专题二课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数和3分解纤维素的微生物的分离的导学与答案
高中生物专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课件新人教版选修12
ⅱ方法：利用选择培养基分离。
a．选择培养基：允许_特__定__种_类__的微生物生长，同时 _阻_止__或__抑__制__其他种类微生物生长的培养基。
b．实例：选择分解尿素的细菌的培养基，以_尿__素_作为唯一氮 源，只有能合成_脲__酶_的微生物才能分解尿素。
项目 原理
25
直接计数法
间接计数法
利用特定细菌计数 板或血细胞计数 板，在显微镜下计 算一定容积的样品 中微生物的数量
当样品的稀释度足够高时，培 养基表面生长的一个菌落，来 源于样品稀释液中的一个活 菌。通过统计平板上的菌落 数，就能推测出样品中大约含 有多少活菌
26
显微镜、细菌计数
主要用具
培养基
22
[归纳总结] 1．选择培养基的选择作用 (1)原理：根据不同微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理
因素的抗性不同而制备培养基。 (2)方法： ①在培养基中加入某种化学物质。例如，加入青霉素可以分离
出酵母菌和霉菌；加入高浓度的食盐可以得到金黄色葡萄球菌。
23
②改变培养基中的营养成分。例如，缺乏氮源时可以分离固氮 微生物；石油作为唯一碳源时，可以分离出能消除石油污染的微生 物；用含无机碳源的培养基分离自养型微生物。
(2)①培养基被污染，一些菌落是由杂菌繁殖而成的；②接种过 程中由于操作不当感染了杂菌；③取菌液时没有摇晃，所取菌液中 细菌个体浓度偏大等。
36
1．分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是( ) ①加尿素 ②不加尿素 ③加琼脂 ④不加琼脂 ⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖 ⑦加硝酸盐 ⑧不加硝酸盐 A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧ C．①③⑤⑧ D．①④⑥⑦ C [要分离土壤中分解尿素的细菌，培养基中尿素应是唯一的 氮源，不能加硝酸盐；在固体培养基上形成菌落，要加琼脂作凝固 剂；分解尿素的细菌是异养生物，要加有机碳源(如葡萄糖)。]
专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
➢实验目的 从土壤中分离分解尿素的细菌并计数
培养基中以尿素为唯一氮源，只有能合成脲酶的微生
➢实验原理 物才能分解尿素，缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿
素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所 以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。
➢实验材料 小铁铲、培养皿、试管、移液管、锥形瓶等
（二）制备培养基 实验组：制备选择培养基 （尿素为唯一氮源的培养基）
筛选出能够分解尿 素的细菌
对照组：制备完全培养基 （牛肉膏蛋白胨培养基）
与选择培养基做对照， 检测选择培养基是否具 有选择作用
➢实验步骤——【3】样品稀释与涂布
判断选择培养基是否 具有筛选作用
选择培养基 完全培养基
➢实验步骤——【3】样品稀释与涂布
（3）测真菌数：一般用102、103、104稀释液
第一次做该实验时，可以将稀释的范围放宽一点，如可 以将103 ~ 107分别涂布到平板上培养。保证获得菌落数 在30～300之间、适于计数的平板
➢4】微生物的培养与观察
培养不同微生物往往需要不同培养温度。 细菌：30～37℃培养1～2d 放线菌：25～28℃培养5～7d 霉菌：25～28℃的温度下培养3～4d。
➢实验步骤 实验结果
实验流程：
土壤取样 制备培养基 样品稀释涂布平板 微生物的培养与观察
菌落计数
（一）土壤取样 从富含有机物、潮湿、酸碱度适中的土壤中取样。铲 去表层土3cm左右，取样，将样品装入事先准备好的
信封中。 铁铲和信封都要灭菌
“微生物的天然培养基”
数量最大、种类最多
大约70%—90%是细菌 细菌适宜在富含有机质，酸碱度接近中性的潮湿土壤 中生长，绝大多数分布在约3~8cm的土壤层。
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课题背景尿素[CO（NH2）2]是一种重要的农业氮肥。
但是，尿素并不能直接被农作物吸收。
只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。
土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶。
尿素最初是从人的尿液中发现的。
当时，人们普遍相信有机物只能由有生命活力的生物产生，而无法通过化学方法合成。
但是，1828年，德国化学家维勒（F. WÖhler）成功地通过无机物的化学反应合成了尿素，揭开了历史上人工合成有机物的新篇章。
