发酵工程与设备实验试题答案
发酵工程和设备试验指导书(河科大)
《发酵工程及设备》实验指导书（适用专业：食品科学与工程）2007年9月实验一摇床培养确定酵母菌体培养和营养条件一．实验目的：掌握微生物斜面培养基、种子培养基及发酵培养基确定方法，学会对已确定菌种确定实验室发酵工艺。
二．实验原理生物量的测定方法有比浊法和直接称重法等。
由于酵母在液体深层通气发酵过程中是以均一混浊液的状态存在的，所以可以采用直接比色法进行测定。
三．仪器与试剂1．仪器设备全恒温振荡培养箱，分光光度计、电热恒温水浴槽、天平、电炉。
2．试剂（1）葡萄糖标准溶液：准确称取100 mg分析纯葡萄糖（预先在105℃烘至恒重），置于小烧杯中，用少量蒸馏水溶解后，定量转移到100 ml的容量瓶中，以蒸馏水定容，冰箱中保存备用。
（2）3, 5－二硝基水杨酸试剂（DNS试剂）：甲液：溶解g苯酚于ml 10％氢氧化钠中，并稀释至69 ml，在此溶液中加入g亚硫酸氢钠。
乙液：称取g酒石酸钾钠，加到300 ml 10％氢氧化钠溶液中，再加入880 ml1％的3、5－二硝基水杨酸溶液。
将甲液与乙液相混合即得黄色试剂，贮于棕色试剂瓶中，放置7－10天以后使用。
（3）37％甲醛溶液（4）mol/L氢氧化钠溶液：称取2 g氢氧化钠，溶于水并稀释至1000 ml。
四．实验方法（1）培养基的配制(见表1,2)表1 正交表试验设计因素水平葡萄糖蔗糖酵母膏KH2PO4123表2 正交表实验方案编号葡萄糖(A) 蔗糖(B)酵母膏(C)KH2PO4（D）生物量（OD）0h 12h 24h 36h 48h 60h1 (1) (1) (1) (1)2 (1) (2) (2) (2)3 (1) (3) (3) (3)4 (2) (1) (2) (3)5 (2) (2) (3) (1)6 (2) (3) (1) (2)7 (3) (1) (3) (2)8 (3) (2) (1) (3)30 min，冷却。
（3）冷却后接种（接种量为5％），置于28℃培养箱进行培养。
微生物发酵技术试题库(附答案)
微生物发酵技术试题库（附答案）一、单选题（共40题，每题1分，共40分）1、采用较（）的接种量，可以缩短菌种在发酵罐的迟缓期，使产物合成期提前到来。
A、大B、小正确答案：A2、固体培养基灭菌时，热的传递方式为（）A、传导B、对流C、热交换D、辐射正确答案：A3、磷量对谷氨酸发酵影响很大。
磷浓度过高时，菌体的代谢转向合成（）A、缬氨酸B、α-酮戊二酸C、乳酸D、谷氨酰胺正确答案：A4、（）空气除菌流程能充分地分离油水、提高冷却器的传热系数，节约冷却水，适用于各种气候条件，尤其适宜于潮湿的地区。
A、高效前置空气过滤除菌流程B、将空气冷却至露点以上的空气除菌流程C、冷热空气直接混合式空气除菌流程D、两级冷却、分离、加热的空气除菌流程正确答案：D5、单位质量干细胞在单位时间内消耗氧的量称为（）A、摄氧率B、好氧速率C、最大比耗氧速率D、呼吸强度正确答案：D6、工业发酵中为了获得易于提纯的代谢产物，菌体尚未达到（）即行放罐处理。
A、停滞期B、稳定期C、衰亡期D、对数期正确答案：C7、肉汤培养基由红色变为（）色，即判断为染菌。
