显微镜概论资料
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显微镜知识总结.docx显微镜知识总结显微镜是一种用来观察微小物体的光学仪器，能够放大物体的图像，使人们可以更清楚地观察和研究微观结构和微观现象。
以下是几个与显微镜相关的重要知识点的总结：1. 显微镜的组成部分：- 物镜：位于样本下方的镜头，主要负责放大样本的图像。
- 目镜：位于物镜上方的镜头，用于进一步放大物镜所产生的图像。
- 眼镜：位于目镜的一端，使观察者能够看到放大的图像。
- 细调节和粗调节装置：用于调节镜头与样本的距离，以获得清晰的图像。
- 光源：提供光线以照亮样本，可以是自然光、透射光或反射光。
- 台：用于支撑和定位样本。
2. 解析力和放大倍数：- 解析力是指显微镜能够显示的最小细节。
它取决于光的波长和物镜的数值孔径。
- 放大倍数是指显微镜放大物体图像的程度。
它取决于目镜和物镜的焦距。
3. 显微镜的工作原理：- 光线通过样本后被物镜放大，然后通过目镜再次被放大。
- 放大后的图像通过眼镜进入观察者的眼睛，形成视觉图像。
4. 类型和应用：- 光学显微镜：使用镜片和光线来放大样本图像。
常用于生物学、医学和材料科学的研究中。
- 电子显微镜：利用电子束代替光线来放大样本图像。
常用于查看纳米级和原子级结构。
- 原子力显微镜：利用探针测量样本表面的原子力变化来放大图像。
常用于表面形貌和物性的研究。
以上是显微镜的一些基本知识，它们对于理解显微镜的工作原理和应用起到了重要的作用。
通过掌握这些知识，人们可以更好地利用显微镜来观察和研究微观世界。
显微镜基础
显微镜技术第一节光学显微镜技术概述第二节常规光学显微镜技术一、普通光学显微镜（一）显微镜的几何光学成像原理（二）物镜（三）显微镜的照明聚光镜（四）视场光阑与孔径光阑（五）目镜（六）普通光学显微镜的操作要点：二、荧光显微镜（一）荧光的基础知识（二）荧光显微镜（三）荧光显微镜的基本操作步骤（四）荧光显微镜的操作注意事项（五）荧光显微镜标本制作特点和观察要求三、倒置显微镜（一）用途：（二）V型与U型倒置显微镜（三）倒置显微镜的光学与结构特点：四、相差显微镜（一）基本原理（二）配置（三）操作（四）相差图像特点及相差装置进展：第三节特殊光学显微镜技术一、暗视野显微镜（一）暗视野显微镜的基本原理：（二）暗视野显微镜的组成（三）图像特点：（四）安装与调试（五）应用二、近场光学显微镜（一）近场光学显微镜的基本原理（二）近场光学显微镜的基本结构（三）近场光学显微镜的应用三、原子力显微镜（一）原子力显微镜的基本原理（二）原子力显微镜的组成（三）原子力显微镜的工作模式（四）原子力显微镜的应用第四节激光扫描共聚焦显微镜一、激光扫描共聚焦显微镜的基本原理二、激光扫描共聚焦显微镜的主要特点三、激光扫描共聚焦显微镜的主要应用四、激光扫描共聚焦显微镜的基本结构五、激光扫描共聚焦显微镜的主要操作步骤六、双光子（多光子）激光共聚焦显微镜第五节显微镜摄影与显微摄影技术一、显微摄影的基本原理二、显微镜摄影中CCD的选择三、显微摄影技术应用四、CCD成像的操作步骤第六节图像分析技术一、图像分析处理的基本概念（一）图像处理和计算机图形（二）计算机图像分析处理的特点（三）图像处理的算法形式（四）图像的特征提取二、图像分析系统的基本配置（一）图像分析系统的构成（二）图像分析系统的基本软件三、图像分析的医学应用（一）图像分析的图像来源（二）图像分析的基本内容（三）医学图像分析的常用分析软件主要参考文献《组织学与胚胎学实验技术》第二章显微镜技术第一节光学显微镜技术概述显微镜是观察组织微细结构不可缺少的精密仪器。
中考生物显微镜知识点总结
中考生物显微镜知识点总结一、显微镜的发明和发展历程1.1 显微镜的发明显微镜是一种利用透镜和反射镜放大细小物体的光学仪器。
