化学发光法的原理技术要点及评价应用

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化学发光技术原理及应用

化学发光技术原理及应用

化学发光技术原理及应用化学发光技术,是指通过化学反应的方法来产生发光现象的一种技术。

它主要依赖于化学反应的能量释放和物质发生转化的过程中产生能量的特点,使用一定的化学试剂,通过物质的化学反应,来使化学能转化为光能,从而实现发光的效果。

化学发光技术广泛应用于生物医学、物质分析、环境监测、能源技术、材料科学等领域。

本文将分别探讨化学发光技术的基本原理,以及它在不同领域中的应用。

一、化学发光技术的基本原理化学发光技术的基本原理是通过特定的化学反应来激发发光分子的能级,使发光分子达到激发态,释放出光子实现发光的过程。

因此,化学发光技术的实现需要开发出一系列符合要求的发光试剂。

常见的发光方式有如下几种。

1. 化学发光化学发光法利用特定的化学反应,使反应物的活化能转化为光能而产生发光。

比如,乳酸氧化酶催化下乳酸和过氧化氢反应生成的基质产生化学发光,可以用于检测血液中的乳酸含量。

2. 其他类型的光化学反应还有一些类型的光化学反应也能产生发光现象,比如化学发光酶免疫分析法。

如果特定化学反应产生的物质与酶或抗体结合,这时的化学发光就能表现出高度的选择性和灵敏度。

3. 高分子发光材料发光高分子材料的制备通常是将一定量的化学反应物和发光剂混合,进一步地,将混合后的料加入到具有合适性能的基体中。

高分子发光材料因其易于加工、成本低廉、安全稳定等优点,在环境监测、生物医学等诸多领域都得到有效应用。

二、化学发光技术在生物医学领域的应用发光技术在生物医学领域的应用非常广泛。

一般来讲,生化指标对临床诊断和病理变化的判断测试和检测是具有非常重要价值的。

其中最重要的生化指标之一是蛋白质,通过检测蛋白质浓度、酶活性等参数的变化,能够早期发现人体的变化,这对于疾病预防和治疗至关重要。

化学发光技术能够针对不同类型的指标开发出相应的检测方法,如果高灵敏度、特异性,检测的速度也十分快。

三、化学发光技术在环境监测领域的应用化学发光技术在环境监测领域的应用十分广泛。

化学发光法的原理技术要点及评价应用共29页文档

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谢谢!
21、要知道对好事的称颂过于夸大,也会招来人们的反感轻蔑和嫉妒。——培根 22、业精于勤,荒于嬉;行成于思,毁于随。——韩愈
23、一切节省,归根到底都归结为时间的节省。——马克思 24、意志命运往往背道而驰,决心到最后会全部推倒。——莎士比亚
25、学习是劳动,是充满思想的劳动。——乌申斯基
化学发光法的原理技术要点及评价应 用

6、黄金时代是在我们的前面,而不在 我们的 后面。

7、心急吃不了热汤圆。

8、你可以很有个性,但某些时候请收 敛。

9、只为成功找方法,不为失败找借口 (蹩脚 的工人 总是说 工具不 好)。乎 能克服 任何恐 惧。因 为,请 记住, 除了在 脑海中 ,恐惧 无处藏 身。-- 戴尔. 卡耐基 。

化学发光分析的原理及应用

化学发光分析的原理及应用

化学发光分析的原理及应用在生命科学、医学、环保、食品安全等领域,化学发光分析技术得到了广泛应用。

化学发光分析是指利用感光剂发生化学反应释放出光的现象,通过测光仪来检测光的强度,从而获得定量和定性分析信息的过程。

本文将从化学发光分析的原理和应用入手,为读者全面介绍这一技术的特点和优势。

一、化学发光分析的原理化学发光分析的原理与荧光分析原理类似,都是利用分子在外界刺激下发出的光来检测分析样品的。

但是,化学发光分析与荧光分析有着本质上的不同。

荧光分析是指分子在外界的激发下带有一定的能量,发生弛豫过程时在瞬间发出的光,这种光是常规荧光光谱所显示的,纵向轴表示发出光的强度,横向轴表示光波长。

而化学发光分析是指在化学反应过程中,当反应中生成的某些种类的粒子、原子或分子受到外界作用而处于激发态时,它们会释放出一定的能量,这些能量使得感光剂处于激发态,而感光剂在弛豫过程中发出的光则可用于检测样品。