此后，尿素的生产走向了工业化，尿素也逐步成为农业生产中重要的氮肥。
本课题以土壤中能分解尿素的细菌为研究对象，要达到两个主要目的：（1）从土壤中分离出能够分解尿素的细菌；（2）统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌。
研究思路（一）筛选菌株DNA多聚酶链式反应（PCR）是一种在体外将少量DNA大量复制的技术（参见专题5课题2）。
此项技术的自动化，要求使用耐高温的DNA聚合酶。
这种酶要能忍受93℃左右的高温。
如果请你来寻找这种耐高温的酶，你会去哪里寻找？科学家是从水生耐热细菌Taq（Thermus aquaticus）中分离到耐高温的Taq DNA聚合酶的。
Taq细菌是美国微生物学家布鲁克（T. Brock）于1966年在美国黄石国家公园的一个热泉（图2-6）中发现的。
这说明，在寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。
为什么Taq细菌能从热泉中被筛选出来呢？这是因为热泉70～80 ℃的高温条件淘汰了绝大多数微生物，而使耐热的Taq细菌脱颖而出。
实验室中微生物的筛选，也应用了同样的原理，即人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。
请你根据这一思路，分析旁栏中本课题将用到的培养基配方，回答下面的问题。
1.在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？2.绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。
专题2,课题二,土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、课题背景1、尿素的利用：p21上//为止。
2、细菌能利用尿素的原因土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶CO(NH2)2+H2O 脲酶CO2+2NH33、常见的分解尿素的微生物芽孢杆菌，小球菌，加单胞杆菌，克氏杆菌，棒状杆菌，梭状芽孢杆菌，某些真菌和放线菌也能分解尿素。
4、课题目的：从土壤中分离出能够分解尿素的细菌；统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌。
二、研究思路：筛选菌株——统计菌落数——设置对照（一）筛选菌株1、实例一：PCR技术。
P21第一段//为止。
原因：热泉温度70-80°C，淘汰了绝大多数微生物，只有Taq细菌被筛选出来。
启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求到相应的环境中去寻找。
2、实验室中微生物的筛选原理：P21下-p20上要分离一种微生物，必须根据微生物的特点，包括营养，生理，生长条件等。
方法：抑制大多数微生物的生长促进目的菌株的生长结果：培养一定时间后，该菌数量上升，再通过平板稀释等方法，对它进行纯化培养分离。
3、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基：p22上（1）从物理性质看此培养基属于：固体培养基（2）在此培养基中：碳源——葡萄糖。
氮源——尿素4、培养基选择分解尿素的微生物原理培养基的氮源为尿素，只能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素为氮源。
缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖而受到抑制，所以用此培养基就能够选择分解尿素的微生物。
分离原理：土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到催化作用。
5、选择培养基：P22上6、怎样证明此培养基具有选择性（二）统计菌落数1、间接计数法：（1）原理：在稀释度足够高时，微生物在固体培养基上，所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的，即一个菌落代表原先一个细胞。
（2）统计菌落数目一般用稀释涂布平板法。
专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(第2课时)
专题2 微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（高二生物）第2课时土壤中分解尿素的细菌分离的实验设计【学习目标】1 学生预习教材P23 “实验设计”，能够整理归纳出实验设计包括的内容，对实验有基本的认识了解，能建立实验设计的流程。
2 学生预习教材P23“资料一土壤取样”的内容，能整理归纳土壤取样要求及操作3学生预习教材P24 “资料二样品的稀释”的内容，能整理归纳样品稀释要求及操作4课堂上通过观看视频，通过教师提示，学生合作探究，学生能够掌握微生物的培养与观察，并能解决操作过程中各种问题5课堂上通过教师提示，学生合作探究，学生能够正确设置实验对照和重复组重点对土样的选取微生物观察与培养难点对分解尿素的细菌的计数【课前预习】一土壤中分解尿素的细菌的分离与计数阅读教材P23 “实验设计”，能够整理归纳出实验设计包括的内容，1实验流程2实验设计包括的内容有：、、和，具体的实验步骤以及时间安排等的综合考虑和安排。
