食品中糖的测定方法
《食品中糖的测定方法》
《食品中糖的测定方法》糖是人体所需要的基本营养物质之一，天然食品中或经过加工的食品中均含有糖，因此测定食品中的糖含量是很有必要的。
本文将从常见的食品中糖的测定方法出发，详细介绍其原理及操作流程，包括显色法、高温反应法和比旋法等。
一、显色法显色法是当前最常用的测定糖含量的方法之一，适用于各种类型的糖，如单糖、双糖和多糖等。
该方法的原理是利用糖将某些金属阳离子还原为金属，而金属被还原后会显色，通过比色法来测定糖的含量。
操作流程：1. 食品样品称取适量，加入一定量的水，用搅拌器混合均匀。
2. 取一定量的样品溶液，加入适量的硫酸，然后加入稀酸性硫酸钾。
3. 将试管放入沸水中加热沸腾2~3分钟后冷却到室温，然后加入硼酸溶液，并用氢氧化钠调整pH值。
4. 添加一定量的柠檬酸铵和硫酸亚铁，摇晃5~10秒后，倒入定量瓶中，加入水至刻度并混合均匀。
5. 将比色皿放入波长648nm的分光光度计中，以纯蒸馏水为参比溶液进行调零，然后加入一定量的试液，记录吸光度。
6. 按照比色皿中的样品浓度计算出糖的含量。
二、高温反应法高温反应法通常适用于葡萄糖的测定。
该方法的原理是将葡萄糖在高温下与类似于尿素的化合物反应，生成有色产物，在一定波长下进行比色，从而测定葡萄糖的含量。
2. 将混合均匀的样品溶液倒入试管中，加入苏斯洛溶液和Copper-Tartrate液。
3. 摇晃混合均匀后，将试管放入加热水浴中，保持温度在95℃左右，反应30~40分钟。
4. 试管取出放置降温后，计算产生的颜色深度，并通过与标准溶液比色，计算出糖的含量。
三、比旋法比旋法是一种简单易行的方法，适用于多糖和单糖的测定。
该方法的原理是通过旋光仪测定糖分子的光学旋转，从而得到糖的含量。
2. 过滤处理得到无浮渣的取样液，将取样液置于旋光仪中测定旋光度。
3. 计算得到旋光度后，按照所测定糖的性质和种类进行计算出糖含量。
总之，每种测定方法都有其优势和局限性，选择适用于特定类型的食品的方法最为重要。
四种糖的测定方法
四种糖的测定方法
1. 莫尼酮试剂法（Benedict试剂法）
莫尼酮试剂法是测定还原性糖（如葡萄糖和果糖）的常用方法。
该方法利用莫尼酮试剂中的铜离子与还原性糖发生氧化还原反应，生成红色或黄色的沉淀。
根据沉淀的颜色来定量测定糖的含量。
2.酚硫酸法
酚硫酸法是测定非还原性糖（如蔗糖和乳糖）的一种方法。
该方法利用硫酸和酚的作用来将糖酸化，生成暗红色的化合物。
通过比色法来测定溶液的吸收值，然后通过标准曲线计算出糖的含量。
3.高效液相色谱法（HPLC）
高效液相色谱法是一种精确测定各种糖的含量和成分的方法。
该方法使用高效液相色谱仪来分离糖，并使用UV检测器来检测糖的吸收峰。
根据吸光度与浓度的关系，以及外部标准曲线，可以定量测定糖的含量。
4.旋光法
旋光法是一种测量光学活性糖（如葡萄糖和果糖）的方法。
光学活性糖分子可以使光线在通过时转动其振动平面。
旋光仪可以测量这种旋光现象，并根据旋转角度和样品底物的厚度来计算样品中的糖含量。
以上是四种常见的糖的测定方法。
根据不同的糖类和实验需求，可以选择适合的方法进行测定。
这些方法在食品工业、生化研究等领域起着重要作用，帮助人们更好地了解和利用糖的性质和功能。
食品中总糖的测定
食品中总糖的测定在食品中测定总糖含量是非常重要的，因为糖是食品中常见的能量来源之一。
在食品中准确测定总糖含量能帮助人们更好地控制摄入的糖量，从而维持健康的饮食习惯。
下面将介绍几种常见的测定总糖含量的方法。
1. 高效液相色谱法（HPLC）：这是一种常用的食品分析方法，可以准确地测定食品中的糖含量。
该方法通过将食品中的糖分离，并利用色谱柱进行分析。
HPLC方法能够同时检测多种糖类物质，包括单糖、双糖和多糖。
