1 甲 醛甲苯联合染毒致小鼠微核作用的研究进展

甲醛甲苯联合染毒致小鼠微核作用的研究进展摘要甲醛是一种具有强烈刺激性气味的气体,由于其来源广泛、毒性效应终点多样、危害阈值低,被喻为生活中的隐形杀手,受到人们的普遍关注。

微核(micronucleus,MN)测定是一种简便快速的细胞遗传学检查方法。

微核试验是目前最常用的遗传毒理学试验之一，同时也可以用于生殖毒性的评价。

通过综述微核实验研究甲醛，甲苯的遗传毒性,为在分子水平探索甲醛和甲苯的遗传毒性机理奠定基础。

关键词甲醛；甲苯；遗传毒性；微核试验Abstract Formaldehyde is one kind has excitant odour of gas, strong due to its source and destination varied widely toxic effects, threshold low, is the birthplace of life, people invisible killer of common concern. Micronucleus (micronucleus, MN) is a simple and rapid determination method of genetics. Is the most commonly used micronucleus test of genetic testing, but also one of toxicology of reproductive toxicity assessment can be used. Through the review of formaldehyde, toluene micronuclear test research hereditary toxicity, at the molecular level for the exploration of formaldehyde and toluene hereditary toxicity mechanism lay the foundation.Key words Formaldehyde；Toluene；Hereditary；Micronucleus Test随着社会经济的高速发展，人们生活水平的不断提高，购房、居室装修已经成为人们改善生活条件，提高生活质量的重要手段。

随之而来的室内空气污染及其对人体健康的危害成为环境科学领域里一个重要问题。

由于人的一生约有80％以上的时间是在室内（住宅、办公室、学校、幼儿园、娱乐和体育场所、车上等）度过的，所以室内环境质量对于现代人尤为重要。

室内空气污染最常见、危害最大的是甲醛、苯等.甲醛和苯都是挥发性有机化合物,常共存于多种污染源中,对暴露人群发挥着联合的毒性效应。

二者不仅污染水平高,而且生物毒性大。

1.甲醛和甲苯的来源及对机体的危害1.1甲醛人体接触甲醛可分为内源性和外源性.内源性甲醛是由体内的一些氨基酸如丝氨酸、组氨酸、甘氨酸、精氨酸、甲硫氨酸、胆碱等代谢生成的。

外源性甲醛一方面由外源物质在体内的代谢产生如甲醇、甲胺、二甲醚等进人体内可氧化生成甲醛。

另一方面来源于:①生产或使用甲醛的工业废气、汽车尾气和光化学烟雾。

②建筑材料、室内装修材料、家具及吸烟、烹调油烟、燃料燃烧等是室内甲醛污染的主要来源。

③医院用于病房、仪器设备的消毒,解剖、病理实验室用于尸体、组织标本的固定和保存,口腔科的许多牙科材料。

④服装面料⑤食物中甲醛浓度超标。

低浓度的甲醛对健康不产生明显的危害,但是,长期接触较高含量的甲醛或短期接触大剂量的甲醛会对健康造成显著危害。

研究表明,甲醛可降低机体的呼吸功能、神经系统的信息整合功能和影响机体的免疫应答,对心血管系统、内分泌系统、消化系统、生殖系统、肾脏均具有毒性作用,并具有一定的遗传毒性。

尤其是对有哮喘病、过敏体质的人以及婴幼儿和孕妇影响较大。

大量文献研究表明，甲醛对人体健康的影响主要表现在嗅觉异常、刺激、过敏、肺功能异常、肝功能异常和免疫功能异常等方面。

曹霞飞，曹智丽，郑翔等的关于甲醛致胎鼠肝微核率及染色体畸变的研究表明甲醛可致胎鼠肝微核率与染色体畸变[1]。

缑祖新发现甲醛对免疫系统的影响是复杂的。

甲醛对机体细胞免疫、体液免疫、非特异性免疫均有抑制作用.提示甲醛是一种免疫抑制剂[2]。

据报道[3]，气态甲醛能诱导小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率和早期精细胞微核率增加,均呈现一定的剂量—反应关系。