举例来说,将齐氏试剂和过氧化氢混合后,会出现化学反应放出大量的能量,这种能量会使得某些物质进入激发态,当这些物质从激发态跃迁到基态时,就会放出光。

常见的化学发光反应有:齐氏反应、硫酸铜-甲酸乙酯氛围中产生气态芳香族化合物的化学发光反应、偶氮氧基苯-二甲基亚硝胺化合物的产生及其化学发光等。

二、化学发光分析的应用1.环保领域化学发光分析是环保领域高精度分析的核心技术之一。

在环境污染监控中,化学发光分析技术可以用来检测各种危害物质的浓度,例如灰霾的微小颗粒物、大气中的挥发性有机物(VOC)和空气中的多环芳烃(PAHs)等。

2.食品安全领域化学发光分析广泛应用于食品安全领域,在快速检测、筛查食品中毒物质、农药、动物药残留以及食品中的微生物等方面有着独特的优势。

以检测食品中的微生物为例,化学发光分析技术中通常采用ATP (三磷酸腺苷)酶系统进行检测,通过测定样品中存在的微生物含量来判断食品是否安全。

3.生命科学和医学领域化学发光分析技术在生命科学和医学领域也有着广泛的应用。

化学发光原理及其在分析化学中的应用

化学发光原理及其在分析化学中的应用

化学发光原理及其在分析化学中的应用化学发光技术是一项新型的光电分析技术,它利用某些物质受到外部激励后会发出光的特性,从而对样品进行分析。

化学发光技术具有检测灵敏度高、选择性好的特点,被广泛应用于环境监测、生物分析、化学分析等领域。

本文将介绍化学发光的原理及其在分析化学中的应用。

一、化学发光的原理化学发光是一种被激发的化学发光现象,被激发的能源包括电、光、热、化学反应等。

根据被激发的能量来源,化学发光可以分为电致发光、光致发光、热致发光、化学发光等几种类型。

其中,电致发光是指当某些物质受到电激发后发生放电现象,并产生能量释放的过程,可以发出光的现象。

如当电流通过稀释的溴甲烷气体时,产生的电离和激发能使其分子产生激发态,在激发态向基态转移时,会有较多的辐射发生,从而产生黄绿色的发光现象。

光致发光是指当某些物质受到光照射后,其分子或离子会发生能级转移,并产生能量释放的过程,可产生发光现象。

例如,当溶液中的荧光染料受到紫外光照射后,将引起它的电子从其基态向激发态跃迁,此时荧光染料分子激发态的电子与周围分子碰撞时就会回到基态,从而发光。

热致发光是指当某些物质在高温下,由于其本身的分子构造和原子结构发生变化,产生能源释放的现象,最终产生发光。

例如,硫脲在高温下会分解,产生出硫酸氮化物,硫酸氮化物在激发态向基态跃迁时,就会放出蓝色的发光。

化学发光是指当某些物质经历化学反应过程时,产生化学能的释放,从而激发分子内部电子或离子之间进行跃迁并产生发光现象。

例如,辛烯酸铵钠(Luciferin)和辛烯酶(Luciferase)的化学反应过程能够生成生物发光现象。

二、化学发光在分析化学中的应用化学发光技术具有检测精度高、检测速度快、选择性好等优点,在分析化学中得到了广泛的应用。

目前,分析化学中常用的化学发光技术主要有荧光法、化学发光法和电化学发光法等。

荧光法是最常用的化学发光技术之一,它分为静态荧光法和动态荧光法。

静态荧光法指的是在实验过程中,样品/试剂的浓度变化较小,荧光信号是稳定的。

化学发光法的原理技术要点及评价应用

化学发光法的原理技术要点及评价应用

化学发光法的原理技术要点及评价应用1.发光基团选择:选择能够被化学反应激活产生发光的基团非常重要。

常用的发光基团包括草酰酸酯(ACRIDINIUMESTER)、酶标记物及化学荧光(CHEMILUMINESCENCE)等。

