(完整版)选修一课堂填空大肠杆菌和尿素答案
高中生物选修一知识点填空含答案
专题一传统发酵技术的应用课题1 果酒和果醋的制作1．果酒制作的原理（1）人类利用微生物发酵制作果酒，该过程用到的微生物是，它的代谢类型是，与异化作用有关的方程式有。
生活状态：进行发酵，产生大量。
（2）果酒制作条件传统发酵技术所使用的酵母菌的来源是。
酵母菌生长的最适温度是； PH呈；（3）红色葡萄酒呈现颜色的原因是：酒精发酵过程中，随着的提高，红色葡萄皮的进入发酵液，使葡萄酒呈色。
（4）在、的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其它微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。
2．果醋的制作原理（1）果醋发酵菌种是，新陈代谢类型。
（2）当氧气和糖源充足时醋酸菌将糖分解成，当糖源不足时醋酸菌将变为再变成醋酸，其反应式。
3．操作过程应注意的问题（1）为防止发酵液被污染，发酵瓶要用消毒。
（2）葡萄汁装入发酵瓶时，要留出大约的空间。
（3）制作葡萄酒时将温度严格控制在，时间控制在 d左右，可通过对发酵的情况进行及时的监测。
（4）制葡萄醋的过程中，将温度严格控制在，时间控制在 d，并注意适时在充气。
4．酒精的检验（1）检验试剂：。
（2）反应条件及现象：在条件下，反应呈现。
5.制作果酒、果醋的实验流程挑选葡萄→→→→↓↓果酒果醋P4旁栏思考题1．你认为应该先洗葡萄还是先除去枝梗，为什么？应该先冲洗葡萄，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会。
2．你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染？需要从发酵制作的过程进行全面的考虑，因为操作的每一步都可能混入杂菌。
例如：榨汁机、发酵装置要清洗干净；每次排气时只需拧松瓶盖、不要完全揭开瓶盖等。
3．制作葡萄酒时，为什么要将温度控制在18～250C？制作葡萄醋时，为什么要将温度控制在30～350C？温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。
200C左右最适合酵母菌繁殖，因此需要将温度控制在其最适温度范围内。
而醋酸菌是嗜温菌，最适生长温度为30～350C，因此要将温度控制在30～350C。
高中生物选修1课本答案
`专题 1 课题 1 果酒和果醋的制作一、课题成就评论( 一) 果酒的制作能否成功发酵后取样，经过嗅味和品味进行初步判定。
别的，还可用显微镜察看酵母菌，并用重铬酸钾查验酒精的存在。
假如实验结果不理想，请学生剖析失败原由，而后从头制作。
( 二) 果醋的制作能否成功第一经过察看菌膜的形成、嗅味和品味进行初步判定，再经过检测和比较醋酸发酵前后的pH 作进一步的判定。
别的，还可以够经过在显微镜下察看发酵液中能否有醋酸菌，并统计其数量作进一步判定。
二、答案和提示（一）旁栏思虑题1.你以为应当先冲刷葡萄仍是先除掉枝梗, 为何？答: 应当先冲刷，而后再除掉枝梗，以防止除掉枝梗时惹起葡萄损坏，增添被杂菌污染的时机。
2. 你以为应当从哪些方面防备发酵液被污染?提示 : 需要从发酵制作的过程进行全面的考虑。
比如，榨汁机、发酵装置要冲洗洁净；每次排气时只要拧松瓶盖、不要完整揭开瓶盖等。
3.制葡萄酒时，为何要将温度控制在18～ 25℃？ , 制葡萄醋时，为何要将温度控制在30～ 35℃？ ,答: 温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。
20℃左右最适合酵母菌生殖。
所以需要将温度控制在其最适温度围。
而醋酸菌是嗜温菌，最适生长温度为30～ 35℃，所以要将温度控制在30～ 35℃。
4. 制葡萄醋时，为何要合时经过充气口充气?答: 醋酸菌是好氧菌，在将酒精变成醋酸时需要氧的参加，所以要合时向发酵液中充气。
（二）资料 , 发酵装置的设计议论题请剖析此装置中的充气口、排气口和出料口分别有哪些作用。