其原理是通过透镜或反射镜使光线聚焦，从而放大被观察的物体。
现代显微镜的发明可以追溯到17世纪初。
荷兰眼镜商扬·斯沃斯（Zacharias Janssen）和其父汉斯·斯沃斯（Hans Janssen）被认为是第一个发明显微镜的人。
而罗伯特·胡克（Robert Hooke）是第一个使用显微镜观察细胞的科学家。
1.2 显微镜的发展在显微镜的发展历程中，出现了许多种不同类型的显微镜，包括光学显微镜、电子显微镜、原子力显微镜等。
其中，电子显微镜的发明标志着显微镜的重大飞跃，使得人们可以观察到比光学显微镜更微小的物体。
二、显微镜的分类及结构2.1 光学显微镜光学显微镜是利用可见光对物体进行放大观察的显微镜。
光学显微镜的主要构成部分包括物镜、目镜、台、光源、反射镜等。
其中，物镜和目镜是光学显微镜最重要的部分，物镜用于放大样品，目镜用于放大视野。
2.2 电子显微镜电子显微镜是利用电子束对物体进行放大观察的显微镜。
电子显微镜的主要构成部分包括电子枪、对焦系统、透镜等。
与光学显微镜相比，电子显微镜可以放大更微小的物体，因此在生物、材料等领域有着广泛的应用。
2.3 原子力显微镜原子力显微镜是一种使用原子尖端对物体进行放大观察的显微镜。
原子力显微镜的主要构成部分包括扫描探针、反馈系统等。
原子力显微镜是一种非接触式的显微镜，可以对表面进行高分辨率的观察。
三、显微镜的使用方法3.1 样品的制备在观察样品之前，需要对样品进行适当的制备工作。
根据不同的观察对象，样品的制备方法也不同。
例如，在观察动植物的细胞时，通常需要将样品进行薄切片，以便于显微镜对其进行放大观察。
3.2 调节显微镜在使用显微镜时，需要按照一定的步骤对显微镜进行调节，以使得观察结果更加清晰。
主要包括对焦、调整光源、选择合适的目镜和物镜等。
显微镜知识点
引言：显微镜是一种常用的科学工具，能够帮助我们观察微观世界。
它在生物学、医学、物理学等领域有着广泛的应用。
本文将介绍显微镜的基本知识，包括显微镜的原理、类型、使用方法和维护保养等方面的内容。
概述：显微镜是一种利用光学原理放大微观目标物体的仪器。
它通过光源和物镜等部件，将目标物体的细节放大到可见或可测量范围，使我们能够观察和研究微观世界中的细胞、细菌、组织等。
正文：一、显微镜的原理1.光学原理：显微镜利用透镜的焦距和放大倍率，可以放大目标物体，使其变得清晰可见。
2.折射原理：光线从一个透明介质进入另一个透明介质时会发生折射，显微镜利用这一原理来改变光线的路径。
3.成像原理：显微镜通过物镜和目镜的配合使用产生放大图像，然后通过眼睛或相机来观察或记录图像。
二、显微镜的类型1.光学显微镜：最常见的显微镜类型，利用可见光的折射原理来观察样本。
2.电子显微镜：利用电子束代替可见光来观察样本，可以获得更高的放大倍率和更高的分辨率。
3.原子力显微镜：利用原子之间的相互作用来观察样本表面的原子排列和形貌。
三、显微镜的使用方法1.样本制备：显微镜观察样本需要进行适当的制备，例如切片、染色、固定等，以便更好地展示细胞结构和物质成分。
2.聚焦调节：显微镜需要通过调节物镜和目镜的位置来聚焦样本，得到清晰的图像。
3.放大倍率选择：不同的观察需求需要选择不同的放大倍率，显微镜通常具有多个物镜和目镜供选择。
4.光源控制：显微镜使用的光源需要适度控制强度和角度，以获得最佳的观察效果。
5.观察记录：显微镜观察的结果可以通过绘图、拍照或记录数据的方式进行保存和分享。
四、显微镜的维护保养1.清洁：显微镜的镜片和镜筒需要定期清洁，避免灰尘和油脂污染影响观察效果。
2.保护：显微镜在非使用时应该保存在干燥、防尘的地方，避免碰撞和摔落。
3.维修：如果显微镜出现故障或损坏，应该及时联系专业维修人员进行检修或更换零件。