2.激发剂选择:选择适当的激发剂也是化学发光法的关键。

可以使用过氧化物、过氧硫酸钾等能够与发光基团发生氧化还原反应的物质作为激发剂。

3.基质调节:对反应体系的pH值、温度等进行调节,可以影响到反应速率和光强度。

通过对基质的调节,可以提高化学发光的灵敏度和稳定性。

4.光学检测系统:使用光电探测器或光电倍增管等器件,可以检测到反应产生的光信号。

对光信号进行放大、滤波等处理,可以提高检测灵敏度和准确度。

1.生物分析:化学发光法可以被用于检测生物标志物、蛋白质、核酸等分子,并用于生物分子的定量分析、免疫测定等。

该方法具有高灵敏度、高选择性、快速反应等优点,适用于临床诊断、药物研发等领域。

2.生命科学研究:化学发光法在生命科学研究中被广泛应用于信号转导、细胞活性检测、蛋白质相互作用等实验。

例如,荧光素酰物酶标记技术可以用于检测酶的活性、细胞内信号的传递等。

3.环境监测:化学发光法可以用于环境中有毒有害物质的快速检测。

例如,利用一些发光基团与特定污染物发生化学反应,可以检测到其存在,并对其浓度进行定量分析。

虽然化学发光法具有许多优点,但也存在一些限制和挑战:1.实验条件控制要求高:化学发光法对实验条件的控制要求较高,包括反应温度、pH值等因素。

这对实验室人员的技术和仪器设备的要求较高。

2.反应可逆性:化学发光法大多利用氧化还原反应产生发光,这种反应通常是可逆的。

因此,光强度的持续时间较短,需要在短时间内进行光信号的检测。

总的来说,化学发光法是一种快速、灵敏度高的分析方法,在生命科学研究和临床诊断中具有广泛的应用前景。

随着科学技术的不断发展,化学发光法的应用也将进一步拓展和深化。

化学发光法原理

化学发光法原理

化学发光法原理
化学发光法是一种利用化学反应产生的光来进行分析的方法。

它广泛应用于生
物医学、环境监测、食品安全等领域,具有灵敏度高、选择性好、操作简便等优点。

化学发光法的原理是通过化学反应产生的激发态分子,经过激发态分子的衰减而释放出光,从而实现分析检测的目的。

化学发光法的原理可以简单地概括为以下几个步骤,首先,化学发光反应的底
物分子在特定条件下被激发,使其转变为激发态分子;其次,激发态分子在短时间内发生非辐射衰减,释放出光子;最后,光子被检测器捕获并转化为电信号,通过信号处理系统得到分析结果。

化学发光法的原理可以通过具体的实例来加以说明。

例如,生物医学领域中常
用的酶免疫法中,辣根过氧化物酶(HRP)与底物间的化学反应产生的激发态分子,通过激发态分子的衰减释放出光,从而实现对生物分子的检测。

在环境监测中,化学发光法也被广泛应用于水质、大气等样品的分析,例如利用过氧化物体系对水中的有机物进行检测。

化学发光法的原理不仅可以用于定性分析,还可以用于定量分析。

通过测量发
光强度,可以确定样品中的目标物质的含量。

同时,化学发光法还可以与其他分析方法相结合,如液相色谱、气相色谱等,实现对复杂样品的分析。

总之,化学发光法作为一种灵敏度高、操作简便的分析方法,具有广泛的应用
前景。

通过深入理解其原理,合理设计化学发光反应体系,可以实现对各种目标物质的快速、准确检测,为生物医学、环境监测、食品安全等领域的研究提供有力支持。

希望本文对化学发光法的原理有所帮助,谢谢阅读!。

化学发光间接法

化学发光间接法

化学发光间接法摘要:1.化学发光间接法的原理2.实验步骤及注意事项3.应用领域4.优缺点分析5.与其他发光方法的比较正文:化学发光间接法是一种灵敏、快速的检测方法,广泛应用于生物学、环境监测、生物医学等领域。