2. 光学旋光法：这是一种基于糖类物质旋光性质的测定方法。
糖类物质对光的旋光性质与其化学结构密切相关，因此通过测量旋光角度可以推测出糖类物质的含量。
这种方法通常适用于单糖的测定。
3. 酶法：酶法是一种常用的测定食品中总糖含量的方法，它基于特定酶与糖类物质发生反应的原理。
常用的酶法包括葡萄糖氧化酶法和酶解法。
葡萄糖氧化酶法通过测定检测的光密度，从而确定食品中葡萄糖的含量。
酶解法则通过将糖类物质与特定酶进行反应，产生可检测的产物来测定总糖含量。
4. 色层分析法：这是一种常见的半定量测定糖类物质含量的方法。
色层分析法通过将食品样品与试剂反应，然后在色层板上通过比较颜色的强度和形状来推测出糖类物质的含量。
这种方法操作简单、成本较低，但精确度相对较低。
以上只是几种常见的测定总糖含量的方法，实际上还有许多其他的方法可以用于测定糖类物质的含量。
在具体进行测定时，一般需要根据样品的特点和分析要求选择适合的方法。
此外，在测定过程中还需要注意一些影响测定结果的因素，例如样品的制备、仪器的校准和样品的存储等。
通过合理选择测定方法和注意测定过程中的细节，可以准确地测定出食品中的总糖含量。
食品中糖含量的测定方法研究
食品中糖含量的测定方法研究糖作为一种常见的食物成分，在食品中扮演着重要的角色。
然而，过多的糖摄入对健康有害。
因此，准确测定食品中糖的含量是非常重要的。
本文就食品中糖含量的测定方法进行研究。
一、高效液相色谱法高效液相色谱法是目前最常用的测定食品中糖含量的方法之一。
该方法通过将样品中的糖分离并使用色谱柱进行定性和定量分析。
高效液相色谱法有准确度高、分析速度快等优点，已经被广泛应用于食品质量检测。
二、酶法测定法酶法测定法是一种通过酶促反应来测定糖含量的方法。
该方法通过将样品与特定的酶底物反应生成可测定的产物来测定糖的含量。
酶法测定法具有反应性强、准确性高等优点，但需要较长的分析时间。
三、红外光谱法红外光谱法是一种基于糖分子对红外光的吸收和散射的特性来测定糖含量的方法。
该方法具有快速、非破坏性等特点，可以对样品进行迅速的分析。
然而，红外光谱法在某些食品样品中存在干扰物质的问题，因此需要进一步改进。
四、核磁共振法核磁共振法是一种通过测定磁共振信号来确定糖含量的方法。
该方法具有高分辨率、非破坏性等特点，可以对样品进行准确的定量分析。
然而，核磁共振法的设备昂贵且复杂，不易在所有实验室中广泛应用。
五、电化学法电化学法是一种基于糖分子在电化学反应中的电子转移特性来测定糖含量的方法。
该方法具有高灵敏度、准确性高等优点，已经成为一种常用的食品中糖含量测定方法。
然而，电化学法在某些食品样品中存在样品处理和电极选择的问题。
综上所述，食品中糖含量的测定方法有多种选择，每种方法都有其特点和局限性。
在实际应用中，我们可以根据具体情况选择合适的测定方法。
随着科学技术的不断进步，未来可能会出现更加准确和快速的测定方法，为食品质量检测提供更大的便利和贡献。
食品中总糖的测定国标的方法
食品中总糖的测定国标的方法一、糕点、糖果中还原糖的测定1、直接滴定法1）原理：样品经除去蛋白质后，在加热条件下，直接滴定经标定的碱性酒石酸铜溶液，还原糖将二价铜还原为氧化亚铜。
以亚甲基蓝为指示剂，在终点稍过量的还原糖将蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无色的还原型亚甲基蓝，根据试样所消耗的体积计算还原糖的含量。
直接滴定法已经过多次改进，只要严格遵守实验条件，分析结果的准确度和重现性是能够满足定量分析的要求。
2）试剂①费林氏剂甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O）及0.05g四甲基蓝，溶于水中并稀释至1000ml。
