脓汁中病原性球菌和粪便中致病性杆菌的鉴定43
脓汁和粪便标本中病原菌的检测-3PPT课件
未来发展趋势预测
01
新技术和新方法的应用
随着科技的不断进步，新的病原菌检测技术和方法将不断涌现，如基于
人工智能的图像识别技术、单细胞测序技术等，这些新技术和新方法将
进一步提高病原菌检测的准确性和效率。
仪器故障
遇到仪器故障时，应及时联系维修人 员进行维修，并对之前的实验结果进 行复查。
操作失误
对于操作失误导致的问题，应仔细分 析原因，并采取相应措施避免类似问 题再次发生。
06 总结与展望
本次课程重点内容回顾
病原菌检测的意义和重要 性
脓汁和粪便标本中病原菌的检 测对于疾病的诊断和治疗具有 重要意义，能够提高医疗质量 和患者生存率。
脓汁和粪便标本中病原菌的检测3ppt课件
目 录
• 脓汁与粪便标本概述 • 病原菌检测方法及原理 • 各类病原菌检测实例分析 • 结果解读与临床意义探讨 • 实验操作注意事项与质量控制 • 总结与展望01 脓与粪便标本概述定义及来源
脓汁定义
来源
脓汁是机体组织炎症过程中形成的浓 稠或稀薄的渗出物，包含坏死组织、 细菌、细胞碎片等。
处理
标本采集后应立即送检，避免干燥、污染。在实验室中， 脓汁和粪便标本需要经过适当的处理，如稀释、涂片、染 色等，以便于后续的病原微生物检测。
临床意义
01
02
03
病原菌检测
通过对脓汁和粪便标本的 检测，可以确定感染的病 原菌种类，为临床诊断和 治疗提供依据。
病情监测
通过对病原菌数量和种类 的变化进行监测，可以评 估患者的病情变化和治疗 效果。
脓汁和粪便标本中病原菌的检测实验报告
2016年秋季学期微生物学实验报告1、了解医学微生物学主要的研究方法和手段，掌握基本技能和基本原理。
2、熟悉常见病原性球菌及常见肠道致病菌的检查程序，掌握各检查实验操作。
3、了解脓汁和粪便标本中病原菌的检测的临床应用及临床意义。
4、熟悉几种常用的细菌生化反应的名称、原理、方法、结果分析及用途。
5、熟悉抗生素对于不同细菌的作用机理。
6、树立牢固的无菌观念。
二、实验器材：1、培养基：营养琼脂平板、伊红美兰平板、斜面、营养肉汤、半固体琼脂2、标本：脓汁标本、粪便标本、空气细菌培养物、手指皮肤细菌培养物、细菌分离培养物、斜面培养物、营养肉汤培养物、药敏试验培养物3、器材：1）培养基的制备：天平、称量皿、药勺、锥形瓶、量筒、试管、试管架、刻度吸管、洗耳球、棉塞、牛皮纸、橡皮筋、干粉培养基、酒精灯、火机。
2）细菌的分离培养：碘酒棉球，酒精棉球、眼科镊子、接种环。
3）细菌的纯培养: 接种环。
4）细菌的形态学检查：生理盐水、镜油瓶、拭镜纸、吸水纸、载玻片、结晶紫染液、芦戈氏碘液、95%酒精、稀释石炭酸复红、染色架、接种环。
5）细菌的生化试验:糖发酵管、抗菌素（青霉素、链霉素、庆大霉素）纸片、眼科镊子、接种针、接种环、小砂轮、葡萄糖发酵微量管、乳糖发酵微量管、兔血浆、生理盐水、载玻片。
6）结果分析：尺子。
三、方法与步骤1、营养肉汤培养基的制备取1.1g营养肉汤粉末于锥形瓶中，加入50ml蒸馏水，摇晃锥形瓶使其几乎完全溶解。
将锥形瓶置于电陶炉上加热至沸腾，观察固体是否完全溶解，冷却后分装至试管内。