4.校正：显微镜的校正是确保观察结果准确性的关键，定期进行校正可以保证显微镜的正常运行。
高一认识显微镜知识点归纳总结
高一认识显微镜知识点归纳总结显微镜是一种科学实验和观察中常用的仪器，它能够放大微小的物体，使我们可以更清晰地观察和研究。
在高一的学习中，我们掌握了一些显微镜的相关知识点，下面将对这些知识点进行归纳总结。
1. 显微镜的分类a. 光学显微镜：依靠透射或反射光线来放大物体的显微镜，主要分为单透镜显微镜和复合显微镜。
b. 电子显微镜：利用电子束来放大物体的显微镜，可分为扫描电子显微镜和透射电子显微镜。
2. 光学显微镜的结构与原理a. 光学显微镜主要由物镜、目镜、光源、粗、细调焦装置、载物台等部分组成。
b. 光线经过光源，经过凸透镜物镜聚焦光线，进入目镜后再次发生折射，形成放大的像。
3. 显微镜的使用与操作a. 使用显微镜前，首先需要调整光源的明亮度，保证观察物体的充足光线。
b. 将待观察的标本放置在载物台上，利用粗调焦装置将物镜与标本逐渐靠近，再利用细调焦装置使画面更加清晰。
4. 显微镜观察与成像a. 显微镜可以放大物体，使人眼无法分辨的细小结构变得可见。
b. 使用不同倍数的物镜和目镜，可以调节显微镜的放大倍数。
c. 放大倍数 = 物镜倍数 ×目镜倍数，常用的目镜倍数有4倍、10倍、40倍等。
5. 显微镜的维护与保养a. 使用显微镜后，要轻轻擦拭镜片和器皿，保持干燥和清洁。
b. 镜片需要定期清洗，可使用特定的清洁剂和柔软的纸巾进行清洁。
c. 收起显微镜时，要将部分松动的部件固定好，放入器皿中保护。
6. 显微镜的应用领域a. 生物学：用于观察细胞、细菌、纤维等微小生物结构。
b. 化学：用于观察和研究化学反应的细微变化。
c. 材料科学：用于分析材料的颗粒、纹理和晶体结构等。
d. 医学：用于疾病诊断和病理研究等领域。
通过对显微镜的认识和学习，我们可以更加深入地了解微观世界，发现隐藏在微小物体中的奥秘。
掌握显微镜的基本原理和操作方法，对于我们今后的学习和研究将有着重要的帮助。
因此，我们应该善于利用显微镜，并不断提升自己的观察和分析能力，进一步拓展科学的视野。
显微镜概论
相差图像
Contrast） 尼康切趾相差物镜（Apodized Phase Contrast）
——使象差观察的光晕减少一倍 ——使象差观察的光晕减少一倍
克服了相差观察式存在的光 可以看到更微细的结构。 晕，可以看到更微细的结构。 对比度更好，影调更丰富。 对比度更好，影调更丰富。 即使标本的折射率有变化， 即使标本的折射率有变化， 仍能得到很好的观察效果。 仍能得到很好的 710/780
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视网膜 晶状体 目镜 物镜实像 (一次成像 一次成像) 一次成像 筒镜 物镜 样品 聚光镜
虚像 (二次成像 二次成像) 二次成像
显微镜的构成
目镜
双目镜筒
镜头 镜身
物镜转盘 标本夹 载物台
物镜
开关 视场镜 调光 旋钮
聚光器
照 明 部 分 视场光栏 集光镜 底座
移动手柄 卤素灯
物镜——显微镜的成像水平主要取决于物镜的好坏 ——显微镜的成像水平主要取决于物镜的好坏
视野数 mm） （mm）
聚光器（Condenser） Condenser）
唯有均匀与高强度的照明才能获 得最佳的分辨率与良好对比度
样品
August Köhler 孔径光阑 视场光阑
柯勒照明(Köhler 柯勒照明(Köhler Illumination)正解 Illumination)正解 决了这一问题
普通相差 尼康切趾相差
3）微分干涉显微镜 (Differential Interference Contrast ，DIC) ）
检偏镜 DIC棱镜 DIC棱镜 物镜 样品 聚光器 DIC棱镜 DIC棱镜 起偏镜 投射光源 线虫