本文将简要介绍化学发光间接法的原理、实验步骤、应用领域及优缺点。

一、化学发光间接法的原理化学发光间接法是基于化学发光反应的一种检测方法。

在该方法中,首先将待测物与试剂发生特异性反应,形成免疫复合物。

然后,通过酶标记物与免疫复合物的结合,使发光底物在酶的催化下发生发光反应。

最后,通过检测发光强度,对待测物进行定量分析。

二、实验步骤及注意事项1.样品处理:对待测样品进行适当处理,使其符合后续实验要求。

2.免疫反应:将待测物与特异性抗体结合,形成免疫复合物。

3.酶标记:利用酶标记物与免疫复合物结合,形成酶标记免疫复合物。

4.发光底物:将酶标记免疫复合物与发光底物混合,使其在酶的催化下发生发光反应。

5.检测:通过光电倍增管或其他检测设备,检测发光强度,对待测物进行定量分析。

注意事项:1.实验过程中应严格控制温度和时间,以保证反应的进行。

2.选用特异性强的抗体和酶标记物,以提高检测灵敏度。

3.定期检查仪器设备,确保其正常运行。

三、应用领域化学发光间接法在许多领域都有广泛应用,如:1.生物学研究:用于蛋白质、核酸等生物大分子的检测。

2.环境监测:检测水、土壤中的有害物质。

3.生物医学:用于疾病诊断、药物研究等。

4.食品安全:检测农残、兽药残留等。

四、优缺点分析优点:1.灵敏度高:化学发光间接法具有较高的检测灵敏度,可检测到微量的待测物。

2.线性范围宽:适用于高、中、低浓度的待测物检测。

3.重复性好:实验结果稳定可靠。

4.操作简便:实验步骤相对简单,易于操作。

缺点:1.仪器设备成本较高。

2.需要专业人员进行操作和维护。

3.某些情况下,假阳性结果较多。

五、与其他发光方法的比较化学发光间接法与其他发光方法(如化学发光直接法、生物发光法等,)相比,具有较高的灵敏度和较好的重复性。

化学发光技术的基本原理和应用

化学发光技术的基本原理和应用

化学发光技术的基本原理和应用化学发光技术是一种光谱分析技术,可以通过化学反应使样品发生发光现象。

化学发光技术具有较高的灵敏度、特异性和速度,已被广泛应用于食品安全、生物医学、环境分析等领域。

一、化学发光的基本原理化学发光技术的基本原理是利用化学反应过程中释放的化学能转化为光能,使样品发生发光现象。

其中,化学发光主要有三种类型:荧光、磷光和化学发光。

1.荧光荧光是指在一定波长的激发下,某些物质(如蛋白质、核酸等)吸收能量后发射出具有不同波长和较长寿命的电子能级跃迁辐射能量的过程。

荧光通常可以通过紫外线或蓝色激发光源激发产生,其波长范围大约在300 ~ 600 nm,通常在可见光区域呈现出蓝色、绿色、黄色或红色的发光。

2.磷光磷光是指在一定波长的激发下,某些物质(如荧光物质、稀土金属离子等)吸收能量后在较长时间内发生第二次辐射、生成光的过程。

磷光的波长通常在可见光和红外光区域,磷光与荧光的区别在于其发光时间相对较长,通常持续数毫秒至数秒不等。

3.化学发光化学发光是指在某些化学反应中,由于活化能很高而不能生成光谱吸收或吸收的光谱不能足以将其激发至发光态,但是在反应后因为化学能、热能的释放,能够将分子激发至高能态从而产生发光现象。

化学发光的特点是光谱宽、持续时间短(通常在微秒数量级),且发光强度较高。

二、化学发光的应用化学发光技术具有灵敏度高、特异性强、检测速度快等优点,因此被广泛应用于生物医学、食品安全、环境分析等领域。

以下是几种常见的化学发光技术及其应用。

1.荧光标记技术荧光标记技术是一种在生物样品中检测特定分子的方法,通过标记样品分子与荧光物质结合,使其在激发下发生发光,并通过荧光检测系统测量荧光强度来定量分析样品中的分子。