为何排气口要经过一个长而曲折的胶管与瓶身连结, 联合果酒、果醋的制作原理，你以为应当如何使用这个发酵装置?答: 充气口是在醋酸发酵时连结充气泵进行充气用的; 排气口是在酒精发酵时用来排出CO2的; 出料口是用来取样的。
排气口要经过一个长而曲折的胶管与瓶身连结，其目的是防备空气中微生物的污染，其作用近似巴斯德的鹅颈瓶。
使用该装置制酒时，应当封闭充气口; 制醋时，应将充气口连结气泵，输入氧气。
高中生物选修一练习(填空)含答案阶段测评2微生物
阶段测评(二)(考试时间90分钟，满分100分)一、选择题(每小题2.5分，共50分)1．将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37 ℃恒温箱的目的是()A．对比观察培养基有没有被微生物利用B．对比分析培养基上是否生有杂菌C．没必要放入未接种的培养基D．为了下次接种时再使用解析：制备好的培养基是经过彻底灭菌的，如果操作过程有失误，在培养基上有杂菌的话，就会影响后面进行的实验结果，所以在进行实验的同时，做一组空白实验，把未接种的培养基一起放入培养箱中，目的就是观察培养基是否污染了杂菌。
答案：B2．在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是()A．分解尿素的细菌B．大肠杆菌C．分解纤维素的细菌D．醋酸菌解析：刚果红染色法是筛选纤维素分解菌的一种方法，它是利用纤维素与刚果红形成一种红色复合物，如果分解纤维素的细菌存在，则会把纤维素分解掉，就会在菌落周围形成没有红色的透明圈，所以利用这种加有纤维素和刚果红的鉴别培养基，就可以把分解纤维素的细菌分离出来。
答案：C3．尿素分解菌能分解尿素是因为可以合成()A．尿素酶B．脲酶C．蛋白酶D．细菌酶解析：土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶，而脲酶可以将尿素进行分解。
答案：B4．在做纤维素分解菌的筛选实验时，选择培养的结果是培养液变()A．清澈B．浑浊C．红色D．产生透明圈解析：在选择培养条件下，使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖使溶液变浑浊。
答案：B5．发酵工程的第一个重要工作是从混杂的微生物群体中选择优良的单一纯种，获得纯种的方法不包括()A．根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基B．根据微生物缺乏生长因子的种类，在培养基中增减不同的生长因子C．利用高温高压消灭不需要的杂菌D．根据微生物对抗生素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗生素解析：A、B、D三种方法都属于选择培养基的使用，都可达到选择出目的菌株的目的，而C项高温处理的时候杀菌是没有选择性的。
高中生物选修一知识点填空总结
【果酒和果醋的制作】一、果酒制作原理1．原理：果酒的制作离不开 ，它属于微生物。
在有氧条件下，可以进行 呼吸，大量繁殖，反应式为：_______________________ ______________；在无氧条件下，进行 (或无氧呼吸)，反应式为：_____________________________。
2．条件：温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，繁殖最适温度为 ，酒精发酵时一般控制在 ℃。
3.菌种来源：⎩⎪⎨⎪⎧自然发酵：附着于葡萄皮上的_____________。
人工培养：分离获得的纯净的酵母菌菌种。
二、果醋制作原理1．原理：果醋制作离不开 ，它是一种 细菌，对氧气含量特别敏感，只有当氧气 时，才能进行旺盛的生理活动。
当氧气、糖源充足时，醋酸菌将葡萄汁中的 分解成 ，其反应式为 ；当缺少糖源时，醋酸菌将 变为乙醛，再将乙醛变为 ，其反应简式为：____ ____。
2．条件：醋酸菌的最适生长温度为 ℃，此外还需要充足的 。