2、细菌的分离培养（平板划线分离法）甲→脓汁标本→营养琼脂平板乙→脓汁标本→营养琼脂平板丙→粪便标本→伊红美蓝平板丁→粪便标本→伊红美蓝平板1）接种环烧灼灭菌，以免污染标本。
2）取标本3～5ul。
3）转动平板，当看到平板表面象镜面有反光的时候，保持这个角度，划线时就能看清划线痕迹，以便控制划线。
4）接种环与平板呈30～40度角，在平板表面上方，以曲线的形式，作大幅度来回连续划线，边划边退，线段要划得长而密集，每区划线不少于30条5）甲、乙烧掉接种环上多余的标本。
脓汁和粪便标本中病原菌的检测实验报告
脓汁和粪便标本中病原菌的检测实验报告本实验旨在通过对脓汁和粪便标本的检测，确认其中的病原菌种类及数量，并提供合理的治疗建议。
一、实验原理病原菌是引起感染的主要原因之一，其种类和数量的检测是诊断和治疗感染的关键步骤之一。
本实验将通过培养、鉴定和计数脓汁和粪便标本中的病原菌，以确定感染的类型和程度，从而为治疗提供依据。
二、实验材料和试剂1. 脓汁标本和粪便标本；2. 消毒用具（酒精棉球、焊接器等）；3. 细菌培养基（营养琼脂、MacConkey琼脂、血琼脂）；4. 鉴定试剂（青霉素酶、氧化/还原试验等）；5. 光学显微镜；6. 均质器；7. 精密天平。
三、实验步骤1. 标本制备将脓汁标本和粪便标本均匀搅拌，取出适量标本（大约1克）并转移到无菌离心管中。
2. 标本清洗使用去离子水将标本管中的标本沉淀洗涤三次，去除杂质。
3. 均质标本使用均质器将标本转移到无菌均质袋中，并进行均质处理。
4. 鉴定菌落计数将均质标本分别接种在营养琼脂、MacConkey琼脂和血琼脂培养基上，并在37°C下培养24-48个小时。
随后使用光学显微镜进行菌落计数和观察颜色和形态。
根据颜色和形态等特征，初步确定病原菌的种类。
5. 鉴定试剂检测针对感染可能的病原菌种类，使用相应的鉴定试剂进行检测，以确定病原菌的确切种类。
6. 病原菌计数根据菌落计数结果，对病原菌进行定量计数，以进一步确定感染的程度。
四、结果分析经过实验分析，使用光学显微镜和鉴定试剂检测，可以初步确定脓汁标本中的病原菌可能为金黄色葡萄球菌。
通过菌落计数和定量计数，可以确定金黄色葡萄球菌的数量为10^6CFU/mL。
而粪便标本中则检测出大肠杆菌，其数量为10^5CFU/g。
五、诊断和治疗建议1. 脓汁标本中检测出的金黄色葡萄球菌，提示患者可能患有金黄色葡萄球菌感染，建议对患者进行进一步检查，以确认诊断。
2. 粪便标本中检测出的大肠杆菌，建议患者增加膳食纤维的摄入，加强个人卫生，避免感染传播。
标本中未知细菌的分离和鉴定
结论：现象与论点、 结论：现象与论点、论据
浓汁标本可疑菌药敏实验结果
药品名称
抑菌圈直径
结论： 结论：
咽拭子
分离培养 血平板） （血平板）
革兰染色
革兰染色
胆汁溶菌试验 奥普托辛试验
荚膜染色 石炭酸复红单染） （石炭酸复红单染）
？
粪便标本
SS平板 SS平板
结果观察
1、菌落观察 2、形态学观察
（二）生化反应 触酶试验： 触酶试验： H2o2
氧化氢酶
H2o + o2
(-) (+)
菌种：可疑菌落 菌种： 试剂：3%过氧化氢 试剂：3%过氧化氢 方法： 方法：见右图 结果： 结果：见右图
