输血前血液学检查 ppt课件

三、 不规则抗体的筛选和鉴定

受血者有输血史、妊娠史或短期内需要大量输血 时应按相关规定进行不规则抗体的筛查和鉴定， 以便及时发现有临床意义的不规则抗体从而避免 输血反应的发生。不规则抗体亦称意外抗体，是 指抗A、抗B以外的红细胞抗体。意外抗体有两种， 包括同种抗体和自身抗体。自身抗体是指受血者 体内产生的抗体，针对自己本身的红细胞抗原。 如果抗体不是针对自身抗原，而是与同种异基因 的红细胞发生反应，即与某些献血者的红细胞出 现凝集反应，为同种抗体。
四、 交叉配血试验


完整的交叉配血试验应包括： 1. 复查收到的受血者血样的ABO、Rh血型以及 抗体筛查的结果。 2. 查阅受血者以前的血型检查记录，如与此次 结果不服，应及时分析原因。 3. 选择预先进行血型检查的合格献血者作交叉 配血试验。 交叉配血体系均应在37℃孵育。使用能检出不完 全抗体的配血方法进行交叉配血。除了盐水介质 法外，还应使用能检出其他血型系统抗体的方法， 例如：抗球蛋白试验，酶技术、聚凝胺法、微柱 凝胶卡式检测法等
五、常用的交叉配血试验


盐水介质法
低离子聚凝胺介质配血法
盐水介质法


1.检验原理
2.操作步骤 3.实验结果 4.注意事项
检验原理

交叉配血试验亦称为血液相容性试验，受血者与供血者 的交叉配血反应体系中，若血清存在针对红细胞膜上 ABO 血型或其他血型抗原的 IgM 抗体时，可直接在离心 力作用和盐水介质条件下，抗原抗体结合而发生肉眼可 见的凝集，亦可在补体参与下进一步引起溶血效应。
一、受血者标本处理

标本应直接从静脉中抽取，不得从输液管或输液侧静脉 中抽取。

要防止受血者血液标本稀释和溶血。采集标本过程中发 生的溶血，一般不能使用。溶血后的游离血红蛋白可以 掩盖抗体引起的溶血，导致假阴性结果。 受血者配血试验的血液标本必须是输血前 3天内采集的。 如果受血者要再次输注红细胞，尤其是受血者最后一次 输注红细胞已间隔了 24 小时，应该重新采集一份标本进 行交叉配血试验，避免回忆反应而产生抗体漏检。每次 输血后，受血者和供血者的标本必须保存于 2~8℃至少7 天。
输血前血液学检查

输血是临床上作为治疗或辅助治疗的重要手段，但不适 当的血液制品输注将造成不良后果，严重者可危急生命。 因此在输血前，严格按照相关程序对受血者和供血者的 血液进行准确的输血前血型血清学检查才能保证受血者 的输血安全。


输血前检查的主要程序包括： 一、受血者血液标本的处理； 二、ABO血型和RhD血型定型； 三、红细胞同种抗体筛查和鉴定； 四、交叉配血试验等。
低离子聚凝胺介质配血法


1.检验原理
2.操作步骤 3.实验结果 4.注意事项
检验原理

聚凝胺是一种高效价季胺盐多聚物，溶解后产生正电荷， 可以大量中和红细胞膜表面的负电荷，减弱红细胞之间 的排斥力，使红细胞彼此间的距离缩短，在离心力的作 用下，可使正常红细胞发生可逆性的非特异性凝聚。离 心后，加入重新悬浮液，中和聚凝胺的凝集作用，使非 特异性的正常红细胞凝集解散，而特异的抗体抗原结合 引起的红细胞凝集仍然存在。
操作步骤



1. 离心供血者、受血者血液标本，使红细胞与血清分离。用生理 盐水洗涤供血者及受血者红细胞 3次，配成3%~5%的生理盐水红细 胞悬液。 2. 取洁净小试管2支，分别标记为主侧及次侧管。 3. 主侧管内加受血者血浆或血清2滴及供血者红细胞悬液1滴；次 侧管加供血者血清2滴及受血者红细胞悬液1滴，立即混匀。 4. 将2支试管放入离心机内，以1000×g离心15秒。 5. 取出试管，首先用肉眼观察试管上清液有无溶血现象，再轻轻 摇动试管，直至红细胞成为均匀的混悬液后，观察有无红细胞凝集。 6. 取1 张玻片，用滴管分别从主侧管和次侧管内吸取红细胞悬液 各1滴，均匀滴放在载玻片上，用显微镜观察并记录结果。
操作步骤




Hale Waihona Puke 1. 取试管两支，标主次侧，主侧管加病人血清（血浆） 2滴，加供血者3%~5%红细胞悬液1滴，次侧管反之。 2. 各加低离子溶液 0.65ml，混合均匀后，再各加聚凝 胺溶液2滴，并混合均匀。 3. 用离心机 3400 转 / 离心 10 秒，然后把上清液倒掉， 不要沥干，让管底残留0.1ml液体。 4. 轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集， 则必须重做。 5. 最后加入悬浮液2滴，轻轻摇动试管混合并同时观察 结果。如果在 60 秒内凝集散开，代表是由聚凝胺溶液引 起的非特异性聚集，配血结果相合；如果凝集不散开， 则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相 合。如反应可疑，可进一步倒在玻片上用显微镜观察。

二、受血者和供血者ABO和Rh定型


血型鉴定是实施输血治疗的首要步骤。 ABO定型包括正定型和反定型。用抗A及抗B试剂与被检 细胞反应，检测红细胞表面是否存在 A 抗原和B抗原，称 之为正定型；用标准 A细胞及 B细胞与被检血清反应，检 测血清中是否存在抗体，称之为反定型。 Rh定型： 1mlRhD 阳性血输入 RhD 阴性个体后，大约会 导致25%个体产生抗D。因此临床上应常规进行RhD抗原 鉴定。
实验结果

主侧和（或）次侧管红细胞均无凝集或溶血，表示受血 者和供血者两血盐水介质配血相容，供血者血液可以输 注。若主侧和（或）次侧管内出现红细胞凝集和（或） 溶血，则表示两血不相容。
注意事项




1. 应用盐水介质交叉配血试验时出现红细胞凝集或溶 血，应当首先重新进行供血者和受血者 ABO 血型鉴定， 排除ABO血型鉴定错误导致的不相容结果。 2. 溶血标本不得用于交叉配血试验。 3. 冬季实验室温度较低出现红细胞凝集时，应当排除 供、受者血清中存在自身冷凝集素。为排除冷凝激素的 干扰，可以把主次侧试管放置在 37 ℃水浴箱内升温一定 时间，轻轻摇动试管，取出试管后立即吸取试管内红细 胞悬液放置显微镜下观察结果；亦可将反应并离心后的 主次侧试管用预温至37℃生理盐水洗涤3次，重新离心后 观察结果。 4. 进行盐水介质交叉配血试验时，红细胞悬液加入血 清以后，采用立即离心法，即刻观察试验结果。不宜在 室温下放置，以免影响试验结果。