3．菌种来源：可从食醋中分离；到生产食醋的工厂或菌种保藏中心购买。
三、实验设计流程图四、关键操作步骤1．材料的选择与处理：选择新鲜的葡萄，榨汁前先将葡萄进行冲洗，2．防止发酵液被污染：榨汁机要清洗干净，并晾干；发酵装置要清洗干净，并用70%的酒精 ；装入榨好的葡萄汁后， 。
3．控制好发酵条件：将葡萄汁装入发酵瓶，留大约 的空间。
制葡萄酒的过程中，将温度严格控制在 ℃，时间控制在 天左右，可通过 对发酵的情况进行及时的监测。
制葡萄醋的过程中，将温度严格控制在 ℃，时间控制在 天左右，并注意适时通过充气口 。
五、结果分析与评价可通过嗅闻、观察和品尝初步鉴定。
(可能的结果如下)酒精发酵 醋酸发酵 气味和味道 酒味 酸味 气泡和泡沫 有气泡和泡沫无气泡和泡沫 发酵液状态 浑浊浑浊，液面形成白色菌膜六、课题延伸：发酵后是否有酒精产生，可用 来检验。
先在试管中加入2 mL 发酵液，再滴入物质的量浓度为3 mol ·L －1的 3滴，振荡混匀，最后滴加常温下饱和的 溶液3滴，如果有酒精产生，则会观察到的现象是出现 否则为 色。
高中生物选修1基础填空清单(含答案)专题一
选修１《生物技术实践》知识清单1.1果酒和果醋的制作1、果酒制作的菌种是，属于生物，异化作用类型为，有氧呼吸使菌种可，此条件下呼吸作用的反应式为：；无氧时进行发酵，反应式为：。
2、自然发酵过程中，菌种来源于。
葡萄酒呈深红色是因为。
3、果酒果醋制作实验流程：挑选葡萄→→榨汁→发酵→发酵。
4、冲洗葡萄的目是，但不能反复冲洗，以防止。
5、果酒制作时，葡萄汁装入发酵瓶时，要留出大约1/3的空间，其目的是；同时可防止发酵过程中产生的造成发酵液溢出。
6、制作葡萄酒时，将温度控制在℃，时间控制在天左右；制作葡萄醋时，将温度控制在℃，时间控制在天左右。
7、果醋制作菌种是，属于生物，呼吸作用类型为。
8、醋酸菌能利用的碳源有。
当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的分解成；当缺少糖源时，醋酸菌能将变为，再变为，反应简式为；9、你认为应该先冲洗葡萄还是先除去枝梗？为什么？。
10、发酵装置的排气口通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的目的是为了。
11、用来检验是否有酒精产生。
在条件下，重铬酸钾与酒精反应的颜色变化是。
浓硫酸与重铬酸钾是怎样的使用顺序？。
12、果醋制作是否成功可检测发酵前后的作进一步鉴定。
1.2腐乳的制作1、腐乳制作的原理是。
2、腐乳制作的流程是：→→→。
3、传统腐乳制作的菌种来自，传统腐乳生成的豆腐块上的所有生物在生态系统中属于（种群/群落）。
4、现代腐乳生产，必须在条件下将菌种直接接种在上，其优点是。
现代腐乳生成的豆腐块上的所有生物在生态系统中属于（种群/群落）。
5、加盐腌制时，加盐的方法是。
加盐腌制时间为天左右。
6、加盐腌制时，加盐的目的是。
7、加盐腌制时，盐的用量不能过低也不能过高，其原因是。
8、卤汤由和各种配置而成。
其中，酒的作用是；酒精含量控制在12％左右为宜，不能过高也不能过低，其原因是。
香辛料的作用是。
9、腌制腐乳时，为什么要随着豆腐层的加高而增加盐的用量？为什么在接近瓶口的表面要将盐铺厚一些？。
生物选修1·生物技术实践·课本基础知识填空及参考答案(人教版)
《高中生物》课本基础知识通关（选修1）专题1 传统发酵技术的应用课题1 果酒和果醋和制作一、果酒制作1．酵母菌是兼性厌氧微生物。
酵母菌进行有氧呼吸的反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O2 → 6CO2+12H2O；酵母菌进行无氧呼吸的反应式如下：C6H12O6 → 2C2H5OH+2CO2 。
2．20 ℃左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵时一般将温度控制在18～25℃。
二、果醋制作1．醋酸菌是一种好氧细菌。
醋酸生成反应式是C2H5OH+O2 → CH3COOH+H2O。