②费林氏剂乙液：称取50g酒石酸钾钠及75gNaOH，溶于水中，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000ml，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
③乙酸锌溶液：称取乙酸锌结晶21.9g，加3ml冰醋酸，加水溶解至100ml。
④106g/l亚铁氰化钾溶液。
⑤葡萄糖标准溶液：准确称取1.0000g经过96±2℃干燥2h的纯葡萄糖，加水溶解后加入5mlHCl,并以水稀释至1000ml。
此溶液每1ml相当于1.0mg葡萄糖。
3）操作方法①样品处理：准确称取样品（粉碎后的）2.5~5.0g置于250ml容量瓶中，加水50ml，摇匀后慢慢加入5ml乙酸锌溶液，混匀后再慢慢加入5ml亚铁氰化钾溶液，振摇，加水定容并摇匀后静置30min，用干滤纸过滤，弃去初始滤液，过滤液备用。
②标定碱性酒石酸铜溶液：吸取 5.00ml碱性酒石酸铜甲液及5.00ml碱性酒石酸铜乙液，置于250ml锥形瓶中，加水10ml，加入玻璃珠3粒，从滴定管加约9ml标准葡萄糖液，使其在2min内加热至沸。
趁热以0.5滴/s的速度继续滴加糖液，直至溶液颜色刚好褪去为终点，记录消耗葡萄糖液的体积。
平行操作3次，得m平均消耗葡萄糖液的体积。
计算每10ml(甲、乙各5ml)碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量（mg），即m＝v×c式中m——10ml碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量（mg）v——标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积c——葡萄糖标准溶液的浓度（mg/ml）③样品溶液的预测定：吸取费林氏甲、乙液各5ml，置于150ml 三角瓶中，加水10ml、玻璃珠2粒，控制在2min内加热至沸，趁沸以先快后慢的速度，从滴定管中加样液，趁沸以0.5滴/s的速度继续滴定至蓝色刚好褪去为终点，记录消耗样液的体积。
食品中总糖、还原糖的测定
食品中转化糖（总糖）、还原糖的测定1安全性评估谨防试剂灼伤：加入碱性酒石酸铜甲乙液、20%氢氧化钠和2%盐酸试剂时，需佩戴一次性乳胶手套。
谨防玻璃割伤：使用前检查玻璃仪器外观完好无损，使用时注意轻拿轻放，清洗时，需佩戴防割手套。
谨防高温烫伤：滴定时，调节滴定管滴定速度的手需佩戴涂脂手套/一次性乳胶手套，且不裸露手腕皮肤，双手不碰及电陶炉表面。
2 目的规范食品中转化糖（总糖）、还原糖的检测流程，确保检测结果的准确性。
3 范围适用于各类食品中转化糖（总糖）、还原糖的测定。
4 依据参照GB 5009.7 - 2016食品安全国家标准食品中还原糖的测定、GB 5009.8 - 2016食品安全国家标准食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定。
5 检测原理还原糖（直接滴定法）：试样经除去蛋白质后，在加热条件下，以亚甲基蓝作指示剂，滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液（用葡萄糖标准溶液标定），根据样品液消耗体积计算还原糖含量。
转化糖（总糖）（酸水解-莱茵-埃农氏法）：试样经除去蛋白质后，其中蔗糖经盐酸水解转化为还原糖，再按还原糖测定，根据样品液消耗体积计算转化糖（总糖）含量。
注：①为消除氧化亚铜沉淀对滴定终点观察的干扰，在碱性酒石酸铜乙液中加入少量亚铁氰化钾，使之与Cu2O生成可溶性的无色络合物，而不再析出红色沉淀，其反应如下：Cu2O↓+K4Fe(CN)6+H2O=K2Cu2Fe(CN)6+2KOH②碱性酒石酸铜甲液和乙液应分别贮存，用时才混合，否则酒石酸钾钠铜络合物长期在碱性条件下会慢慢分解析出氧化亚铜沉淀，使试剂有效浓度降低。
