标准溶液和1.0 mL 盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min。
仪器分析实验-自来水中铁含量测定(邻二氮菲分光光度法)
实验二 自来水中铁含量的测定（邻二氮菲分光光度法）一、目的要求1．掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理；2．熟悉绘制吸收曲线的方法，正确选择测定波长；3．学习标准曲线的制作。
二、实验原理邻二氮菲（1，10—二氮杂菲），也称邻菲啰啉，是测定微量铁的高灵敏、高选择性显色剂。
在pH2～9范围内（一般控制在5～6间）Fe 2+与邻二氮菲试剂生成稳定的橙红色配合物Fe(Phen)32+ lgK ＝21.3，在510nm 下，其摩尔吸光系数为1.1×104 dm 3·cm －1·mol －1 。
Fe 3+也和邻二氮菲生成配合物（呈蓝色）。
因此，在显色之前需用盐酸羟胺或抗坏血酸将全部的Fe 3+还原为Fe 2+。
本方法的选择性很高，相当于含铁量40倍的Sn 、AI 、Ca 、Mg 、Zn 、Si ，20倍的Cr 、Mn 、V 、P 和5倍的Co 、Ni 、Cu 不干扰测定。
本实验采用标准曲线法（又称工作曲线法），即配制一系列浓度由小到大的标准溶液，在确定条件下依次测量各标准溶液的吸光度（A ），以标准溶液的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线。
将未知试样按照与绘制标准曲线相同的操作条件的操作，测定出其吸光度，再从标准曲线上查出该吸光度对应的浓度值就可计算出被测试样中被测物的含量。
三、仪器与试剂1．仪器 722型分光光度计、容量瓶（50mL 、100mL ）、刻度吸管（5mL ，10mL ）等。
2．试剂（1）铁标准储备溶液准确称取0.176克分析纯硫酸亚铁铵（FeSO 4 ·(NH 4)2 SO 4·6H 2O ）于小烧杯中，加水溶解，加入6mol ∕L HCl 溶液5mL ，定量转移至250mL 容量瓶中稀释至刻度，摇匀。
所得溶液每毫升含铁0.100 mg （即100ug/mL ）。
（2）0.1％邻二氮菲溶液；2Fe 3++2NH 2OH = 2Fe 2++N2O +2H +Fe 2+ + 3N N Fe2+3（3）10％盐酸羟胺（新配）（4）HAc－NaAc缓冲溶液（pH＝4.6）（5）6 mol∕L HCl（6）测铁水样：约10mL 100ug/mL铁标准储备液稀释至250mL。
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邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的１、学会吸收曲线及标准曲线的绘制,了解分光光度法的基本原理。
２、掌握用邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理。
3、学会721型分光光度计的正确使用，了解其工作原理。
４、学会数据处理的基本方法。
5、掌握比色皿的正确使用。
二、实验原理根据朗伯-比耳定律:Ａ=εbc，当入射光波长λ及光程ｂ一定时,在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。
只要绘出以吸光度A 为纵坐标,浓度c为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值,即未知样的含量。
同时,还可应用相关的回归分析软件，将数据输入计算机,得到相应的分析结果。
用分光光度法测定试样中的微量铁,可选用显色剂邻二氮菲(又称邻菲罗啉),邻二氮菲分光光度法是化工产品中测定微量铁的通用方法,在pH值为2-9的溶液中,邻二氮菲和二价铁离子结合生成红色配合物：此配合物的lｇK稳＝2１．3，摩尔吸光系数ε510= 1.１×１０4L·mｏl-1·cm-１，而Fe3+能与邻二氮菲生成3∶１配合物,呈淡蓝色,lｇK稳=１4.１。