2．醋酸菌的最适生长温度为30～35 ℃。
3.默写：制作果酒和果醋实验流程示意图挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→醋酸发酵↓↓果酒果醋4.为防止发酵液被污染，发酵瓶要清洗干净，用体积分数为70%的酒精消毒。
5.果汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验。
在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。
课题2 腐乳的制作1．多种微生物参与了豆腐的发酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。
2. 毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。
3．将豆腐块平放在笼屉内，将笼屉中的温度控制在15～18C。
4．现代的腐乳生产是在严格的无菌条件下，将优良毛霉菌种直接接种在豆腐上，这样可以避免其他菌种的污染，保证产品的质量。
5．默写腐乳制作的实验流程示意图让豆腐长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制6．卤汤中的酒可以选用料酒、黄酒、米酒、高粱酒等，含量一般控制在6.12%左右。
课题3 制作泡菜并检测亚硝酸盐含量1．泡菜的制作离不开乳酸菌。
乳酸菌是厌氧细菌。
常见的乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌。
乳酸杆菌常用于生产酸奶。
2．测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玖瑰红色染料。
将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，可以大致估算出亚硝酸盐的含量。
生物选修一 专题二 微生物知识点填空(含答案)
微生物模块一、微生物的实验室：1.培养基(1)概念：人们按照微生物对的不同需求,配制出供其的营养基质。
(2)营养组成：一般都含有和。
此外，还需要满足微生物生长对、氧气以及的要求。
（3）分类培养基(含凝固剂); 培养基(不含凝固剂)（凝固剂是 : 中提取到物质，在下凝固，下熔化）2.无菌技术获得纯净培养物的关键：3.大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基步骤：计算→称量→→→→问题：①.培养基灭菌后，需要冷却到左右时，才能用来倒平板。
你用什么办法来估计培养基的温度？②.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？③.为什么将平板倒置？(2)纯化大肠杆菌的方法①纯化培养原理：想方设法在培养基上得到的肉眼可见的，即可获得较纯的菌种。
②纯化大肠杆菌的关键步骤：，接种时要在旁，原因是。
③常用的微生物接种方法有两种a. 法：是通过在琼脂固体培养基表面的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
b. 法：是将菌液进行一系列的，然后将的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
问题：①在这两种接种方法中，计数时只能选哪种接种方法？②两种接种方法的目的是：问题①.划线时为什么要从上一次划线的末端开始？②.划线时不能划破培养基，如果划破了会怎样？③.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？④.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？(3)菌种的保存方法①对于频繁使用的菌种，可以采用的方法，接种在试管的培养基上，将试管放入保藏②对于需要长期保存的菌种，可以采用的方法。
4.实验室中筛选微生物的原理是。
