动植物细胞培养

②pH值 动物细胞合适的pH值一般在7.2～7.4，低于6.8或 高于7.6时都对细胞产生不利的影响，严重时可导致 细胞退变或死亡。原代培养细胞对pH值的变化耐受 性差，传代细胞对pH值变化的耐受性较强。对于大 多数细胞来说，偏酸性环境比碱性环境更有利于细 胞的生长。


③营养成分 营养物质包括碳源、氮源、氨基酸、无机盐、微量 元素、生长因子等。 ④渗透压等其它因素 渗透压对动物细胞也有影响。其他因素如血清、剪 切力等对细胞也有很大的影响。
4、多形性细胞型

除上述三种细胞外，还有一些组织和细胞，如神经 组织的细胞等，难以确定它们的稳定形态，可统归 多形性细胞。
5、悬浮型细胞

这类细胞常呈圆形，不贴附在支持物上，呈现悬浮 状态生长。如血液细胞，淋巴组织细胞及肿瘤细胞。 培养这类细胞也可采用微生物培养的方法进行悬浮 物培养。
二、动物细胞培养基


⑤支持物 体外培养的大多数动物细胞需在人工支持物上单层 生长，常用支持物有：玻璃、塑料制品、微载体 （聚苯乙烯、交联葡萄糖、聚丙烯酰胺、纤维素衍 生物、几丁质、明胶等）。 ⑥气体 氧气：气相中最重要的成分是氧气和二氧化碳。大 多数动物细胞培养适合于大气中的氧含量或更低些。 据报道，对培养基硒含量的要求与氧浓度有关，硒 有助于除去呈自由基状态的氧。在大规模细胞培养 中，氧可能成为细胞密度的限制因素。
疫苗
干扰素
单克隆抗体
遗传重组产品
动物细胞培养过程中的特征：



①生长速度慢，易受微生物污染，但可采用在培养 过程中加入抗生素等措施来解决。 ②细胞个体大且无壁，对环境敏感，因此应慎重解 决供氧（搅拌与通风）与细胞脆弱的矛盾。 ③设备放大是一新课题，不能完全按照微生物反应 过程的经验。 ④反应过程成本高，主要用于高附加值产物的生产。
1、动物细胞培养的环境要求 2、培养基组成 3、常用的合成培养基 4、培养基制备应考虑的因素

1、动物细胞培养的环境要求



①温度 来源不同的动物细胞，其最适的生长温度是不尽相 同的，昆虫细胞的最适温度是 25～28℃，人和哺乳 动物细胞的最适温度37℃。鸟类细胞在38.5℃时生 长最佳。 动物细胞对低温的耐受力比对高温的耐受力强，如 温度升至45℃时，1h内人和哺乳动物细胞将被杀死； 相反，降低温度把细胞置于25～35℃时，细胞仍能 生长，但速度减慢，并维持长时间不死。


与微生物相比植物细胞的特性：





1、细胞个大，细胞壁以纤维素为主要成分，耐拉不 耐扭，抗剪切能力低。 2、生长速率慢，为防止培养过程中染菌，需加抗 生素。 3、细胞培养需氧，但培养液黏度大，且不能强力 通风搅拌。 4、产物在细胞内，且产量低。 5、培养中细胞常生长成各种大小的团块，增加了 悬浮培养的难度。
第六章 动植物细胞培养




动植物细胞培养技术：将动植物组织、器官在适当 的培养基上进行离体培养的技术。 组织：指由结构和功能相似的细胞和细胞间质组成， 具有一定形态和生理功能的聚集体。 器官：指机体中具有特殊结构和完成特殊功能的分 化部分。 组织与器官培养：在人工条件下，使它们得以继续 生存或发展的一种培养方法。
植物细胞培养的工业化产品：
朝鲜参皂角苷、桉树油、生物碱等。 兰花等名贵花卉、紫杉醇等

植物细胞培养技术：

诱导子、前体饲喂、两相法培养、质体转化、 毛状根、冠瘿瘤组织培养，固定化技术。
第二节

动物细胞大规模培养
一、动物细胞的形态 二、动物细胞培养基 三、动物细胞培养方法 四、动物细胞培养技术和工艺
一、动物细胞的形态
1、成纤维细胞型 2、上皮细胞型 3、游走细胞型 4、多形性细胞型 5、悬浮型细胞

1、成纤维细胞型

这种细胞形态与体内成纤维细胞形态相似故 而得名。细胞体呈梭形或不规则三角形，中 央有圆形核，胞质向外伸出2～3个长短不同 的突起。如血管内皮、心肌、平滑肌、成骨 细胞等。
二、植物细胞培养特性


植物细胞培Байду номын сангаас发展历史
1902年，出生于奥地利的德国植物学家 G.Haberlandt预言植物细胞培养的可能性。 1937年，法国和美国科学家成功进行胡萝卜和烟草 的组织培养。 1954年，Muir等第一次进行植物细胞悬浮培养。 1966年，Klein指出利用植物细胞培养生产生化产品。
第一节



动植物细胞培养的特性
一、动物细胞培养的特性
技术发展历史：
1907年，美国，Harrison首次将蛙的神经组织在试管内培 养成功。 1950年，Enders及同事发表第一篇在培养细胞中生长病毒 的报告。 1972年，Knazek等创立中空纤维细胞培养技术，使细胞体 外培养扩展为大规模培养。 1986年，Demo生物公司用微囊化技术大规模培养杂交瘤 细胞生产单克隆抗体获得成功。 随后，动物细胞培养技术日趋完善。
2、上皮细胞型

细胞呈扁平的不规则三角形，中央有圆形核，生长 时常彼此紧密连接单层细胞片，起源于外胚层和内 胚层组织的细胞，如皮肤表皮及衍生物（汗腺、皮 脂腺等）。肠管上皮、肝、胰和肺泡上皮细胞。
3、游走细胞型

细胞的培养需要在支持物上生长，一般不连接成片， 细胞胞质经常出现伪足和突起，呈活跃的游走和变 形运动，速度快而且方向不规则。
大规模细胞培养的主要危害是微生物污染。




设备、培养基、悬浮系统和操作方法等的复杂性是 引起微生物污染的主要原因。 支原体的感染能力强，且不易检出，对动物细胞培 养的威胁最大。 大规模细胞培养需要有一个设备精良的细胞库（cell bank）。 动物细胞的脆性是导致培养控制复杂化的关键。
动物细胞培养 生产的产品




与微生物培养相比动物细胞培养特性：


1、动物细胞无细胞壁，机械强度低，适应环境能力差； 2、生长速度缓慢，易受微生物污染，培养时需要抗生素。 大多数哺乳动物细胞需附着在固体或半固体的表面才能生长； 3、对营养要求严格； 4、大规模培养时，不可简单地套用微生物培养的经验。 5、动物细胞培养基配方复杂，需补充血清和蛋白胨。