所以在加入显色剂之前，应用盐酸羟胺（NH２OH·HCl)将Fｅ３+还原为Fe2+，其反应式如下：２Fe3＋+ 2NH2OH·HCl → 2Ｆｅ2+＋N2+ H2O ＋4H++ ２Cl-测定时酸度高,反应进行较慢；酸度太低,则离子易水解。
本实验采用HAc－NａAc缓冲溶液控制溶液pH≈5.0,使显色反应进行完全。
为判断待测溶液中铁元素含量,需首先绘制标准曲线,根据标准曲线中不同浓度铁离子引起的吸光度的变化,对应实测样品引起的吸光度,计算样品中铁离子浓度。
本方法的选择性很高,相当于含铁量4０倍的Sn2＋、Ａl3+、Ｃa2＋、Mｇ２+、Zn2+、SｉO32-；2０倍的Cr3+、Ｍｎ2+、VO3-、PO43-;5倍的Co2＋、Ni2+、Cu２+-等离子不干扰测定。
但Bi3+、Cd2＋、Hｇ２+、Ｚn2+、Aｇ+等离子与邻二氮菲作用生成沉淀干扰测定。
三、实验仪器与试剂:721型分光光度计、酸度计、50ml比色管、吸量管（１mL、2mL、5ｍL、10 mL）、比色皿、洗耳球。
1.１×10-3mol·L-1铁标准溶液、100ug·ml-1铁标准溶液、盐酸、盐酸羟胺、醋酸钠、０.15%邻二氮菲水溶液。
四、实验步骤(一）准备工作打开仪器电源开关,预热，调解仪器。
（二）测量工作(以通过空白溶液的透射光强度为Ｉ0,通过待测液的透射光强度为I,由仪器给出透射比T,再由T值算出吸光度A值）１、吸收曲线的绘制和测量波长的选择用吸量管吸取２．00 mＬ1.0×1０－3mol．L-1标准溶液，注入50 mL比色管中,加入1．００mL 10％盐酸羟胺溶液，摇匀，加入２.00 mL０.15％邻二氮菲溶液，5.0 mＬ NａＡc溶液，以水稀释至刻度。
在光度计上用１ｃm比色皿,采用试剂溶液为参比溶液，在44０－560 nm间，每隔1０ｎm测量一次吸光度，以波长为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制吸收曲线,选择测量的适宜波长。
一般选用最大吸收波长λmax为测定波长。
2、显色剂条件的选择(显色剂用量)在6支比色管中，各加入２.00mL 1．0×１0－3ｍｏｌ·Ｌ－1铁标准溶液和１.00mL 10%盐酸羟胺溶液，摇匀。
分别加入0．1０，０．50,１．00,2.00 ，3.0０及４．0０mL 0．15％邻二氮菲溶液，5．０ｍL ＮａAc溶液，以水稀释至刻度,摇匀。
在光度计上用1cm比色皿,采用试剂溶液为参比溶液,测吸光度。
以邻二氮菲体积为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸光度-试剂用量曲线,从而确定最佳显色剂用量。
3、溶液pH的确定取8支50 mＬ比色管,各加入2mL 1.00×10-3ｍｏl／L－1的标准铁溶液和1 mL １0%的盐酸羟胺溶液,摇匀。
放置2 min，再加入特定体积（2中探究出的最适量)０.15% L邻二氮菲,摇匀，分别加入0.0、０．20、0.50、1．0０、1.50、2．00、3．００ mＬ０.15%的NａAc溶液,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀。
在光度计上，用1cm的比色皿,选择适宜（由“1”所决定的)波长,以蒸馏水为参比,分别测其吸光度。
在坐标纸上以加入的NaAｃ溶液体积数为横坐标,相应的吸光度为纵坐标，绘制A—pＨ曲线，确定测定过程中ｐH范围。
4、显色时间及有色溶液的稳定性用吸量管吸取 2ｍL 1.00×10-3ｍoｌ/Ｌ-1的标准铁溶液于5０ mＬ比色管中,加入 1 ｍL 1０％的盐酸羟胺溶液，摇匀(原则上每加入一种试剂后都要摇匀）。
再加入２ mＬ邻二氮菲溶液，加入特定体积的（3中探究出的)ＮaAc溶液，以水稀释至刻度,摇匀。
在光度计上，用1 mL的比色皿,以蒸馏水为参比溶液,放置，每两分钟测一次，在510nｍ之间测定吸光度。
以时间为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制A-t吸收曲线，选择测量的最适时间。
5、标准曲线的制作在6个５0 mL的容量瓶中，用10 mＬ吸量管分别加入０．０0、０.2０、0.4０、0．６0、0.80、1.０0 mL １00μg·mL-1铁标准溶液，各加入1 ｍＬ10%盐酸羟胺,摇匀（原则上每加入一种试剂都要摇匀)。