还有研究表明[4]，气态甲醛能诱导外周血淋巴细胞微核率和肝细胞微核率增加,染毒组与对照组比均有显著性差异。

1.2甲苯室内甲苯污染主要来源于油漆和稀释剂的使用以及吸烟,并且发现室内甲苯浓度高于室外。

室内常见的苯系物包括苯、甲苯、乙苯、二甲苯等。

甲苯、二甲苯对皮肤和黏膜刺激性大,对神经系统损伤比苯强,长期接触有引起膀胱癌的可能。

还有研究表明，甲苯可以引起心脏的损伤[11]。

也有研究发现，甲苯对机体的免疫功能以及中枢神经系统都有影响。

2.甲醛，甲苯的遗传毒性(1)甲醛的遗传毒性甲醛来源广泛,具有遗传毒性,甲醛能引起人类细胞出现微核(micronuclei)和产生DNA -蛋白交联[1~2]。

甲醛在低浓度（50μmol/L）条件下不能明显诱导DPC 效应，而高浓度（100μmol/L及以上）甲醛可以明显诱导DPC的形成。

而且甲醛导致细胞的DPC效应可以得到较好的修复[3]。

还有研究表明，甲醛暴露可引起外周血淋巴细胞和肝细胞产生微核，具有远距离遗传毒性效应[4]；曹霞飞，曹智丽，郑翔等[5]的研究结果显示甲醛对胎鼠肝血微核率有影响,与阴性对照组相比,阳性对照组胎鼠肝血微核率及肝染色体畸变率显著增加(P< 0·01);甲醛染毒组除低剂量(0·20mg/kg)处理后的肝血微核率、染色体畸变率未见显著升高外,其余各剂量组的肝血微核率和染色体畸变率均有显著增加(P<0·01),且呈明显的剂量-效应关系。

(2)甲苯的遗传毒性宋辉，刘志宏,刘贺荣,李伯灵的研究表明[6]，甲苯进入人体后,可产生血液和遗传毒性。

赵国华,董定龙,王德启[5]等关于接触低浓度苯系混合物作业工人细胞微核率及染色体断裂率的观察表明，混合苯对作业工人遗传物质具有损害作用。

其损害程度随着接触时间呈递增趋势。

关于甲苯遗传毒性的研究,虽有报道,但尚无一致结论。

Funes2Gravioto 等报道甲苯接触者(375～750mg/ m3 ) 可发生染色体畸变与损伤[13] ,但也有学者认为作业工人长期接触甲苯后,其染色体损伤并不明显[14] 。

(3)甲醛和甲苯的联合染毒对机体的遗传毒性有研究表明，甲醛和苯系物均可引起体外培养细胞的DNA损伤，而且这种损伤作用具有剂量-效应关系。

由于研究方法和技术手段等因素的限制，目前对甲醛和甲苯的研究主要集中在单项化学物的毒作用，二者的联合毒性国内外涉及很少。

3.微核试验的研究动态及微核介绍微核试验创建微核试验创建于20世纪70年代中期(1973~1975)。

随着分子生物学技术的发展，拓展了微核试验的检测和应用范围。

微核实验已广泛应用于遗传、食品、药物、环境等多领域的遗传毒性评估,以及作为有害职业和生活环境暴露人群遗传损害的生物标志物。

总之，微核试验是反映染色体损伤的重要试验方法，已经成为检测药物，放射线，有毒物质的遗传毒性的常用试验方法。

有许多学者注意到，微核的形成与染色体部位有关。

微核的形成是细胞受遗传毒物作用后的一种遗传学终点，以观察细胞中的微核的形成来检测遗传物质，观察其出现的微核率（micronucleus frequency MNF）来反映遗传物质染色体损伤程度,是观察毒物对机体遗传效应影响的重要指标之一[10]。