实验设计原则：设计重复组（3个）设计。
3实验步骤（1）土壤取样：土壤有之称，土壤中微生物，在表层，有更多的微生物生长，土壤中的微生物大约是细菌，细菌适宜生活在取样：从肥沃、湿润的土壤中，用无菌小铁铲铲去表层土取距地表约的土壤层，迅速取土壤并装入____________密封（2）样品稀释稀释原因：样品稀释程度直接影响，稀释标准：选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数在，适于计数的平板稀释倍数：测定细菌：选用稀释倍，测定放线菌：选用稀释倍测定真菌：选用稀释倍（3）微生物的培养与观察培养：不同种类的微生物，往往需要不同的培养和培养。
细菌：放线菌：真菌：观察：在实验过程中，一般每隔统计一次数目，选取菌落数目的记录作为结果，这样可以。
菌落特征：（4）细菌的计数当菌落数目稳定时，选取菌落数在的平板进行计数。
在下，至少对个平板进行重复计数，然后求出，并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。
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四、菌种鉴定 1．原理：分解尿素的细菌合成的 脲酶 将尿素分解为 氨 ， 使培养基的碱性 增强 。 2．方法：在以 尿素 为唯一氮源的培养基中加入酚红指示 剂，培养某种细菌，若指示剂变 红 ，可初步鉴定该种细菌能 够分解尿素。
1．在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻
止其他种类微生物生长的培养基称做
③统计方法：为了保证结果准确，一般设置 3～5 个平板， 选择菌落数在 30～300 的平板进行计数，并取其 平均值 。
(2)显微镜直接计数法：在显微镜下直接观察和计数微生物 的数量。
3.设置对照 (1)对照实验：指除了 被测试 的条件外，其他条件都相同的 实验。 (2)主要目的：排除实验组中 非测试因素 对实验结果的影 响，提高实验结果的可信度。
二、实验设计 1.土壤取样 从富含有机质、酸碱度接近中性且潮湿的土壤取样。先 铲去表层土，在距地表约 3～8 cm 的土壤层取样。 2.样品的稀释 (1)稀释原因：样品的 稀释度 直接影响平板上生长的 _菌__落__数__目__。 (2)稀释标准：选用一定稀释范围的样品液进行培养，保 证获得菌落数在 30～300 之间，便于计数。
3．用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际
值相比
(B )
A．比实际值高
B．比实际值低
C．和实际值一致
D．比实际值可能高也可能低
解析：培养基上的一个菌落也可能由相连的两个或多个菌
体繁殖而来，并且该方法测得的是活菌的菌落数目，未包
括死细菌数，因此统计的活菌数要少于菌体实际值。
4．产生每个标准菌落的细菌的最初数目和培养基分别是( C ) A．一个细菌，液体培养基 B．许多细菌，液体培养基 C．一个细菌，固体培养基 D．许多细菌，固体培养基 解析：在微生物的培养中产生每个标准菌落的细菌的最初 数目是一个细菌，使用的培养基为固体培养基。
专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
3．重复组的结果是否一致 如果学生选取的是同一种土样，统计的结果应该 接近 。 _____ 四、操作提示 1．无菌操作 灭菌 。 (1)取土样的用具在使用前都需要_____ (2)应在火焰旁称取土壤，并在火焰附近将土样倒 入烧瓶中，塞好棉塞。 稀释 土壤溶液的过程中，每一步都要在 (3)在_______ 火焰 旁操作。 _____
2．实验室中目的菌株的筛选 (1)理论依据 目的菌株 人为提供有利于 ____________ 生长的条件 ( 包括营
养、温度、 pH等 ) ，同时抑制或阻止其他微生物生
长。
(2)选择培养基
特定种类的微生物生长， 指在微生物学中，允许_____
抑制 或阻止其他种类微生物生长的培养基。 同时_____
解析：选D。在设计实验时，一定要涂布至少3
个平板，作为重复组，才能增强实验的说服力
与准确性，所以A、B两项不正确。C项虽涂布
了3个平板，但是，其中1个平板的计数结果与
另两个相差太远，说明在操作过程中可能出现
了错误，因此，不能简单地用 3 个平板的计数
值求平均值。
知能过关演练
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2．做好标记 平板 和试管比较多，为避免混 本实验使用的 ______ 淆，最好在使用前就做好标记。 3．规划时间 对于耗时较长的生物实验，要事先规划时间， 以便提高工作效率，在操作时更加有条不紊。 五、课题延伸 细菌合成的_____ 脲酶 将尿素分解成氨，使培养基 的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中 红， 加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变___ 可确定该种细菌能够分解尿素。
