叶绿素的超声波辅助提取及组成分析
叶绿素的提纯实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解叶绿素的结构和性质。
2. 掌握叶绿素的提取和提纯方法。
3. 学习利用有机溶剂提取叶绿素，并通过色谱法进行分离和纯化。
二、实验原理叶绿素是绿色植物中进行光合作用的重要色素，主要由叶绿素a和叶绿素b组成。
叶绿素不溶于水，但可溶于有机溶剂，如乙醇、丙酮等。
通过提取和提纯，可以得到高纯度的叶绿素，为进一步研究其性质和作用提供条件。
实验过程中，首先将植物叶片用有机溶剂提取叶绿素，然后通过层析法分离叶绿素和其他色素，最后收集纯化的叶绿素。
三、实验器材1. 新鲜植物叶片（如菠菜、青菜等）2. 研钵、研杵3. 乙醇、丙酮（分析纯）4. 层析柱、层析板5. 滤纸、脱脂棉6. 移液管、滴管7. 恒温水浴锅8. 显微镜9. 紫外-可见分光光度计四、实验步骤1. 提取叶绿素（1）取新鲜植物叶片，用剪刀剪碎，放入研钵中。
（2）加入适量乙醇和丙酮（体积比1:1），研磨至匀浆。
（3）将匀浆倒入分液漏斗，静置分层。
（4）收集有机层，用无水硫酸钠干燥。
（5）过滤，得到叶绿素提取液。
2. 分离叶绿素（1）将层析板放入层析柱中，在底部铺一层脱脂棉。
（2）取适量叶绿素提取液，用移液管滴加于层析板上，确保液面低于层析板边缘。
（3）选择合适的溶剂系统，如正己烷-乙酸乙酯（体积比4:1）。
（4）将溶剂滴加于层析板上，观察层析过程，直至溶剂前沿到达预定位置。
（5）取出层析板，用铅笔标记层析结果。
3. 收集纯化叶绿素（1）用移液管收集叶绿素层，倒入小烧杯中。
（2）加入少量乙醇，搅拌均匀。
（3）用滤纸过滤，收集滤液。
（4）将滤液倒入蒸发皿中，用恒温水浴锅蒸干。
（5）用少量乙醇溶解残留物，得到纯化叶绿素。
五、实验结果与分析1. 叶绿素提取：通过有机溶剂提取，可以得到绿色叶片提取物，表明叶绿素已从植物叶片中提取出来。
2. 叶绿素分离：通过层析法，可以将叶绿素与其他色素分离，证明叶绿素具有独特的性质。
3. 叶绿素纯化：通过蒸发和溶解，可以得到纯化的叶绿素，说明实验过程中叶绿素得到了有效的纯化。
响应面法优化超声波提取构树叶中叶绿素的工艺研究
响应面法优化超声波提取构树叶中叶绿素的工艺研究
超声波提取法是靠超声波的反复振动和高频能量将物料内的有用成分分离出来的一种提取方法。
在植物营养学和药用植物研究中，常常需要从植物中提取叶绿素等活性成分，超声波提取法是一种快速、高效的方法。
本文通过响应面法对超声波提取法优化构树叶中叶绿素提取工艺进行探讨。
1. 实验方法
（1）材料准备：采集构树叶，用水清洗干净后，切成小块备用。
（2）实验操作：按照正交表设计，设置提取温度、提取时间、超声波功率三个因素的不同水平，共进行15个试验组，每个
试验组采用超声波提取法提取叶绿素，并测定提取效果。
（3）测定方法：用纯酒精提取叶绿素，通过紫外-可见分光光
度计，测定提取液在470nm处的吸光值（OD470），即为叶
绿素含量。
2. 实验结果
根据15个试验组的实验结果，通过SPSS统计软件进行响应
面分析和多元回归分析，得到了优化的超声波提取叶绿素的工艺条件。
在本次实验中，温度（A）、时间（B）、超声波功率（C）
对叶绿素的提取率均有显著影响，其中超声波功率的影响最大，温度和时间的相对影响较小。
在温度60℃、时间15min、超声波功率200W的条件下，叶绿素的提取率最高，达到了2.8%。
3. 总结
本研究通过响应面法优化了超声波提取构树叶中叶绿素的工艺条件，得到了最佳的提取条件：温度60℃、时间15min、超
声波功率200W。
与传统的叶绿素提取方法相比，超声波提取
法具有提取效率高、操作方便等优点，可为绿色食品和药品的开发提供新思路和新方法。
3、超声波辅助提取绿原酸是利用的原理