荧光标记技术广泛应用于肿瘤诊断、细胞成像、酶学研究等方面。

2.化学发光分析技术化学发光分析技术是一种利用化学反应的发光过程进行定量分析的方法,主要应用于药物分析、环境监测、食品安全检测等领域。

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2.分离技术 在电磁场中进行2-3次洗涤后,很快 地将未结合的多余Ag和标记Ab洗去。
3.化学发光反应 经洗涤的磁珠中,加入H2O2和 pH纠正液NaOH,这时AE不需要催化剂即分解并 发光,由集光器接收,经光电倍增管放大,记 录1S内所产生的光子能,其积分与被测物含量
成正比,按标准曲线,仪器可计算出被测物含量。
R u ( b p y )33+
激发态
R u ( b p y )3 *
R u ( b p y )32+
基态
不稳定
光 子( 6 2 0 n m ) 返回
技术要点
1.抗原抗体结合反应 将已包被了抗体的乳胶微 粒和待测标本加入反应杯中,经温育一定时间 后,再加入AP标记抗体,温育,形成固相包被抗 体-抗原-酶标抗体复合物
二、技术类型 1.分离方法 常用磁颗粒分离技术 2.免疫学反应模式 同酶发光免疫测定技术 3.不同只是相应标记物是吖啶酯而不是酶
技术要点
1.抗原抗体结合反应 将包被McAb的磁颗粒和待 测标本加入到反应管中,标本中待测Ag与磁珠 上Ab结合,再加上AE标记Ab,经过温育,形成 磁珠Ab-Ag-AE标记Ab复合物。
根据免疫学反应模式分 1.双抗体夹心法和双抗原夹心法 3.固相抗原竞争法:
Hale Waihona Puke 荧光酶免疫测定技术反应原理图
E
E E
洗涤
E
弃上清
E
E
E
4MU
E
激 发 荧 光
碱性磷酸酶
是抗塑 体料利包微用被珠 理想标的记酶抗体荧光样抗底本原 物,生成的产物稳定并有 强的荧光强度,通过测定荧光强度进行定量。
化学发光酶免疫测定技术反应原理图
4.蠕动泵加入TPA,电极加电压,启动ECL反应过程。 该过程在电极表面周而复始地进行,产生许多光子, 光电倍增管检测光强度,其与[Ru(bpy)3]2+的浓度呈 线性关系,故可测出待测Ag的含量。
原理图
抗体包被 样本 Ru(byp)23+ 的磁珠 抗原 标记抗体
TPA缓冲 液洗涤
返回
方法评价
①标记物的再循环利用,使发光时间更长、强 度更高、易于测定;
HRP
+N2 + H2O +光
对-羟基苯乙酸(HPA)
• HPA在H2O2存在下被HRP氧化成氧化二聚体(荧光 物质),在350nm激发光作用下,发出450nm波长 的荧光,可用荧光光度计测量。
1.2 HPA
H2O2 HRP
HO
CH2 COOH +荧

HO
CH 2 COOH
氧化二聚体
AMPPD
• AMPPD在碱性条件下,被AP酶解生成相当稳定的 AMP-D阴离子,其有2~30min的分解半衰期,发 出波长为470nm的持续性光,在15min时其强度 达到高峰,15~60min内光强度保持相对稳定。
3.包被珠分离法:用聚苯乙稀等材料制成小珠,在 小珠上包被抗原或抗体,经抗原抗体反应后,将 结合状态和游离状态的酶标记物进行分离.
第三节 化学发光免疫测定技术(CLIA)
一、原理 用化学发光剂直接标记抗原或抗体,与 待测标本中相应Ab或Ag、磁颗粒性的Ag或Ab反 应,通过磁场把结合状态(沉淀部分)和游离 状态的化学发光剂标记物分离开来,然后加入 发光促进剂进行发光反应,通过对发光强度的 检测进行定量或定性检测 。
化学发光免疫技术
第一节 发光与化学发光剂 第二节 发光酶免疫测定(CLEIA) (chemiluminescence enzyme immunoasssay) 第三节 化学发光免疫测定技术(CLIA) (chemiluminescence immunoassay) 第四章 电化学发光免疫测定技术(ECLI) (electrochemiluminescence immunoassay)
3.化学发光:在常温下由化学反应产生的光的发射。 化学发光是一个多步骤的过程。
萤火虫荧光素
荧光素酶 ATP;O2;Mg2+
光 + AMP+ O2 + CO2 + 氧化萤火虫荧光素
返回
化学发光 • 机制:某些化合物可以利用化学反应产生的能
量使其产物分子或反应中间态分子上升至电子 激发态。当此产物分子或中间态分子衰退至基 态时,以发射光子的形式释放能量(即发光)。
方法评价
1.AE其低背景噪音、化学反应简单、快速而无催 化剂。
2.AE与大分子的结合并无减少所产生的光量, 从而增加灵敏度,灵敏度可达10-15g/ml。
3.AE标记试剂有效期长,可达一年。 4.固相分离剂为极为幼细的磁粉,除增大包被
面积,加快反应外,亦同时使清洗及分离更 简易、快捷。
第四节 电化学发光免疫测定技术(ECLI)
特别是免疫活性。
返回
1.酶促反应的发光底物
• 是指经酶的降解作用而发出光的一类发光底物。 • CLEIA中常用的酶有HRP和AP • HRP的发光底物有鲁米诺、对-羟基苯乙酸 • AP的发光底物有AMPPD、4-MUP(荧光底物) • 特点:可作标记物、也可作过氧化物酶的底物
1.1 鲁米诺
H2O2 /OH —
②敏感度高,可达pg/ml或pmol水平; ③线性范围宽>104; ④反应时间短,20min以内可完成测定; ⑤试剂稳定性好,2~5℃可保持一年以上。
五、临床应用
1.甲状腺激素
2.生殖激素
3.肾上腺/垂体激素 4.贫血因子
5.肿瘤标记物
6.感染性疾病
7.糖尿病
8.心血管系统
9.病毒标记物
10.骨代谢
三联毗啶钌 分子结构图
N
N
N
Ru
N
N
N
O O
N O
O
返回
第二节 发光酶免疫测定(CLEIA)
一、原理 属于酶免疫测定的一种。只是最后一 步酶反应所用底物为发光剂,通过发光反应 发出的光在特定的仪器上进行测定。
二、技术类型 根据酶促反应底物不同可分为: 1.荧光酶免疫测定技术 2.化学发光酶免疫测定技术
• 化学发光剂或发光底物:在化学发光反应中参 与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量 的化合物。
• 发光剂分为荧光素、生物发光剂、化学发光剂
化学发光剂应符合以下几个条件
①能参与化学发光反应; ②与抗原或抗体偶联后形成稳定的结合物试剂; ③偶联后仍保留高的量子效应和反应动力; ④应不改变或极少改变被标记物的理化特性,
2.分离技术 将复合物转移到玻璃纤维上,用缓 冲液洗涤,没结合的抗原被洗脱,酶标抗体-抗 原-胶乳微粒抗体复合物则被保留在纤维膜上。
3.酶促发光反应 加入4-MUP,酶标抗体上AP将 4-MUP分解,形成4-MU,它在360nm激发光的照 射下,发出448nm的荧光,经荧光仪记录,放大, 根据标准曲线由电脑计算出所测物质的含量
E
E E
洗涤
E
弃上清
E
E
E
A M P P D 发 光
E
碱性磷酸酶
抗 塑
体料是通包微 利过被珠 光用酶强度对标记的发抗光测体 定底而物样抗 本原催直接化进作A M行用P P定而D 量直。接发光,
电化学发光原理图
• 这一过程可在电极表面周而复始地进行 • 产生许多光子,使光信号增强
TPA+●
电极