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
课标领航 1 ．举例说明什么是选择培养基，并研究培 养基对微生物的选择作用。 2 ．设置重复组和对照组，对土壤中分解尿 素的细菌进行分离和计数。 【重点】 选择培养基的作用。 【难点】 菌落数目的统计。
专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（选修1）来源：拇指教育作者：小茹1．(2011年松原高二检测)土壤中的细菌能分解尿素，是因为它们能合成一种() A．尿素酶B．脲酶C．蛋白酶D．肽酶解析：选B。
能够分解利用尿素的细菌，其细胞内含有脲酶，可以把尿素分解成氨，然后进一步利用。
2．在培养基中加入尿素(惟一氮源)，以分离出能分解尿素的细菌，这种加入尿素的培养基在功能上属于()A．选择培养基B．固体培养基C．液体培养基D．半固体培养基解析：选A。
选择培养基是从功能上对培养基进行分类的，B、C、D三项所述的培养基是根据培养基的物理状态进行分类的。
题述培养基能分离出以尿素为惟一氮源的细菌，故是一种选择培养基。
3．实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事先准备好的琼脂平板上画3条等长的平行线(3条线均与图中的链霉素带接触)，将平板置于37 ℃条件下恒温培养3天，结果如图所示。
从实验结果分析，以下叙述不正确的是()[来源:21世纪教育网]A．链霉素能阻止结核菌的生长B．链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效C．链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效D．链霉素可以用于治疗伤寒病人解析：选D。
从图中可以看出，这是含有链霉素的选择培养基，接种的三种细菌中，霍乱菌和结核菌都可以被杀灭，并且链霉素对结核菌杀灭的有效程度大于霍乱菌，而伤寒菌照常生长不受影响，所以选项D错。
4．测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释，其原因是()A．细菌个体小，真菌个体大B．细菌易稀释，真菌不易稀释C．细菌在土壤中数量比真菌多D．随机的，没有原因解析：选C，土壤中的微生物大约70%～90%是细菌，真菌的数量要比细菌少。
样品的稀释度越高，在平板上生成的菌落数目就越少。
在实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数在30～300之间，适于平板计数，所以细菌的稀释倍数要高于真菌的稀释倍数。
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专题二课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数【基础知识】一、理论基础1．筛选菌株(1)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时或其他微生物生长。
(2)选择培养基：在微生物学中，将允许种类的微生物生长，同时和其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。
（3）配制选择培养基的依据根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。
例如，培养基中不加入有机物可以选择培养微生物；培养基中不加入氮元素，可以选择培养；的微生物.加入高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。
2．统计菌落数目（1）测定微生物数量的常用方法有和。
（2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理当样品的足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个。
通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
为了保证结果准确，一般选择菌落数在的平板进行计数。
此外，测定微生物数量的常用方法还有直接计数。
3．设置对照设置对照的主要目的是排除实验组中对实验结果的影响，提高实验结果的。
例如为了排除培养基是否被杂菌污染了，需以培养的培养基作为空白对照。
二、实验设计关于土壤中某样品细菌的分离与计数实验操作步骤如下：1．取样：从肥沃、湿润的土壤中取样。
应先 3 cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的中。
2．制备：准备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基，将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显选择培养基上的数目，因此，牛肉膏蛋白胨培养基可以作为，用来判断选择培养基是否起到了选择作用。