甘露醇实验
甘露醇生化反应管
药敏实验
浓汁标本可疑菌生长现象及生化反应结果 观察
玻片凝集试验
粪便标本可疑菌生长现象及生化、 粪便标本可疑菌生长现象及生化、血清反 应结果观察
SS平板 SS平板 生长现象 形态学 特 征 单糖发酵试验 血清学试验
葡萄糖 乳糖
结论：现象与论点、 结论：现象与论点、论据
粪便标本可疑菌药敏实验结果
药品名称
抑菌圈直径
结论： 结论：
二、标本中未知肠道感染细菌 的分离鉴定程序
脓血便、 脓血便、肛拭子
标本 SS平板,EMB平板 SS平板,EMB平板 平板 选择/ 选择/鉴别培基
克氏双糖铁培养基, 克氏双糖铁培养基, 动力-靛基质动力-靛基质-尿素 半固体琼脂培养基
血清学鉴定 生化反应
玻片凝 集试验
设计性实验
临床标本中病原菌的分离与鉴定
3.尿 3.尿 标本： 标本：尿液 培养基：伊红美兰琼脂平板、克氏双糖铁斜面培养基、 培养基：伊红美兰琼脂平板、克氏双糖铁斜面培养基、 动力-靛基质动力-靛基质-尿素半固体琼脂培养基 其他：革兰染液、靛基质试剂、玻片等 其他：革兰染液、靛基质试剂、 4.粪便 4.粪便 标本：肛门拭子 标本： 培养基：伊红美兰琼脂平板、克氏双糖铁斜面培养基、 培养基：伊红美兰琼脂平板、克氏双糖铁斜面培养基、 动力-靛基质动力-靛基质-尿素半固体琼脂培养基 其他：生理盐水、靛基质试剂、沙门菌多价血清、 其他：生理盐水、靛基质试剂、沙门菌多价血清、志贺 菌多价血清、玻片等 菌多价血清、
脓汁和粪便标本中病原菌的检验实验报告
脓汁和粪便标本中病原菌的检测年级专业：学号：姓名：一实验目的：从脓汁和粪便标本中分离、培养和检测病原体。
了解医学微生物学主要的研究方法和手段，掌握基本技能和基本原理，树立牢固的无菌观念。
二实验器材：试管架,酒精灯,污物盘，普通冰箱，隔水式电热恒温培养箱，奥林巴斯CX21型生物显微镜，乙醇乙醚，吸水纸，石蜡油，拭镜纸，染色架，革兰染色瓶，1500W 电炉，石棉网，手套，酒精棉球，镊子，碘酒棉球,接种针、接种环、油性笔、打火机、试管架、冷藏室、蒸馏水、玻片缸、消毒液、1‰新洁而灭、天平、砝码、细菌干粉培养基、锥形瓶、量筒、试管筐、糖发酵管、灭菌平皿、试管（棉塞）、刻度吸管、洗耳球、称量纸、硫酸纸、牛皮纸、橡皮筋、尺子三方法与步骤：○1培养基的制备、消毒和灭菌:1.调配→溶化→矫正pH →分装→灭菌→检定→保存。
2.干粉培养基→蒸馏水→加热溶化→分装→灭菌→检定→保存。
②细菌的分离培养:采用平板划线分离法，将取脓汁和粪便标本中混杂的多种细菌，分别在普通平板和伊红美蓝固体培养基表面划线，使之分散成单个细菌，在37℃培养18～24h ，从而分离出单个菌落。
③细菌的纯培养：脓汁标本在普通平板上有黄色、白色两种菌落；粪便标本在伊红美蓝平板上，有紫黑色、淡粉红色两种菌落。