TPA
技术要点
1.三联吡啶钌标记抗体和生物素标记抗体与待测标本 同时加入一个反应杯中孵育反应
2.将链霉亲和素(SA)包被磁珠加入反应杯中,再次 孵育,使生物素(B)通过与亲和素(A)的结合, 将磁珠、Ab连接为一体,形成双Ab夹心法。
3.蠕动泵将形成的 [Ru(bpy)3]2+-Ab-Ag-Ab-B-SA-磁珠 复合体吸入流动测量室,磁珠被工作电极下面的磁铁 吸附于电极表面。同时,游离的Ab也被吸出测量室。
常用试剂:吖啶酯(acridinium,AE)
CH 3
N+
- HO 2
CO
O
CH 3 N
O CO O
R R
CH 3 N
O CO O
+ CO2+ 光
3.电化学发光剂
• 是指通过在电极表面进行电化学反应而发出 光的物质。
特点:①反应在电极进行; ②电子供体为:三丙胺(TPA) ③化学发光剂:三联毗啶钌
概念
• 化学发光免疫技术:集灵敏的化学 发光分析和特异的抗原抗体免疫测 定于一体的检测技术。
• 特点: 特异性高、敏感性高、分离简便、 快速、试剂无毒、安全稳定、 可自动化。
化学发光免疫技术的类型
• 按发光剂不同分为 1.发光酶免疫测定(CLEIA) chemiluminescence enzymeimmunoasssay 2.化学发光免疫测定技术(CLIA) chemiluminescence immunoassay 3.电化学发光免疫测定技术(ECLI) electrochemiluminescence immunoassay
1.3 AMPPD
OO
OCH 3
AP /OH —

O-
HPO4 2—
4-MUP
• 4-MUP被AP催化生成4-甲基伞形酮,在360nm的 激发光的作用下,发出448nm的荧光,可用荧 光光度计进行测量。
1.4 4-MUP
AP H3PO4 +
360nm 激发光

4-MU

2.直接化学发光剂
特点:不需催化剂,只需改变溶液的pH等条件 就能发光的物质。反应迅速、背景低、 信比高,发光量与AE浓度呈线性关系。
• 按分离方法不同分 1.微粒子化学发光免疫测定 2.磁颗粒化学发光免疫测定
第一节 发光与化学发光剂
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