3．微生物的与观察将10g土样加入盛有90 mL无菌生理盐水的锥形瓶中(体积为250 mL)，充分摇匀，吸取上清液，转移至盛有的生理盐水的无菌大试管中，将土样以1、101、102……依次等比稀释至107稀释度，并按照由107～103稀释度的顺序分别吸取进行平板涂布操作。
每个稀释度下需要3个选择培养基、1个牛肉膏蛋白胨培养基。
将涂布好的培养皿放在30℃温度下培养，及时观察和记录。
挑选选择培养基中不同形态的菌落接入含培养基的斜面中，观察能否产生如教材中图2-lO的颜色反应。
4．细菌的计数当菌落数目稳定时，选取菌落数在的平板进行计数。
在同一稀释度下，至少对3个平板进行重复计数，然后求出，并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。
三：思考与讨论（1）如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？（2）为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围相同吗？(3)P183在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？（4）P183这种培养基对微生物是否具有选择作用？如果有，又是如何进行选择的？（5）P183你认为哪位同学的结果接近真实值？你认为这两位同学的实验需要改进吗？如果需要，如何改进？（6）P183你能通过设置对照，帮助A同学排除上述两个可能影响实验结果的因素吗？专题2课题3 分解纤维素的微生物的分离基础知识一、纤维素与纤维素酶1．纤维素的化学组成：三种元素，是一种糖。
2．纤维素的分布：是自然界中纤维素含量最高的天然产物，此外，木材、作物秸秆等也富含纤维素。
3．纤维素酶的作用：纤维素酶是一种，一般认为它至少包括三种组分，即酶、酶酶，前两种酶使纤维素分解成，第三种酶将纤维二糖分解成。
二、纤维素分解菌的筛选1．筛选方法：染色法。
2．筛选原理：刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以为中心的透明圈，我们可以通过来筛选纤维素分解菌。
三、试验设计土壤中纤维素分解菌的分离的实验方案：分解纤维素的微生物的分离的试验流程、、、、1．土壤取样：采集土样时，应选择富含的环境。
2．选择培养：阅读资料二“选择培养基”，回答以下三个问题：〖思考1〗纤维素分解菌选择培养基属于培养基，原因是什么？。
〖思考2〗培养基选择作用机制是什么？〖思考3〗若设置一个对照实验说明选择培养的作用，应控制的变量是什么？(1)目的：增加纤维素分解菌的，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。
(2)制备选择培养基：参照课本旁栏中的比例配制。
(3)选择培养：称取土样20 g，在无菌条件下加入装有30mL培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在上，在一定温度下振荡培养1～2 d，直至培养液变。
也可重复选择培养。
（4）梯度稀释：依次将培养液稀释101～107倍。
思考是如何操作的？(5) 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上<1>制备培养基：参照课本旁栏中的比例。
<2>倒平板操作。
<3>涂布平板：将稀释度为104～106的菌悬液各取0．1 mL涂布在平板培养基上，30℃倒置培养。
(6)刚果红染色法：挑选产生的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。
〖思考4〗本实验流程与尿素分解菌的分离实验流程有哪些异同？3.刚果红染色法：常用的刚果红染色法有两种即两种方法的优点与不足：〖思考5〗为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？四：结果分析与评价1为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行实验，纤维素酶的发酵方法有发酵和发酵。
2纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的含量进行定量测定。
典型例题分析【例1】分析下面培养基的配方：KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H20、葡萄糖、尿素、琼脂。
请回答：(1)在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别和。