6 试剂和仪器：实验室三级用水6.1 试剂2 %盐酸溶液，20 %氢氧化钠溶液，碱性酒石酸铜溶液：碱性酒石酸铜甲液（以下简称A 液）（硫酸铜+亚甲基蓝）+碱性酒石酸铜乙液（以下简称B液）（酒石酸钾钠+氢氧化钠+亚铁氰化钾），乙酸锌溶液（219 g/L），亚铁氰化钾溶液（106 g/L），葡萄糖标准溶液。
食品中糖类成分浓度的测定与分析
食品中糖类成分浓度的测定与分析糖是人体能量的重要来源，然而，在现代社会，随着人们生活水平的提高和口味的变化，食品中的糖类成分含量呈现出迅猛增长的态势。
高糖饮食被认为是引发肥胖、糖尿病等健康问题的主要原因之一，因此，研究食品中糖的含量成为一项重要的课题。
食品中的糖类主要包括单糖、双糖和多糖，如葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖等。
为了准确测定食品中糖类的含量，科学家们制定了一系列的测定方法和分析技术。
目前，常用的方法有色谱法、质谱法、光谱法等。
其中，高效液相色谱法（HPLC）是一种较为准确和常用的测定方法。
该方法通过将待测样品与特定溶剂混合，采用高压将样品溶液通过分离柱，分离出不同成分，再通过检测器测定各个成分的浓度。
通过与标准品进行对比，可以得出样品中糖类成分的浓度。
此外，质谱法也是一种常用的分析技术。
质谱法通过将样品中的糖分子离子化，利用离子的质量-电荷比进行分析。
与HPLC相比，质谱法具有分析速度快、灵敏度高等优点，但也需要更加复杂的仪器设备和样品预处理步骤。
光谱法是一种非常直观和快速的测定方法，通过光的吸收和散射来测量样品中糖的浓度。
常用的光谱法有紫外-可见光谱法和红外光谱法。
紫外-可见光谱法适用于分析具有吸收特性的糖类，通过测量光的吸收程度来间接计算糖的浓度。
红外光谱法则通过测定样品中糖类分子的振动频率来分析糖的种类和含量。
除了以上几种常见的测定方法和分析技术，还有一些新兴的方法被广泛应用于食品中糖类成分的测定与分析。
比如，生化传感器技术能够快速、准确地测定食品中的糖类成分。
通过将特定的酶固定在传感器表面，当样品中的糖分子与酶反应时，可以产生显著的电化学信号。
通过测量这些信号的变化，可以推算出样品中糖类的浓度。
食品中糖类成分的测定与分析不仅对于食品行业具有重要意义，也对于人们的健康有着直接的影响。
通过准确测定食品中糖类的含量，可以帮助人们科学合理地进行饮食搭配，减少糖的摄入量，预防疾病的发生。
未来，随着科学技术的不断进步，食品中糖类成分浓度的测定与分析方法也将越来越多样化、准确和方便。
糖度检测方法标准
糖度检测方法标准糖度是描述溶液中糖分浓度的一个重要指标，对于食品加工、农业种植、酿酒等行业来说，糖度的准确测量是非常关键的。
本文将介绍几种常见的糖度检测方法及其标准，以及各种方法的优缺点和适用范围。
一、折光法折光法是一种常用的糖度检测方法，通过测量溶液的折射率来确定糖度。
根据不同的糖度测量范围，可以选择不同的仪器。
常见的折光仪有手持式折光仪和台式折光仪。
使用折光仪时，首先需要根据仪器的要求进行校准，然后将样品放入测量池中，仪器会自动显示糖度值。
折光法测量糖度的优点是快速、准确，适用于各种类型的溶液。
二、密度法密度法是通过测量溶液的密度来确定糖度，是一种简单实用的糖度检测方法。
常见的密度计有玻璃密度计和数字密度计。
使用密度计测量时，首先需要根据仪器的要求进行校准，然后将样品放入密度计中，仪器会自动显示糖度值。
密度法测量糖度的优点是简便易行，适用于各种类型的溶液。
三、滴定法滴定法是一种常见的定量分析方法，也可以用于测量糖度。
滴定法的原理是将标准溶液滴定到待测溶液中，通过滴定液的消耗量来确定糖度。