挑选这四种不同菌落分别在斜面培养基上接种④细菌的形态学检查：涂片制备→干燥→固定→革兰染色⑤细菌的生化试验等:糖发酵试验, 细菌药物敏感性试验, 血浆凝固酶试验, 半固体接种法, 痢疾血清玻片凝集反应⑥结果观察、分析、总结四结果与讨论结果讨论：1.在制备好培养基后，我们首先采用的是平板划线分离法，从脓汁标本中分离出黄色和白色两种菌落→在显微镜下观察，这两株细菌均为G+球菌，排列不规则，呈葡萄串状，是典型的葡萄球菌→再结合菌落或菌苔颜色，可初步断定，这两株葡萄球菌分别是金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌→再通过血浆凝固酶试验鉴别，金黄色葡萄球菌是致病菌。
脓汁和粪便标本中病原菌的检测
脓汁和粪便标本中病原菌的检测（作者：bibi）目的从脓汁和粪便标本中分离、培养和检测病原体。
方法培养基的制备、消毒和灭菌，细菌的分离与培养，细菌群体和个体形态特征的观察，细菌生化反应鉴定。
结果脓汁标本形成黄、白两种颜色菌落，均为革兰氏阳性菌，均对青霉素和链霉素敏感；粪便标本形成紫黑和粉红色两种菌落，均为革兰氏阴性菌，对青霉素不敏感，对链霉素敏感。
四种细菌均对广谱抗菌素庆大霉素敏感。
关键词：脓汁粪便微生物细菌菌落生化鉴定药敏试验引言：常见的化脓性病原菌有葡萄球菌、链球菌、淋球菌、脑膜炎球菌、肺炎链球菌、结核杆菌、假单胞菌、流感杆菌等。
浓汁标本在做细菌分离培养的同时，均须直接涂片检查，观察是否有典型形态的菌体，芽孢有无，为临床提供最初的诊治依据。
粪便标本中常见的病原菌有志贺氏菌属、致病性大肠杆菌属、弧菌属、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、艰难梭菌等。
粪便标本中常含有很多杂菌，应根据检验目的菌的不同而选择培养基（如SS、伊红美蓝平板、碱性蛋白胨水），尽可能抑制杂菌，以利于病原菌的检出。
这次实验我们从浓汁标本中检出的是金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌，从粪便标本中检出的是大肠埃希菌、痢疾志贺菌。
更重要的是我们了解了，医学微生物学主要的研究方法和手段，掌握了微生物试验的基本技能和基本原理，树立了牢固的无菌观念。
同时培养学生自学能力、科学思维能力、动手能力和表达能力。
培养学生从临床标本中分离细菌以查找与疾病有关的病原体，为临床治疗预后调查提供一定的价值1.实验器材：接种针、接种环、油性笔、打火机、试管架、普通冰箱、冷藏室、隔水式电热恒温培养箱、奥林巴斯 CX21型生物显微镜、1500W电炉、蒸馏水、玻片缸、消毒液、1‰新洁而灭、天平、砝码、细菌干粉培养基、锥形瓶、量筒、试管筐、糖发酵管、灭菌平皿、试管（棉塞）、刻度吸管、洗耳球、称量纸、硫酸纸、牛皮纸、橡皮筋、尺子2.实验方法：2.1培养基的制备、消毒和灭菌培养基制备的一般程序：①调配→溶化→矫正pH →分装→灭菌→检定→保存。
【参考文档】粪便检查实验报告-范文word版 (12页)
本文部分内容来自网络整理，本司不为其真实性负责，如有异议或侵权请及时联系，本司将立即删除！== 本文为word格式，下载后可方便编辑和修改！ ==粪便检查实验报告篇一：脓汁和粪便标本中病原菌的检验实验报告脓汁和粪便标本中病原菌的检测年级专业：学号：姓名：一实验目的：从脓汁和粪便标本中分离、培养和检测病原体。
了解医学微生物学主要的研究方法和手段，掌握基本技能和基本原理，树立牢固的无菌观念。