A、粉B、蓝C、绿D、黄正确答案：D8、Met、Leu、Phe和Ala代表：（）A、蛋氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸和丙氨酸B、蛋氨酸、亮氨酸、丙氨酸和苯丙氨酸C、亮氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸和丙氨酸D、精氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸和丙氨酸正确答案：A9、谷氨酸发酵最怕（）污染，难以防治，容易造成连续污染。
A、芽孢杆菌B、细短产气杆菌C、青霉菌D、噬菌体正确答案：D10、自然界的氨基酸大都是（）型。
A、L型B、D型C、L型和D型D、不确定正确答案：A11、关于微生物检定抗生素效价，下列说法错误的是（）A、误差大B、操作步骤多C、可以测定新发现抗生素的效价D、测定时间短正确答案：D12、青霉素的作用机制为（）A、抑制或干扰细胞壁合成B、抑制或干扰细胞膜功能C、抑制或干扰DNA、RNAD、抑制或干扰蛋白质合成正确答案：A13、在发酵工程中产生的单细胞蛋白是指（）A、从微生物细胞内提取的蛋白质B、微生物的菌体本身C、微生物所分泌的蛋白质D、微生物产生的代谢产物正确答案：B14、下列物质属于生长因子的是（）A、葡萄糖B、蛋白胨C、NaClD、维生素正确答案：D15、固体发酵与液体发酵相比，无菌程度通常要求（）A、低B、高C、相同D、都可以正确答案：A16、将大肠杆菌的质粒取出，连接上人生长激素的基因后重新置于大肠杆菌细胞内，用这种带有人生长激素基因的大肠杆菌进行发酵，该处理过程在发酵中属于（）A、扩大培养B、诱变育种C、菌种选育D、接种正确答案：C17、利用酵母菌发酵生产酒精时，投放的适宜原料和在产生酒精阶段要控制的必要条件分别是（）A、玉米粉和无氧B、大豆粉和无氧C、玉米粉和有氧D、大豆粉和有氧正确答案：A18、谷氨酸发酵结束后，常用哪种方法进行提取（）。
大学课程《发酵工程设备》专业期末试题A卷及答案
《发酵工程设备》课程补考试卷（A）一、选择题: (每题1分，共5分)1、无菌空气在机械搅拌发酵罐生产中的主要作用是______。
A.给培养微生物提供氧气，并可促进菌体在培养基中不断混合B.主要起搅拌作用C.打碎泡沫，防止逃液D.防止产生涡流2、罐式连续蒸煮糖化设备中，为了使真空冷却器达到一定的真空度，除了________之外都可以选用。
A.真空泵B.蒸汽喷射泵C.水力喷射泵D.高压水泵3、空气过滤系统中旋风分离器的作用是______________。
A.分离油雾和水滴B.分离全部杂菌C.分离二氧化碳D.分离部分杂菌4、目前啤酒厂的圆筒锥底发酵罐内采用______________。
A.圆盘平直叶涡轮搅拌器B.螺旋浆式搅拌器C.无搅拌器D.锚式搅拌器5、管道式光培养反应器最适合______________细胞培养。
A.酵母菌B.长春花细胞C.Hela细胞D.海藻细胞。
二、判断题（对的打“√”，错的打“×”每题1分，共5分）1、辊式粉碎机主要利用冲击力将物料粉碎。
2、空气过滤系统中空气加热器的作用是杀灭杂菌。
3、生产操作过程中，始终要保持发酵罐内的罐压为正压。
4、弱碱性阳离子交换树脂交换能力不受溶液pH的影响。
5、立式结晶锅多采用螺旋式搅拌器。
三、填空题（共14空，每空1分，共14分）1、自吸式发酵罐的搅拌轴是从罐下方进罐的,因此应该用________轴封。
2、动物细胞培养时，悬浮培养适用于型动物细胞，贴壁培养适用于贴壁依赖型细胞。
除此之外还有一种培养对两类细胞都适用。
3、啤酒厂生产麦芽汁多采用四器组合，四器为、、和。