超声波辅助提取绿原酸是一种新兴的提取方法，利用超声波在提取过程中产生的物理、化学和生物效应，以提高绿原酸的提取效率和质量。
在这篇文章中，我将详细探讨超声波辅助提取绿原酸的原理，并共享个人对这一主题的理解和观点。
1. 超声波的作用原理超声波是一种机械波，其频率高于20kHz，可以在液体中产生强大的机械振动。
在超声波场中，液体分子受到高频振动的作用，产生剧烈的运动和碰撞，从而导致液体内部产生剧烈的涡流和剪切力。
这些物理效应可以破坏植物细胞结构，并促进细胞内物质的迁移和扩散，有利于提取目标化合物。
2. 超声波辅助提取绿原酸的原理绿原酸是一种重要的生物活性物质，广泛存在于植物中。
传统的提取方法存在提取效率低、提取时间长、操作复杂等问题。
而超声波辅助提取绿原酸可以利用超声波的作用原理，加速绿原酸从植物材料中的释放和迁移。
超声波的机械振动可以破坏植物细胞壁，使得绿原酸更容易释放到溶剂中。
超声波还可以提高溶剂的渗透性，促进绿原酸在溶剂中的溶解和扩散，提高提取效率和速度。
3. 个人观点和理解我认为超声波辅助提取绿原酸是一种非常有前景的提取方法。
与传统的热提取和搅拌提取相比，超声波辅助提取具有操作简便、提取效率高、提取时间短等优点。
超声波提取的过程中，由于温度相对较低，可以有效地避免热敏化物质的分解和氧化，有利于提取物质的保护。
我对超声波辅助提取绿原酸的前景非常乐观。
4. 总结和回顾在本文中，我首先介绍了超声波的作用原理，然后详细阐述了超声波辅助提取绿原酸的原理和优势，并共享了个人的观点和理解。
通过本文的阅读，相信读者对超声波辅助提取绿原酸的原理和应用有了更深入的了解。
总体而言，超声波辅助提取绿原酸是一种具有广阔应用前景的新兴提取方法，我相信随着科学技术的不断进步，超声波在植物提取领域的应用将会越来越广泛。
希望本文能够对读者有所帮助，谢谢！这篇文章共计795字。
超声波辅助提取绿原酸在植物提取领域的应用超声波辅助提取绿原酸作为一种新兴的提取方法，具有许多优势和应用前景。
叶绿素的提取与分析测定
叶绿素的提取与分析测定叶绿素的提取与分析测定是一项重要的生物技术实验，主要用于研究植物光合作用中的重要色素——叶绿素。
下面将详细介绍实验的步骤、方法和数据分析。
一、实验目的本实验旨在提取和分析测定叶绿素，了解其在植物光合作用中的重要作用，并为进一步研究植物生长和发育提供基础数据。
二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的主要色素，它能够吸收太阳光能，并将其转化为化学能，为植物的生长和发育提供能量。
叶绿素广泛存在于植物的绿色组织中，尤其在叶片中含量最为丰富。
本实验将采用有机溶剂（如乙醇、丙酮等）从植物组织中提取叶绿素。
提取后的叶绿素可通过分光光度法进行定量分析。
三、实验步骤1.样品准备：选取新鲜植物组织（如叶片），用蒸馏水冲洗干净，滤纸吸干表面水分，称取一定质量（m）的样品备用。
2.叶绿素提取：将样品放入研钵中，加入适量有机溶剂（如乙醇-丙酮混合液），研磨成匀浆。
将匀浆转入离心管中，于低温下离心（如4℃、10000 r/min），收集上清液备用。
3.叶绿素定量分析：取一定体积（V）的上清液，加入适量蒸馏水稀释，用分光光度计在663nm和646nm波长下测定吸光度（A）。
根据朗伯-比尔定律，叶绿素的浓度（C）可由吸光度计算得出。
公式如下：C = (11.77A663 -2.59A646) / m / V4.数据记录：记录每个样品在各波长下的吸光度，并计算出叶绿素浓度。
5.数据分析：对所得数据进行统计分析，比较不同样品间的叶绿素含量差异，并绘制柱状图或饼图等图形表示结果。
四、实验结果与数据分析假设我们选取了三种不同植物的叶片进行实验，以下是实验所得的数据：1.三种植物叶片中叶绿素的含量存在差异，其中样品1的叶绿素含量最高，样品3的含量最低。
这可能与不同植物的生物学特性有关。