滴定法需要使用一定量的标准溶液和指示剂。
测量时，先将待测溶液与指示剂混合，然后滴加标准溶液，直到指示剂的颜色发生变化。
滴定法测量糖度的优点是准确可靠，适用于各种类型的溶液，但操作相对复杂。
四、红外光谱法红外光谱法是一种非常准确的糖度检测方法，通过测量溶液中糖分特征吸收峰的强度来确定糖度。
红外光谱仪是一种高精度的仪器，可以提供详细的红外光谱图。
使用红外光谱法测量时，首先需要将样品制成固体或液体，然后放入红外光谱仪中进行测量。
红外光谱法测量糖度的优点是准确性高，可以提供更多的理化信息，适用于各种类型的溶液。
以上是几种常见的糖度检测方法及其标准。
不同的方法适用于不同的场景，在选择糖度检测方法时，需要根据实际需求和条件选择合适的方法。
同时，在进行糖度检测时，还需要注意仪器的校准和样品的处理，以确保测量结果的准确性和可靠性。
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食品中糖的测定方法对于糖的测定方法有很多，大致可分为三类1.物理法，〔1.旋光法, 2 .折光法, 3.比重法,〕2.物理化学法,(1.点位法, 2极普法,3.光度法,4.色谱法)3.化学方法,(1.斐林氏法. 2.高锰酸钾法. 3.碘量法.4.铁氰化钾法.5.蒽铜比色法.6.咔唑比色法)共计三大种，在测定其他碳水化合物时，往往是使其水解为糖再进行测定。
一. 总糖的测定食品中的总糖主要指具有复原性的葡萄糖，果糖，戊糖，乳糖和在测定条件下能水解为复原性的单糖的蔗糖〔水解后为1分子葡萄糖和1分子果糖〕，麦芽糖〔水解后为2分子葡萄糖〕以及可能部分水解的淀粉〔水解后为2分子葡萄糖〕。
复原糖类之所以具有复原性是由于分子中含有游离的醛基〔-CHO〕或酮基(=C=O)。
测定总糖的经典化学方法都是以其能被各种试剂氧化为基础的。
这些方法中，以各种根据斐林氏溶液的氧化作用的改良法的应用范围最广。
在这里我们主要给大家介绍铁氰化钾法，蒽铜比色法，斐林氏容量法。
斐林氏容量法由于反应复杂，影响因素较多，所以不如铁氰化钾法准确，但其操作简单迅速，试剂稳定，故被广泛采用。
蒽铜比色法要求比色时糖液浓度在一定范围内，但要求检测液澄清，此外，在大多数情况下，测定要求不包括淀粉和糊精，这就要在测定前将淀粉，糊精去掉，这样就使操作复杂化，限制了其广泛应用。
〔一〕铁氰化钾法1.原理：样品中原有的和水解后产生的转化糖都具有复原性质，在碱性溶液中能将铁氰化钾复原，根据铁氰化钾的浓度和检验滴定量可计算出含糖量。
其反应为下：C6H12O6+6K3[Fe(CN)6] + 6KOH →(CHOH)4•(COOH)2 + 6K4［Fe(CN)6］+ 4H2O滴定终了时，稍过量的转化糖即将指示剂次甲基兰复原为无色的隐色体。
2，试剂1〕1％的次甲基兰指示剂2)盐酸〔水解作用〕3〕10％和30％的NaOH溶液4〕1％铁氰化钾〔贮存特色瓶，临用前标定〕标定步骤称蔗糖→定容500ml→取此液50ml→于100ml容量瓶→加hcl5ml→摇匀→65-70℃水裕15分钟→取出冷却→用30％NaOH中和→加水于刻度→倒入滴定管中→取10ml1％铁氰化钾于锥形瓶中→加10％NaOH2.5ml加12.5ml的水加玻璃珠颗粒→加热至沸→保持一分钟→加次甲基兰1滴→立即以糖液滴足至蓝色退去为止，记录用量。
正式滴定比较滴定时少0.5ml糖液，煮沸1分钟，加指示剂一滴，再用糖液滴定至兰色褪去，计算铁氰化钾溶液的浓度。