二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1.实验原理：(1)能合成的细菌才能分解尿素(2)配制以为唯一的培养基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌，还要涂布一个牛肉膏蛋白胨培养基，以此说明。
⑶可以用加了的培养基进行鉴别，培养基变2.实验流程：土壤取样→配制土壤溶液和制备培养基→→涂布平板与培养→菌落计数3.统计菌落数目的方法方法一：（活菌计数法）；至少要涂布个平板，最后求取值，还要设置一个平板作为对照，以说明一般选择菌落数在的平板进行计数。
高中生物选修一知识点填空含答案解析
专题一传统发酵技术的应用课题1 果酒和果醋的制作1．果酒制作的原理（1）人类利用微生物发酵制作果酒，该过程用到的微生物是，它的代谢类型是，与异化作用有关的方程式有。
生活状态：进行发酵，产生大量。
（2）果酒制作条件传统发酵技术所使用的酵母菌的来源是。
酵母菌生长的最适温度是； PH呈；（3）红色葡萄酒呈现颜色的原因是：酒精发酵过程中，随着的提高，红色葡萄皮的进入发酵液，使葡萄酒呈色。
（4）在、的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其它微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。
2．果醋的制作原理（1）果醋发酵菌种是，新陈代谢类型。
（2）当氧气和糖源充足时醋酸菌将糖分解成，当糖源不足时醋酸菌将变为再变成醋酸，其反应式。
3．操作过程应注意的问题（1）为防止发酵液被污染，发酵瓶要用消毒。
（2）葡萄汁装入发酵瓶时，要留出大约的空间。
（3）制作葡萄酒时将温度严格控制在，时间控制在 d左右，可通过对发酵的情况进行及时的监测。
（4）制葡萄醋的过程中，将温度严格控制在，时间控制在 d，并注意适时在充气。
4．酒精的检验（1）检验试剂：。
（2）反应条件及现象：在条件下，反应呈现。
5.制作果酒、果醋的实验流程挑选葡萄→→→→↓↓果酒果醋P4旁栏思考题1．你认为应该先洗葡萄还是先除去枝梗，为什么？应该先冲洗葡萄，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会。
2．你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染？需要从发酵制作的过程进行全面的考虑，因为操作的每一步都可能混入杂菌。
例如：榨汁机、发酵装置要清洗干净；每次排气时只需拧松瓶盖、不要完全揭开瓶盖等。
3．制作葡萄酒时，为什么要将温度控制在18～250C？制作葡萄醋时，为什么要将温度控制在30～350C？温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。
200C左右最适合酵母菌繁殖，因此需要将温度控制在其最适温度范围内。
而醋酸菌是嗜温菌，最适生长温度为30～350C，因此要将温度控制在30～350C。
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选修一课堂默写（1）
班级姓名
实验1 大肠杆菌的培养和分离
1．培养基的配制
（1） LB 培养基是通用的细菌培养基，其中包含水、NaCl、蛋白胨和酵母提取液（如果配制的是固体培养基，还需要加入琼脂）。
（2）培养细菌的培养基中加入一定量NaCl的作用是维持渗透压。
（3）在制备培养基时，还需调节培养基的pH，细菌通常喜欢中性偏碱性的环境，调节pH应该在培养基灭菌之前（填“前”或“后”）。
（4）培养基配置完成后，需转移分装到三角瓶、试管中，为了避免发生污染，三角瓶口、试管口不能沾有培养基，因此，分装时必须用三角漏斗（玻璃漏斗）。
分装完成后，三角瓶口和试管口需要加棉塞，制作棉塞所需的棉花不能用脱脂棉，因为脱脂棉易吸水，吸水后容易引起污染。
如果有条件，可以用__ 封口膜（橡胶塞、塑料盖）代替棉塞。