2.根据所得数据绘制柱状图或饼图等图形，可以直观地展示不同样品间的叶绿素含量差异。
这有助于我们进一步了解植物间的差异以及叶绿素在植物生长和发育中的作用。
蔬菜叶绿素不同提取方法的比较
蔬菜叶绿素不同提取方法的比较蔬菜叶绿素是一种重要的天然色素，具有保健和治疗作用。
提取蔬菜叶绿素可以采用不同的方法，每种方法都有其优缺点。
本文将对几种常见的蔬菜叶绿素提取方法进行比较分析。
1. 传统提取方法：传统提取方法是最常用的蔬菜叶绿素提取方法之一。
该方法主要通过机械破碎、浸泡和过滤等步骤来提取叶绿素。
优点是操作简单，成本较低，适用范围广。
传统提取方法提取效率低，不易控制提取过程，有些蔬菜中的叶绿素含量较低，提取量较少。
2. 超声波辅助提取方法：超声波辅助提取方法是利用超声波的作用对蔬菜进行辅助提取。
超声波能够破坏细胞壁，促进叶绿素的释放。
这种方法操作简便，提取效率较高，提取时间较短。
超声波辅助提取方法需要使用专用设备，成本较高，对仪器的要求较高。
3. 超临界流体提取方法：超临界流体提取方法是利用超临界流体的特殊性质对蔬菜进行提取。
超临界流体是介于气体和液体之间的一种状态，在此状态下，其密度和溶解能力都较大。
通过调整超临界流体的温度和压力等参数，可以实现对叶绿素的选择性提取。
这种方法提取效率高，提取速度快，提取物中有害物质较少。
超临界流体设备成本高，操作过程对设备的稳定性要求高。
4. 液液萃取法：液液萃取法是将蔬菜样品与有机溶剂相混合，并通过搅拌或振荡等方式，使叶绿素从水相转移到有机相的一种提取方法。
这种方法操作简单，不需要特殊设备，提取效率较高。
有机溶剂对环境污染较大，需要注意处理废液的问题。
通过对不同提取方法的比较，可以看出每种方法都有其优点和局限性。
综合考虑提取效率、成本、操作简易度、对设备的要求以及环境影响等因素，选择适合自己实验条件和目的的提取方法是非常重要的。
可以根据具体的实验需求，结合不同的方法进行优化和改进，以提高叶绿素的提取效率和纯度。
叶绿素的提取方法及药理作用进展
叶绿素的提取方法及药理作用进展文章阐述了叶绿素的多种提取方法，并对近年来叶绿素及其衍生物的药理作用进行了概述，为叶绿素提取以及药理作用的进一步研究提供理论基础。
标签：叶绿素；提取；药理作用叶绿素是植物进行光合作用的重要物质。
叶绿素有很多种，是以镁原子为核心的卟啉类络合物。
文章对叶绿素的提取方法、叶绿素及叶绿素衍生物的药理作用进行了概述。
1 叶绿素的提取方法1.1 有机溶剂萃取法根据对植物的处理方式，将有机溶剂萃取法分为研磨法和浸提法。
杨一思[1]等通过研磨法提取菠菜叶绿素，加入碳酸钙和石英砂充分研磨，用工业乙醇作提取剂在室温下浸泡，得到叶绿素含量为0.682mg/g。
李淤慧等[2]以苦瓜为研究对象，采用乙醇-石油醚浸提，在单因素和正交试验下，得出苦瓜叶绿素的最佳提取率为0.0215mg/g。
1.2 微波萃取法微波萃取法热效率高、易于控制、选择性好、回收率高。
邓祥元[3]等以蚕沙为研究对象，用微波萃取法提取叶绿素，得出最优条件为：微波压力0.4MPa、微波功率300W、微波时间50s时，蚕沙叶绿素的提取率为14.325mg/L。
1.3 超临界CO2萃取法超临界CO2萃取法具有萃取速度高、常温操作、传热速率快、易控制等特点。
Macias-sanchez[4]等用该方法从海藻中提取叶绿素和类胡萝卜素，得出最优条件下的萃取温度为60℃，压力是40MPa。
1.4 超声波法超声波萃取法安全性好、操作简单、萃取效率高、成本低。
刘辉[5]等以海带为研究对象，用超声波提取法提取海带叶绿素，优化工艺后叶绿素含量可达5.486mg/g。
2 叶绿素的药理作用2.1 抗癌作用叶绿素及其衍生物可以与肿瘤细胞特异性结合，具有一定的抗肿瘤作用。
施浩等[6]在接种了人胆管癌细胞的小鼠体内应用一种叶绿素衍生物（CHDM）作为光动力抗癌药物进行观察研究，应用该叶绿素衍生物光动力治疗的肿瘤坏死，肿瘤体积也相比减小。