4、空气过滤除菌中常用的介质材料有__________ __ 、_____________、________________等。
5、啤酒发酵罐中发酵液的对流主要是依靠其中的作用,另外冷却操作时啤酒的变化也会引起罐的内容物的对流循环。
6、转鼓直径小，转速高,一般为15000r/min,分离因数大,可达50000,因此分离强度高,可用于液-液分离和微粒较小的悬浮液的澄清。
发酵工程期末试卷A卷答案
、选择题（共10小题，每题2分，共计20 分）1.下列关于发酵工程的说法，错误的是（C ）A发酵工程产品主要是指微生物的代谢产物、酶和菌体本身B可以通过人工诱变选育新菌株C培养基、发酵设备和菌种必须经过严格的灭菌D环境条件的变化既影响菌种的生长繁殖又影响菌体代谢产物的形成2.当培养基pH发生变化时，应该（C ）A加酸 B 加碱C 加缓冲液 D 加无机盐3.甘油生物合成主要由下列哪种物质引起（D ）A尿素 B 硫酸铵 C 酶 D 亚硫酸盐4.对谷氨酸发酵的叙述正确的是（D ）A菌体是异养厌氧型微生物 B 生物素对谷氨酸生成无影响C谷氨酸的形成与搅拌速度无关D产物可用离子交换法提取5.为使淀粉和纤维素进行代谢而提供能量，（B ）A它们必须第一步变成脂肪分子 B 它们的葡萄糖单位必须被释放C环境中必须有游离氧存在 D 遗传密码必须起促进作用6.关于微生物代谢产物的说法中不正确的是（D ）A初级代谢产物是微生物生长和繁殖所必须的B次级代谢产物并非是微生物生长和繁殖所必须的C初级代谢产物在代谢调节下产生D次级代谢产物的合成无需代谢调节7.在发酵中有关氧的利用正确的是（B ）A微生物可直接利用空气中的氧B微生物只能利用发酵液中溶解氧C温度升高，发酵液中溶解氧增多D机械搅拌与溶氧浓度无关8.某药厂用谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸，结果代谢产物没有谷氨酸而产生乳酸及琥珀酸，其原因可能是（B ）A温度控制不适B 通气量过多 C pH呈酸性D溶氧不足9.下列可用于生产谷氨酸的菌种是（C ）A谷氨酸棒状杆菌、金黄色葡萄球菌B链球菌、大肠杆菌C谷氨酸棒状杆菌，黄色短杆菌D大肠杆菌、乳酸菌10.酵母菌培养液中常含有一定浓度的葡萄糖，但当葡萄糖浓度过高时，反而会抑制微生物的生长，原因是（B ）A •碳源供应太充足B •细胞会发生质壁分离C •改变了酵母菌的pH值D •葡萄糖不是酵母菌的原料二、判断正误（共15小题，每题1分，共计15分）1、在微生物杀虫剂中，引用最广泛的是苏云金芽抱杆菌，他用来毒杀鳞翅目和双翅目的害虫。
发酵工程与设备
一、名词解释
VVM；Yx/s；qs ；YP/S ；μ；KL；kLa；kd；D；Dcrit；Ks；Km；YP/X；μmax；qCO2；qO2；td；YATP；补料分批发酵；临界氧浓度；呼吸商； 过滤效虑；雷诺准数；比热死速率常数（K）；活塞流反应器（PF）；连续式全混流型反应器（CFSTR）；返混；连续培养；高密度培养；补料培养；生产强度；固定化酶；固定化细胞；传氧效率
具有抗性？
三、计算题
1、在一定培养条件下，培养大肠杆菌，测定实验数据如下：
S（mg/L） 100 120 153 170 220
μ（h-1） 0.667 0.706 0.754 0.773 0.815
求(1)在该培养条件下，大肠杆菌的最大比生长速率μMAX,饱和常数KS
(2)比生长速率为μMAX时的倍增时间τd。
23、 用于在线检测的传感器必须符合哪些要求？