（4）常见的灭菌方法还有高压蒸汽灭菌法和灼烧灭菌法等三角瓶、培养皿和试管等器皿的灭菌要在121℃（1kg/cm2压力）下灭菌15分钟，这种灭菌方法称为高压蒸汽灭菌法。
（5）制备培养细菌用的空白试管斜面：LB液体培养基配好后，加入琼脂并加热使之融化，在未凝固时，通过三角漏斗（玻璃漏斗）加入试管（15mmX150mm）中，每支试管2 ml。
试管口加棉塞，并将试管捆在一起，上端加盖一张牛皮纸（报纸）纸，灭菌后将试管斜靠在平放的铅笔上，冷却后，固体培养基即成为斜面。
2．大肠杆菌的扩大培养
将接种环在酒精灯火焰上烧红后伸入保存有大肠杆菌的试管斜面，待其冷却后再蘸取大肠杆菌，将其放入三角瓶的液体培养基中，然后将三角瓶用封口膜密封，放到37℃、每分钟200转的摇床上振荡 12小时。
3．大肠杆菌的分离
（1）单菌落的分离是消除污染杂菌的通用方法，也是筛选高表达量菌株的最简便方法之一。
分离细菌的方法主要有划线分离法和涂布分离法。
前者通常使用的工具是接种环，后者通常使用的工具是玻璃刮刀。
其中操作方法较简单的是划线分离法，较容易得到单菌落的是涂布分离法。
如果要统计活细菌的数目，宜采用涂布分离法。
（2）划线分离法：将接种环烧红并冷却后蘸取大肠杆菌菌液，然后在培养皿的固体培养基上连续划线。
完成后盖上盖子，然后将培养皿倒置，在37℃的恒温培养箱中培养12～24小时。
由于在划线过
程中接种环上的菌液逐渐稀释，因此划线最后部分细菌间的距离逐渐加大。
经培养后可看到在划线的末端出现不连续的单菌落，这表明细菌已被分离。
（3）涂布分离法：先将大肠杆菌菌液稀释，然后取0.1 ml稀释度不同的菌液，加到培养皿的固体培养基上。
再将保存在70% 酒精中的玻璃刮刀放在酒精灯火焰上，待玻璃刮刀上的火焰熄灭后，用其将培养皿中的菌液涂布在培养基平面上。
完成后盖上盖子，然后将培养皿倒置，在37℃的恒温培养箱中培养12～24小时，最后可得到相互分开的单菌落，这表明细菌已被分离。
在适当的稀释度下，可培养得到相互分开的菌落，通常以每个培养皿中有 20个以内的单菌落最为适宜。
4．大肠杆菌的保存
在无菌条件下，将大肠杆菌的单菌落用接种环取出，再用划线法接种在试管中的斜面培养基上，37℃培养24小时后，置于4℃的冰箱中保存。
实验2 分离以尿素为氮源的微生物
1．尿素又称脲，是蛋白质降解的产物。
土壤中有一些细菌含有脲酶，它们可以将尿素降解为氨，从而为其生长提供氮源。
在脲酶作用下，尿素分解的化学方程式是：书25页
2．分离以尿素为氮源的微生物所用的培养基中含有水、NaCl、K2HPO4、尿素、葡萄糖、琼脂糖和酚红等，其中酚红作为指示剂，琼脂糖作为凝固剂，选用琼脂糖而不选用琼脂的原因是琼脂中含有一定量的含氮化合物，不利于以尿素为氮源的微生物的筛选。
尿素培养基灭菌时，为防止尿素分解，可将尿素溶液通过 G6玻璃砂漏斗过滤，使其无菌。
该设备使用前需经过高压蒸汽灭菌，使用后需用1mol/L 的盐酸浸泡，并抽滤去酸，再用蒸馏水清洗至洗出液呈中性，干燥后保存。
培养基的其余成分配制好后用高压蒸汽灭菌法灭菌，待冷却至60℃时，加入无菌的尿素溶液，混合均匀后待用。
同时配置好LB固体培养基，灭菌待用。
3．制备土壤细菌悬液：在无菌条件下，将1g土样加入有99 ml无菌水的三角瓶中，振荡10min，即成10-2土壤稀释液。
取上述土壤稀释液0.5ml加入有4.5ml 无菌水的试管中，震荡制成稀释度 10-3为土壤稀释液。
依次法制备10-4和10-5土壤稀释液。
取样时，尽量只取悬液。
4.涂布：取稀释度10-4和10-5土壤稀释液各0.1ml，分别加到有LB 培养基和尿素培养基的培养皿中，再将保存在 70%酒精中的玻璃刮刀放在酒精灯火焰上，待刮刀上的火焰熄灭，在酒精灯旁打开培养皿，将菌液涂布到整个平面上。
5.培养和观察：涂布后，将培养皿倒置，在37℃的恒温培养箱中培养24～48小时。
最终在尿素培养基上出现的菌落数要少于（填“多于”、“等于”或“少于”）LB培养基，而且在尿素培养基上的菌落周围会出现红色环带。
这是因为尿素培养基中的氮源只有尿素，含有脲酶的细菌才能利用尿素存活生长。
它们将培养基中的尿素降解为氨，使酚红变为红色。