2.2 抑菌作用有许多的临床及试管实验中都已证实叶绿素具有抗菌作用。
提取叶绿素的方法
提取叶绿素的方法叶绿素是植物有机世界中重要的色素，叶绿素对植物的生长、蓓蕾的开放、绿叶更替以及植物对于强光等的光合作用均有重要的作用。
叶绿素的提取是植物色素的核心，它的提取方法也是非常的宝贵。
叶绿素的提取是植物色素分析中最重要的环节，不同的植物叶绿素的提取也有所不同。
常用的叶绿素提取方法主要有热提取、冷提取、超声波法和水蒸气提取法。
热提取是一种温和的提取方法，通常使用高温环境完成叶绿素的提取，如果叶绿素含量较高，则可以使用低温提取技术完成提取。
热提取操作步骤一般是将植物样品放入滤纸袋，然后将滤纸袋放入提取管中，用高温的水进行提取，提取完毕后再使用冷却技术降低温度，完成叶绿素的提取。
另外一种常见的提取方法是冷提取，这种方法比较简单，一般是使用水溶液进行提取，将植物样品浸入水溶液中，然后调整pH值，使叶绿素和水溶液分离，完成提取。
超声波法是一种特别的提取方法，他利用超声波的分散效应加快叶绿素的提取速度，超声波是振动和压力的共同作用，大大加快了提取过程，由此可以加速叶绿素的释放速度。
最后一种常见的提取方法为水蒸气提取，此方法也叫无溶剂萃取法，它利用水蒸气把植物中的叶绿素蒸发出来，最终在蒸气和极端低温下分离出叶绿素。
以上就是对叶绿素常用提取方法的总结，不同的植物叶绿素提取方法也有所不同，在实际操作中，根据叶绿素含量的不同选择不同的提取方法，即可实现提取叶绿素的目的。
另外，在实际应用中，要注意植物中叶绿素的比例，以便根据不同的比例选择不同的提取方法，以获得更高的提取率。
总之，叶绿素提取是植物色素分析的重要环节，在实际应用中应该根据叶绿素的含量和比例选择合适的提取方法，以获得更高的叶绿素提取率。
叶绿素提取方法的选取是一个比较复杂的过程，希望能帮助更多人理解叶绿素提取方法的介绍。
超声波辅助提取紫丁香叶叶绿素的工艺
第25卷增刊1农业工程学报V ol.25Supp.12009年6月Transactions of the CSAE Jun.2009171超声波辅助提取紫丁香叶叶绿素的工艺王立娟(东北林业大学生物质材料科学与技术教育部重点试验室,哈尔滨150040)摘要：以深秋的紫丁香树叶为原料，利用超声波辅助提取其中的叶绿素。
首先研究了4种不同溶剂对提取的影响，然后在单因子试验基础上，探讨了料液比、超声波功率、超声波处理时间和超声提取次数4个因素对叶绿素提取的影响，用正交试验法优化了超声波辅助提取叶绿素的条件。
最后将超声波法与传统提取法进行了对比。
结果表明，紫丁香树叶中叶绿素a和叶绿素b的含量分别为0.37%和0.15%，叶绿素的总含量为0.52%；以乙醇︰丙酮为1︰2之混合溶剂的提取效果最好；优化的叶绿素超声波辅助提取条件为：料液比1︰7.5，超声波功率400W，提取3次，每次处理时间20min，提取率能达到(91.85±0.8)%。
室温条件下，超声波辅助提取的提取率高于传统提取法17.13个百分点。
关键词:紫丁香叶，叶绿素，超声波辅助提取doi:10.3969/j.issn.1002-6819.2009.z1.035中图分类号：TS201.1文献标识码：A文章编号：1002-6819(2009)Supp.1-0171-04王立娟．超声波辅助提取紫丁香叶叶绿素的工艺[J]．农业工程学报，2009，25(Supp.1)：171－174.Wang Lijuan.Technology for extracting chlorophyll from leaves of Syringa Oblata L.by ultrasonic-assisted method[J]. Transactions of the CSAE,2009,25(Supp.1)：171－174.(in Chinese with English abstract)0引言随着生活水平的提高，人们对合成色素的毒副作用有了较为深刻的认识，开始青睐无毒无害的天然色素。