(2)想一想这种培养基对微生物是否具有选择作用?如果具有，又是如何进行选择的?【例2】用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中得到以下几种统计结果，正确的是…( )A．涂布了一个平板，统计的菌落数是230B．涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238C．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和2墨6，取平均值163D．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是2l0、240和250，取平均值233【例3】用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是 ( )A．未接种的选择培养基B．未接种的牛肉膏蛋白胨(全营养)培养基C．接种了的牛肉膏蛋白胨(全营养)培养基D．接种了的选择培养基【例4】纤维素酶可以将下列哪种物质分解…………( )A．牛肉片 B．鱼片 C．滤纸条 D．塑料条【例5】在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是……………………( )A．分解尿素的细菌 B．硝化细菌 C．分解纤维素的细菌 D．乳酸菌【例6】本实验关于选择培养目的叙述正确的是…( )A．可以增加纤维素分解菌的浓度 B．可以减少纤维素分解菌的浓度C．所用培养基是固体培养基 D．所用培养基是平板培养基基础自测1．PCR技术要求使用耐高温的DNA聚合酶，这种酶要能忍受93℃左右的高温。
如果请你来寻找这种耐高温的酶，你会去哪里寻找………( )A．土壤中 B．海水中 C．热泉中 D．冷库中2．下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是………………( )A．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、尿素、琼脂、水B．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、琼脂、水C．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、尿素、琼脂、水D．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水；3.某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL)…( )A．2.34×108 B．2.34×109 C．234 D．23.44.在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。
A同学的结果产生原因( )①由于土样不同②由于培养基污染③由于操作失误④没有设置对照A．①②③ B．②③④ C．①③④ D．①②④5.关于土壤取样的叙述错误的是………( )A．土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤B．先铲去表层土3cm左右，再取样C．取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌D．应在火焰旁称取土壤6．下列材料中纤维素含量最高的是( )A．杨树 B．小麦 C．玉米 D．棉花7．纤维素酶能够分解（）A．纤维素的微生物 B．淀粉的微生物 C．纤维素 D．淀粉8．刚果红能与哪项物质形成红色复合物( )A．纤维二糖 B．纤维素 C．葡萄糖 D．麦芽糖专题二课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、1（1）目的菌珠抑制阻止（2）特定抑制阻止(3)自养能固氮的微生物；2(1)有稀释涂布平板法和显微镜直接计数。
(2).稀释度细菌 30-300 显微镜3.非测试因素可信度无杂菌污染二、1. 土壤，铲去表层土。
2. 培养基多于对照 3.培养 1ml 9ml 0.1mL 4.30-300 平均数三：思考与讨论（1）统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计3个平板，计算出平板菌落数的平均值，然后按课本旁栏的公式进行计算（2）这是因为土壤中各类微生物的数量（单位：株/kg）是不同的，例如在干旱土壤中的上层样本中：好氧及兼性厌氧细菌数约为2185万，放线菌数约为477万，霉菌数约为23.1万。
因此，为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。
*（3）提供碳源的是葡萄糖，提供氮源的的是尿素（4）具有只有能够以尿素作为氮源的微生物才能在该培养基上生长。
（5）第二位同学的结果接近真实值改进的操作是第一位同学需设置重复实验组；第二位同学统计的三个菌落数相差太大，说明操作有误，需重新实验。
（6）方案1：其他同学用A同学的土样进行实验。
方案2：A同学以不接种的培养基作为空白对照。
专题2 课题3 分解纤维素的微生物的分离[参考答案]：一、1.C H O 多糖 2.棉花 3.复合酶 C1 Cx葡萄糖苷纤维二糖葡萄糖二 1. 刚果红 2.红色复合物，纤维素分解菌，是否产生透明圈三、（流程参考课本P138） 1. 纤维素2〖思考1〗液体，没有添加琼脂成分.〖思考2〗以纤维素粉为唯一碳源，只有纤维素分解菌才能生存。
〖思考3〗将纤维素粉改为葡萄糖。
(1)纯度 (3).摇床混浊(4)参照专题1的稀释操作， (6).透明圈〖思考4〗尿素分解菌的分离实验流程是将土样制成的菌悬液直接涂布在选择培养基上；本课题通过选择培养使细菌增殖后，再涂布在鉴别培养基上。
其它操作基本基本共同。