DIC将样品厚度信息转化为光强信息 DIC将样品厚度信息转化为光强信息
显微镜有关知识总结
显微镜有关知识总结引言概述：显微镜是一种利用光学原理观察微观事物的仪器，广泛应用于生物学、医学、材料科学等领域。
本文将介绍显微镜的基本原理、分类、操作技巧以及常见问题和解决方法，旨在提供显微镜相关知识的全面总结。
正文内容：一、显微镜的基本原理1.光学原理：显微镜通过透明样本的透射或反射产生图像。
介绍光的折射、散射、吸收等基本原理。
2.目镜和物镜的作用：目镜放大目标到初像，物镜放大初像得到最终物像。
介绍目镜和物镜的种类和功能。
3.成像原理：介绍显微镜的光路结构，包括显微镜的主要部件如光源、凹物镜、凸物镜、接物眼镜等。
二、显微镜的分类1.光学显微镜：介绍最常用的光学显微镜，如亮场显微镜、荧光显微镜、相差显微镜等，以及它们的应用领域和特点。
2.电子显微镜：介绍电子显微镜的原理和分类，如透射电子显微镜和扫描电子显微镜等，及其在纳米材料和生物领域的应用。
3.原子力显微镜：介绍原子力显微镜的原理和工作方式，以及其在材料科学和表面形貌研究中的应用。
三、显微镜的操作技巧1.样本制备：详细介绍显微镜样本的制作步骤，包括固定、切片、染色等。
解释每个步骤的目的和注意事项。
2.对焦调节：介绍显微镜的对焦方法，包括调节物镜、宏观和微观对焦，提供实用的对焦技巧和误差排除方法。
3.图像调节：介绍调节亮度、对比度和色彩平衡等参数的方法，以获得更清晰的显微图像。
4.数字显微镜操作：介绍数字显微镜的特点和操作方法，包括数码相机的安装和使用，以及图像采集和处理。
5.维护与清洁：介绍显微镜的日常维护和清洁方法，包括镜头和机械部件的保养，以及常见故障的解决方法。
四、常见问题和解决方法1.图像模糊：介绍图像模糊的可能原因，包括对焦错误、光源问题和样本问题，提供解决模糊图像的方法。
2.显微镜失调：介绍显微镜装置失调的表现和原因，如物镜不对中、目镜未调节等，以及相应的解决方法。
3.样本准备不当：介绍样本制备过程中可能出现的问题，如固定不彻底、切片厚度不一致等，以及相应的解决方法。
显微镜的知识点
显微镜的知识点显微镜是一种科学实验室常用的仪器，它可以帮助我们观察微小的物体和细胞结构等。
在生物学、化学、医学等领域，显微镜起着不可或缺的作用。
今天，我们就一起来了解一些关于显微镜的知识点。
显微镜的发展历史可以追溯到17世纪，当时荷兰科学家安东尼·凡·李文虎克发明了第一台复合显微镜。
相较于单倍镜，复合显微镜通过多个透镜的组合，使得观察者可以放大更多倍的细小物体。
这一发明在科学研究中起到了革命性的作用。
在显微镜的组成部分中，最重要的是物镜和目镜。
物镜是靠近被观察物体的镜片，而目镜是接近人眼的部分。
物镜是用来放大物体的，具有不同倍数的物镜可以放大不同程度的物体。
目镜则用来将物体放大的光线聚焦到人眼上。
物镜和目镜的组合倍数可以决定显微镜的总放大倍数。
在显微镜的使用过程中，我们还需要注意调节焦距。
通过调节镜头的位置，我们可以使被观察的物体清晰可见。
此外，还有一项重要的技巧叫做使用油浸镜。
当我们想要观察比较小的细胞或微生物时，使用油浸镜可以提高显微镜的分辨率，使我们看到更加清晰的细节。
除了以上的基本知识点，还有一些关于显微镜的应用。
首先是在生物学中的应用。
显微镜可以帮助科学家观察细胞的结构，研究生物体的各种特征。
它还可以在医学中被用来观察血液中的细菌、病毒等微生物，帮助医生进行疾病的诊断和治疗。
显微镜也在化学实验中被广泛使用，用来观察和研究化学物质的分子结构和反应过程。
此外，显微镜还被应用于材料科学和纳米技术领域。
纳米技术研究的是极小尺寸的物体和材料，显微镜可以帮助科学家观察和探索这些尺度以下的世界。