微核试验在我国的应用经历了传入、推广、普及、高潮到回落的一个发展阶段,回顾我国的微核研究情况，在技术上和机理的研究方面有很多不足的地方。

随着微核试验检测范围的进一步拓宽,我国学者应加强对这一方法的研究,加大新技术示范与推广的力度,以缩小与国际同类研究的距离。

参考文献:(1)IPCS/WHO.ConciseInternationalChemicalAssessmentDocumentNo·40[R].Formaldehyde.Geneva,WorldHealthOrganization,2002.(2)Shaham JA. DNA -protein crosslinks, a biomarker of exposure toformaldehyde-in vitro and in vivo studies[J].Carcinogenesis, 1996,17(1): 121-25.(3)江中发，胡建国，张玲，李宁，袁春，张本廷.甲醛致A549细胞DNA-蛋白交联及其修复效应.环境与健康杂志.2009.26(10).(4)孙立平,李德志,刘志谋,等.大鼠骨髓嗜多染红细胞微核的流式细胞自动化检测[J].癌变畸变突变, 2004,16(3): 155-158, 182.(5)赵国华,董定龙,王德启,艾晓清,浦卫东,胡宝友,穆庆梅,李学东.接触低浓度苯系混合物作业工人细胞微核率及染色体断裂率的观察.现代预防医学.1997.24(4).(6)宋辉，刘志宏，刘贺荣，李伯灵.甲苯对血液及遗传的毒性研究.宁夏医学院院报.1997.19(4).(7)IPCS/WHO.ConciseInternationalChemicalAssessmentDocumentNo·40[R].Formaldehyde.Geneva,WorldHealthOrganization,2002.(8)Shaham JA. DNA -protein crosslinks, a biomarker of exposure toformaldehyde-in vitro and in vivo studies[J].Carcinogenesis, 1996,17(1): 121-25.(9))曹佳.微核试验在中国的应用、发展与展望.遗传.2003.25(1).(10)陈宏伟.微核及微核试验的应用与发展.Journal of Qiqihar Medical College ,2004.25(10).(11）孟昭伟1,韩冬1,穆进军2,张爱民2.甲苯急性染毒对小鼠心脏的影响.中国工业医学杂志.2010.23(1).(12) Heddle J A,Cimino M C,Hayashi M,et al.Micronuclei as an in-dex of cytogenetic damage:Past,Present and Future[J].Environ(13)Funes —Gravioto F , et al1 Chromosome aberrations and SCE in workers in chemical laboratoris and a rotoprinting factory and in children of woman laboratory workers. Lancet ,1977 ,2(8033) :322.(14)Douglas GA , et al. Toluene , WHO Study group on recommanded health —based limit in occupational exposure to selected organic solvents1Greneva ,198017 —24. (15) 雷玲，崔香丽，韩光，秦钢，崔凤金，曹慧芳，侯旭红，祝寿芬.甲醛在脏器中的含量与微核效应.中国公共卫生学报.1998.17(1).(16) Heddle J A.A rapidin vivotest for chromosomal damage[J].Mutat Res,1973,18:187~190.(17) 李晓东，柏建岭.甲醛对小鼠精子毒作用和微核作用的研究 .南通医学院学报.2004.24(1) .(18) 童智敏，朱士新，施健，杨红，孔璐，姜荣明，赵进顺.吸入甲醛对小鼠精子畸形率和骨髓细胞微核率的影响.预防医学论坛.2006.12(4).(19) Schmid W.The micronucleus test[J].Mutat Res,1975,31:9~15.(20) 谢颖，唐明德，易义珍，王伟.甲醛对雄性小鼠生殖细胞遗传物质的影响极其机制.工业卫生与职业病.2003.29(2).(21) 谢国辉，黄振辉，黄海雄，余淑宛.室内装修材料有机挥发物测定及微核试验观察.华南预防医学2002.28(4).(22) 李宏.微核的研究进展.安徽农业科学.2009.37(7).(23) 余明泽，欧世萍，蒋中仁.微核试验的应用进展.预防医学情报杂志.2006.22(6).(24) 刘杰，刘宏亮，王光学，严彦，李睿，杨旭.气态甲醛对小鼠不同组织器官SOD的抑制作用.[期刊论文]-环境与健康杂志.2003.(2).(25) 王爽，诸葛坚，余应年.微核与微核试验在遗传毒理学中的应用.癌变·畸变·突变.2000.12(4).(26）HeckH. Casanova M Phamaco dynamics of formaldehyde: applications of a model for the arrest of DNA replication by DNA-protein cross-link 1999.(27)邢卫平，赵恒奎，姜宗荣,微核及微核试验在遗传毒理学中的应用.安徽预防医学杂志.2002.8(5).(28 端礼荣，李君荣，陈传芬，邢光伟，后永根. 苯，甲苯，二甲苯对小鼠的骨髓细胞微核的联合作用. 镇江医学院学报 1996.6(4).(29)王晓平，段立菊，赵倩，李晨岚，杨旭.气态甲醛对小鼠微核作用的试验研究.现代预防医学.2006.33(1).(30)戎芬,原福胜,赵五红,白剑英,史晓丽.甲醛诱导小鼠骨髓细胞微核和DNA损伤的研究环境与健康杂志.2005.22..(31)曹佳,林真,余争平主编:微核试验———原理、方法及其在人群监测和毒性评价中的应用[M].北京:军事医学科学出版社,2000:1~9.。