A=(W•V)/(1000×0.95)A：相当于10ml铁氰化钾溶液的转化糖的量〔克〕V：滴定时消耗的糖液的体积W：称取纯蔗糖的量1000：稀释比0.95：换算等数3．操作方法稀释10g→用100ml水作溶液→于250ml容量瓶→加20％醋酸铅10ml→至沉淀完为止→加10ml10％NA2HPO4→至不在产生沉淀为止→加水至刻度→过滤－取滤液50ml→于100ml容量瓶中→按铁氰化钾标定法进行转化，中和及滴定计算糖含量总糖〔以转化糖计%〕= (A × 1000)/(W•V)× 100A：相当于10ml铁氰化钾溶液的转化糖的重量，W：样品的重量V：滴定时样液消耗的体积4．实验应注意〔a〕达终点时，过量的转化糖将指示剂次甲基兰复原为无色的隐色体，隐色体容量受空气中氧所氧化，很快又变成指示剂的颜色。
〔b〕整个过程应在低温电炉上进行，滴定要速度，否则终点不明显〔c〕糖与硫酸反应脱水生成羟甲基呋喃甲醛，生产物再与蒽铜缩合成兰色化合物，其颜色深浅与溶液中糖的浓度成正比，单、双糖等糖类都直接于试剂发生作用，因此不需要水解。
〔二〕蒽铜的比色法1.原理：糖与硫酸反应脱水生成羟甲基呋喃甲醛，生产物再与蒽铜缩合成兰色化合物，其颜色深浅与溶液中糖的浓度成正比，可比色定量。
2.试剂〔1〕硫酸锌溶液：溶解500g化学纯硫酸锌于500ml水中〔2〕亚铁氰化钾溶液：溶解化学纯亚铁氰化钾于100ml水中〔3〕 0.2％蒽铜试剂：溶解蒽铜于100ml95％硫酸中，置棕色瓶中冷暗处保存〔4〕 0.1％葡萄糖液：准确称干燥葡萄糖定容100ml3.操作方法〔1〕标准曲线绘制〔2〕 100ml容量瓶编号沸水浴加热6分钟，取出冷却→用1cm比色杯→610nm测定吸光度→作出以吸光度为横坐标，糖液浓度为纵坐标的准曲线〔3〕样品测定称10g样品→于100ml热水加入500ml容量瓶中－加硫酸锌5ml→沸水浴5分钟→取出再摇动下加亚铁氰化钾5ml，→冷却→定容500ml→过滤→吸滤液25ml→于250ml容量瓶→定容250ml→取稀释液1ml，于比色管中→加10ml蒽铜试剂→摇匀→水浴加热6分钟→冷却→比色试验注意1，样液必须清澈透明，加热后不应有蛋白质沉淀2，样品颜色较深时，可用活性炭脱色后再进行测定3，此法与所用的硫酸浓度和加热时间有关4，所取糖液浓度在1-2.5mg/100ml之间二. 复原糖的测定方法复原糖包括葡萄糖、果糖、麦芽糖，在葡萄糖分子中含有淤青的醛茎，在果糖分子中含有淤青的酮茎，在乳糖中和麦芽糖中含有淤青的半缩羧茎，因此都有复原性。
在测定复原糖时一般测定总糖时所有将糖类水解为转化糖再测定的方法都可用来测定复原糖。
〔一〕斐林氏容量法1.此法的原理、试剂、方法与总糖的测定方法相同。
只是样品溶液不必以过转化，而是直接取滤液进行滴定，滤液进行滴定，滤液中的复原糖含量以在0.2-0.5%为好，又能通过增减样品量或改变稀释倍数来调节。
10毫升费林氏A、B 液混合时理论上相当复原糖量如下：葡萄糖〔无水〕果糖或转化糖尿病乳糖尿病麦芽糖2试剂〔1〕斐林氏A液，称 cp硫酸铜于100ml水中，过滤备用〔2〕斐林氏B液，称.cp浓流锌钠和100gcp NaOH于1000ml水中，过滤备用3方法称取样品10-20g：制备与转化同铁氰化钾法。
将样液倒入滴管中，吸取A,B液准备预滴定预滴定：吸A、B液各5ml→从滴管中加15ml样液→加热至沸→继续滴加样液→至兰色变潜→加3滴次甲基兰→在1分钟内滴定到终点到达终点时，稍微过量的转化糖，将兰色的次甲基兰染色体复原为无色的隐色体，而显出氧化亚铜的红色，去碱性条件下加热糖的产物是复杂的。
去碱性中断裂是由于碱度不同，加热时间不同，生产不等的碎片，这种碎片给后面滴定带来误差，而且，这种碎片与糖没有化合量的关系，所以，Lanecrol-Eynon Method 作出数据检索表正式滴定：吸A,B液各5ml→于三角瓶→加比预定量少0.5-1.0ml样液→2分钟内要求沸腾1分钟→加3滴指示剂→用样液滴定兰色消失总沸腾时间为3分钟，即滴定在3分钟完成。