24、 pH电极的指示电极能测定pH值的原理是什么？
25、 pH电极的测量范围有没有限制？使用时应注意哪些问题？
26、 溶氧电极能够测定液体中溶氧浓度的原理是什么？ 影响溶氧电极测定的灵敏度和准确
性的因素有哪些？
27、高密度培养的意义是什么？难以实施的原因是什么？
拌发酵罐的供氧水平？
14、测定Kla的方法有哪些？发酵液中Kla的调节可以采取哪些措施？
15、 氧的供需研究与反应器设计与放大的关系？
16、 准确判断发酵终点有什么好处？依据哪些参数来判断？
17、 pH对发酵的影响表现在哪些方面？ 发酵过程的pH控制可以采取哪些措施？
18、 发酵过程温度的选择有什么依据？
表3
6、室温下蔗糖在蔗糖酶的催化作用下水解得到产物。蔗糖的初始浓度Cs0＝1.0mm0l/L，酶的初始浓度C E0＝0.01lmmol/L。现在一间歇式操作的实验反应器测得了不同时间下蔗糖的浓度(见表4)，根据实验提供的数据确定，(1)该反应速率能否用M—M方程描述?(2)如可以，试求动力学参数Km和k+2的值。
机考06708发酵工程与设备复习题
发酵工程与设备复习题1.常用的诱变剂包括物理、化学和生物三大类。
2.杂交育种同诱变育种相比，具有更强的方向性和目的性。
3.细菌的杂交可以通过细菌接合、F因子转移、转化和转导等方式促使基因重组。
4.反馈调节系统主要包括反馈抑制和反馈阻遏。
5.菌种保藏的基本原理是根据微生物的生理生化特性，人为地创造条件，使微生物处于代谢不活跃、生长繁殖受到抑制的休眠状态，以减少菌种的变异。
5.配制培养基常用的碳源有糖类、油脂、有机酸、低碳醇等。
6.工业生产上所用的微生物都能利用无机氮源或有机氮源。
其功能是构成菌体成分，作为酶的组成成分或维持酶的活性，调节渗透压、pH、氧化还原电位等。
7.糖用做碳源时最好单独灭菌，因为糖易与氨离子和氨基酸反应生成黑色含氮化合物，会抑制许多微生物的生长。
8.有机氮源除了作为菌体生长繁殖的营养外，有的还是产物的前体。
9.磷是核酸和蛋白质的必要成分，也是重要的能量传递者三磷酸腺苷的成分。
10.碳源的代谢速率会影响生物量的生成或初级产物或次级产物的代谢。
11.无机盐及微量元素一般在低浓度时对微生物生长和产物合成有促进作用，在高浓度时表现出明显的抑制作用。
12.在生产中为了减少毒性和增加前体的利用率，前体的添加常采用少量多次的流加工艺。
13.许多消泡剂是表面活性剂并降低传氧速率。
14.泡沫的形成最主要的原因是培养基中的蛋白质在气液界面处变性并形成一层不易破裂的薄膜。
15.泡沫会导致培养基中的细胞逃逸进而自溶，释放出胞内蛋白，进一步增加泡沫的稳定性。
16.发酵培养基不仅要满足微生物生长对营养物质的需求，而且还要能够满足最大量合成产物的需要。
17.种子培养基主要可分为液体培养基和产孢培养基，其糖分要少，氮源物质要相对多些。
18．种子培养基和发酵培养基相近，可以使微生物进入发酵过程的适应期缩短，减少延迟期而缩短发酵时间。
19.设计培养基配比时，培养基的成分必须能满足形成细胞生物量和代谢产物的基本要求。
联大-发酵工程设备试卷A1及答案
《发酵工程设备》课程考试试卷（A ）一、单项选择题: (每题1分，共10分)1、典型的细菌生长曲线中指数生长期和减数生长期比生长速率为 。
A.max μ,S K S S +maxμ B.max 2ln μ,max μ C. max μ max μ/2 D.max μ/2, SK SS +max μ 2、在细胞活动热释放过程中，基质氧化态越 ，耗氧量越 ，热释放越 。