再加入2 mL 0.15%的邻二氮菲溶液和特定体积 1mol·Ｌ-1ＮaAc溶液,以蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
放置一段时间(４中探究出的时间)。
以试剂空白为参比，在5１0nm或所波长下,用1ｃm的比色皿,测定各溶液的吸光度。
绘制标准曲线。
6、试液含铁量的测定准确吸取适量试液（如水样或工业盐酸、石灰石样品制备液等）代替标准溶液，其他步骤同上，平行三次测定其吸光度。
记录计算机显示的含铁量，计算试液中铁的含量(以ｍｇ·Ｌ-１表示)。
五、数据处理1、邻二氮菲-Ｆe2+吸收曲线的绘制(1)数据纪录不同波长吸光度波长λ/ｎm440445４50４554６0465４7０4７５480吸光度A0.３４00．3５30.36４０.3７70.3950.4１50．4330.44７0.454波长λ/nｍ48５４90495５00５０5510５１552０525吸光度Ａ0.45７0.4600.4670.4770.4９00．497０.4910．4680.428波长λ／ｎm5３０53５5４054５5５055５5６0吸光度A０.3７40．3100．2４60.１88０．1４０.104０.077（2)作吸收曲线图由图可知,最大吸收波长λｍax＝５１0ｎｍ2、显色剂用量的测定（1)显色剂用量与吸光度的关系邻二氮菲用量曲线:(λ=5１0 nm）邻二氮菲的体积（mｌ）0.１０0.50 1.00 2.00 3.00 4.０0吸光度A0.０4８0．２820.4970.50０0.4910.485据上面数据，作得标准曲线图如下:由图可知，显色剂最佳用量为1.00 mL 0．15%邻二氮菲溶液。
浓度[ug/ｍl]Abｓ０0.0060．20.06０.5０.23110.42１.5０.4０620.4022.50.395据上面数据，作得标准曲线图如下：由图可知,NaAc最佳用量为1.00 mＬ。
t mｉ0369１２15 nＡ0.4800.4770.４78０.4790.４800.4７9结论:放置12分钟后铁离子与邻二氮菲基本完全结合。
2、工业盐酸中铁含量的测定(1)标准曲线的制作Vｍ０．０00.600.8０ 1.001．20 1.40１00ｕg/mLＬA 0.000.２180.28９０.35５0.4300.494测试次数123吸光度A０.482０.４8３０.48３铁的浓度/ug/mL 1.3545 1.3574 1.3５74铁水样浓度的平均值／ug/mL 1.35６4相对偏差０.0９5％０.０5%0.05%六、实验注意事项1、不能颠倒各种试剂的加入顺序。
2、读数据时要注意A和T所对应的数据。
透射比与吸光度的关系为：A=ｌ/I)＝ lｏg(1/Ｔ）;测定条件指：测定波长和参比溶液的选择。
og(Ｉ３、最佳波长选择好后不要再改变。
４、每次测定前要注意调满刻度。
七、思考题1、邻二氮菲分光光度法测定微量铁时为何要加入盐酸羟胺溶液?答:工业盐酸中含有Ｆe２+和Fe３+,其中Fe２+与邻二氮菲(phen)能生成稳定的桔红色配合物[Fe(ｐhｅｎ)3]2+此配合物的ｌgK稳＝21.3,摩尔吸光系数ε５10=1.1×104L·mol-1·cｍ-1,而Fe3＋能与邻二氮菲生成3∶１配合物，呈淡蓝色，ｌgK稳=14.１。
所以在加入显色剂之前，应用盐酸羟胺（NH2OH·HCl)将Fe3+还原为Fe2+，然后，进行铁的总量的测定。
2、参比溶液的作用是什么？在本实验中可否用蒸馏水作参比?答：参比溶液的作用是扣除背景干扰，不能用蒸馏水作参比，因为蒸馏水成分与试液成分相差太远,只有参比和试液成分尽可能相近，测量的误差才会越小。
３、邻二氮菲与铁的显色反应，其主要条件有哪些？答：邻二氮菲与铁的显色反应,其主要条件有:酸度一般（pＨ＝５~6)、温度、邻二氮菲的用量，显色时间等。
八、实验总结通过本实验，学习了确定实验条件的方法，再次熟悉了可见分光光度法的测量原理和实验操作步骤,掌握了邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理以及掌握７21型分光光度计的使用方法。