显微镜的进步和纳米技术的结合，使得我们能够更好地了解和利用纳米材料的性质与特征。
总的来说，显微镜是一种不可或缺的工具。
它拓宽了我们对微观世界的认识，帮助我们发现并研究微小的事物。
随着科学技术的不断提升，显微镜也在不断发展和改进。
我们相信，在未来的科学研究中，显微镜将继续发挥着重要的作用，并带来更多的突破和发现。
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1）数值孔径（Numerical Aperture）
N.A.=n*sinθ
物镜
n：样本和物镜间介质的折射率 θ：光轴和最外侧通过光线的夹角
空气：n＝1 油： n＝1.515
生产商 平场校正
放大倍数 特殊观察方 式
镜筒长度
盖玻片厚度 范围
盖玻片厚度刻度
固定螺纹
色差校正
数值孔径
工作距离 色环 校正环
前镜头装置
DIC将样品厚度信息转化为光强信息
聚光器 DIC棱镜
HeLa细胞
起偏镜 投射光源
线虫
尼康高级调制相衬（NAMC）
DIC具有优良的观察效果，但只能使用玻璃的介质。如使
用塑料培养皿则无法进行DIC的观察。人们使用新的技术 如尼康的NAMC可以使用塑料业观察到类似DIC的效果。
显微镜的基本类型
1）正置显微镜
Plan Apo：平场复消色差
特殊观察方
（Plan Apochromat）式镜筒长度
Apo： 复消色差（Apochromat）盖玻片厚度 范围
各厂数值孔径 工作距离 色环 校正环
前镜头装置
Olympus UIS2物镜
齐焦距离 45mm
Zeiss IC2S物镜
齐焦距离 45mm
➢ 克服了相差观察式存在的光 晕，可以看到更微细的结构。
➢ 对比度更好，影调更丰富。
➢ 即使标本的折射率有变化， 仍能得到很好的观察效果。
普通相差
尼康切趾相差
3）微分干涉显微镜 (Differential Interference Contrast ，DIC)
检偏镜
样品厚度
DIC成像光强度
DIC棱镜 物镜 样品
Leica 系列物镜
齐焦距离 45mm
目镜（Eyepiece）
视野 指观察范围
眼镜所观察到的视野=目镜倍率×视野数（如下为22cm相当于 在眼前25cm处有一直径为22cm的圆形屏幕）
实际在样品上的观察区域（实际视野）=目镜视野数／物镜倍率 如使用40X物镜实际视野=22mm/40=0.55mm
目镜 倍率
物镜 筒镜
利用光线
点光源像
损失光线
点光源像
3）工作距离（Working Distance）
——物镜前透镜到盖玻片上表面的距离
盖玻片 载玻片
大工作距离可带来方便的操 作与更广泛的样品适用性
工作 生距产离商
平场校正
放大倍数 特殊观察方 式
镜筒长度 盖玻片厚度 范围
盖玻片厚度刻度
固定螺纹
色差校正 数值孔径
显微镜概述
——显微镜的原理与应用简介
显微镜——用来观察微小物体的特殊眼镜
斑马鱼
Microscope
Small（小）；to View（看）
海马齿状回
神经元
——在14世纪意大利人发明了眼镜， 从此拉开了制造显微镜的序幕。
单镜片显微镜
Antonie van Leeuwenhoek（列文虎克）
1600s荷兰商人列文虎克使用单 镜片显微镜发现微生物而成为
视网膜 晶状体
目镜 物镜实像 (一次成像) 筒镜
物镜 样品 聚光镜
虚像 (二次成像)
目镜
显微镜的构成
双目镜筒
镜头
镜身
物镜转盘
物镜
标本夹
载物台
样品
聚光器
开关 调光
视场镜
照
明
视场光栏
部
集光镜
旋钮
分
底座
移动手柄
卤素灯
物镜——显微镜的成像水平主要取决于物镜的好坏
（Objectives）
物镜主要特性： 1）数值孔径 2）分辨率 3）工作距离 4）消象差&色差
物镜 (2θ)
(2θ)
2）分辨率（Resolution）
——分辨率与放大倍数没有关系
分辨率 = 0.61λ / N.A.