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《叶绿素的超声波辅助提取及组成分析》个人实验方案设计报告及小组实验报告
实验小组人员
学院生物与化学工程学院专业化工
实验指导教师
开课学期2017 至2018 学年二学期
填报时间2018 年 6 月22 日
第二部分小组实验报告
一、实验部分
1、实验原料
名称规格产地
竹叶干燥、剪碎—
无水乙醇分析纯—
氧化铝颗粒—
石油醚分析纯—
丙酮分析纯—
2、实验仪器与装置（含装置图）
主要实验仪器：
仪器名称型号产地
超声波清洗仪——
真空泵——
烘箱——
电热炉——
布氏漏斗——
紫外分光光度计——
层析柱——
比色皿——
容量瓶25.00ml—另有烧杯、烧瓶、玻璃棒等。
装置图：
萃取瓶层析柱
蒸馏装置
过滤装置
3、竹叶中叶绿素提取实验步骤
1)开启超声波清洗器电源。
加入适量水，调节温度50℃，调节功率200W，调节
超声频率28kHz。
等待温度稳定。
2)准确称取2.00g毛竹叶粉末放入于玻璃瓶中，加入40ml乙醇使其完全浸没。
盖
紧瓶盖。
放入超声波清洗器中进行超声萃取。
同时用手轻晃瓶子。
3)40min后，关闭超声波清洗器并取出瓶子。
4)将萃取液连同竹叶一并转入布氏漏斗进行真空抽滤。
用适量乙醇洗涤瓶子及竹
叶。
5)将萃取液完全转移至烧瓶中，加入毛细管（防止暴沸），蒸馏浓缩。
6)待烧瓶中溶液冷却至室温。
将烧瓶中溶液完全转移至25ml棕色容量瓶中，用乙
醇定容。
4、总叶绿素含量测定实验步骤
测定吸光度：采用紫外-可见分光光度计对它们的含量进行测定。
叶绿素a和b的吸收光谱相互重叠，相互重叠的曲线在波长652 nm处，用这一波长可测定叶绿素的总含量。
根据朗伯-比尔定律，取一定量的叶绿素提取液，经稀释后测定波长652 nm处的吸光度可用来计算叶绿素含量。
5、叶绿素各组分分离纯化实验步
叶绿素的柱层析分离：
1）湿法装柱：以石油醚为初始洗脱液，用湿法装柱的方法将适量中性氧化铝装入一洗净的、干燥的层析柱，排除气泡，保证装填紧密，放出石油醚，直到距柱表面仅1-2 mm 高，无论如何不能使液面低于柱表面。
2）上样：用长滴管将浓缩的叶绿素提取液沿柱壁小心的加到柱顶部。
加完后，稍稍打开柱下部活塞，使液面下降至柱表面约1 mm处，关闭活塞，用少量石油醚冲洗柱壁，使液面下降至原高度。
3）洗脱：在柱顶装一储液器，先加入适量洗脱剂石油醚，打开柱下部活塞，让洗脱剂逐滴放出，层析开始，用锥型瓶收集流出液。
注意观察流出液颜色，当橙黄色色带（胡
萝卜素）流出时，可改用石油醚—丙酮混合溶液（体积比可为1:1）作洗脱剂，洗脱第二个黄色带（叶黄素），再根据实验情况增加洗脱剂中丙酮比例分别洗脱叶绿素a（蓝绿色）和b（黄绿色）。
将各组分分别收集保存。
二、实验结果与讨论
1、实验数据及结果处理（可列表）
注：超声功率（100%）为200W。
计算示例：（以第1组为示例）
C(mg/ml)=A652×1000
34.5
=
1.028
34.5
=29.80(mg/ml)
叶绿素含量=C×V T
W×1000×n=29.80×25.00
2.00×1000
=0.3725(mg/g)
式中，C：叶绿体色素的浓度(mg·L-1)；W：竹叶重(g)；V T：提取液总体积(mL)；
n：稀释倍数。
2、讨论
容易从上表得出，超声利于叶绿素的提取；通过第2、4、5三组对比，可以看出在此液固比范围内，对叶绿素提取没有太大影响。
又11、12组对比发现，液固比越大，对叶绿素提取有利。
造成两者区别可能的原因是有无超声；通过1、2、3和8、9、10组分别比较可发现温度升高对叶绿素萃取有利；通过2、6、7组对比发现延长超声萃取时间有利于叶绿素提取。
三、心得体会。