A.高，少，多 B.低，少，少 C.高，少，少 D.低，少，多 3、机械搅拌发酵罐内以下装置不具有防止液面中央形成漩涡流动，增强湍动和溶氧传质作用的是 。
A 树立的列管 B.挡板 C. 树立的蛇管 D.涡轮式搅拌器 4、以下可以用于杂交瘤细胞培养（生产单克隆抗体）的生物反应器有 。
①笼式通气搅拌器②气升式细胞培养反应器③中空纤维细胞培养反应器④大载体细胞培养反应器A. ①、②B. ③、④C. ①、③、④D. ①、②、③、④ 5、罐式连续蒸煮糖化设备中，为了使真空冷却器达到一定的真空度，除了________之外都可以选用。
A.真空泵B.蒸汽喷射泵C.水力喷射泵D.高压水泵 6、动物细胞培养的操作方式中，哪一种细胞不是始终留在反应器中？ A.流加式操作 B.分批式操作 C.连续操作 D.灌注培养 7、对黏度较高的液体的蒸发浓缩最好应采用 。
A.管式升膜蒸发器B.套筒式升膜蒸发器C.套管式升膜蒸发器D. 降膜蒸发器8、管道式光培养反应器最适合以下哪类细胞培养？ 。
A.酵母菌 B.长春花细胞 C.Hela 细胞 D.海藻细胞。
9、以下设备需要装设搅拌器的是 。
A.喷射自吸式发酵罐B. 酒精发酵罐C.流化床生物反应器D.啤酒多罐式连续发酵设备10、从多个地方向较远处运送玉米采用哪种气流输送方式最好？ 。
A.吸引式 B.压送式 C. 真空、压力输送 D.螺旋输送二、 判断题（对的打“√” ，错的打“×”每题1分，共10分）1、气升环流式发酵罐的高径比一般为1.7～3.5。
发酵工程
发酵工程[填空题]1什么是微生物的生物转化发酵？参考答案：是指利用微生物细胞的一种或多种酶，作用于一些化合物的特定部位（基因），使其转变成结构相类似但经济价值更大的化合物的生化反应。
[填空题]2什么是发酵工程？参考答案：利用微生物生长速度快、生长条件简单以及代谢过程特殊等特点,在合适条件下通过现代化工程技术手段,由微生物的某种特定功能生产出人类需要的产品。
[填空题]3生物反应过程由（）、（）、（）、（）四个部分组成。
参考答案：原材料预处理；生物催化剂的制备；生物反应器及反应条件的选择；产物的分离纯化[填空题]4简述微生物工程的特点。
参考答案： 1、严格的无菌生长环境：包括发酵开始前采用高温高压对发酵原料和发酵罐以及各种连接管道进行灭菌的技术；在发酵过程中不断向发酵罐中通入干燥无菌空气的空气过滤技术；2、在发酵过程中根据细胞生长要求控制加料速度的计算机控制技术；3、种子培养和生产培养的不同的工艺技术。
4、在进行任何大规模工业发酵前，必须在实验室规模的小发酵罐进行大量的实验，得到产物形成的动力学模型，并根据这个模型设计中试的发酵要求，最后从中试数据再设计更大规模生产的动力学模型。
5、由于生物反应的复杂性，在从实验室到中试，从中试到大规模生产过程中会出现许多问题，这就是发酵工程工艺放大问题。
[填空题]5微生物工程与化学工程相比，微生物反应过程具有哪些化学工程优点？参考答案：（1）作为生物化学反应，通常是在常温、常压下进行的；其能耗低、选择性好、效率高，无爆炸危险，无需考虑防爆问题。
同时还有可能是一种设备具有多种用途。
（2）主要以可再生资源作原料，原料通常以糖蜜，淀粉等碳水化合物为主，加入少量有机即或无机氮源，只要不含毒物，一般无精制必要，微生物本身能有选择地摄取所需物质。