λ： 光的波长（550 nm） NA：物镜的数值孔径
分辨率
N.A.
干物镜 大约300 nm 0.95
油镜 大约200 nm 1.40
利用光线
艾里斑与分辨率
分辨极限 无法分辨
损失光线
物镜产品案例
尼康CFI60物镜
CF：
Chromatic aberration Free（无色差）
I：
Infinity（无限远）
60：
齐焦距离 60mm （物镜长度）
通过物镜表示分辨物镜的特性
无标识：消色差 （Achromat）
Plan： 平场消色差
生产商
平场校正
（Plan Achromat）
放大倍数
——物镜在样本的上方
主要用于各类切 片的研究，尤其 多在病理切片观 察中使用。
2）倒置显微镜——物镜在样本的下方
由于培养细胞的广泛应用尤其在 基础研究领域倒置显微镜成为更
常用到的显微镜
3）体视显微镜
具有较低的放大倍数可观察更大的样品，具有连续变倍功能 与超长的工作距离，可在镜下进行各种操作。
工作距离
色环 校正环
前镜头装置
4）象差 色差 (Aberration),
（Chromatic Aberration ）
不同波长的光具有 不同的折射率，而 使焦点产生了偏移
真实图像
象差图像
红光焦点 绿光焦点 蓝光焦点
硅藻 色差图像
光学畸变可通过 制造工艺解决
平行白光
物镜
通过粘合不同折射率 的镜片而校正色差
1）明视场透射光观察
筒镜
（Brightfield）
物镜
样品 聚光器
投射光源
2）相差显微镜 (Phase Contrast Microscopy)
明场图像
直射光
物镜 样品 聚光器
成像面 折射光
相位板 相差环
相差图像
尼康切趾相差物镜（Apodized Phase Contrast）
——使象差观察的光晕减少一倍
照明部分 油灯
水瓶
样品架
目镜
黄铜镜筒
对焦旋钮 物镜
约1670年虎克所使 用的复合式显微镜， 其已具备现代显微 镜的所有部分。
显微镜原理
1）两次放大。第一次成 放大的实像，第二次成 放大的虚像。
2）样品处于物镜焦平面， 因而物镜与筒镜间形成 平行光线，中间距离可 无限延长（无限远光学 系统）。
3）成像在250mm明视 距离处。
“显微镜之父”
1600s
镜片 标本夹
晚
期
列
文
虎
克
所
制
造
的
单
镜
片
显
微
列文虎克绘制的木片结构
镜
复合式显微镜
在16世纪晚期荷兰人Janssen兄弟发明了第一台
复合式显微镜
第一台复合式显微镜由多 个镜片组成（约1595年）
物镜
镜筒
可通过抽拉镜筒改变镜 片的位置而完成对焦
目镜
复式显微镜光路图
复合式显微镜
罗伯特·虎克使用复合式显微 镜提出细胞（Cell）的概念
视野数 （mm）
聚光器（Condenser）
唯有均匀与高强度的照明才能获 得最佳的分辨率与良好对比度
样品
孔径光阑 视场光阑
August Kö hler
柯勒照明(Köhler Illumination)正解 决了这一问题
聚光器的调节
尼康首创复眼照明技术
形成多重光源是照明更加均匀
复眼照明
普通照明
常用显微镜观察方式