计算：复原糖＝( F•V2)/(W•V1)×100F→用水溶解称取250ml容量瓶中→定容→吸50ml于100ml 定量瓶中→加HCL5ml→再65-70摄氏度水裕15分钟→冷却→用30％NaOH中和→定容准确吸A,B液各5ml于三角瓶中→加水约50ml玻璃珠三粒→加热至沸→保持1分钟→加指示剂1滴→再煮1分钟→立即用糖液滴定至兰色褪去，红色出现即为终点正式滴定，先加入比预滴定时少0.5ml左右得糖液煮沸1分钟→加指示剂1滴→再煮沸1分钟→继续滴至终点计算： A＝W*V/500×0.95A：相当于10ml斐林氏A、B液的转化糖的量W：称取蔗糖的质量V ：滴定蔗糖的量500：稀释比0.95：换算等数最后计算：总糖〔复原糖测定时样品溶液的消耗体积应该与标定葡萄糖标液的消耗体积相近，通过测定了解样品浓度是否合适，浓度过大或过小应该加以调整，使测定时消耗样品溶液量在10毫升左右；二是通过测定可知道此溶液的大概消耗量，以便在正式的滴定时，预先加入比实际用量少1毫升左右的样液，只留下1ml左右的样液在续滴定时加入，以便保证在1分钟内完成续滴定工作，提交预测定的准确度。
2.此实验影响测定结果的主要操作因素是反应液碱度、热源强度，煮沸时间和滴定速度一般煮沸时间短消耗糖多，反之，消耗糖液少，滴定速度过快，消耗糖量多，反之，消耗糖量少。
另外溶液碱度愈高，二价铜的复原愈快，因此必须严格控制反应的体积〕以转化糖计%=〔A*1000/W*V〕*100A：同上W：制取样品的量V：滴定是时样品消耗量1000：是稀释倍数〔100/50*500〕1.预测定的目的：对样品溶液中复原糖浓度有一定要要求〔0.1%左右〕，，使反应体系碱度一致。
热源一般采用800W 电炉，反应液在2秒内沸腾。
〔二〕KMNO4〔高锰酸钾法〕1．原理，复原糖在碱性溶液中使铜盐复原成氧化亚铜，在酸性条件下，氧化亚铜能使硫酸铁复原为硫酸亚铁，再用KMNO4溶液滴定硫酸亚铁，即可标出复原糖的量。
2. 操作方法〔1〕样品处理a. 乳糖：包括乳制品以及含蛋白质的冷食类称样2-5g〔液体样25~50ml〕→于250ml容量瓶→加水50ml→加A液10ml+1N NaOH 4ml →定容→静置30秒→过滤→弃去初液→可测复原糖及蔗糖用。
b. 低酒度饮料：麦精露、各类汽酒等饮料。
先暴气除CO2→取100ml→于蒸发皿中→用1 N NaOH 中和→沸水浴蒸至原体积四分之→转入250ml容量瓶→加50ml 水→摇匀→〔加A液10ml→加1 N NaOH 4ml〕→加水至刻度→静置30秒→过滤。
c. 含多量淀粉的食品：婴儿食品、糕干粉、宝宝乐、代乳粉、饼干、面包、糕点等称样10-20g→250ml容量瓶→加水200ml→45度水浴加热1小时→不停摇动→冷后加水至刻度→静置→吸出清夜200ml 于另一容量瓶〔250ml〕→加A液10ml+1N NaOH 4ml→静置30秒→过滤。
d. 汽水、果露、国产七种可乐及可口可乐处理CO2→吸样液100ml→于250ml容量瓶→加水至刻度→可测复原糖及蔗糖。
〔2〕测定方法取50ml处理的样液→于400ml烧杯→加A、B液各25ml→加热在4min左右沸腾→再煮2min→趁热抽滤→用60℃水洗烧杯和沉淀→直到洗液不成碱性→将抽滤的纸〔或者石棉〕及Cu2O→转入原来烧杯→用25ml硫酸铁溶液冲洗抽滤瓶→使冲洗液全部洗入原烧杯中→加水25ml→使Cu2O溶解→用0.1N KMnO4标液滴定至微红色，同时用50ml水按上述方法做空白实验。
〔3〕计算3. 注意事项：〔1〕煮沸后的溶液显红色不显兰色，则表示糖量高，可减少取样体积。
〔2〕在洗涤Cu2O的整个过程中应使沉淀上层保持一层水层，以隔绝空气，防止Cu2O被空气中的氧所氧化。
〔3〕此法适用于各类食品中复原糖的测定，有色样液不受限制，准确度高，重现性好。
准确性和重现性都优于直接滴定法，但操作复杂、费时，需使用特制的高锰酸钾法糖类检索表。
〔二〕直接滴定法〔斐林氏溶液凯氏定氮样品与浓硫酸共热。