（3）反应是以生命体的自动调节方式进行，因此数十个反应过程能象单一反应一样，在单一设备（发酵罐）内很容易进行。
（4）能容易生产复杂的高分子化合物，酶类的生产和光学活性体的有选择性生产等，是发酵工业最有特色的领域。
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发酵工程与设备实验
1.决定摇瓶溶氧量的因素有哪些？它们如何影响摇瓶溶氧量？答：⑴摇瓶的透气性：8层纱布，纱布透气性越好，摇瓶溶氧量越大。
⑵摇瓶的转速：转速越大，培养基流动越剧烈，增大与气体接触面积。
⑶培养基的粘稠度：粘稠度越大，氧气越难进入，溶氧量越低。
2.采用磷钼蓝法测定发酵液中的植酸酶活性实验中，空白对照中并未发生酶和底物的水解反应，但经过显示后，颜色却呈较深的蓝色，试解释其原因。
答：①磷钼蓝受热，易被氧化成蓝色还原物。
②植酸钠中含杂质磷太多。
3.红曲米发酵实验中，为何要添加酸水？无菌酸水如何制得？答：是为了洗脱菌种，同时为红曲霉生长创造酸性环境。
制备：取一烧杯的蒸馏水，往水中加入乳酸并调PH至4.0.然后取10ml配制好的溶液于干净的试管中，密封包扎后，放入高压灭菌锅灭菌，即可得到无菌酸水。
4.产植酸酶黑曲霉的分离实验中，为何选用植酸钙而不选用植酸钠？
答：钠盐易溶解、钙盐难容，易形成透明圈，从而筛选。
5.产植酸酶黑曲霉的分离实验中，为什么不将脱氧胆酸钠溶液
和氯霉素眼药水加入到筛选培养基中一起灭菌？
答：①脱氧胆酸钠会与铁盐高温时反应。
②细菌性抗生素、自身就是杀菌的，且本身无菌，也不能灭菌。
6.请详细说明产植酸酶黑曲霉的分离实验的实验原理。
答：以植酸钙为唯一磷来源的选择培养基，同时以透明圈法，从土壤中分离筛选产植酸酶的黑曲霉
7.产植酸酶黑曲霉的摇瓶发酵实验中，摇瓶的作用有哪些？答：①气体和营养分布均匀②温度保持恒定③代谢产物分散④避免影响其他菌丝生长⑤防止细胞沉淀
8.植酸酶酶活力测定实验中，若显色后的反应体系测定吸光度值为2.23，说明什么问题？该如何调整实验方案？
答：浓度过大，该稀释。
9.植酸酶活力测定时做标线的目的是什么？
答：标线是反应吸光度与无机磷浓度之间的关系，待我们测的样品吸光度后即可在标线上读出对应无机磷浓度，从而进行酶活计算。
10.简述灭菌锅的使用方法及步骤。
答：①向锅内注入水至三脚架上边缘、预热。
②放入物品，将直排气管并放入排气槽。
③关盖，拧紧对应螺栓，打开开关加热
④待压力达到0.05MPa，排冷空气，归零。
⑤使温度在121～126℃，20～30min，打开排气阀，自然归零，开盖，取出物品存用。
11.试述试管棉塞的详细制作步骤。
答：①剪方形纱布②取方形棉花③对折棉花④紧卷棉花⑤纱布包紧⑥塞入试管并整理⑦扎线⑧去残角
12.试述锥形瓶棉塞的详细制作步骤。
答：①取适量棉花②对折③紧卷④取适当大小方形纱布⑤包紧⑥塞入锥形瓶并整理⑦将纱布对角，残角塞入纱布内
13.试述发酵瓶棉塞的详细制作步骤。
答：取8层纱布（取一张对折三次）→塞在瓶口内→整理纱布，使纱布与瓶壁接触处无折痕即可
14.试述平板菌落接种试管斜面的详细步骤。
答：工具、手、试管斜面、平板、工作台等消毒→点燃酒精灯，再消毒手，在酒精灯附近打开平板和试管塞→用接种环在平板上取一环菌丝接种到斜面上，盖上平板，塞上试管塞
15.试述摇瓶种子接种发酵瓶的详细步骤。
答：工具、手、试管斜面、平板、工作台等消毒→点燃酒精灯，再消毒手，在酒精灯附近打开瓶塞→用移液管从种子瓶量取适量菌液接种到发酵瓶中→盖上瓶盖