二实验器材：试管架,酒精灯,污物盘，普通冰箱，隔水式电热恒温培养箱，奥林巴斯 CX21型生物显微镜，乙醇乙醚，吸水纸，石蜡油，拭镜纸，染色架，革兰染色瓶，1500W电炉，石棉网，手套，酒精棉球，镊子，碘酒棉球,接种针、接种环、油性笔、打火机、试管架、冷藏室、蒸馏水、玻片缸、消毒液、1‰新洁而灭、天平、砝码、细菌干粉培养基、锥形瓶、量筒、试管筐、糖发酵管、灭菌平皿、试管（棉塞）、刻度吸管、洗耳球、称量纸、硫酸纸、牛皮纸、橡皮筋、尺子三方法与步骤：1培养基的制备、消毒和灭菌: ○1. 调配→溶化→ 矫正pH →分装→灭菌→检定→保存。
2. 干粉培养基→蒸馏水→加热溶化→分装→灭菌→检定→保存。
②细菌的分离培养: 采用平板划线分离法，将取脓汁和粪便标本中混杂的多种细菌，分别在普通平板和伊红美蓝固体培养基表面划线，使之分散成单个细菌，在37℃培养18～24h ，从而分离出单个菌落。
③细菌的纯培养：脓汁标本在普通平板上有黄色、白色两种菌落；粪便标本在伊红美蓝平板上，有紫黑色、淡粉红色两种菌落。
挑选这四种不同菌落分别在斜面培养基上接种④细菌的形态学检查：涂片制备→ 干燥→ 固定→ 革兰染色⑤细菌的生化试验等 : 糖发酵试验, 细菌药物敏感性试验, 血浆凝固酶试验, 半固体接种法, 痢疾血清玻片凝集反应⑥结果观察、分析、总结四结果与讨论结果讨论：1. 在制备好培养基后，我们首先采用的是平板划线分离法，从脓汁标本中分离出黄色和白色两种菌落→在显微镜下观察，这两株细菌均为G+球菌，排列不规则，呈葡萄串状，是典型的葡萄球菌→再结合菌落或菌苔颜色，可初步断定，这两株葡萄球菌分别是金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌→再通过血浆凝固酶试验鉴别，金黄色葡萄球菌是致病菌。
脓汁中病原性球菌和粪便中致病性杆菌的鉴定(精)
新乡医学院微生物学教研室
目的要求
1. 掌握血浆凝固酶试验和玻片凝集试验的操 作方法； 2. 熟悉血浆凝固酶试验和玻片凝集试验的原 理；
3. 了解病原性球菌和杆菌的一般鉴定过程。
脓汁中病原性球菌的鉴定
脓，痰，分泌 物，穿刺物
血，尿，胆汁
葡萄糖酚红 肉汤增菌培养 涂 片 革 兰染 色 镜 检，如有菌生长
观察菌落特点
1 粪便标本在SS平板上经过24小时的培 养，长出菌落，首先观察菌落的特点： 2 挑取可疑菌落，革兰染色，进行形态学 检测，同时接种于双糖铁培养基。
肠道杆菌的生长结果
SS 大肠杆菌 痢疾杆菌 粉红色大菌落 无色细小 半透明菌落 无色细小 半透明菌落 双糖铁 黄色 上红下黄
伤寒杆菌
上红下黄 黑色沉淀
肺炎链球菌
胆汁溶菌；菊糖发酵；奥普托辛
A群链球菌
甲链 乙链 丙链
胆汁溶菌实验
• 肺炎双球菌 • 甲型溶血性链球菌
+
—
菊糖发酵实验
• 肺炎双球菌 • 甲型溶血性链球菌
+
—
奥普托辛实验
奥普托辛能干扰肺双叶酸的合成，故对肺炎 双球菌的抑制作用比较大。
肺双的抑菌圈直径一般大于20mm为阳性；
甲链的抑菌圈直径小于12mm为阴性； 如果介于12－20mm之间时应重复试验。
操作内容
1 革兰染色： 每台2张玻片，染1张球菌和1张杆菌； 2 血浆凝固酶实验： 每台1张玻片； 3 玻片凝集反应： 每台1张玻片； 4 接种双糖铁培养基： 每台2管双糖铁培养基（穿刺+斜面 ）。
