腺病毒介导的MAT2B过表达促进猪肌内脂肪细胞分化

畜牧兽医学报 2017，48（5）：802-809
A c t aV e t e r i n a r i a e tZ o o t e c h n i c aS i n i c a
d o i ：10.11843/j
.i s s n .0366-6964.2017.05.003腺病毒介导的M A T 2B 过表达促进猪肌内脂肪细胞分化
赵存真1，李黄琨1，马 云2，杨公社3*
（1.信阳农林学院牧医工程学院，信阳464000；2.信阳师范学院生命科学学院，信阳464000；
3.西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室，杨凌712100
）摘 要：本研究旨在通过构建腺病毒介导的体外超表达载体，探究腺苷甲硫氨酸转移酶（MA T 2B ）对猪肌内脂肪细胞分化的影响。

本研究以猪脂肪组织为试验材料，提取总R N A ，并反转录得到c D N A ，参考G e n B a n k 收录的猪M A T 2B 基因m R N A 序列设计引物，P C R 扩增并连接到腺病毒穿梭载体p A d T r a c k -C MV ，进行测序鉴定。

结果表明，构建的穿梭载体与骨架载体p A d E a s y -1可以实现同源重组，即腺病毒重组载体p A d -MA T 2B 构建成功；用P a c Ⅰ限制性内切酶酶切线性化p A d -MA T 2B 载体并回收质粒大片段转染293A 细胞可以实现病毒的成功包装，病毒滴度测定可满足原代细胞侵染需要。

转染猪原代肌内脂肪细胞后，M A T 2B 的m R N A 和蛋白水平实现了显著的上调。

油红O 染色结果表明，过表达M A T 2B 促进了肌内脂肪细胞脂质积累；实时定量结果证明，M A T 2B 促进成脂标志基因P P A R γ和a P 2表达的显著上调。

综上所述，腺病毒介导的体外表达载体可以成功的实现M A T 2B 基因超表达；M A T 2B 正向调控猪肌内脂肪细胞分化。

关键词：
腺苷甲硫氨酸转移酶2B ；重组腺病毒；肌内脂肪细胞；猪中图分类号：S 828；S 813.1 文献标志码：A 文章编号：0366-6964（2017）05-0802-08收稿日期：2016-11-10
基金项目：信阳农林学院青年基金项目（201601005）；国家重点基础研究发展计划（2012C B 124705
）作者简介：赵存真（1987-），女，河南安阳人，讲师，博士，主要从事畜禽脂肪细胞增殖及分化研究，E -m a i l ：b a i z h e n l m n c o o l @1
26.c o m *通信作者：杨公社，教授，E -m a i l ：g o n g s h e y a n g 999@h o t m a i l .c o m M A T 2BO v e r e x p r s s i o n M e d i a t e db y A d e n o v i r u s P r o m o t i n g P
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t eD i f f e r e n t i a t i o n Z HA OC u n -z h e n 1，L IH u a n g -k u n 1，MA Y u n 2，Y A N G G o n g
-s h e 3*（1.C o l l e g e o f A n i m a lS c i e n c e a n dV e t e r i n a r y M e d i c i n e ，X i n y a n g A g r i c u l t u r e a n dF o r e s t r y U n i v e r s i t y ，X i n y a n g 464000，C h i n a ；2.C o l l e g e o f L i f eS c i e n c e ，X i n y a n g N o r m a lU n i v e r s i t y ，X i n y a n g 464000，C h i n a ；3.L a b o r a t o r y o f A n i m a lF a tD e p o s i t i o na n d M u s c l eD e v e l o p
m e n t ，N o r t h w e s t A&F U n i v e r s i t y ，Y a n g l i n g 7
12100，C h i n a ）A b s t r a c t ：T h ea i m o f t h i ss t u d y w a st oe x p
l o r et h ee f f e c to f MA T 2Bo n p o r c i n e i n t r a m u s c u l a r p r e a d i p o c y t ed i f f e r e n t i a t i o nb y c o n s t r u c t i n g o v e r e x p
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