16.试述红曲斜面孢子种接至三角瓶的详细步骤。
答：工具、手、试管斜面、平板、工作台等消毒→点燃酒精灯，
再消毒手，在酒精灯附近打开无菌水试管塞和斜面试管塞→把无菌水加入斜面中，盖上塞子，震荡→在酒精灯旁打开药瓶塞和斜面塞→用移液管从斜面上吸取适量孢子液，注入摇瓶中→盖上塞子
17.植酸酶酶活力测定实验中，样品管与空白管的加样顺序有何不同？为什么不同？
答：TCA和植酸钠顺序相反。
①保证加样相同②避免空白管中酶液与底物反应。
18.植酸酶酶活力测定实验中，Vc、植酸钠和TCA的作用各是什么？
答：Vc：强还原剂，显色液成分之一。
植酸钠：酶反应的底物。
TCA：酶失活剂
19.所培养的平板有没有可能得不到菌落？试分析得不到菌落的原因及措施。
答：有可能。
①样品富集②取稀释倍数低的稀释液③人为原因引起的可重新培养平板
20.产植酸酶黑曲霉的分离实验中，平板中为什么要加入1%脱氧胆酸钠溶液？
答：抑制真菌菌落菌丝生长速度，防止连成一片，有利得到单菌落。
21.产植酸酶黑曲霉的分离实验中，氯霉素注射液或氯霉素眼药
水为何不需要灭菌，加入有何作用？
答：细菌性抗生素、自身就是杀菌的，且本身无菌，也不能灭菌。
作用：抑制杂菌生长
22.产植酸酶黑曲霉的分离实验中，经过一次分离的菌种是否为纯种？若不纯，应采用那种分离方法最合适？
答：多半不是，进行多次纯化，不断进行分离，可采用划线培养。
23.简述黑曲霉纯种培养操作过程中的关键无菌操作技术。
答：①操作在酒精灯附近②灼烧接种环，靠壁冷却③管口对准酒精灯和接种环④灼烧试管口⑤动作要迅速
24.试举例说明摇瓶培养技术的应用。
答：摇瓶培养Cc168鸡腿菌，周期短，产量高，成本低，污染少。
25.红曲米固态发酵中，为什么每天要将三角瓶摇动2～3次？答：①充分混匀菌体，充分发酵②温度，不致局部过热影响发酵
③放出底部CO₂，使O₂充分接触
26.酸奶制做实验中，如何判断主发酵是否完成？
答：通过乳酸菌发酵牛奶的乳糖产生乳酸，乳酸使牛奶中的酪蛋白（占乳蛋白85%）变性凝固而使整个奶液呈凝乳状态。
同时，可形成酸奶特有的香味和风味。
27.酸奶制作的基本原理是什么？
答：①凝固②PH检测
28.常用的酸奶发酵菌种有哪些？（写3~5种）
答：①保加利亚乳杆菌②嗜热链球菌③双歧乳杆菌④嗜酸乳杆菌29.植酸酶酶活力测定实验中，空白管和样品管的加样顺序有何不同？为什么？
答：TCA和植酸钠顺序相反。
①保证加样相同②避免空白管中酶液与底物反应。
30.酿制糯米甜酒的酒药中主要含何种微生物？糯米甜酒的发酵原理是什么？
答：根霉。
米饭（淀粉）→上面是淀粉酶，下面根霉。
可发酵性糖→上面酒化，下面根霉/酵母。
酒→上面后熟。
香酒
31.为什么糯米饭要降温至35℃以下拌酒曲？为什么糯米饭一开始发酵时要挖个洞？后来为什么又要填平？
答：温度一般为菌种生长的速度，依菌种而定。
挖洞：①充分与O₂接触②观察4/5时转入发酵，发酵为压氧，故填平。
32.为什么刚酿制的甜酒往往略带酸味？经低温存放后则酸味消失，香味更浓郁，试解释其中原因。
答：微生物自身代谢产生有机酸。
后熟原理：有机酸与生成的乙醇酯化反应成脂类物质，具有香味
33.红曲米色价测定实验中，萃取后的米粒中仍带有红色，是否
对结果产生影响？为什么？
答：无影响。
浸泡一定时间，会达到一个平衡点，带有红色是正常的，色价定义是1克样品60℃水浴2h后的醇溶性色素在505nm处的吸光度值。