观察内容
1 脓汁标本细菌在血平板上的生长现象； 2 肠杆菌在SS平板上生长的菌落特点； 3 肠杆菌在双糖铁培养基上生长的特点。
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结果判断
菌落特点：形态；色素；溶血； 革兰染色的特点：判断形态，排列和染色； 根据溶血判断链球菌的种类；根据生化反应 区别肺炎双球菌和甲链。
G+菌葡萄串状排列
首先观察菌落特点：色素；溶血情况；
进一步鉴定： 血浆凝固酶实验； 耐热核酸酶实验； 甘露醇的发酵
凝固酶试验
新乡医学院 微生物学教研室
凝固酶
是指能使含有枸橼酸钠或肝素抗凝剂的人或 兔的血浆发生凝固的酶类物质。
致病性葡萄球菌大多能产生凝固酶 凝固酶分为两种：游离凝固酶、结合凝固酶
方法
试管法
适合于游离凝固 酶的检查
玻片法
适合于结合凝固 酶的检查
试管法凝固酶试验
原理
协同因子
游离凝固酶 类似凝血酶原物质
凝血酶样物质
纤维蛋白原 液态
纤维蛋白 固态
玻片法凝固酶试验
原理
致病菌
纤维蛋白原受体 纤（维结蛋合白凝原固酶）
材料
菌种：金黄色葡萄球菌，白色葡萄球菌 兔血浆 试剂：生理盐水（N.S） 玻片：
方法
1. 分区 2. 制备细菌悬液 3. 滴加兔血浆 4. 观察结果
1. 分区
玻片分为左右两区并做好标记
革兰氏染色镜检
血平板培养分离
涂 片 革 兰染 色 镜 检，如有菌生长
挑 取 可 疑 菌 落，革 兰 染 色 镜 检
G-双球菌 奈瑟菌属
G+双球菌 草绿色溶血
营 养 耐 温生 化 反 应血清学鉴定
胆
菊
汁
糖
溶
发
菌
酵
G+链状排列
草
乙
不
绿
型
色
溶
溶
溶
血
血
血
奥
乙
丙
普
型
型
托
链
链
辛
球
球
菌
菌
+
G+葡萄状排列 血浆凝固酶
血清学鉴定
凝集反应： 试管凝集；
玻片凝集。
玻片法凝集反应
原理：颗粒性抗原(未知细菌)+抗体(已知)
电解质
凝集(+) ;
未凝集(-)
材料，方法：
伤寒血清+待测菌
伤寒血清+待测菌
结果：凝集+ ；无凝集 —。
结果判断
SS平板：菌落的形态，颜色； 双糖铁培养基上生化特点； 革兰染色：形态，排列，染色特点； 玻片凝集的反应结果。
金
表
黄
皮
色
葡
葡
萄
萄
球
球
菌
菌
观察菌落特点
脓汁标本在血平板上经过24小时的培养，已 经长出菌落，首先观察菌落的特点： • 菌落的形态； • 光滑程度； • 色素的产生情况； • 细菌的溶血情况。
形态学鉴定
革兰染色，观察细菌的染色性状和排列特点。
G-球菌
双球菌 结合临床进行判断
G+菌链状排列或成对排列
脓汁中病原性球菌和粪便中 致病性杆菌的鉴定
新乡医学院微生物学教研室
目的要求
1. 掌握血浆凝固酶试验和玻片凝集试验的操 作方法；
2. 熟悉血浆凝固酶试验和玻片凝集试验的原 理；
3. 了解病原性球菌和杆菌的一般鉴定过程。
脓汁中病原性球菌的鉴定
脓，痰，分泌 物，穿刺物
血，尿，胆汁
葡萄糖酚红 肉汤增菌培养
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